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    基于同步熒光光譜的雞肉中磺胺二甲基嘧啶和氧氟沙星殘留的快速檢測

    2021-07-03 07:00:38劉木華袁海超黃雙根趙進輝
    光學精密工程 2021年4期
    關鍵詞:高法雞肉提取液

    陳 健,劉木華,2,袁海超,2,黃雙根,2,趙進輝,2*,徐 寧,王 婷,胡 圍

    (1.江西農業(yè)大學 工學院 江西省現代農業(yè)裝備重點實驗室,江西 南昌330045;2.江西農業(yè)大學 工學院 江西省果蔬采后處理關鍵技術及質量安全協同創(chuàng)新中心,江西 南昌330045)

    1 引言

    自1929年Fleming[1]發(fā)現第1劑抗生素(青霉素)以來,抗生素得到了快速發(fā)展和應用,不僅用于治療人類的各類感染性疾病,而且也用于解決家禽養(yǎng)殖中存在的疫病防治問題。然而,在家禽養(yǎng)殖中使用抗生素是一把雙刃劍,因為抗生素會殘留在家禽中,人類食用這種家禽后抗生素會導致各種副作用,例如破壞人體的腸道菌群,轉移耐藥性細菌至人體和致癌等[2-4]。

    磺胺二甲基嘧啶(Sulfamethazine,SM 2)屬于磺胺類抗生素,氧氟沙星(Ofloxacin,OFL)屬于喹諾酮類抗生素,均是家禽疾病防治的常用藥。為保障家禽產品質量安全和公共衛(wèi)生安全,中國農業(yè)農村部規(guī)定在雞肌肉組織中SM 2的最大殘留限量為100μg/kg,禁止使用OFL[5-6]。目前,檢測肉中磺胺類和喹諾酮類抗生素殘留的方法主要有液相色譜法[7-8]、液相色譜和質譜聯用法[9-10]等。這些方法需要實驗室環(huán)境、熟練的技術人員和較長的檢測時間等,難以滿足日益增長的現場實時檢測需求[11-13]。因此,需要開發(fā)操作簡單、快速和低成本的檢測技術。熒光屬于光致發(fā)光現象,當紫外線照射某些物質時,這些物質會發(fā)射出不同顏色和強度的可見光,而當停止照射時,發(fā)射的光也會迅速消失[14]。在實際使用中,常規(guī)熒光光譜法具有較高靈敏度,但對于一些多組分混合物分析時,熒光光譜常重疊嚴重,難以分析,光譜檢測效果不佳。為改善熒光檢測的效果,同步熒光掃描技術被提出,該技術同時掃描激發(fā)和發(fā)射單色器波長,并將測得的熒光強度信號對應的激發(fā)(或發(fā)射)波長作圖[15-16]。與常規(guī)熒光光譜相比,同步熒光法具有窄化光譜帶、減弱光譜重疊等優(yōu)點。科研人員已經應用同步熒光技術檢測豬肉中頭孢噻呋或頭孢拉定殘留[17-18],由此表明同步熒光技術可用于單種抗生素殘留的快速檢測。

    目前,應用同步熒光技術同時檢測雞肉中SM 2和OFL殘留的研究尚無報道。因此,本文將同步熒光技術與化學計量學方法結合,以雞肉為載體,SM 2和OFL為研究對象,優(yōu)化了熒光檢測條件,建立并對比了峰高法和峰面積法的預測模型,為進一步應用同步熒光技術檢測肉中抗生素殘留提供技術支持。

    2 實驗

    2.1 材料與試劑

    雞胸肉(南昌市某大型超市);SM 2(99.4%,德國Dr.Ehrenstorfer公司);OFL(≥99%,上海源葉生物科技有限公司);鄰苯二甲醛、β-巰基乙醇(99.0%,成都艾科達化學試劑有限公司);硼酸(≥99.5%)、磷酸(≥85.0%)(西隴科學股份有限公司);乙二胺四乙酸二鈉(Na2EDTA)、磷酸 二 氫 鉀(KH2PO4)和 磷 酸 氫 二 鉀(K2HPO4·3H2O)(分析純,西隴科學股份有限公司);冰乙酸(≥99.5%,天津市大茂化學試劑廠);三氯乙酸(分析純,上海阿拉丁生化科技股份有限公司);有機相針式濾器(0.45μm,上海安譜實驗科技股份有限公司)。

