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      微生物實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      2021-06-24 14:15:52衛(wèi)芳王艷婷趙靜雪張二衛(wèi)
      食品安全導(dǎo)刊·中旬刊 2021年5期
      關(guān)鍵詞:潔凈度滅菌器菌種

      衛(wèi)芳 王艷婷 趙靜雪 張二衛(wèi)

      隨著科技的不斷發(fā)展和人們對(duì)高質(zhì)量生活水平的需求增長(zhǎng),許多新興的產(chǎn)業(yè)和物種不斷產(chǎn)生,在滿足條件的同時(shí)一個(gè)隱形的殺手——生物安全問(wèn)題日益凸顯。因此,微生物實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)控制具有相當(dāng)重要的意義。

      為確保參與微生物實(shí)驗(yàn)人員身體健康,環(huán)境不受污染,能夠正常開(kāi)展微生物實(shí)驗(yàn),確保出具的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、有效,需要對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室所有實(shí)驗(yàn)活動(dòng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別和分析評(píng)估,并提出相應(yīng)的控制措施[1]。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立并維持風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)控制程序,以持續(xù)進(jìn)行危險(xiǎn)識(shí)別、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和實(shí)施必要的控制措施。

      生物因子危害及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      生物因子危害

      實(shí)驗(yàn)室使用的菌種基本包括大腸埃希氏菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、單核增生李斯特氏菌、銅綠假單胞菌、副溶血性弧菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、糞鏈球菌等,存在一定的風(fēng)險(xiǎn),包括菌種保存不當(dāng)、未按照規(guī)定要求進(jìn)行菌株傳代、操作時(shí)菌液濺灑、廢棄物處理不當(dāng)?shù)取?/p>

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      菌種保存不當(dāng):菌種保存應(yīng)設(shè)置生物安全員專人負(fù)責(zé)保管,保存菌種的低溫冰箱設(shè)置雙人雙鎖。每次拿放菌種需要做相應(yīng)的登記,由實(shí)驗(yàn)室人員和生物安全員雙方簽字確認(rèn)。

      菌株傳代:菌株傳代應(yīng)有完善的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)和菌株傳代記錄,標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株應(yīng)在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)轉(zhuǎn)種傳代,并做相應(yīng)的確認(rèn)試驗(yàn),記錄相關(guān)原始數(shù)據(jù)存檔保存。

      菌液濺灑:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備防菌液濺灑措施,出現(xiàn)菌懸液濺灑時(shí)用消毒液進(jìn)行處理,防止對(duì)人員和環(huán)境造成傷害和污染。

      廢棄物處理不當(dāng):對(duì)于實(shí)驗(yàn)室用過(guò)的帶菌的、污染過(guò)的培養(yǎng)基、試劑條、槍頭、接種環(huán)、玻璃器皿等廢棄物要采用相應(yīng)的消毒劑滅菌或者121℃,30min以上高溫高壓滅菌,廢棄物的處理應(yīng)有相應(yīng)的制度和廢棄物處置記錄。

      人員風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      人員風(fēng)險(xiǎn) 由于微生物檢測(cè)人員專業(yè)知識(shí)欠缺,操作不規(guī)范導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不準(zhǔn)確,甚至生物安全事故的發(fā)生。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 參與微生物檢測(cè)的人員應(yīng)具備微生物相關(guān)專業(yè)知識(shí),學(xué)歷、工作經(jīng)驗(yàn)應(yīng)符合檢驗(yàn)檢測(cè)要求,實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)熟悉生物檢測(cè)安全操作知識(shí)和消毒滅菌知識(shí)。

      生物安全柜風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      生物安全柜[2]風(fēng)險(xiǎn) 生物安全柜未按規(guī)定要求校準(zhǔn),參數(shù)不達(dá)標(biāo);未按照設(shè)備操作規(guī)程和使用說(shuō)明進(jìn)行操作維護(hù)可能使生物安全柜喪失功能,無(wú)法保證生物安全。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 應(yīng)設(shè)置專門(mén)的設(shè)備管理員負(fù)責(zé)設(shè)備的定期校準(zhǔn)和維護(hù);制作生物安全柜操作規(guī)程,由專業(yè)老師培訓(xùn)指導(dǎo),考核通過(guò)方可上崗作業(yè)。

