AR/ER在ER陽性乳腺癌中的臨床研究

韓佩，常慶龍，崔萍萍，王會華

(鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450052)

0 引言

乳腺癌是全球女性中最常見的腫瘤，約占全球癌癥發(fā)病率30%[1]，作為一種激素依賴性腫瘤，既往研究證實長期暴露于性激素是其高危因素之一。AR是屬于核受體超級家族的類固醇激素活性轉(zhuǎn)錄因子成員之一，這一組也包括分子構(gòu)成及內(nèi)分泌治療相關(guān)機制已基本明確的ER和PR，但AR與乳腺癌的相關(guān)性仍研究甚少。在已知的研究中，AR在乳腺癌中表達率高達70%-90%，高于ER和PR的表達率，在ER陽性乳腺癌中，AR陽性與更好的預(yù)后相關(guān)，提示AR可能是反映預(yù)后及部分乳腺癌潛在治療靶點[2-3]，但與此同時，AR表達也增加了對抗雌激素治療藥物的耐藥性[3]，這與Basile D等發(fā)現(xiàn)的AR和ER在乳腺癌細胞系中存在著串?dāng)_一致[4]，近年來新的研究發(fā)現(xiàn)AR/ER≥2的乳腺癌患者預(yù)后較差[5]，提示該比值作為新的預(yù)測指標的可能性。但該結(jié)論是否適用于所有乳腺癌患者尚無定論。為了探究AR/ER比值在ER陽性乳腺癌中的意義，本研究利用回顧性調(diào)查，分析AR/ER比值與ER陽性乳腺癌患者病理參數(shù)的相關(guān)性，探討該比值在ER陽性乳腺癌中的表達情況及其臨床應(yīng)用價值。

1 對象與方法

1.1 標本來源

選取2017年01月01日至2019年10月1日鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院(河南省婦幼保健院)經(jīng)病理確診且ER陽性的160例非特殊浸潤癌研究對象(如圖1)。納入標準：①經(jīng)病理確診的女性乳腺癌患者；②腫塊大小均為T1及T2的乳腺癌患者；③患者不合并高血壓、糖尿病等基礎(chǔ)疾??；④病理資料完整；⑤未接受新輔助治療。排除標準：①男性乳腺癌；②乳腺原位癌及特殊類型乳腺癌；③合并心腦血管等基礎(chǔ)疾病及其他類型惡性腫瘤；④病理資料不完整；⑤初治發(fā)現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移及行新輔助治療后的患者。所有患者既往免疫組化染色切片重新經(jīng)由兩位病理醫(yī)師閱片，根據(jù)2015年《ASCO/CAP乳腺激素受體IHC檢測指南》的判定標準判讀為ER陽性表達。

如表1所示，共有ER陽性且AR陽性患者130名，這些患者年齡26歲-86歲，中位年齡為48.5歲；組織學(xué)分級Ⅰ級17例，Ⅱ級102例，Ⅲ級11例；病理組織中有癌栓侵犯者20例，未見癌栓侵犯者110例；腫瘤最大徑≤1cm者8例，最大徑在1.1cm-2.0cm者45例，最大徑在2.1cm-3.0cm者47例，最大徑在3.1cm-4.0cm者22例，最大徑在4.1cm-5.0cm者8例；PR陰性者27例，陽性者103例；PR值＜20%者39例，PR值≥20%者91例；Ki-67陽性者83例，Ki-67陰性者47例；HER-2陽性43例，HER-2陰性87例；有淋巴結(jié)受累45例，無淋巴結(jié)受累85例。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)染色

對所有非特殊性浸潤癌標本進行免疫組化SP法行ER、PR、AR、Ki-67及HER-2免疫組化染色，試劑及試劑盒均購自上海羅氏公司，已知陽性切片作陽性對照，PBS緩沖液代替一抗作陰性對照。

1.2.2 陽性判定標準

ER、PR、AR以細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞，當(dāng)陽性腫瘤細胞數(shù)＞1%時判為陽性。

Ki-67的免疫組化檢測標準：染色細胞核呈棕黃色為陽性細胞，以癌細胞核著色陽性細胞≥20%為陽性。

HER-2 以半定量分級標準判定：0：無著色或≤10%的浸潤癌細胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細胞膜染色；1+：＞10%的浸潤癌細胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細胞膜染色；2+：有2種情況，第一種為＞10%的浸潤癌細胞呈現(xiàn)弱-中等強度的完整細胞膜染色，第二種為≤10%的浸潤癌細胞呈現(xiàn)強而完整的細胞膜染色；3+：＞10%的浸潤癌細胞呈現(xiàn)強、完整且均勻的細胞膜染色。HER-2表達為0、1+時判定為陰性，當(dāng)HER-2表達為3+時判定為陽性，對于HER-2(2+)的病例需進一步做原位雜交免疫熒光FISH檢測明確有無擴增，無擴增判定為陰性，有擴增判定為陽性。部分免疫組化染色情況如圖2所示。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0進行統(tǒng)計分析，臨床資料的描述采用百分比或中位數(shù)。應(yīng)用χ2檢驗(或Fisher精確檢驗)截斷值上下與各組臨床病理參數(shù)間相關(guān)性，檢驗水準α=0.05，取雙側(cè)檢驗。

