淺談新法規(guī)形勢(shì)下常用美白劑的原理和組合搭配

＊趙冰怡 叢琳 劉海勇 李雪竹

（1.上海新高姿化妝品有限公司 廣東 510000 2.廣州澳希亞實(shí)業(yè)有限公司 廣東 510000）

美白是一個(gè)亙古不變的話題，早在3500年前埃及人就已經(jīng)使用美白化妝品，中國唐代孫思邈發(fā)明有專門的美白組方。美白功效已成為占據(jù)中國化妝品主流功效之一，足見擁有白皙凈透的肌膚對(duì)新一代消費(fèi)者的重要性。2021年3月國家藥監(jiān)局再次發(fā)文注冊(cè)申請(qǐng)人申請(qǐng)祛斑類特殊化妝品時(shí)應(yīng)當(dāng)按提交符合要求的人體功效試驗(yàn)報(bào)告。國家發(fā)布的美白祛斑檢測(cè)方法新在何處？新法令之下美白成分如何組合才能實(shí)現(xiàn)人體實(shí)驗(yàn)的顯著性差異？本文將從以下幾方面闡述對(duì)新法令和美白劑應(yīng)用的思考。

1.新法規(guī)對(duì)美白祛斑特殊化妝品提出的新要求

2021年3月5日國家藥監(jiān)局發(fā)布《國家藥監(jiān)局關(guān)于實(shí)施 〈化妝品注冊(cè)備案資料管理規(guī)定〉有關(guān)事項(xiàng)的公告（2021年第35號(hào)）》，文件中明確說明關(guān)于祛斑美白化妝品功效評(píng)價(jià)檢驗(yàn)報(bào)告的要求：自2022年1月1日起，申請(qǐng)祛斑美白妝品注冊(cè)時(shí)，注冊(cè)申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)按照規(guī)定，提交符合要求的人體功效試驗(yàn)報(bào)告；2021年5月1日前申請(qǐng)并取得注冊(cè)的祛斑美白化妝品，注冊(cè)人應(yīng)當(dāng)在2023年5月1日前補(bǔ)充提交人體功效試驗(yàn)報(bào)告；2021年5月1日至12月31日期間申請(qǐng)并取得注冊(cè)的祛斑美白，注冊(cè)人應(yīng)當(dāng)于2022年5月1日前補(bǔ)充提交符合要求的人體功效試驗(yàn)報(bào)告。自此，具有美白祛斑功效的特殊化妝品取得注冊(cè)資格僅需要提供美白劑佐證材料的時(shí)代一去不復(fù)返，如何在過渡期實(shí)現(xiàn)自研產(chǎn)品在人體功效試驗(yàn)中的有效性亟待解決。

美白祛斑類化妝品人體評(píng)價(jià)試驗(yàn)方法又是如何操作的呢？明晰美白祛斑人體檢測(cè)方法是產(chǎn)品開發(fā)的前提。2021年2月8日國家出臺(tái)相關(guān)文件，《化妝品祛斑美白功效測(cè)試方法》經(jīng)化妝品標(biāo)準(zhǔn)專家委員會(huì)全體會(huì)議審議通過，作為《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》修訂或新增的檢驗(yàn)方法，納入《規(guī)范》相應(yīng)章節(jié)?，F(xiàn)將其對(duì)比見表1。

表1 化妝品祛斑美白功效測(cè)試方法對(duì)比

方法一更加適用于宣稱具有美白的化妝品。測(cè)試開始時(shí)要求試驗(yàn)部位膚色I(xiàn)TA°值在20°～41°之間，試驗(yàn)是通過特定條件先建立“黑化”模型，即將皮膚先行曬黑后進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)是采用的7%抗壞血酸制劑作為陰性對(duì)照，連續(xù)經(jīng)過4周的測(cè)試時(shí)間，滿足視覺評(píng)分或者ITA°指標(biāo)顯著改善時(shí)則可判定試驗(yàn)產(chǎn)品具有美白功效。該方法優(yōu)點(diǎn)在于同一組受試者可進(jìn)行多個(gè)樣品的評(píng)價(jià)，測(cè)試周期短，更為快捷。方法一側(cè)重曬黑皮膚的美白修復(fù)，若試驗(yàn)產(chǎn)品對(duì)皮膚已形成的黑色素具有良好的還原、剝脫效果或是對(duì)引發(fā)黑化的炎癥因子具有良好的抑制作用，則通過合理的配方搭建即可實(shí)現(xiàn)優(yōu)秀的美白效果。

