黃秋葵MYB轉(zhuǎn)錄因子的鑒定及與果實老化關(guān)系分析

李永平 白昌輝 薛珠政 朱海生 溫慶放

(福建省蔬菜遺傳育種重點實驗室/福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，福建 福州 350013)

黃秋葵(HibiscusesculentusL.)，錦葵科草本植物，含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素、多糖等物質(zhì)[1]，同時，幼果中含有大量果膠、牛乳聚糖、阿拉伯聚糖和豐富的膳食纖維[2]，是一種高檔保健蔬菜[3]。黃秋葵的食用價值較高，但其采收期短；坐果5～7 d內(nèi)采收適宜，之后果莢快速老化，口感堅韌難嚼，食用性差[4]；采收后常溫保存1～2 d即失去商品性。

有研究發(fā)現(xiàn)，黃秋葵果實老化的生理過程中果莢的維管束細胞壁增厚，纖維素、木質(zhì)素等大量積累[5-6]。植物次生細胞壁由纖維素、半纖維素和木質(zhì)素交織構(gòu)成，除了大量的蛋白與酶參與植物細胞壁的生物合成外，還受到轉(zhuǎn)錄因子的級聯(lián)調(diào)控[7]。在植物體內(nèi)的50多個轉(zhuǎn)錄因子家族中，參與次生細胞壁合成的轉(zhuǎn)錄因子主要有NAC(NAA、ATAF 1/2、CUC 1/2)和MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homology)類轉(zhuǎn)錄因子[8]。MYB類轉(zhuǎn)錄因子是植物中數(shù)量最龐大、功能最多的轉(zhuǎn)錄因子家族。在擬南芥(Arabidopsisthaliana)中已發(fā)現(xiàn)近200個MYB成員[9]。植物細胞周期、新陳代謝及環(huán)境響應(yīng)等眾多生命活動都有MYB類轉(zhuǎn)錄因子的作用。隨著生物科學(xué)研究的發(fā)展，植物中越來越多的MYB類轉(zhuǎn)錄因子被鑒定和分析，已成為研究植物基因功能和表達調(diào)控的熱點[10]。

植物MYB轉(zhuǎn)錄因子參與眾多生物學(xué)過程，包括細胞壁組分合成及類黃酮代謝途徑等多種初生和次生代謝反應(yīng)過程，對纖維素、木質(zhì)素和木聚糖生物合成與沉積，以及次生細胞壁形成具有重要的調(diào)控作用[10]。擬南芥的AtMYB46[11]、AtMYB83、AtMYB58[12]、AtMYB63、AtMYB52、AtMYB54、AtMYB69和AtMYB85[13]正調(diào)控纖維素、木質(zhì)素、木聚糖和半纖維素的合成，影響植物次生細胞壁的形成；AtMYB103調(diào)控纖維素的合成，以及參與花粉孢子外壁的形成[14]。擬南芥中AtMYB4、AtMYB32和AtMYB68負調(diào)控根部木質(zhì)素累積[15]?；鹁嫠?Pinustaeda)中PtMYB4[16]和PtMYB8[17]、楊樹(Populus)中MYB6[18]以及蘋果桉(Eucalyptusgunnii)中EgMYB2[19]等基因均在次生木質(zhì)部特異表達，調(diào)控整個次生壁的合成；金魚草(Antirrhinummajus)的AmMYB308、AmMYB330[20]和蘋果桉中EgMYB1[21]的過表達均能抑制木質(zhì)素的合成和次生細胞壁形成。黃秋葵中MYB46、MYB83 調(diào)節(jié)黃秋葵果實纖維素合成[5]。本研究通過顯微鏡觀察其細胞組織結(jié)構(gòu)變化，測定黃秋葵果實發(fā)育過程和采后貯存的纖維素、木質(zhì)素等含量變化，明確其老化原因；并分析黃秋葵MYB家族的10個基因生物序列特征及果實不同時期的表達與纖維素、木質(zhì)素含量的相關(guān)性，初步明確MYB轉(zhuǎn)錄因子在黃秋葵老化過程中的作用，以期為黃秋葵的生產(chǎn)、分子育種等提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

植物材料為種植于福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究室的綠色黃秋葵品種臺灣五福。取健康果實[花后2、4、6、8、10 d果實，分別記為花后2、4、6、8、10 d，以及商品果(花后6 d果實)在常溫下貯藏0、1、2、3、4 d，記為采后0、1、2、3、4 d]，每個處理隨機取3個果實混合取樣，3次重復(fù)，液氮處理后，-80℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 黃秋葵果實細胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察