2 結(jié)果

2.1 AR表達及AR/ER截斷值與各臨床素相關(guān)性分析

在160例ER陽性患者中，AR陽性表達率為81.25%(130/160)。如表1所示AR/ER比值與組織學(xué)分級、癌栓侵犯、腫瘤大小、PR狀態(tài)、HER-2狀態(tài)、Ki-67狀態(tài)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目及月經(jīng)狀態(tài)等臨床病理因素相關(guān)(P值均＜0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，而與年齡無關(guān)(P＞0.05)。

3 討論

越來越多的研究表明，AR在乳腺癌中廣泛表達，一項大型研究發(fā)現(xiàn)82%的腫瘤患者中呈AR陽性(≥1%)，AR陽性癌癥患者更有可能出現(xiàn)較小的、低分級的腫瘤[6]。本研究中AR陽性率為81.25%(130/160)，與該大型研究結(jié)果接近。

2014年有學(xué)者對AR進行研究，并引入AR/ER比值概念得到結(jié)論：AR/ER≥2是乳腺癌的無病生存和疾病特異性生存的獨立預(yù)測因子[7]；2015年指出AR和AR/ER比值在鑒別乳腺導(dǎo)管原位癌可能復(fù)發(fā)或進展為浸潤性乳腺癌方面起著重要作用[8]，且在乳腺原位癌手術(shù)患者和手術(shù)加放療患者中，AR/ER比值預(yù)測其復(fù)發(fā)或進展為浸潤性癌方面總體準確性分別為92%和80%[9]；2018年有研究選取了ER陽性且HER-2陰性乳腺癌進行研究后指出：與AR/ER＜2的病例相比，AR/ER≥2的腫瘤表現(xiàn)出更頻繁的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)、更大的體積、更高的組織學(xué)分級和更低的PR水平[5]。以上研究均表明了AR/ER比值在預(yù)后方面的重要意義。本研究得出的實驗結(jié)果支持上述結(jié)論。

之前有研究提出ER陰性的乳腺癌中AR表達與HER-2表達呈正相關(guān)，ER陽性的乳腺癌中AR的表達與HER-2的表達無關(guān)[10-11]，同時有學(xué)者通過研究AR通路活性發(fā)現(xiàn)AR通路活性與HER-2陽性乳腺癌的AR表達呈正相關(guān)，與HER-2陰性乳腺癌的AR表達呈負相關(guān)[12]。且AR陽性是HER-2富集的轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者獨立預(yù)后因素[13]。而本研究對于ER陽性的乳腺癌AR/ER比值進行進一步研究，發(fā)現(xiàn)AR/ER比值與HER-2呈明顯相關(guān)，比值較高者多為HER-2陽性患者。

盡管大部分文獻提示AR陽性是ER陽性乳腺癌患者良好預(yù)后的象征[14-16]。本研究進一步分析不同HER-2狀態(tài)下的AR/ER比值，發(fā)現(xiàn)HER-2陽性狀態(tài)下，AR/ER比值或許不能反映乳腺癌患者的惡性程度，這與Rahim B提出的“AR在HER-2擴增性乳腺癌中的預(yù)后意義似乎要么與生存率無關(guān)，要么表明預(yù)后較差[3]”結(jié)果是類似的，本研究過程中AR/ER比值與HER-2狀態(tài)呈顯著相關(guān)可能受ER狀態(tài)影響所致。而在陰性狀態(tài)下該比值與乳腺癌惡性程度有關(guān)，以上提示我們AR/ER比值在HER-2陰性狀態(tài)下可能是乳腺癌預(yù)后指標之一，同時AR與HER-2作用通路之間的交叉調(diào)節(jié)機制值得我們進一步深入研究。

表1 130例ER+且AR+患者AR/ER截斷值與各臨床素相關(guān)性分析

綜上所述：AR/ER比值是預(yù)測ER陽性乳腺癌惡性程度的指標，當(dāng)AR/ER比值≥2時，乳腺癌惡性程度相對較高，患者預(yù)后相對較差，但是對于不同HER-2狀態(tài)人群，還應(yīng)分別對于AR/ER比值意義進行進一步探究，AR/ER比值有望成為乳腺癌預(yù)后的新指標之一。