鼻咽癌患者PHD2、PDGF-BB 表達(dá)水平及臨床意義

戴惠婷

莆田學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科 福建莆田 351100

鼻咽癌是指發(fā)生于鼻咽腔頂部和側(cè)壁的惡性腫瘤，近年來我國鼻咽癌的發(fā)病率一直居于較高的水平。放療是鼻咽癌的主要治療方法，早中期的患者僅經(jīng)放療治療后即可治愈，但有部分患者在治療后會出現(xiàn)復(fù)發(fā)甚至轉(zhuǎn)移的情況，預(yù)后較差[1]。有研究發(fā)現(xiàn)脯氨酸羥化酶2（proline hydroxylase2，PHD2）和血小板生長因子-BB（Recombinant Human Platelet Derived Growth Factor-BB，PDGF-BB）在腫瘤細(xì)胞的增殖，擴散中起了重要作用，其異常表達(dá)影響多種癌癥預(yù)后的危險因素[2]；但關(guān)于鼻咽癌患者生物分子表達(dá)的相關(guān)研究較少，基于此本研究就鼻咽癌患者PHD2、PDGF-BB 表達(dá)水平及臨床意義展開探討，旨在為臨床治療提供參考，現(xiàn)將研究報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018 年11 月～2020 年3 月我院腫瘤科收治的鼻咽癌的患者共58例，其中男42例，女性16例，年齡26～63 歲，平均年齡（40.26±4.23）歲。根據(jù)鼻咽癌TNM 分期分為：T1～T2 期20例；T3～T4期 38例。根據(jù)有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為：轉(zhuǎn)移36例，無轉(zhuǎn)移22例。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有患者均符合中國臨床腫瘤學(xué)會發(fā)布的《頭頸部腫瘤診治指南（2018 版）》中鼻咽癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)并經(jīng)病例活檢確診[3]；（2）患者臨床資料完整且自愿簽署知情同意囑。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他重要器官嚴(yán)重疾??；（2）合并其他惡性腫瘤。

1.2 方法

1.2.1 試劑

兔抗人PHD2 多克隆抗體購自美國賽默飛世爾公司；山羊抗人PDGF-BB 多克隆抗體購自Creative Biomart 公司；SP 系列免疫組化通用型工作液試劑盒、DAB 顯色劑均購自北京欣興唐生物科技有限公司。

1.2.2 檢測方法

所有標(biāo)本手術(shù)切除后立即用10%甲醛溶液固定，組織切片后脫蠟、水化。然后根據(jù)S-P 免疫組化染色法對PHD2、PDGF-BB 進(jìn)行檢測，具體操作嚴(yán)格按照試劑盒上的說明進(jìn)行。每批切片染色均以PB S代替一抗作陰性對照，PHD2、PDGF-BB 用已知陽性表達(dá)的組織切片作陽性對照。一抗稀釋比例均為1：100。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)[4]

根據(jù)陽性細(xì)胞百分比、染色強度判定。0 分：無陽性細(xì)胞；1 分：陽性細(xì)胞低于10%，2 分：陽性細(xì)胞在11%～15%的范圍內(nèi)，3 分：陽性細(xì)胞超過50%。染色強度判定：0 分：未見染色，1 分：淡黃色，弱陽性；2 分：棕黃色，中等陽性；3 分：棕褐色，高陽性?？偡e分：上述2 項評分的和。低表達(dá)水平為3 分及以下，高表達(dá)水平為4 分及以上。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

本研究數(shù)據(jù)均采用SPSS18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料通過平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述，采用t 檢驗；計數(shù)資料通過率或構(gòu)成比描述，并采用χ2檢驗；相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)分析；以P ＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌組織和癌旁組織的表達(dá)水平 見表1

表1 PHD2、PDGF-BB 在鼻咽癌組織和癌旁組織的表達(dá)水平[n(%)]

2.2 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌組織的表達(dá)水平與患者臨床特征的關(guān)系 見表2～3

