腦膜瘤組織中脆性X相關(guān)基因1過(guò)表達(dá)促進(jìn)腦膜瘤細(xì)胞生長(zhǎng)與血管生成的研究

曹 杰， 張 杰， 孟發(fā)財(cái)， 藺鵬幀， 袁云超， 黃衛(wèi)東，侯明山， 王繼軍， 繆星宇， 師 蔚， 李 民

(1.陜西省人民醫(yī)院神經(jīng)外科， 陜西 西安 710004 2.西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科， 陜西 西安 710004)

腦膜瘤(Meningiomas)是最常見(jiàn)的腦內(nèi)和其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤類(lèi)型，約占所有顱內(nèi)腫瘤的30%，源自腦膜內(nèi)皮細(xì)胞[1]。根據(jù)2016年世界衛(wèi)生組織(WHO)的分類(lèi)，腦膜瘤被分類(lèi)為Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)，Ⅰ級(jí)腦膜瘤是典型或良性的腫瘤，約占所有腦膜瘤的88～94%。非典型腦膜瘤屬于Ⅱ級(jí)，約占腦膜瘤的5%～8%，切除后復(fù)發(fā)率為29%～52%，而且Ⅱ級(jí)表現(xiàn)為惡性進(jìn)展趨勢(shì)，腫瘤細(xì)胞遷移和周?chē)M織浸潤(rùn)明顯增加。間變性變體(Ⅲ級(jí))極為罕見(jiàn)，占所有腦膜瘤的1%～3%，中位總生存期僅為1.5年。腦膜瘤的標(biāo)準(zhǔn)治療方法是手術(shù)切除，但復(fù)發(fā)的可能性極大。由于逆作用和多重耐藥性，化學(xué)治療藥物的效率也會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而降低[2]。研究表明，腦膜瘤復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)與腫瘤的分子特征密切相關(guān)，確定新的靶標(biāo)以促進(jìn)早期診斷對(duì)提高腦膜瘤患者至關(guān)重要。脆性X相關(guān)蛋白1(fragile X-related protein 1，F(xiàn)XR1)是一種RNA結(jié)合蛋白，為脆性 X智力遲鈍相關(guān)基因家族中的一員，主要分布于神經(jīng)系統(tǒng)及肌肉組織[3]。FXR1作為RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體(RISC)的成員，F(xiàn)XR1蛋白能夠與RNA結(jié)合，因此與基因翻譯和沉默密切相關(guān)[4]。FXR1對(duì)正常的肌發(fā)生和肌肉發(fā)育至關(guān)重要，最近研究表明，F(xiàn)XR1表達(dá)與幾種人類(lèi)癌癥包括乳腺癌、卵巢癌、頭頸癌和非小細(xì)胞肺癌的不良預(yù)后相關(guān)[5,6]。然而FXR1對(duì)于腦膜瘤的影響研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究觀察FXR1在腦膜瘤組織中的表達(dá)情況及對(duì)腦膜瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和血管生成的影響，旨在為腦膜瘤的靶向治療方案的提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1臨床資料：選取我院自2016年6月至2019年10月收治腦膜瘤患者的組織標(biāo)本為研究對(duì)象，包括腫瘤組織標(biāo)本及對(duì)應(yīng)瘤旁組織標(biāo)本各24例。所有患者均行Simpson分級(jí)Ⅰ或Ⅱ級(jí)腫瘤切除術(shù)，完整切除腫塊和累及的硬腦膜組織，再切除周?chē)鷶U(kuò)大約2cm硬腦膜及附著的正常腦膜組織，經(jīng)顱腦核磁共振成像與術(shù)后病理診斷均證實(shí)為腦膜瘤?；颊咧杏?3例男性，11例女性，年齡在42～69歲，平均年齡(52.31±4.79)歲。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)分級(jí)，良性腦膜瘤(Ⅰ級(jí))18例，非典型性腦膜瘤(Ⅱ級(jí))6例。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者術(shù)前未進(jìn)行任何治療，均具有完整的病例資料，經(jīng)CT證實(shí)存在顱內(nèi)血腫，既往無(wú)顱內(nèi)腫瘤病史。患者組織標(biāo)本的使用取得患者及家屬的知悉并簽署知情同意書(shū)。