    磷酸鹽緩沖液(含0.4 mmol/L的Na2EDTA和10%的三氯乙酸溶液)的配制:準確稱取1 g K2HPO4·3H2O和4 g KH2PO4,用480 mL超純水溶解,分別加入Na2EDTA 75 mg和三氯乙酸50 g,溶解混勻并用超純水定容至500 mL。0.01 mol/L鄰苯二甲醛溶液的配制:準確稱取0.134 g鄰苯二甲醛溶于100 mL容量瓶中,用超純水稀釋至刻度。0.1 mol/Lβ-巰基乙醇溶液的配制:準確量取β-巰基乙醇704μL于100 mL容量瓶中,用超純水稀釋至刻度。BR緩沖液(p H 1.8)的配制:用超純水配制濃度各為0.04 mol/L的磷酸、冰乙酸和硼酸混合緩沖溶液。

    2.2 儀器與設備

    實驗設備有:Cary Eclipse熒光分光光度計(美國瓦里安);FA 1004B電子天平(上海上平儀器有限公司);全自動RO純水機(湖南科爾頓水務有限公司);JK-50B超聲波清洗器(合肥金尼克機械有限公司);VORTEX-5漩渦混合器(海門市其林貝爾儀器有限公司);KJ-201BS振蕩器(江蘇康健醫(yī)療用品有限公司);JW-1024低速離心機(安徽嘉文儀器裝備有限公司);JJ-2B組織搗碎勻漿機(江蘇省金南儀器廠);1 cm光程石英比色皿(宜興市晨偉玻璃儀器廠)。

    2.3 樣品的制備

    (1)抗生素儲備液的配制:取7.5 mg的SM 2(或OFL)標準品溶于50 mL超純水,可得到150 mg/L SM 2(或150 mg/L OFL)儲備液,于4℃下儲存。

    (2)SM 2工作液的配制:取0.6 mL的SM 2儲備液,用超純水稀釋至15 mL,得到6.0 mg/L SM 2工作液,于4℃下儲存。

    (3)OFL工作液的配制:取0.1 mL的OFL儲備液,用超純水稀釋至15 mL,得到1.0 mg/L OFL工作液,于4℃下儲存。

    (4)根據文獻[8]中的快速溶劑萃取法提取空白雞肉,具體操作如下:稱取均質的雞胸肉5.0 g(精確到0.1 g),置于50 mL離心管中,加入超純水4 mL,渦旋1 min,再加入磷酸鹽緩沖液10 mL,渦旋1 min,振蕩15 min,4500 r/min離心15 min,將上清液轉移至另一個50 mL離心管中,往離心管沉淀物中再加入磷酸鹽緩沖液10 mL;重復上述步驟1次,并將2次提取的上清液合并,混勻,過0.45μm濾膜,用磷酸鹽緩沖液定容至25 mL,得到空白雞肉提取液。

    (5)根據文獻[8],雞肉中SM 2和OFL的殘留提取操作分為3部分。①混合抗生素工作液的配制:在10 mL離心管中分別加入0.083,0.167,0.500,0.750,1.000,1.250,1.500,1.750,2.250,2.500 mL的SM 2儲備液和0.042,0.083,0.167,0.417,0.500,0.583,0.667,0.750,0.833,0.917 mL的OFL儲備液,兩者濃度隨機組合,用超純水定容至4 mL,得到這兩種混合抗生素工作液。②加標雞肉的制備:稱取均質的雞胸肉5.0 g(精確到0.1 g),置于50 mL離心管中,加入4 mL混合抗生素工作液,渦旋1 min。③雞肉中抗生素的提?。杭尤肓姿猁}緩沖液10 mL,渦旋1 min,振蕩15 min,4500 r/min離心15 min,將上清液轉移至另一個50 mL離心管中,往離心管沉淀物中再加入磷酸鹽緩沖液10 mL,重復上述步驟1次,并將2次提取的上清液合并,混勻,過0.45μm有機相濾膜,用磷酸鹽緩沖液定容至25 mL。得到含SM 2和OFL的雞肉提取液:SM 2濃 度 為0.5,1.0,3.0,4.5,6.0,7.5,9.0,10.5,13.5,15.0 mg/L(分別對應于雞肉中含有2.5,5.0,15.0,22.5,30.0,37.5,45.0,52.5,67.5,75.0 mg/kg的SM 2),OFL濃度為0.25,0.5,1.0,2.5,3.0,3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 mg/L(分別對應于雞肉中含有1.25,2.5,5.0,12.5,15.0,17.5,20.0,22.5,25.0,27.5 mg/kg的OFL)。

