抗-E、抗-Jkb聯(lián)合抗體致配血困難1例

楊俊龍，張 利，胡 燕，李靜靜，甘新宇，彭 濤

Kidd血型抗體在體內(nèi)產(chǎn)生后抗體效價(jià)可迅速減弱至檢測水平以下，檢出率并不高，常合并其他血型不規(guī)則抗體，容易被漏檢引起遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)（hemolytic transfusion reaction,HTR）或新生兒溶血?。╤emolytic disease of newborn,HDN）[1]?，F(xiàn)將1例因抗-Jkb、抗-E聯(lián)合抗體致配血不合病例報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料 患者，男，77歲，已婚，高血壓病史20年，曾因“腦梗塞、藥物性肝損害和胃潰瘍”多次住院輸血治療。3周前，因“突發(fā)左側(cè)肢體無力2月余”及消化道出血在外院反復(fù)輸血治療，后交叉配血不合，3月7日轉(zhuǎn)入我院。入院后診斷腦梗塞、重度貧血、高血壓3級(jí)，血常規(guī)檢查：WBC 1.67×109/L，RBC 1.16×1012/L，Hb 41 g/L，PLT 157×1012/L，急需輸血治療。

1.2 試劑與儀器 單克隆抗體試劑，抗-A、抗-B、抗-D、抗-C、抗-E、抗-c、抗-e（上海血液，批號(hào)分別為:20180716，20181809，20183001，20183202，20173101，20183301），A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（上海血液，批號(hào):20195306）；譜細(xì)胞、抗-Jka、抗-Jkb（荷蘭Sanquin，批號(hào)分別為:8000251497，8000240527，8000242050）；抗篩細(xì)胞（批號(hào):19006.01），血型卡（戴安娜DG Gel ABO-CDE，批號(hào):18021.02），凝膠卡（戴安娜DG Gel Coombs，批號(hào):18174.01），血型儀器，離心機(jī)，孵箱均為戴安娜公司。

1.3 血清學(xué)檢測方法 ABO、Rh血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗(yàn)（DAT）、抗體篩查、抗體鑒定均按照試劑說明書進(jìn)行，血清學(xué)吸收放散、抗體效價(jià)及交叉配血試驗(yàn)均按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 血型鑒定 O型、Rh分型:CCDee、Jk（a+b-）。

2.2 抗體篩查和抗體鑒定 患者血清與I、II、III號(hào)抗篩細(xì)胞用微柱凝膠卡法反應(yīng)均陽性，DAT和自身對(duì)照試驗(yàn)均陰性，鹽水試管法均陰性（見表1）。患者血清與譜細(xì)胞用微柱凝膠卡法反應(yīng)結(jié)果（見表2），與Jkb抗原和E抗原陽性紅細(xì)胞均凝集，與Jkb抗原和E抗原陰性紅細(xì)胞均不凝集，說明血清產(chǎn)生抗-Jkb、抗-E聯(lián)合抗體。見表1。

表1 患者血清與抗篩細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果

2.3 吸收放散試驗(yàn) 將患者2 mL血清與2 mL O型CCDee，Jk（a+b+）紅細(xì)胞混勻37℃吸收30 min，每10 min混勻1次，離心后吸取上清為上清液，用上清液與O型CCDee，Jk（a+b+）紅細(xì)胞IAT反應(yīng)為陰性。將吸收后的紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌三遍，加等量生理鹽水在56℃水浴箱震蕩熱放散10 min，離心吸取放散后的上清為放散液，將上清液、放散液與譜細(xì)胞用微柱凝膠卡法做抗體鑒定。結(jié)果上清液檢出抗-E，放散液檢出抗-Jkb，證實(shí)血清產(chǎn)生抗-Jkb、抗-E聯(lián)合抗體。見表2。

表2 患者血清、紅細(xì)胞吸收后上清液、放散液與譜細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果

2.4 抗體效價(jià) 患者血清分別與抗篩細(xì)胞中I號(hào)細(xì)胞、II號(hào)細(xì)胞通過倍比稀釋法測抗體效價(jià)，抗-E為16，抗-Jkb由16降低至4。見表3。

表3 患者血清抗體效價(jià)檢測

2.5 交叉配血 用抗-Jkb、抗-E試劑從112位獻(xiàn)血者中篩選到O型E、Jkb抗原陰性血液6人（11 U去白紅細(xì)胞懸液），采用鹽水法、聚凝胺法和微柱凝膠卡法進(jìn)行交叉配血，結(jié)果均無溶血、無凝集，主次側(cè)相合?；颊咦≡浩陂g共輸注6 U去白紅細(xì)胞懸液，Hb由入院時(shí)41 g/L上升為80 g/L，輸血過程順利，無輸血不良反應(yīng)，貧血明顯改善，最終好轉(zhuǎn)出院。

