文│李翠玲 樊祜卿 候敬民 姜利 宇凌(山東省菏澤市動物疫病預防控制中心)
為解決油用牡丹資源浪費的難題,山東省菏澤市中青年突出貢獻專家創(chuàng)新團隊研發(fā)了牡丹鮮花酶并申報了發(fā)明專利,其保留了牡丹鮮花的有效活性成分,并加入了多種益生菌,其成品過濾后的渣滓仍然殘存大量益生菌及多種營養(yǎng)物質(zhì),如果丟棄就會造成資源浪費。本試驗旨在研究牡丹鮮花酶渣滓加工的飲水劑對肉仔雞的影響,希望低成本開發(fā)出禽用添加劑。
1.材料。
(1)疫苗。ND疫苗,購自青島易邦生物工程有限公司(生產(chǎn)批號:20200936)。
(2)試驗用雞。180只健康的1日齡“AA”商品肉雛雞于菏澤市華豐養(yǎng)雞場籠養(yǎng)。
(3)飼料及營養(yǎng)水平。0~21日齡、21日齡至出欄階段飼料均采用華豐養(yǎng)雞場自配料。
(4)器材。恒溫干燥箱(上海一恒儀器有限公司DHG-9030)、電子秤(永康華鷹衡器有限公司至尊708)、電子分析天平(賽多利斯QUINTIX124-1CNQ224)、徠卡組織切片機、徠卡自動染色機、徠卡Qwin 圖像分析系統(tǒng)(CD2000)、鑷子、剪刀、軟尺。
(5)牡丹鮮花酶渣滓飲水劑。無菌條件下將牡丹鮮花酶(菏澤市中青年突出貢獻專家創(chuàng)新團隊發(fā)明專利)渣滓添加10倍水稀釋過濾得到澄清溶液。
2.方法。
表1 0~21日齡飼料營養(yǎng)水平 %
(1)動物分組。180只1日齡“AA”商品肉雛雞,在同一飼養(yǎng)管理水平下,按每組60只,隨機分三組,A組(飲水中添加1%牡丹鮮花酶渣滓飲水劑,同時注射ND疫苗),B組(飲水中添加1%牡丹鮮花酶渣滓飲水劑不用ND疫苗),C組(空白對照組,不添加飲水劑,不用ND疫苗)。
(2)飼養(yǎng)管理方法。試驗雞采用籠養(yǎng)模式,嚴格執(zhí)行肉雞飼養(yǎng)管理操作規(guī)程,全天24小時光照,自由采食飲水,正試期一個半月。
(3)方法。牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雞生產(chǎn)功能的影響。記錄每天采食飼料量、觀察記錄分析雞的病死情況。分別在第1天、第7天、第14天、第21天、第45天飼喂前空腹稱取各組雞體重,并分別計算出其日增重、料重比和料重比改善率。
牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雞免疫器官的影響。分別計算第9天和第45天各組雞脾和胸腺的指數(shù)。
牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雞體液免疫功能的影響。分別在第9天、第28天、第45天每組隨機抽取5只雞,測定EAC花環(huán)形成率(%)。
牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雞細胞免疫性能的影響。分別在第9天、第28天、第45天隨機抽取每組5只雞,檢測ANAE陽性率(%)。
牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雞紅細胞(RBC)免疫黏附功能的影響。分別在第9天、第45天隨機抽取每組5只雞,測定C3b花環(huán)率( %)和IC花環(huán)率(%)。
(4)數(shù)據(jù)處理。數(shù)據(jù)由平均數(shù)±標準誤差組成,利用SPSS11.0軟件進行統(tǒng)計分析,P﹤0.05為差異顯著,P﹤0.01為差異極顯著。
1.牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對肉雞生產(chǎn)功能的影響。表3顯示,在1~21天階段中A組、B兩組平均日增重顯著高于C組(P﹤0.05),差異主要集中在15~21天這一階段,該階段中A組、B組增重效果顯著優(yōu)于C組(P﹤0.05);0~7天和8~14天階段三組雞增重無顯著差異(P>0.05)。提示牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對15天后的肉雞增重效果明顯。
表2 21日齡至出欄飼料營養(yǎng)水平 %
表3 21日齡前各階段每組增重情況統(tǒng)計 克/只
表4顯示,在1~21天階段,三組之間采食量差異不顯著(P>0.05)。
表4 0~21日齡不同日齡段肉仔雞的采食量 克/只
表5顯示在1~21天階段,A、B兩組料重比顯著低于C組(P﹤0.05)。差異主要體現(xiàn)在8~14天和15~21天階段,其間A組、B組兩組料重比顯著低于C組(P﹤0.05)。0~7天階段三組雞增重無顯著差異(P>0.05)。說明牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可以顯著提高8日齡后肉雞的飼料轉(zhuǎn)化率。
表5 0~21天不同階段肉仔雞的料重比
表6 46天出欄平均體重、成活率、料重比結(jié)果
表7 牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雛雞免疫器官發(fā)育的影響
從表6可以看出,三組間的成活率相比差異不顯著,A組較B組高2.1%、B組較C組高4.2%;出欄平均體重A組較C組高0.21%,B組較C組高0.13%;料重比A組較C組降低0.224%,B組較C組低0.177%。通過觀察,在整體生長情況、抗病能力、抗應(yīng)激能力和存活率方面,A、B兩組均要優(yōu)于C組。
2.牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對肉雞免疫性能的影響。