方法二更適用于宣稱具有美白/祛斑功效化妝品的人體實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)。該方法適用受試部位具有明顯色素沉著或皮膚暗沉者，色素沉著區(qū)皮膚和周圍附近皮膚的ITA°差值大于10°，即對(duì)自身已形成的色素進(jìn)行。采用不含祛斑美白功效成分的相應(yīng)基質(zhì)試驗(yàn)配方產(chǎn)品與美白祛斑試驗(yàn)產(chǎn)品平行測(cè)試，連續(xù)測(cè)試8周，滿足視覺評(píng)分、ITA°、MI值或圖像分析色斑光密度指標(biāo)顯著改善時(shí)則可判定試驗(yàn)產(chǎn)品具有美白功效。該方法優(yōu)點(diǎn)是更具有代表性，缺點(diǎn)是同一組受試者只能對(duì)一個(gè)樣品進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)周期長。方法二既是針對(duì)已形成色斑的褪黑試驗(yàn)，若試驗(yàn)產(chǎn)品對(duì)導(dǎo)致皮膚色斑形成的多個(gè)路徑具有顯著的抑制作用，則通過合理的配方搭建也可實(shí)現(xiàn)優(yōu)秀的美白祛斑效果。

2.皮膚黑化機(jī)理及常用美白劑原理分析

(1)皮膚黑化機(jī)理

一般來說，膚色的暗沉、斑點(diǎn)是黑色素沉淀導(dǎo)致[1]。在皮膚組織顯微鏡觀測(cè)圖可以看到斑點(diǎn)部位皮膚黑色素過量沉淀。這些過量的黑色素又從何而來呢？當(dāng)皮膚受到過量外界紫外線照攝，皮膚細(xì)胞內(nèi)自由基爆發(fā)、炎癥因子大量積累時(shí)，會(huì)刺激角質(zhì)形成細(xì)胞發(fā)出信號(hào)，刺激黑色素細(xì)胞分裂增殖，黑色素細(xì)胞得以活化，產(chǎn)生內(nèi)部應(yīng)激反應(yīng)。黑色素細(xì)胞內(nèi)的黑色素小體發(fā)生黑色素生成的生理過程。隨后經(jīng)黑色素細(xì)胞樹突結(jié)構(gòu)運(yùn)輸至角質(zhì)細(xì)胞外沉淀，并逐漸向表皮運(yùn)輸，若此時(shí)角質(zhì)層代謝不足或異常，則表現(xiàn)為皮膚斑點(diǎn)或者膚色暗沉，皮膚變黑。當(dāng)皮膚刺激源消失，曬黑后皮膚生成的黑色素會(huì)隨著皮角質(zhì)細(xì)胞脫落，層層代謝，最終皮膚恢復(fù)至原來的肌膚顏色。需要說明的是與生俱來的斑點(diǎn)部分黑色素分泌始終是源源不斷進(jìn)行的，這些固有的黑斑大多是由基因調(diào)控，黑色素不易分解，斑點(diǎn)幾乎也無法褪去[2]。

(2)常用美白劑原理分析

①熊果苷。熊果苷（Arbutin），化妝品中一般指的是β-熊果苷，一方面可以抑制黑素小體內(nèi)酪氨酸酶的活性[3]，從而抑制酪氨酸向多巴的轉(zhuǎn)變，以及多巴向多巴醌的轉(zhuǎn)變，進(jìn)而最終抑制黑色素的生成；另一方面，由于熊果苷與L-酪氨酸結(jié)構(gòu)的相似性，可與酪氨酸酶相互作用，參與競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酪氨酸酶的活性位點(diǎn)，進(jìn)而減少黑色素的生成。熊果苷在不良的條件下（高溫、紫外線照射、極端pH等），以及人表皮微生物和葡萄糖苷酶的作用下，容易分解產(chǎn)生有刺激性和毒性的氫醌[3]。另外，β-熊果苷還有一種同分異構(gòu)體即α-熊果苷。α-熊果苷相對(duì)β-熊果苷其化學(xué)性質(zhì)更為穩(wěn)定，安全性更高，效果更好，價(jià)格更昂貴[4]。

②苯乙基間苯二酚。苯乙基間苯二酚，有一個(gè)更聞名遐邇的名稱SymWhite 377。苯乙基間苯二酚一方面具有較強(qiáng)的抑制酪氨酸酶的作用；另一方面，該成分結(jié)構(gòu)中的雙酚羥基結(jié)構(gòu)具有較強(qiáng)的抗氧化能力，可對(duì)生成黑色素的反應(yīng)進(jìn)行抑制[5]。苯乙基間苯二酚在非特征產(chǎn)品中不允許超過0.5%，特征申報(bào)的產(chǎn)品中不允許超過2%，苯乙基間苯二酚在光照下不穩(wěn)定，且容易與金屬離子螯合，在弱酸性配方體系下穩(wěn)定（pH4.5-6.0），限制了其在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用，因此含有377的美白產(chǎn)品建議添加紫外吸收劑和光穩(wěn)定劑等來提高苯乙基間苯二酚的穩(wěn)定性，并在避光環(huán)境下保存。