1.2主要試驗(yàn)材料與試劑:人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)購(gòu)自上海中科院典型培養(yǎng)物保藏中心，F(xiàn)XR1免疫組織化學(xué)染色試劑購(gòu)自北京天根生化公司，MEM培養(yǎng)基、胎牛血清(FBS)購(gòu)自美國(guó)HyClone公司，Lipofectamine 2000試劑盒購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司，RNAiso Plus試劑、反轉(zhuǎn)錄試劑盒和實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒購(gòu)自日本TaKaRa公司，CCK-8試劑盒購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，結(jié)晶紫、Matrigel基質(zhì)膠及BCA試劑盒購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)公司，ECL發(fā)光液與聚偏二氟乙烯(PVDF)膜購(gòu)自武漢博士德生物公司，抗體FXR1、VEGF、EDN-1與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記山羊抗兔IgG購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司，抗體CD31、CD34購(gòu)自美國(guó)eBioscience公司。pcDNA3.1-FXR1質(zhì)粒載體和引物均有上海生工生物公司設(shè)計(jì)構(gòu)建與合成。

1.3方 法

1.3.1免疫組織化學(xué)染色:將腦膜瘤組織固定于4%多聚甲醛，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，常規(guī)石蠟包埋，切成厚度為4μm連續(xù)切片。脫蠟脫水后，加入枸櫞酸緩沖液煮沸10min進(jìn)行抗原修復(fù)，冷卻后采用PBS清洗，置于3%H2O2溶液消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，PBS清洗，滴加山羊血清封閉液，在室溫下封閉30min，滴加稀釋的一抗工作液(1∶200)，4℃下孵育過(guò)夜。次日，緩沖液清洗后，滴加稀釋的HRP標(biāo)記的二抗(1∶1000)，室溫孵育30min，PBS再次沖洗后，滴加二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，蘇木素復(fù)染15s，反復(fù)沖洗，脫水透明后，中性樹(shù)膠封片，干燥后電鏡下觀察并拍照。FXR1的陽(yáng)性表達(dá)以棕黃色顆粒為主，電鏡下隨機(jī)選擇5個(gè)視野，以陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞數(shù)及染色強(qiáng)度進(jìn)行綜合評(píng)定。陽(yáng)性細(xì)胞評(píng)分:陽(yáng)性細(xì)胞比例<5%記0分，5%～25%記1分，26%～50%記2分，51%～75%記3分，>75%記4分。染色強(qiáng)度評(píng)分：未著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩者相加分?jǐn)?shù)小于2分則判定為陰性，大于等于2分判定為陽(yáng)性。

1.3.2腦膜瘤細(xì)胞分離、培養(yǎng):在無(wú)菌條件下將腦膜瘤組織剪碎，加入含1g/L膠原酶的MEM培養(yǎng)液，在5% CO2、37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4h，然后采用300μm篩網(wǎng)過(guò)濾，收集濾液，離心機(jī)中以2000r/min離心20min，在沉淀中加入含100mL/L FBS的 MEM培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞基本長(zhǎng)滿(mǎn)瓶底壁為單層時(shí)，融合度為80%左右時(shí)，使用0.25%胰蛋白酶消化離心。

1.3.3細(xì)胞轉(zhuǎn)染:取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的腦膜瘤細(xì)胞，調(diào)整密度為1×105個(gè)/孔接種于6孔板，待細(xì)胞生長(zhǎng)密度約為80%時(shí)，分為三組，包括空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組(pcDNA3.1-NC組)和過(guò)表達(dá)FXR1組(pcDNA3.1-FXR1組)，按照Lipofectamine 2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法進(jìn)行轉(zhuǎn)染，具體按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，分別將構(gòu)建好的pcDNA3.1-FXR1質(zhì)粒載體與pcDNA3.1空質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染至pcDNA3.1-FXR1組及pcDNA3.1-NC組的腦膜瘤細(xì)胞中，于37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h 后更換新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48h后收集細(xì)胞，供后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用，設(shè)置空白對(duì)照組為正常培養(yǎng)、不進(jìn)行轉(zhuǎn)染的腦膜瘤細(xì)胞。