3 討論

人體免疫產(chǎn)生同種抗體最主要的原因是輸血和妊娠。本例患者因“腦梗塞、藥物性肝損害和胃潰瘍等疾病”多次住院輸血治療，產(chǎn)生不規(guī)則抗體導(dǎo)致交叉配血不相合?；颊逥AT試驗(yàn)和自身對(duì)照試驗(yàn)均陰性，說明不存在自身抗體，血清與抗篩細(xì)胞用鹽水試管法不凝集，在微柱凝膠法中凝集，說明所含抗體為IgG抗體，通過抗體鑒定、吸收放散等試驗(yàn)確認(rèn)患者血清產(chǎn)生抗-Jkb、抗-E聯(lián)合抗體。輸血科用抗-Jkb、抗-E試劑從112位獻(xiàn)血者中僅篩選到6袋O型、E、Jkb抗原陰性血液，用不同方法交叉配血均相合，患者共輸注6 U去白紅細(xì)胞懸液后，貧血狀況明顯改善。E抗原陰性頻率約為50%，抗-E為Rh血型系統(tǒng)常見不規(guī)則抗體，而Jkb抗原陰性頻率在亞洲人群約為24%[2]，抗-Jkb為Kidd血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體，較為少見且難以檢出，抗-E合并抗-Jkb僅見于少數(shù)的案例報(bào)道。若因抗體效價(jià)低、凝集強(qiáng)度弱或?qū)嶒?yàn)方法原因漏檢抗-Jkb，當(dāng)再次輸血Jkb抗原刺激可引發(fā)回憶反應(yīng)，使體內(nèi)迅速產(chǎn)生大量Jkb抗體，造成嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病[1]。

Kidd血型是1951年由Allen等首次發(fā)現(xiàn)，有Jka、Jkb和JK33個(gè)抗原，對(duì)應(yīng)3個(gè)抗體：抗-Jka、抗-Jkb和抗-Jk3，存在4種表型：Jk（a+b-）、Jk（a+b+）、Jk（a-b+）和Jk（a-b-）型，基因位于第18號(hào)染色體，以共顯性等位基因的方式遺傳。Kidd血型抗體多為IgG抗體，和其他抗體不同，抗-Jka或抗-Jkb在體內(nèi)產(chǎn)生后消失極快，抗體效價(jià)可迅速降低，易被漏檢導(dǎo)致遲發(fā)性輸血反應(yīng)[3]。在輸血相容性血清學(xué)檢測中可采用抗人球蛋白法、微柱凝膠法或聚凝胺法聯(lián)合檢測，提高Jk抗體檢出率[4]。本例患者住院期間，抗-E抗體效價(jià)并未改變，抗-Jkb抗體效價(jià)在6 d從16降低至4，因治療好轉(zhuǎn)出院，未能繼續(xù)監(jiān)測。目前國內(nèi)僅報(bào)道10多例HTR，其原因與Kidd血型的免疫原性和抗體特性有關(guān)，Kidd血型抗體常合并其他血型抗體，需警惕漏檢弱抗體?；旌峡贵w鑒定可根據(jù)紅細(xì)胞表型推測可能的抗體，用特定抗原陽性其余抗原陰性的紅細(xì)胞通過血清吸收放散試驗(yàn)分開或確認(rèn)混合抗體[5]。

本案例啟示：臨床工作中對(duì)不明原因的交叉配血不合需提高警惕，應(yīng)選擇不同的方法進(jìn)行交叉配血。對(duì)反復(fù)輸血患者，建議進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查和Rh血型5種抗原表型符合輸血。對(duì)抗篩陽性患者，應(yīng)鑒定抗體特異性，用抗體試劑篩選獻(xiàn)血者紅細(xì)胞相應(yīng)抗原陰性血液進(jìn)行交叉配血，輸入相合血液可避免同種抗體引發(fā)嚴(yán)重的HTR。已鑒定出特異性抗體的患者，輸血科須建立抗體陽性的特殊患者信息管理[6]，避免輸入含有相應(yīng)抗原的血液。因部分醫(yī)院輸血科甚至中心血站不能進(jìn)行Kidd系統(tǒng)等特殊血型抗原的鑒定，為保證臨床輸血安全，患者出院前須告知其血液含有特異性抗體，在其他醫(yī)院輸血治療，將抗體鑒定結(jié)果提前告知輸血科，防止溶血性輸血反應(yīng)和提高輸血療效。