③曲酸。曲酸（Kojic Acid）是由微生物發(fā)酵而來的一種具有美白、抗菌作用的有機(jī)酸[6]。曲酸能夠與細(xì)胞中金屬離子如銅離子絡(luò)合，從而抑制酪氨酸酶的活性，進(jìn)而抑制酪氨酸合成黑色素[7]。曲酸對(duì)光、熱敏感，與空氣接觸容易被氧化從而失去美白效果，其在化妝品中的用途受到限制。

④維生素C及其衍生物。維生素C是一種多羥基化合物，又稱抗壞血酸通常維生素C衍生物是將維生素C活性位置C-2上羥基取代或者酯化而來。

維生素C類的美白機(jī)制，一方面，可對(duì)生成黑色素的路徑進(jìn)行還原，將多巴醌還原為多巴，使黑色素不再增加[7]；另一方面，增強(qiáng)皮膚修復(fù)和再生能力，延緩衰老[8]。維生素C的活性主要源自其四個(gè)羥基，特別是其烯醇結(jié)構(gòu)上的兩個(gè)羥基，對(duì)熱、光、氧敏感，不穩(wěn)定。產(chǎn)品易引起褐變。因此在化妝品中，更多情況下添加的是維生素C衍生物。使用頻率較高的有抗壞血酸酯類衍生物，抗壞血酸醚類衍生物，抗壞血酸磷酸鹽衍生物以及抗壞血酸葡萄糖衍生物四類[7]。

⑤煙酰胺。煙酰胺又稱尼克酰胺，是煙酸（維生素B3）的酰胺化合物，因此也可稱作是維生素B3的一種衍生物。促進(jìn)黑色素向角化細(xì)胞的傳遞，加速黑色素在角質(zhì)層的代謝和脫落。簡(jiǎn)而言之，類似于一邊讓黑素工廠壓貨，一遍讓皮膚迅速甩貨，所以對(duì)于已形成的黑色素剝脫十分有效快速[9]。另外，煙酰胺是一位全能選手，能夠減輕粉刺，包括降低粉刺的嚴(yán)重程度；減少丘疹，膿包的數(shù)量；有效減少皮脂的形成和排出；淡化痘印[10]。

⑥傳明酸。傳明酸，又名凝血酸、氨甲環(huán)酸。一直以來是皮膚科醫(yī)生治療黃褐斑的王牌成分。研究數(shù)據(jù)表明皮膚斑點(diǎn)部位存在慢性微弱炎癥。這些炎癥因子會(huì)刺激黑色素細(xì)胞周圍的細(xì)胞持續(xù)發(fā)出產(chǎn)生黑色素的信息物質(zhì)PGE2（慢性微弱炎癥），進(jìn)而促使黑色素細(xì)胞生成黑色素。傳明酸的美白機(jī)制即抑制炎癥因子對(duì)黑色素細(xì)胞的信號(hào)刺激作用[7]。傳明酸是從信號(hào)抑制角度出發(fā)，所以一般更多地與其他美白劑復(fù)配使用。

⑦十一碳烯?；奖彼?。十一碳烯酰基苯丙氨酸是α-MSH（促黑色素激素）的結(jié)構(gòu)相似物，是α-MSH的對(duì)抗劑。通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合黑色素細(xì)胞上黑色素刺激素受體MC1-R，使黑色素細(xì)胞無法產(chǎn)生酪氨酸酶，從而抑制黑色素細(xì)胞活性，減少黑色素的生成[11]。

⑧4-甲氧基水楊酸鉀。4-甲氧基水楊酸鉀，又名4MSK（4-Methoxy Salicylic Acid KCI）。皮膚變黑，一方面是黑色素生成，另一方面是黑色素?zé)o法順利代謝剝脫。雖然皮膚會(huì)代謝，但如果這部分的皮膚出現(xiàn)異常，含有黑色素的細(xì)胞像釘子戶一樣不脫落，皮膚依舊變黑。4MSK除具有抑制酪氨酸酶的活性外，最主要的是可以通過調(diào)理肌膚角化過程的不順暢來改善皮膚的色澤[7,12]。