將1.1中試驗材料于保存前去芯去籽，迅速放入甲醛-乙酸-乙醇(formalin-aceto-alcohol, FAA)固定液中固定24 h，然后用植物軟化液(G1115，武漢塞維爾公司)軟化14 d。參照改良的石蠟包埋法[22]制作石蠟切片。將脫蠟的切片用蒸餾水清洗，再將切片放入5%鹽酸間苯三酚染色液中染色2～5 min，之后進行蒸餾水沖洗、透明封固。1×51光學(xué)顯微鏡(Olympus，日本)下觀察、拍照。木質(zhì)化的細胞壁呈紫紅色，纖維素細胞組織呈藍綠色。

1.3 纖維素和木質(zhì)素提取和測定

采用硫酸蒽酮比色法測定纖維素含量[23]、滴定法測木質(zhì)素含量[24]。差異顯著性分析采用SPSS 19軟件。

1.4 轉(zhuǎn)錄組測序

將1.1中的10個處理樣品置于干冰中，寄往廣州基迪奧生物科技有限公司，采用Illumina HiSeqTM 2500 PE125系統(tǒng)進行RNA-seq轉(zhuǎn)錄組測序，經(jīng)Trinity序列組裝，過濾獲得49.6 G的有效數(shù)據(jù)。

1.5 基因的生物信息學(xué)分析軟件

用primer premier 5.0軟件設(shè)計引物序列，ProtScale(http://web.expasy.org/protscale/0)分析基因蛋白的結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)；在線軟件線分析工具ProtComp 9.0(http://linux1.softberry.com)預(yù)測分析黃秋葵MYB蛋白亞細胞定位；在線軟件Smart預(yù)測蛋白序列保守結(jié)構(gòu)域；使用NetPhos2.0Server(http://www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos/)軟件預(yù)測磷酸化位點；MEGA 5.0軟件構(gòu)建進化樹。

1.6 實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR，qRT-PCR)分析

依據(jù)獲得的黃秋葵MYB全長序列和黃秋葵Actin(GenBank: MG792 349.1)，應(yīng)用primer premier 5.0軟件設(shè)計熒光定量PCR特異引物(表1)。使用Power SYBR Green PCR Master Mix試劑盒(ABI，美國)，進行實時熒光定量PCR反應(yīng)。反應(yīng)體系為25 μL：PCR Master Mix 12.5 μL，cDNA 1 μL，10 μmol·L-1正反向引物各0.5 μL，加蒸餾水至總體積25 μL。反應(yīng)程序：95℃預(yù)變性45 s；95℃變性5 s，56℃退火30 s，72℃延伸45 s，40個循環(huán)。每個反應(yīng)設(shè)3重復(fù)，應(yīng)用ABI 7500軟件中的ΔΔCT法分析處理數(shù)據(jù)并得出目的基因的表達情況。

表1 黃秋葵MYB基因驗證與表達的引物

2 結(jié)果與分析

2.1 黃秋葵果實細胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察

觀察鹽酸間苯三酚染色的石蠟切片，纖維素細胞組織呈綠色，木質(zhì)素為紫紅色。由圖1可知，隨黃秋葵果實的生長發(fā)育，維管束中細胞的細胞壁呈階梯式增厚，花后2～6 d有增厚但不明顯，花后8 d有明顯的增厚，花后10 d增厚更加明顯；薄壁細胞在花后2～6 d變化不大，花后8～10 d細胞壁中有一定程度增厚。維管束中細胞的細胞壁在采后0～1 d細胞壁增厚不明顯，2～4 d細胞壁增厚明顯。

注：鹽酸間苯三酚染色200倍視野；G2：花后2 d；G4：花后4 d；G6：花后6 d；G8：花后8 d；G10：花后10 d；T0：采后 0 d；T1：采后1 d；T2：采后2 d；T3：采后3 d；T4：采后4 d；標(biāo)尺為100 px。

2.2 黃秋葵果實纖維素含量測定

隨著黃秋葵果實生長發(fā)育，果實中的纖維素含量呈增加趨勢，但在花后4～6 d，每相鄰2 d的纖維素含量雖有增加，但差異不顯著，花后6、8和10 d，果實的纖維素含量增加顯著。黃秋葵果實采后處理中，果實采后0～4 d中，纖維素的含量持續(xù)顯著增加，木質(zhì)素則在采后2～3 d后增加顯著(表2)。

表2 黃秋葵果實發(fā)育過程、果實采后處理的纖維素和木質(zhì)素含量

2.3 黃秋葵MYB基因鑒定

從黃秋葵果實轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)庫中篩選得到10條功能注釋為MYB基因的Unigene序列，分別為MYB4(Unigene0000800)、MYB6(Unigene0002945)、MYB26(Unigene0037799)、MYB28(Unigene0024424)、MYB44(Unigene0007347)、MYB46(Unigene0036406)、MYB59(Unigene0043914)、MYB86(Unigene0064389)、MYB108(Unigene0040179)、MYB113(Unigene0031002)。如圖2所示，上述10個MYB基因在10個不同處理中均呈現(xiàn)表達差異模式，其中MYB59和MYB113在果實發(fā)育進程中呈現(xiàn)下調(diào)表達模式，MYB4、MYB6、MYB26、MYB28、MYB44、MYB46、MYB86、MYB108基因表達呈現(xiàn)上調(diào)模式；MYB46、MYB59、MYB108在采后常溫貯藏1～4 d的果實中的表達量呈上調(diào)模式，MYB4、MYB6、MYB26、MYB28、MYB44、MYB86、MYB113則表現(xiàn)為下調(diào)。(圖2)