    2.4 標準溶液以及雞肉提取液的三維同步熒光光譜的采集

    為了采集標準溶液以及雞肉提取液的三維同步熒光光譜,分別取200μL SM 2標準溶液(6.0 mg/L)、OFL標準溶液(1.0 mg/L)、空白雞肉提取液和含SM 2和OFL的雞肉提取液(6.0 mg/kg SM 2,1.0 mg/kg OFL)于不同的石英比色皿中,再先后加入800μL BR緩沖液,100μL β-巰基乙醇溶液和100μL鄰苯二甲醛溶液,采集波長差(Δλ:20~300 nm,間隔10 nm)的三維同步熒光光譜。

    2.5 定性實驗設計方案

    (1)為了探究不同β-巰基乙醇溶液加入量對同步熒光強度的影響,向石英比色皿中依次加入200μL含SM 2和OFL的雞肉提取液(6.0 mg/kg SM 2,1.0 mg/kg OFL),BR緩沖液(調節(jié)其體積使體系恒為1.2 mL),25,100,300,400,600和800μL的β-巰基乙醇溶液,100μL鄰苯二甲醛溶液,設置5個平行組,采集44 min,Δλ=150 nm和210 nm處的同步熒光光譜。

    (2)為了探究不同鄰苯二甲醛溶液加入量對同步熒光強度的影響,向石英比色皿中依次加入200μL含SM 2和OFL的雞肉提取液(6.0 mg/kg SM 2,1.0 mg/kg OFL),BR緩沖液(調節(jié)其體積使體系恒為1.2 mL),300μLβ-巰基乙醇溶液,25,100,200,300和400μL的鄰苯二甲醛溶液,設置5個平行組,采集44 min,Δλ=150 nm和210 nm處的同步熒光光譜。

    (3)為了探究不同時間對同步熒光強度的影響,向石英比色皿中依次加入200μL含SM 2和OFL的雞肉提取液(6.0 mg/kg SM 2,1.0 mg/kg OFL),675μL BR緩沖液,300μLβ-巰基乙醇溶液,25μL鄰苯二甲醛溶液,設置5個平行組,采集0~100 min(間隔4 min),Δλ=150 nm和210 nm處的同步熒光光譜。

    2.6 定量實驗設計方案

    向石英比色皿中依次加入200μL的含不同濃度SM 2和OFL的雞肉提取液,675μL BR緩沖液,300μLβ-巰基乙醇溶液,25μL鄰苯二甲醛溶液,設置5個平行組,采集44 min,Δλ=150 nm和210 nm處的同步熒光光譜。

    2.7 熒光光譜儀參數設置

    標準溶液以及雞肉提取液的三維同步熒光光譜采集時,熒光光譜儀的采集參數設置如下:激發(fā)波長的掃描范圍為240~490 nm,激發(fā)、發(fā)射狹縫寬度分別為10 nm和5 nm,光電倍增管(Photomultiplier Tube,PMT)電壓為700 V。

    定性實驗和定量實驗時,熒光光譜儀的參數設置如下:激發(fā)波長的掃描范圍為240~400 nm,激發(fā)、發(fā)射狹縫寬度分別為10 nm和5 nm,PMT電壓為700 V。

    2.8 數據處理方法

    在建立預測模型之前,使用The Unscram?bler X 10.4(挪威CAMO公司)軟件對原始光譜進行基線偏移,以消除原始光譜的基線漂移。其次,使用LabSpec 5(法國JobinYvon公司)軟件對SM 2的同步熒光光譜(Δλ=150 nm,激發(fā)波長在270~315 nm)和OFL的同步熒光光譜(Δλ=210 nm,激發(fā)波長在275~315 nm)進行峰面積計算。為了建立基于峰高法的預測模型,擬合雞肉中SM 2殘留濃度和熒光激發(fā)峰強度(Δλ=150 nm,熒光激發(fā)峰為292.5 nm)之間的關系、擬合雞肉中OFL殘留濃度和熒光激發(fā)峰強度(Δλ=210 nm,熒光激發(fā)峰為295 nm)之間的關系,來評估熒光激發(fā)峰強度與相應濃度之間是否存在良好的線性關系。此外,為了建立基于峰面積法的預測模型,擬合雞肉中SM 2殘留濃度和熒光激發(fā)峰面積之間的關系以及雞肉中OFL殘留濃度和熒光激發(fā)峰面積之間的關系,來評估熒光激發(fā)峰面積與相應濃度之間是否存在良好的線性關系。計算訓練集決定系數(Coefficient of Determina?tion for the Training Set,)、預測集決定系數(Coefficient of Determination for the Prediction Set,)、預測集均方根誤差(Root Mean Square Error for the Prediction Set,RMSEP)、回收率和相對標準偏差(Relative Standard Deviation,RSD),以評估預測模型性能。