(1)免疫器官指數(shù)的測定。表7顯示,第9天A組、B組的法氏囊指數(shù)和脾指數(shù)均顯著高于C組(P<0.05),各組胸腺指數(shù)無顯著差異(P>0.05);在第45天A組和B組的法氏囊、脾和胸腺三指數(shù)均顯著高于C組(P<0.05)。
(2)雛雞淋巴細胞EAC花環(huán)率測定。從表8可以看出,A、B二組雞不同階段EAC花環(huán)率均高于C組,極顯著 (P<0.01),說明牡丹鮮花酶渣滓飲水劑有促進肉雞體液免疫的作用。A組的EAC花環(huán)率極顯著高于B組(P<0.01),則提示牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可顯著增強接種ND疫苗肉雞的特異性免疫能力。
表8 牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雛雞B細胞EAC花環(huán)率的影響%
(3)雛雞T淋巴細胞ANAE陽性率檢測結(jié)果。表9顯示,第9天A、B兩組T細胞ANAE陽性率與C組比較,差異不顯著(P>0.05),表明牡丹鮮花酶渣滓對0~9天的雛雞細胞免疫功能基本無影響。在第28天和第45天,A、B兩組T細胞ANAE陽性率差異不顯著(P>0.05),但均極顯著高于C組(P<0.01)。因此,牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對第10天后肉雞的細胞免疫功能有極其顯著的促進作用。
表9 牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雛雞T細胞ANAE陽性率的影響%
(4)雞紅細胞C3b花環(huán)率和IC花環(huán)率測定結(jié)果。表10顯示,第9天和第45天的A、B兩組肉雞紅細胞C3b花環(huán)百分率差異不顯著(P>0.05),但均顯著高于C組(P<0.05);第9天和第45天的A、B兩組IC花環(huán)百分率差異不顯著(P>0.05),但均顯著低于C組(P<0.05)。表明牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對肉雞RBC免疫黏附功能有明顯促進作用。
表10 牡丹鮮花酶渣滓對肉雞RBC免疫性能的影響%
1.牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對肉雞生產(chǎn)功能的影響。本研究表明,牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可顯著提高肉雞生產(chǎn)功能,改善料重比。A組出欄平均體重比C組提高10.04%,B組出欄平均體重比C組提高6.22%;A組料重比較C組降低了9.95%,B組比C組降低了7.86%;另外,牡丹鮮花酶渣滓飲水劑還可提高肉雞成活率,試驗中A組成活率比C組提高了6.3%。隨著肉雞養(yǎng)殖標準化程度的提升,科學高效的飼養(yǎng)管理水平確保了肉雞的高存活率,本試驗中C組的存活率已經(jīng)達到了91.9%,較高的對照組存活率基數(shù)導致A、B、C三組存活率在數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析時無顯著差異,但是在實際生產(chǎn)中6.3%無疑是一個巨大的提升。
2.牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對肉雞免疫性能的影響。法氏囊、脾和胸腺是雞的主要免疫器官,T細胞和B細胞在這里分化、增殖并分別介導機體的細胞免疫和體液免疫,因此法氏囊、脾、胸腺的重量和臟器指數(shù)常常被認為是衡量雞免疫狀態(tài)的重要指標。一般來說,法氏囊、脾、胸腺的重量和臟器指數(shù)增加說明雞的免疫力增強,反之則是免疫抑制所致。本研究表明,牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可明顯的促進雞法氏囊、脾和胸腺的生長發(fā)育;A、B兩組不同日齡EAC花環(huán)率均極顯著地高于C組(P<0.01),說明牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可以顯著提高B細胞免疫(體液免疫)水平;A組EAC花環(huán)率極顯著高于B組(P<0.01),則說明牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可以顯著促進和提高接種ND疫苗雛雞的特異性免疫。
從第9天、第28天和第45天的ANAE陽性率來看,A組和B組在第9天時與C組相比差異不顯著(P>0.05),在第28天和第45天時極顯著地高于C組(P<0.01),說明隨著雞免疫器官的日趨成熟(飼喂9天后),牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可以顯著提高雞T細胞免疫功能即細胞免疫水平。對比第9天和第45天三組雞紅細胞C3b花環(huán)百分率和IC花環(huán)百分率,A、B兩組C3b花環(huán)百分率較C組顯著提高(P<0.05)、IC花環(huán)百分率較C組顯著降低(P<0.05),說明牡丹鮮花酶渣滓飲水劑對雛雞RBC免疫黏附功能有顯著增強作用。由此可知,通過在飲水中添加1%牡丹鮮花酶渣滓飲水劑可以有效調(diào)節(jié)雞群體液免疫和細胞免疫水平,提高雞群整體免疫力,增強雞群抵御病原微生物入侵的能力,進而有效提高雞群存活率,這與本研究中肉雞生產(chǎn)性能試驗部分存活率分析是一致的。