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    超高效液相色譜法測(cè)定食用油中9種抗氧化劑

    2021-06-23 21:08:29崔利輝李璐琦胡娜
    中國(guó)食品 2021年11期
    關(guān)鍵詞:丁基抗氧化劑正己烷

    崔利輝 李璐琦 胡娜

    植物油脂經(jīng)過(guò)加工后,天然存在的抗氧化成分會(huì)大量損失。為保證油脂的質(zhì)量安全,防止油脂在貯存過(guò)程中發(fā)生氧化酸敗,在油脂中添加合成抗氧化劑是最有效的解決方法之一。按來(lái)源不同,抗氧化劑主要分為天然和人工合成抗氧化劑,為了節(jié)約成本,企業(yè)一般會(huì)使用人工合成抗氧化劑,以延長(zhǎng)食品的保質(zhì)期。食品中的合成抗氧化劑主要有丁基羥基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、叔丁基對(duì)苯二酚(TBHQ)、沒(méi)食子酸丙酯(PG)等。目前抗氧化劑的檢測(cè)方法主要有比色法、氣相色譜法、液相色譜法、電化學(xué)分析法、氣質(zhì)聯(lián)用法、液質(zhì)聯(lián)用法等。GB/T 5009.32-2017食品中9種抗氧化劑的測(cè)定,規(guī)定了相關(guān)技術(shù)方法的檢測(cè)范圍,本研究利用超高效液相色譜對(duì)該方法進(jìn)行了優(yōu)化,縮短了分析時(shí)間,簡(jiǎn)化了處理過(guò)程,且有更高的靈敏度、更低的定量限。

    一、材料與方法

    1.儀器、試劑與標(biāo)準(zhǔn)品。(1)儀器。LC30A超高效液相色譜儀(日本島津公司); D型干式氮吹儀(上海滬析實(shí)業(yè)有限公司);MS3渦旋震蕩器(德國(guó)IKA公司);Allegra 64R低溫高速離心機(jī) (美國(guó)貝克曼公司);ME204電子天平(瑞士梅特勒公司)。(2)試劑與標(biāo)準(zhǔn)品。試劑: 乙腈、正己烷(HPLC級(jí), 美國(guó)天地)、甲酸(HPLC級(jí), 阿拉?。?biāo)準(zhǔn)品:乙腈中9種抗氧化劑混標(biāo)(GB 5009.32-2016,編號(hào)為80861JH,北京壇墨質(zhì)檢)。

    2.實(shí)驗(yàn)方法。(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備?;旌蠘?biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取1000μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液2.5mL,用乙腈稀釋定容至25mL,配置成濃度為100μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。分別取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mL儲(chǔ)備液,用乙腈稀釋定容至10mL,配置成濃度為5.0、10.0、20.0、50.0、100.0μg/mL系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

    (2)樣品處理。稱取約1.00g樣品于50mL離心管中,加入5mL乙腈飽和的正己烷溶液,渦旋2min,再加入5mL正己烷飽和的乙腈溶液渦旋提取2min,8000r/min離心5分鐘,去除正己烷層,吸取乙腈層2.00mL,40℃氮?dú)獯蹈?,加?.5mL30%乙腈水溶液,渦旋1min,溶液過(guò)0.22μm尼龍濾膜,液相色譜測(cè)定。

    3.色譜條件。色譜柱:Shim-pack XR-ODS III(2mmL×75mm,1.6μm);流速:0.5mL/min;進(jìn)樣量5μL,柱溫40℃;流動(dòng)相A:0.1%甲酸乙腈溶液;流動(dòng)相B:0.1%甲酸水溶液;洗脫程序(A)0-1.5min,30%升至40%;1.5-6.5min,升至42%;6.5-7.5min保持90%;檢測(cè)波長(zhǎng):280nm;檢測(cè)器采集頻率:100ms;外標(biāo)法定量。

    二、結(jié)果與分析

    1.標(biāo)準(zhǔn)譜圖。本文采用超高效液相色譜法測(cè)定9種合成抗氧化劑,紫外檢測(cè)器檢測(cè)頻率為100ms,色譜圖如圖1所示。

    2.標(biāo)準(zhǔn)曲線及定量限。依次測(cè)定濃度為5、10、20、50、100mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液,得到線性回歸方程,線性關(guān)系良好。以10μg/mL濃度的混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行液相分析,以各目標(biāo)峰的信噪比(S/N≥10)分別確認(rèn)9種抗氧化劑的定量限,如表1表示。

    3.準(zhǔn)確度和精密度。選擇空白樣品測(cè)定6次,計(jì)算目標(biāo)物含量后,準(zhǔn)確添加9種抗氧化劑,質(zhì)量濃度均為5、50mg/kg,按確定的方法進(jìn)行處理(n=6),計(jì)算加標(biāo)回收率和精密度,見(jiàn)表2。

    本研究基于超高效液相色譜法建立了一種處理簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確定量分析食用油中沒(méi)食子酸丙酯、2,4,5-三羥基苯丁酮、叔丁基對(duì)苯二酚、去甲二氫愈創(chuàng)木酸、叔丁基對(duì)羥基茴香醚BHA、2,6-二叔丁基-4-羥甲基苯酚、沒(méi)食子酸辛酯、2,6-二叔丁基對(duì)甲基苯酚、沒(méi)食子酸十二酯等9種抗氧化劑的方法,與GB 5009.32-2016中第一法相比,簡(jiǎn)化了凈化過(guò)程,提高了檢測(cè)靈敏度,縮短了檢測(cè)分析時(shí)間,節(jié)省了試劑用量。

    結(jié)果顯示,本方法可以在11min內(nèi)完成9種化合物的檢測(cè),具有良好的精確度和準(zhǔn)確度,在5.0-50μg/mL范圍內(nèi),信號(hào)響應(yīng)值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)大于0.999,定量為0.3-2.4μg/kg,加標(biāo)回收率為89.6%-96.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.3%-7.0%。(基金項(xiàng)目:2020年楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院校內(nèi)基金項(xiàng)目“食品中多種抗氧化劑的快速檢測(cè)研究”,編號(hào)ZK20-61。)

    作者簡(jiǎn)介:崔利輝(1987-),男,漢族,陜西楊凌,楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程分院,碩士研究生,助教;研究方向:食品質(zhì)量安全檢測(cè)。

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