    3 結果與分析

    3.1 標準溶液以及雞肉提取液的三維同步熒光光譜

    SM 2和OFL具有不同的熒光基團,進而有著不同的熒光特性。為了同時檢測這兩種抗生素,需要SM 2和OFL都能表現出明顯的熒光特征,從而收集包含這兩種抗生素的熒光信息。SM 2是弱熒光物質,但它具有伯胺基團,可通過衍生劑(本文使用鄰苯二甲醛)進行衍生,其產物在Δλ/激發(fā)波長為150/292.5 nm處有熒光激發(fā)峰。伯胺化合物與鄰苯二甲醛反應的化學方程式[19]如下:

    另一方面,從化學結構來看,OFL具有共軛結構和剛性,且其核心結構部分為喹啉,因此具有較強的熒光特性[20]。圖1(a)和圖1(b)分別為SM 2衍生物和OFL的三維同步熒光等高線圖。從中可見,OFL在Δλ/激發(fā)波長為170/330 nm和210/295 nm處有熒光激發(fā)峰。雞肉成分復雜(存在蛋白質、脂肪等),某些成分(例如色氨酸等)具有較強的熒光特性,因此,采用三氯乙酸、有機相針式濾器對提取液進行處理,以減弱蛋白質、脂肪等物質的干擾。圖1(c)為空白雞肉提取液的三維同步熒光等高線圖。從中可見,空白雞肉提取液在Δλ/激發(fā)波長為60/282.5 nm和130/337.5 nm處有明顯的熒光激發(fā)峰。圖1(d)為含SM 2和OFL的雞肉提取液的三維同步熒光等高線圖。從中可見,在含SM 2和OFL的雞肉提取液中SM 2衍生物和OFL顯現出它們的熒光激發(fā)峰。綜上所述,待測抗生素(SM 2、OFL)與雞肉背景的熒光信號有明顯的區(qū)別,可通過Δλ/激發(fā)波長150/292.5 nm(SM 2)和210/295 nm(OFL)實現同時檢測。

    圖1 三維同步熒光等高線圖Fig.1 Contour spectra of three-dimensional synchronous fluorescence

    3.2 同步熒光光譜檢測條件優(yōu)化

    在鄰苯二甲醛與SM 2的衍生過程中,β-巰基乙醇作為還原劑[21],其加入量會影響目標衍生物的生成量。由圖2(a)可知,β-巰基乙醇溶液加入量在25~300μL內,隨著β-巰基乙醇溶液加入量的增多,SM 2衍生物的熒光強度迅速增強。這可能是隨著β-巰基乙醇含量增加,更多的β-巰基乙醇參與了衍生反應,SM 2衍生物產量增加了。β-巰基乙醇溶液加入量在300~800μL內,它對SM 2衍生物的熒光強度影響不大。這是因為β-巰基乙醇溶液加入量對SM 2衍生物生成的影響減小了。此外,β-巰基乙醇溶液加入量在25~600μL內,隨著β-巰基乙醇溶液加入量的增多,OFL的熒光強度增強。這是因為在酸性介質(p H 4)中具有苯環(huán)的OFL熒光特性更強[22],隨著β-巰基乙醇(pH 4.5~6.0)含量的增加,體系p H逐步向β-巰基乙醇靠近。β-巰基乙醇溶液加入量在600~800μL內,它對OFL的熒光強度影響不大。這是因為β-巰基乙醇溶液加入量對體系p H的影響減小了。從圖2(a)可以看出,加入β-巰基乙醇溶液300μL時,SM 2衍生物的熒光強度達到最大,且OFL的熒光強度比SM 2衍生物強。因此,β-巰基乙醇溶液的加入量在300~800μL之間。SM 2產生熒光條件苛刻,且熒光較弱,所以增強其熒光強度有利于提高檢測靈敏度。綜合考慮,SM 2和OFL的熒光強度以及節(jié)約β-巰基乙醇用量,確定300μL為最佳加入量。