1.3.4實(shí)時(shí)熒光定量PCR:根據(jù)RNAiso Plus試劑說(shuō)明提取各組腦膜瘤細(xì)胞的總RNA，采用NanoDrop2000 紫外分光光度計(jì)檢測(cè) RNA 的純度及濃度。逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，以cDNA為模板，參照SYBR?Premix Ex TaqTM Ⅱ試劑盒說(shuō)明進(jìn)行qRT-PCR實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)細(xì)胞中FXR1基因mRNA的表達(dá)情況，以GAPDH作為內(nèi)參。擴(kuò)增條件為：95℃ 5 min，1個(gè)循環(huán)；95℃ 30 s、60℃ 30 s、58℃ 30 s，40個(gè)循環(huán)。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3 次。結(jié)果采用2-ΔΔCt法計(jì)算各基因的表達(dá)水平。采用Primer Premier5軟件設(shè)計(jì)基因引物序列，引物序列：FXR1上游引物5’-TCGATCTTTACCCATCCTTCCT-3’，下游引物5’- ATCGATATGGAGGACATGACGGTGG-3’；GAPDH上游引物5’-GGTGAAGGTCGGTGTGAAC-3’，下游引物5’- AGATGGTGATGGGCTGCCC-3’。

1.3.5Western blot:在各處理組腦膜瘤細(xì)胞中加入預(yù)冷的RIPA 裂解液進(jìn)行裂解，離心取上清液，BCA試劑盒說(shuō)明測(cè)定蛋白濃度。取25 μg總蛋白上樣，通過(guò)10%SDS-PAGE分離，并將分離蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上。TBST 洗滌3 次，5%山羊血清進(jìn)行封閉2h，洗滌并加入稀釋的一抗FXR1(1∶1000)、VEGF(1∶1000)、EDN-1(1∶1000)，在4度C下孵育過(guò)夜。次日，TBST洗膜3次，加入稀釋的HRP標(biāo)記山羊抗兔IgG(1∶5000)為二抗，室溫下孵育2h。再次TBST洗滌3次，滴加ECL發(fā)光液進(jìn)行顯影，采用Image J圖像分析軟件統(tǒng)計(jì)各條帶灰度值，以GAPDH為內(nèi)參計(jì)算各蛋白相對(duì)表達(dá)量。

1.3.6CCK-8檢測(cè):將腦膜瘤細(xì)胞以1×104個(gè)/孔接種于96孔板，置于37℃、5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中過(guò)夜培養(yǎng)，按照1.3.3進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染，每孔設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，分別于轉(zhuǎn)染后24h、48h、72h和96h，每孔加入10μL CCK-8試劑液，混合均勻后，繼續(xù)培養(yǎng)4h，采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀在450nm處檢測(cè)各孔細(xì)胞的光密度(OD)值。

1.3.7細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn):收集轉(zhuǎn)染后的腦膜瘤細(xì)胞，稀釋并以4×103個(gè)接種到培養(yǎng)皿中，接種后輕晃使細(xì)胞均勻分布，14d，出現(xiàn)細(xì)胞集落并用PBS洗滌，加4%多聚甲醛固定菌落，用0.5%結(jié)晶紫染色15min，使用流水沖洗，自然條件下干燥，在光鏡下觀察并計(jì)數(shù)細(xì)胞集落數(shù)目(將≥50個(gè)細(xì)胞克隆團(tuán)為1個(gè)集落)。

1.3.8流式細(xì)胞術(shù):收集轉(zhuǎn)染后的腦膜瘤細(xì)胞，使用0.25%胰蛋白酶、0.02%EDTA處理細(xì)胞，以4,000r/min離心5min，采用PBS重懸細(xì)胞，滴加4%多聚甲醛，37℃處理10min，置于冰上處理1min。然后加入90%甲醛，繼續(xù)在冰上靜置30min。PBS清洗細(xì)胞，離心并重懸細(xì)胞，室溫封閉10min，加入抗體CD34與CD31，室溫孵育30min，PBS清洗細(xì)胞，離心、重懸，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，F(xiàn)lowJo軟件進(jìn)行分析。

1.3.9體外小管生成試驗(yàn):基質(zhì)膠置于并上融化，取100μL緩沖液與900μL BD Matrigel基質(zhì)膠混合均勻進(jìn)行稀釋?zhuān)瑢?50μL稀釋的基質(zhì)膠加入24孔板中，置于37℃孵育1h，待膠凝固。對(duì)HUVECs細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，將轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞濃度調(diào)整為5×105個(gè)/mL，取1mL接種于預(yù)先鋪好的基質(zhì)膠的孔中，繼續(xù)培養(yǎng)12h，在倒置顯微鏡下觀察小管形成情況并拍照。

2 結(jié) 果

2.1腦膜瘤組織及瘤旁組織中FXR1表達(dá)比較:免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)腦膜瘤組織與瘤旁組織中FXR1表達(dá)，結(jié)果如圖1所示。經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，腦膜瘤組織中FXR1陽(yáng)性表達(dá)大于瘤旁組織標(biāo)本，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。腦膜瘤組織中FXR1陽(yáng)性表達(dá)為19例(79.17%)，其中Ⅰ級(jí)為13例(86.67%)，Ⅱ級(jí)為6例(100%)，而瘤旁組織中FXR1陽(yáng)性表達(dá)為3例(12.5%)。