      高壓滅菌器風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      高壓滅菌器風(fēng)險(xiǎn) 高壓滅菌器未按規(guī)定要求校準(zhǔn),參數(shù)不達(dá)標(biāo),未按照設(shè)備操作規(guī)程和使用說(shuō)明進(jìn)行操作、維護(hù),可能使滅菌效果降低或喪失。未定期做高壓滅菌器效果鑒定可能滅菌效果不達(dá)標(biāo)導(dǎo)致滅菌不徹底,易引起空白長(zhǎng)菌,樣品污染導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。高壓滅菌器內(nèi)溫度過(guò)高,容易造成蒸汽燙傷。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 設(shè)置專門(mén)的設(shè)備管理員負(fù)責(zé)設(shè)備的定期校準(zhǔn)和維護(hù)。參加高壓滅菌器的專業(yè)培訓(xùn),持證上崗。

      建立高壓滅菌器效果鑒定作業(yè)程序[3],包括監(jiān)測(cè)方法和監(jiān)測(cè)頻率。并記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。

      化學(xué)法監(jiān)測(cè)是指將滅菌指示條放入待滅菌的物品中,經(jīng)一個(gè)滅菌周期后,顏色和性狀符合規(guī)定要求則為合格,反之則不合格。

      培養(yǎng)后指示管不變色(呈紫色),表示滅菌通過(guò)。培養(yǎng)后指示管變色(呈黃色),表示滅菌不通過(guò)。同時(shí)培養(yǎng)的對(duì)照管應(yīng)為陽(yáng)性(呈黃色)。

      待高壓滅菌器內(nèi)壓力降至0、溫度降至規(guī)定要求再拿取物品,可帶上防高溫手袋避免燙傷。

      電熱鼓風(fēng)干燥箱風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      電熱鼓風(fēng)干燥箱風(fēng)險(xiǎn) 滅菌時(shí)間不夠,滅菌不徹底可能導(dǎo)致培養(yǎng)皿污染空白長(zhǎng)菌。高溫設(shè)備使用不當(dāng)可能導(dǎo)致燒傷、燙傷等危害。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 制作電熱鼓風(fēng)干燥箱作業(yè)指導(dǎo)書(shū),包含規(guī)范的操作流程和滅菌時(shí)間,避免安全事故的發(fā)生。

      紫外燈風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      紫外燈風(fēng)險(xiǎn) 紫外燈未定期更換,超過(guò)使用壽命,可能導(dǎo)致滅菌效果不達(dá)標(biāo)。操作時(shí)未關(guān)閉紫外燈,長(zhǎng)期紫外燈光照可能導(dǎo)致操作人員皮膚受損。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 完善紫外燈使用記錄,定期更換,加強(qiáng)人員監(jiān)督力度。制作安全使用警示標(biāo)識(shí)貼在紫外燈開(kāi)關(guān)明顯位置,提醒操作人員,操作前關(guān)閉紫外燈。

      生物安全實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      生物安全實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn) 布局不合理,無(wú)菌室、陽(yáng)性對(duì)照室、培養(yǎng)間未獨(dú)立開(kāi)可能造成交叉污染。未安裝壓差表,可能無(wú)法保證生物安全實(shí)驗(yàn)室潔凈度。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 生物安全實(shí)驗(yàn)室[4] 應(yīng)設(shè)置無(wú)菌室、陽(yáng)性對(duì)照室、培養(yǎng)間等功能間,能有效降低感染率。生物安全實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝壓差表,通過(guò)壓力差控制氣流方向,保證生物安全實(shí)驗(yàn)室潔凈度。

      洗眼器風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      洗眼器風(fēng)險(xiǎn) 未安裝洗眼器,當(dāng)發(fā)生有害物質(zhì)噴濺眼睛或者面部時(shí)不能起到有效的保護(hù)措施。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 在實(shí)驗(yàn)室的適當(dāng)位置安裝洗眼器,當(dāng)發(fā)生有害物質(zhì)噴濺眼睛或者面部時(shí)第一時(shí)間提供水沖洗,降低傷害。