3.四款美白劑的組合搭配建議

通過以上8種常用美白劑美白原理的分析和配方限制，方法一皮膚黑化模型祛斑美白功效測(cè)試法方法適合于以煙酰胺為主，搭配傳明酸、維生素C類、去角質(zhì)活性物的配方；方法二人體開放性祛斑美白功效測(cè)試方法適用于含有以顯著控制黑色素合成、抑制黑化信號(hào)傳導(dǎo)、調(diào)理角質(zhì)層代謝的美白配方，如377、熊果苷、傳明酸、4MSK?，F(xiàn)選擇4種在配方中易于應(yīng)用、活性高效、敏感率低的美白劑進(jìn)行配方應(yīng)用研究，分別是：AA2G、煙酰胺、凝血酸、4MSK。

(1)焦亞硫酸鈉對(duì)四種美白劑的影響

根據(jù)表2進(jìn)行配方打樣后，放入統(tǒng)一的透明樣品瓶，避光45℃下測(cè)試樣品90天，然后將樣品取出于恒溫箱中歷時(shí)24h恢復(fù)至25℃，與室溫留樣對(duì)比觀察樣品熱穩(wěn)定性狀態(tài)。把樣品放置于自然光直射的環(huán)境下90天，回收樣品，觀察樣品光穩(wěn)定性狀態(tài)。樣板初始時(shí)均為乳白色液態(tài)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表3。焦亞硫酸鈉對(duì)AA2G、煙酰胺、凝血酸的光穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性具有明顯改善；在耐熱穩(wěn)定性方面，4MSK不存在變色問題；在光穩(wěn)定性方面，焦亞硫酸鈉可一定程度上阻止4MSK變色反應(yīng)，但不夠顯著，所以4MSK遇熱不易變色，遇光容易變色。焦亞硫酸鈉溶于水產(chǎn)生刺激性氣味，會(huì)對(duì)美白配方的氣味和溫和性帶來負(fù)面影響，因此需把握劑量，建議配方添加0.003%。

表2 焦亞硫酸鈉對(duì)四種美白劑的色澤穩(wěn)定性配方

表3 焦亞硫酸鈉對(duì)4MSK色澤穩(wěn)定性的影響

(2)四款美白劑兩兩配伍的應(yīng)用

根據(jù)表4進(jìn)行配方打樣，放入統(tǒng)一的透明樣品瓶，避光45℃下測(cè)試樣品90天，然后將樣品取出于恒溫箱中歷時(shí)24h回復(fù)至25℃，與室溫留樣對(duì)比觀察樣品熱穩(wěn)定性狀態(tài)。把樣品放置于自然光直射的環(huán)境下90天，回收樣品，觀察樣品光穩(wěn)定性狀態(tài)。樣板初始時(shí)均為乳白色液態(tài)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5。煙酰胺與凝血酸組合在該體系下經(jīng)老化，色澤、氣味最優(yōu)；煙酰胺與4MSK在該體系下不兼容，初始樣板即會(huì)明顯發(fā)出酸臭味，經(jīng)老化更明顯；4MSK光照變粉色，但僅當(dāng)于AA2G搭配時(shí)其變粉色的現(xiàn)象幾乎消失，微乎其微；4MSK與凝血酸組合高溫微黃，光照變粉，氣味良好；含AA2G的樣板老化后均有酸味，其中AA2G和4MSK組合酸味程度最輕，AA2G與煙酰胺組合酸味居中，AA2G與凝血酸組合酸味最重；所有組合中AA2G與凝血酸高溫黃變是最嚴(yán)重的。

表4 四款美白劑復(fù)配的色澤穩(wěn)定性配方

表5 四款美白劑兩兩配伍的光、熱穩(wěn)定性

4.結(jié)論

申請(qǐng)祛斑類特殊化妝品時(shí)應(yīng)當(dāng)提交符合要求的人體功效試驗(yàn)報(bào)告是新時(shí)代下化妝品研發(fā)走向規(guī)范化和嚴(yán)格化的表現(xiàn)。焦亞硫酸鈉可有效緩解美白劑在耐熱和光照環(huán)境下的變色問題，實(shí)驗(yàn)表明煙酰胺搭配凝血酸較好，4MSK搭配傳明酸或抗壞血酸葡糖苷較適宜?；瘖y品企業(yè)和個(gè)人都應(yīng)深耕研發(fā)，注重基礎(chǔ)研究，積累有效的人體數(shù)據(jù)，推進(jìn)中國現(xiàn)代化的化妝品事業(yè)發(fā)展。