圖1 免疫組化染色檢測(cè)FXR1表達(dá)(×100)

2.2轉(zhuǎn)染后腦膜瘤細(xì)胞FXR1表達(dá)檢測(cè):qRT-PCR和Western Blot檢測(cè)結(jié)果如表1與圖2所示，與空白對(duì)照組和pcDNA3.1-NC組比較，pcDNA3.1-FXR1組細(xì)胞中FXR1 mRNA相對(duì)表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均顯著升高(P<0.05)，表明細(xì)胞轉(zhuǎn)染成功。

表1 各組腦膜瘤細(xì)胞中FXR1 mRNA相對(duì)表達(dá)量和蛋白表達(dá)量比較

圖2 Western Blot檢測(cè)腦膜瘤細(xì)胞中FXR1蛋白表達(dá)

2.3過(guò)表達(dá)FXR1促進(jìn)腦膜瘤細(xì)胞增殖活性:CCK-8法檢測(cè)結(jié)果如圖3所示，轉(zhuǎn)染48、72、96h后，與空白對(duì)照組和pcDNA3.1-NC組比較，pcDNA3.1-FXR1組腦膜瘤細(xì)胞的增殖活性顯著升高(P<0.05)，而陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)的增殖活性之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

圖3 CCK-8法檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)腦膜瘤細(xì)胞增殖活性

2.4過(guò)表達(dá)FXR1促進(jìn)腦膜瘤細(xì)胞克隆形成:細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖4，與空白對(duì)照組和pcDNA3.1-NC組比較，pcDNA3.1-FXR1組腦膜瘤細(xì)胞克隆形成數(shù)目顯著增加(P<0.05)；而與空白對(duì)照組比較，pcDNA3.1-NC組細(xì)胞克隆數(shù)目無(wú)顯著變化(P>0.05)。

圖4 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腦膜瘤細(xì)胞克隆形成能力

2.5過(guò)表達(dá)FXR1促進(jìn)VEGF、EDN-1蛋白表達(dá):Western Blot檢測(cè)結(jié)果如圖5，與空白對(duì)照組和pcDNA3.1-NC組比較，pcDNA3.1-FXR1組腦膜瘤細(xì)胞中VEGF、EDN-1蛋白表達(dá)水平顯著增加(P<0.05)；空白對(duì)照組與pcDNA3.1-NC組細(xì)胞中VEGF、EDN-1蛋白表達(dá)水平間無(wú)顯著變化(P>0.05)。

圖5 Western Blot檢測(cè)腦膜瘤細(xì)胞中VEGF、EDN-1蛋白表達(dá)

2.6過(guò)表達(dá)FXR1增加CD34+/CD31+陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá):流式細(xì)胞術(shù)篩選結(jié)果如圖6所示，空白對(duì)照組和pcDNA3.1-NC組細(xì)胞組間CD34+/CD31+陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；而與空白對(duì)照組和pcDNA3.1-NC組比較，pcDNA3.1-FXR1組CD34+/CD31+陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)顯著增多(P<0.05)。

圖6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD34+/CD31+陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)

2.7過(guò)表達(dá)FXR1促進(jìn)HUVECs體外小管生成:體外小管生成試驗(yàn)結(jié)果如圖7所示，空白對(duì)照組與pcDNA3.1-NC組的管腔形成數(shù)目較少；與空白對(duì)照組和pcDNA3.1-NC組比較，pcDNA3.1-FXR1組的管腔形成數(shù)目明顯增多，管腔較大。