表2 PHD2 在鼻咽癌組織的表達(dá)水平與患者臨床特征的關(guān)系[n(%)]

表3 PDGF-BB 在鼻咽癌組織的表達(dá)水平與患者臨床特征的關(guān)系[n(%)]

2.3 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌組織的表達(dá)水平與患者病理特征的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson 進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，鼻咽癌患者PHD2 水平與T 分期呈負(fù)相關(guān)（r=-0.623，P ＜0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)（r=-0.837，P ＜0.05）；PDGF-BB 水平與患者T 分期呈正相關(guān)（r=0.582，P＜0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（r=0.736，P ＜0.05）。

3 討論

鼻咽癌患者在疾病早期可無任何癥狀，隨著疾病的發(fā)展，可出現(xiàn)頸部腫塊，聽力下降、耳鳴、耳部疼痛，耳部感染并反復(fù)發(fā)作，頭痛等癥狀；多數(shù)患者是在頸部出現(xiàn)腫塊去醫(yī)院檢查時才懷疑鼻咽癌；目前認(rèn)為，鼻咽癌的發(fā)生主要與EB病毒感染和環(huán)境等因素相關(guān)，此外，大量吸煙、食用腌制食品、空氣污染等不健康的生活方式也可誘發(fā)該病的發(fā)生[5]。

近年來，對于癌癥發(fā)病分子機制的研究越來越多，已有多數(shù)學(xué)者經(jīng)研究證實實質(zhì)性腫瘤微環(huán)境的主要特點是缺氧，缺氧的環(huán)境能使腫瘤細(xì)胞向惡性發(fā)展；脯氨酸羥化酶 2（PHD2）是促進(jìn)缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxiainducible factor，HIF）降解關(guān)鍵步驟的限速酶，其在人體的各種組織的均有表達(dá)，PHD2 以氧為輔助機制發(fā)揮作用，因此在缺氧的條件下該酶會被抑制；因此認(rèn)為PHD2 介導(dǎo)腫瘤缺氧的微環(huán)境的形成，亦有研究發(fā)現(xiàn)PHD2 可能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)移，與腫瘤患者的預(yù)后具有一定的相關(guān)性[6，7]；在本研究中，通過檢測鼻咽癌患者癌組織與癌旁組織發(fā)現(xiàn)PHD2 在鼻咽癌組織中表達(dá)水平低，且明顯低于癌旁組織（P ＜0.05），通過進(jìn)一步分析PHD2 癌組織表達(dá)水平與患者病理特征患者的關(guān)系發(fā)現(xiàn)TNM 分期為T3～T4 期，有淋巴轉(zhuǎn)移的患者PHD2 的表達(dá)水平明顯低于T1～T2 期，無轉(zhuǎn)移的患者（P<0.05），經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)其與T 分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，與上述研究相似；血小板生長因子-BB（PDGF-BB）是血小板生長因子（PDGF）的一種二聚體結(jié)構(gòu)，有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，該因子能夠刺激腫瘤血管形成，且與腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)[8]；研究結(jié)果顯示TNM分期為T3～T4 期，有淋巴轉(zhuǎn)移的患者PDGF-BB 表達(dá)水平明顯高于T1～T2 期，無轉(zhuǎn)移的患者，與T 分期。淋巴轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，與國外諸多學(xué)者研究結(jié)果一致；臨床數(shù)據(jù)顯示，鼻咽癌晚期淋巴轉(zhuǎn)移的患者療效預(yù)后差，這提示PHD2、PDGF-BB 表達(dá)水平對鼻咽癌患者預(yù)后有一定的影響。

綜上所述，鼻咽癌患者PHD2 在癌組織中主要為低表達(dá)、PDGF-BB 高表達(dá)，上述指標(biāo)與T 分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理特征有相關(guān)性，可作為臨床評估患者病情情況以指導(dǎo)治療的參考指標(biāo)。