    目前,鄰苯二甲醛在熒光檢測中得到了廣泛的應用[23-25]。由圖2(b)可見,鄰苯二甲醛溶液加入量在25~300μL內,隨著鄰苯二甲醛溶液加入量的增多,SM 2衍生物的熒光強度逐漸減弱。在異吲哚衍生物形成過程中加入過量的鄰苯二甲醛會導致其快速降解[26-28],這是SM 2衍生物熒光強度減弱的原因。鄰苯二甲醛溶液加入量在300~400μL內,它對SM 2衍生物熒光強度的影響不大。這是因為鄰苯二甲醛溶液加入量對異吲哚衍生物降解的影響減弱了。此外,鄰苯二甲醛溶液加入量在25~300μL內,隨著加入量的增多,OFL的熒光強度也逐漸減弱。在酸性體系中,隨著鄰苯二甲醛(pH7,53 g/L)含量的增加,體系的pH升高,從而減弱了OFL的熒光特性。鄰苯二甲醛溶液加入量在300~400μL內,它對OFL熒光強度的影響不大。這是因為鄰苯二甲醛溶液加入量對體系pH的影響減弱了。綜合考慮,在加入鄰苯二甲醛溶液25μL時,SM 2衍生物和OFL的熒光強度最強。因此,選擇25μL作為鄰苯二甲醛溶液的加入量。

    由圖2(c)可知,在0~44 min內,隨著時間的增加,SM 2衍生物的熒光強度逐漸增強,在44 min后,其熒光強度保持穩(wěn)定。此外,在0~30 min內,隨著時間的增加,OFL的熒光強度也隨之增強;在30 min后,其熒光強度保持穩(wěn)定。綜合考慮,在30 min時,OFL的熒光強度達到最大;在44 min時,SM 2衍生物的熒光強度達到最大,同時OFL的熒光強度并未減弱。因此,選擇在44 min采集熒光光譜。

    圖2 不同條件對熒光強度的影響Fig.2 Effects of difference conditions on fluorescence intensity

    3.3 預測模型建立及預測結果分析

    含SM 2和OFL的雞肉提取液樣本共10個,采用1∶1的分配方案,預測集的數據都落在訓練集的范圍之內,訓練集、預測集都由5個樣本組成,如表1所示。預測模型的性能用預測集進行驗證,擬合真實值與預測值之間的線性關系。

    表1 雞肉中SM 2和OFL殘留的樣本統計結果Tab.1 Statistical results of samples of SM 2 and OFL residues in chicken

    3.3.1 基于峰高法的預測模型

    圖3(a)為雞肉中不同濃度SM 2殘留和對應的熒光激發(fā)峰強度(Δλ=150 nm,熒光激發(fā)峰為292.5 nm)之間的線性關系。由圖可知,基于峰高法的SM 2殘留的工作曲線具有良好的線性關系,線性方程為y=0.5505x+18.884,為0.9194。由圖3(c)可知,真實值與預測值之間的為0.8973,RMSEP為6.0605 mg/kg。對預測集樣本進行回收實驗,樣本回收率處于76.1%~115.2%之間,RSD處于2.7%~7.0%之間(見表2)。

    圖3 基于峰高法的雞肉中SM 2和OFL殘留的工作曲線和預測集樣本關系Fig.3 Working curves and relationship between actual and predicted values of SM 2 and OFL residues in prediction sam?ples in chicken by peak height algorithm

    圖3(b)為雞肉中不同濃度OFL殘留和對應的熒光激發(fā)峰強度(Δλ=210 nm,熒光激發(fā)峰為295 nm)之間的線性關系。由圖可知,基于峰高法的OFL殘留的工作曲線具有良好的線性關系,線 性 方 程 為y=7.7838x+15.919,R2

    T為0.9738。由圖3(d)可知,真實值與預測值之間的為0.9973,RMSEP為0.5392 mg/kg。對預測集樣本進行回收實驗,樣本回收率處于96.7%~110.1%之間,RSD處于2.8%~10.0%之間(見表2)。

    表2 基于峰高法的雞肉中SM 2和OFL殘留的預測結果Tab.2 Prediction results of SM 2 and OFL residues in chicken by peak height algorithm

    3.3.2 基于峰面積法的預測模型

    圖4(a)為雞肉中不同SM 2殘留和對應的熒光激發(fā)峰面積(Δλ=150 nm,激發(fā)波長為270~315 nm)之間的線性關系。由圖可知,基于峰面積法的雞肉中SM 2殘留的工作曲線具有良好的線性關系,線性方程為y=20.508x+870.12,為0.8328。由圖4(c)可知,真實值與預測值之間的R2