圖7 小管生成試驗(yàn)檢測(cè)各組HUVECs細(xì)胞的小管生成

3 討 論

近年來(lái)，由于基因組和表觀遺傳學(xué)在腫瘤研究分析中的應(yīng)用，為腦膜瘤的分子診斷和治療提供了更為全面的信息[7]。但是，仍需準(zhǔn)確尋找腦膜瘤相關(guān)特異性基因與診治及預(yù)后之間的相關(guān)性并進(jìn)行更詳細(xì)的研究，以建立更加全面可靠的綜合診治策略。目前，關(guān)于腦膜瘤的腫瘤標(biāo)志物的報(bào)道也不斷增加，從分子層面對(duì)驅(qū)動(dòng)腦膜瘤發(fā)生和發(fā)展的因素進(jìn)行深入探討對(duì)腫瘤的診治意義重大。FXR1作為基序結(jié)合RNA并在真核生物中發(fā)揮功能，對(duì)于RNA運(yùn)輸、翻譯及穩(wěn)定性具有一定的作用[4]。FXR1包含兩個(gè)區(qū)域，富含精氨酸和甘氨酸，能夠形成RGG結(jié)構(gòu)域且可以識(shí)別G-quartet結(jié)構(gòu)域并與之發(fā)生特異性結(jié)合，G-quartet是DNA和RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)，在四個(gè)配位的鳥(niǎo)嘌呤之間形成。人體中FXR1基因編碼一種蛋白質(zhì)，并以至少7種亞型表達(dá)[8]。然而，F(xiàn)XR1在人類(lèi)疾病中的作用研究相對(duì)較少，以往研究表明，F(xiàn)XR1在兒童腎癌中最常見(jiàn)的威爾姆斯腫瘤中表達(dá)上調(diào)[9]，抑制FXR1基因的表達(dá)可抑制卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及細(xì)胞增殖[10]，這些結(jié)果提示FXR1的調(diào)節(jié)功能可能與細(xì)胞癌變有關(guān)。本研究通過(guò)檢測(cè)人腦膜瘤組織及癌旁組織中FXR1表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)XR1在人腦膜瘤組織中也呈高表達(dá)，與之前在其他腫瘤疾病中的檢測(cè)結(jié)果一致。

腦膜瘤是高度血管性腫瘤疾病，因此，探究腦膜瘤中抑制血管生成可預(yù)防癌癥向惡性轉(zhuǎn)化。細(xì)胞因子血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)作為一種血管通透性因子，通過(guò)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移、增殖和管形成來(lái)充當(dāng)血管新生的正調(diào)節(jié)劑。VEGF在腦膜瘤中上調(diào)，其作為促血管生成因子來(lái)發(fā)揮作用[11]。內(nèi)皮素(EDN-1)由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，參與許多生理病理過(guò)程的調(diào)節(jié)，例如心血管發(fā)育、肺動(dòng)脈高壓以及神經(jīng)細(xì)胞增殖、分化和遷移等[12]。本研究通過(guò)檢測(cè)過(guò)表達(dá)FXR1腦膜瘤細(xì)胞中VEGF和EDN-1的蛋白表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，該細(xì)胞中VEGF和EDN-1的蛋白表達(dá)水平均明顯增加。腫瘤血管生成主要是根據(jù)微血管密度(MVD)進(jìn)行評(píng)估的，也可以使用各種內(nèi)皮標(biāo)記物如CD34和CD31進(jìn)行測(cè)量，通過(guò)進(jìn)一步研究FXR1對(duì)于腦膜瘤細(xì)胞血管生成的影響發(fā)現(xiàn)，過(guò)表達(dá)FXR1可使腦膜瘤中CD34和CD31標(biāo)記的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量增多，此外，顯微鏡下也觀察到小管形成明顯變多，這些結(jié)果意味著FXR1可能會(huì)促進(jìn)腦膜瘤細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化，促進(jìn)了腦膜瘤細(xì)胞的血管形成能力，加快腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程。

惡性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移對(duì)于腫瘤的發(fā)生發(fā)展以及進(jìn)一步惡化至關(guān)重要。腦膜瘤生長(zhǎng)迅速，會(huì)頻繁復(fù)發(fā)或發(fā)生腦部侵襲，使其治療更具挑戰(zhàn)性。在這些情況下，采取有效措施抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移是腦膜瘤的治療的關(guān)鍵一步。本研究結(jié)果顯示，過(guò)表達(dá)FXR1的腦膜瘤細(xì)胞的細(xì)胞增殖活性升高，同時(shí)細(xì)胞的克隆形成數(shù)目也明顯增加。由此推測(cè)，F(xiàn)XR1的表達(dá)增加促進(jìn)了腦膜瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，起到了促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用。

綜上所述，本研究揭示了FXR1在腦膜瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，并從微觀的角度探討了FXR1對(duì)腦膜瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和血管生成的影響，表明過(guò)表達(dá)FXR1能夠促進(jìn)腦膜瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和血管生成，但此過(guò)程涉及的具體的作用機(jī)制以及分子表達(dá)模式關(guān)聯(lián)性有待進(jìn)一步深入研究。