      培養(yǎng)基使用風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      培養(yǎng)基使用風(fēng)險(xiǎn) 培養(yǎng)基未按規(guī)定進(jìn)行驗(yàn)收,可能原料不合格導(dǎo)致菌種生長(zhǎng)異常影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;培養(yǎng)基未按要求的環(huán)境條件儲(chǔ)存,造成培養(yǎng)基受潮結(jié)塊可能影響產(chǎn)品質(zhì)量;培養(yǎng)基未按標(biāo)準(zhǔn)要求滅菌,導(dǎo)致培養(yǎng)基滅菌不徹底或者營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)受損影響菌種生長(zhǎng)。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 制作培養(yǎng)基驗(yàn)收[5]記錄,包括外觀驗(yàn)收、內(nèi)容物檢查、產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)驗(yàn)收(包含所用的標(biāo)準(zhǔn)菌株的信息);培養(yǎng)基、試劑應(yīng)按照相應(yīng)的儲(chǔ)存環(huán)境保存,并在儲(chǔ)存柜里放置溫濕度表,每天監(jiān)測(cè)溫濕度變化,保證儲(chǔ)存環(huán)境符合培養(yǎng)基、試劑的儲(chǔ)存要求;培養(yǎng)基應(yīng)按照規(guī)定的壓力、溫度、時(shí)間要求滅菌。

      玻璃器皿、酒精燈風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      玻璃器皿、酒精燈風(fēng)險(xiǎn) 玻璃器皿破損,可能造成操作員手被劃傷;有裂紋的玻璃器皿高溫加熱可能炸裂造成安全事故。未規(guī)范使用酒精燈導(dǎo)致酒精濺灑遇明火燃燒造成火災(zāi)。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 避免使用有缺口的玻璃儀器、操作前檢查玻璃器皿有無(wú)破損裂紋。操作時(shí)注意安全,避免劃傷。加熱玻璃器皿時(shí)拿取應(yīng)戴上隔熱手套。酒精燈的使用應(yīng)注意酒精濺灑,一旦濺灑燃燒可用濕布撲滅。燈內(nèi)酒精不易裝得太滿,避免外溢。

      無(wú)菌室潔凈度風(fēng)險(xiǎn)及風(fēng)險(xiǎn)控制措施

      無(wú)菌室潔凈度風(fēng)險(xiǎn) 未定期做無(wú)菌室潔凈度驗(yàn)證,潔凈度不達(dá)標(biāo),導(dǎo)致樣品污染。

      風(fēng)險(xiǎn)控制措施 制作無(wú)菌室潔凈度驗(yàn)證作業(yè)指導(dǎo)書(shū),包括驗(yàn)證的方法及頻次并做好相應(yīng)的記錄,定期做無(wú)菌室潔凈度驗(yàn)證[6] ,如大于所設(shè)定的風(fēng)險(xiǎn)值則應(yīng)分析原因,并采取適當(dāng)措施。

      結(jié)論

      生物安全問(wèn)題已經(jīng)受到普遍的關(guān)注,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,越來(lái)越多的科學(xué)研究、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、企業(yè)生產(chǎn)等行業(yè)涉及到生物安全問(wèn)題。微生物實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)控制是一個(gè)持續(xù)進(jìn)行的過(guò)程,以上分析的風(fēng)險(xiǎn)因素可能存在評(píng)估不全面、不到位、防控措施待改進(jìn)等缺點(diǎn),我們將在以后的評(píng)估中不斷完善改進(jìn)。

      參考文獻(xiàn)

      [1]GB 19489-2008 實(shí)驗(yàn)室 生物安全通用要求[S]. 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)發(fā)布,2008.

      [2]YY 0569-2011 Ⅱ級(jí)生物安全柜[S]. 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布,2011.

      [3]CNAS-CL01-A001檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明[S]. 中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)發(fā)布,2018.

      [4] GB 50346-2011 生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范[S].北京:中國(guó)建筑工業(yè)出版社,2011.

      [5]GB 4789.28-2013 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求[S].中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布,2013.

      [6]GB/T 27405-2008 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測(cè)[S]. 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)發(fā)布,2008.

      衛(wèi)芳 王艷婷 趙靜雪 張二衛(wèi)

      河南中方質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)有限公司

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