    P為0.7281,RMSEP為11.2770 mg/kg。對預測集樣本進行回收實驗,回收率處于56.3%~127.4%之間,RSD處于2.5%~6.6%之間(見表3)。

    對比基于峰高法和峰面積法的雞肉中SM 2殘留預測模型可知,基于峰高法的預測模型比基于峰面積法的預測模型的和大,分別大了0.0866和0.1692,表明采用峰高法可以有效地提高預測模型的線性關系,提高預測集的真實值和預測值之間的線性關系?;诜甯叻ǖ念A測模型比基于峰面積法的預測模型的回收率的上、下限值更接近100%,此外,基于峰高法的預測模型比基于峰面積法的預測模型的RMSEP減小了5.2165 mg/kg,表明采用峰高法可以顯著提高預測模型的準確度。基于峰高法和基于峰面積法的預測模型的RSD均小于7%,表明采用這兩種算法分析數據,預測模型均具有良好的精密度。

    圖4(b)為雞肉中不同OFL殘留和對應的熒光激發(fā)峰面積(Δλ=210 nm,激發(fā)波長為275~315 nm)之間的線性關系。由圖可知,基于峰面積法的雞肉中OFL殘留的工作曲線具有良好的線性關系,線性方程為y=238.07x+505.57,為0.9748。由圖可知,真實值與預測值之間的為0.9965,RMSEP為0.6060 mg/kg。對預測集樣本進行回收實驗,回收率處于96.7%~113.5%之間,RSD處于2.9%~9.9%之間(見表3)。

    表3 基于峰面積法的雞肉中SM 2和OFL殘留的預測結果Tab.3 Prediction results of SM 2 and OFL residues in chicken by peak area algorithm

    圖4 基于峰面積法的雞肉中SM 2和OFL殘留的工作曲線和預測集樣本關系Fig.4 Working curves and relationship between actual and predicted values of SM 2 and OFL residues in chicken in predic?tion samples by peak area algorithm

    對比基于峰高法和峰面積法的雞肉中OFL殘留預測模型可知,基于峰高法和基于峰面積法的預測模型的和相差很小,表明采用峰高法和峰面積法建立的預測模型都具有良好的線性關系且差異不大,此外,預測集的真實值和預測值之間也都具有良好的線性關系且差異不大?;诜甯叻ǖ念A測模型比基于峰面積法的預測模型的回收率上限值要更接近100%,且預測模型的RMSEP要小0.0668 mg/kg,表明采用峰高法能夠提高預測模型的準確度。基于峰高法和基于峰面積法的預測模型的RSD均小于10%,表明采用這兩種方法建立的預測模型均具有良好的精度。

    綜上所述,本實驗優(yōu)選峰高法建立雞肉中SM 2和OFL殘留的預測模型,檢測雞肉中SM 2和OFL殘留的檢出限分別可達2.5 mg/kg和1.25 mg/kg,能夠滿足雞肉中SM 2和OFL殘留快速同時檢測的要求。

    4 結論

    本文采用同步熒光技術結合化學計量學方法,提出了雞肉中SM 2和OFL殘留快速檢測方法。首先,分析了SM 2標準溶液、OFL標準溶液、空白雞肉提取液和含SM 2和OFL的雞肉提取液的三維同步熒光光譜,確定Δλ/激發(fā)波長為150/292.5 nm(SM 2)和210/295 nm(OFL)。其次,采用單因素實驗研究了β-巰基乙醇加入量、鄰苯二甲醛加入量和時間對熒光強度的影響,得到了最佳檢測條件:β-巰基乙醇加入量為300μL、鄰苯二甲醛加入量為25μL和時間為44 min。最后,比較了基于峰高法和峰面積法的預測模型性能,選擇了基于峰高法的預測模型作為分析模型。基于峰高法的SM 2殘留預測模型的真實值與預測值之間的RMSEP為6.0605 mg/kg,回 收 率 為76.1%~115.2%,RSD為2.7%~7.0%?;诜甯叻ǖ腛FL殘留預測模型的真實值與預測值之間的RMSEP為0.5392 mg/kg,回 收 率 為96.7%~110.1%,RSD為2.8%~10.0%。由此表明,該方法可以滿足快速檢測雞肉中SM 2和OFL殘留的需求。

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