圖2 MYB基因在黃秋葵果實RNA-seq數(shù)據(jù)庫的表達分析

2.4 目的基因克隆及序列分析

從黃秋葵果實轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)庫中篩選得到MYB4、MYB6、MYB26、MYB28、MYB44、MYB46、MYB59、MYB86、MYB108、MYB113基因序列，設(shè)計引物進行驗證。經(jīng)回收、連結(jié)、轉(zhuǎn)化、測序，結(jié)果表明，MYB4(登錄號：MW363898)、MYB6(登錄號：MW363900)、MYB26(登錄號：MW363897)、MYB28(登錄號：MW363910)、MYB44(登錄號：MW363896)、MYB46(登錄號：MW674793)、MYB59(登錄號：MW363901)、MYB86(登錄號：MW363904)、MYB108(登錄號：MW363905)、MYB113(登錄號：MW363907)基因的全長分別為837、864、909、1 434、1 242、990、627、1 223、861、717 bp，上述基因編碼的蛋白分別為278、287、302、477、413、329、208、440、286、238 AA。

2.5 基因的生物信息學(xué)分析

2.5.1 編碼蛋白的理化性質(zhì)分析 如表3所示，經(jīng)克隆驗證獲得10條黃秋葵MYB的基因全長序列，編碼的蛋白208～477 AA，分子量在27 460.13～53 726.88 Da 之間，脂肪族氨基酸指數(shù)為56.68～78.48，均為親水性蛋白，不穩(wěn)定系數(shù)在43.86～67.38之間。HeMYB6、HeMYB26、HeMYB86為堿性，其余7個MYB為弱酸性。10個MYB的蛋白都定位于質(zhì)膜上。

表3 黃秋葵MYB基因家族蛋白理化性質(zhì)

2.5.2 蛋白磷酸化位點和保守結(jié)構(gòu)域分析 蛋白質(zhì)磷酸化是生物體內(nèi)調(diào)節(jié)和控制蛋白質(zhì)活力和功能的最基礎(chǔ)、最重要的蛋白活性調(diào)節(jié)機制，在細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著至關(guān)重要的作用[25]。使用NetPhos 2.0 Server(http://www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos/)軟件預(yù)測10個HeMYB轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化位點(圖3)，絲氨酸(Ser，S)磷酸化位點最多為39個，蘇氨酸(Thr，T)磷酸化位點最多為18個，酪氨酸(Tyr，Y)磷酸化位點最多為7個。說明HeMYB 轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化以絲氨酸磷酸化為優(yōu)勢，同時兼有蘇氨酸和酪氨酸磷酸化。

圖3 MYB 轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化位點數(shù)量

利用Smart進行保守結(jié)構(gòu)域分析，結(jié)果顯示除HeMYB59蛋白N末端均含有1個SANT結(jié)構(gòu)域，其余9個HeMYB均含串聯(lián)的2個R2R3-MYB型轉(zhuǎn)錄因子的典型SANT結(jié)構(gòu)域；HeMYB4、HeMYB6、HeMYB28、HeMYB44含有1個ZnF結(jié)構(gòu)域；HeMYB6、HeMYB86、HeMYB108含有1個CARD結(jié)構(gòu)域；HeMYB4、HeMYB46、HeMYB59含有1個FA結(jié)構(gòu)域；HeMYB46含1個KNOX2結(jié)構(gòu)域，KNOX2是同源二聚化所必需的，參與次生細胞壁的合成。

2.5.3 進化分析 將黃秋葵的10個MYB蛋白序列與擬南芥、亞洲棉(Gossypiumhirsutum)、火炬松、毛果楊、蘋果桉等49個MYB蛋白序列進行進化分析(圖4)。49個MYB蛋白形成5個分支，Group I 包含HeMYB6、HeMYB46、HeMYB86、HeMYB26、HeMYB59、HeMYB108等35個MYB蛋白；GroupⅡ包含HeMYB113、亞洲棉MYB113等4個MYB蛋白；GroupⅢ含HeMYB59、AtMYB59、亞洲棉MYB59等3個MYB蛋白；GroupⅣ包含HeMYB44、AtMYB44、亞洲棉MYB44等6個MYB蛋白；GroupⅤ包含HeMYB28。除亞洲棉MYB4、MYB28外，黃秋葵的MYB蛋白與擬南芥、亞洲棉的相應(yīng)MYB蛋白均在同一分支，且與亞洲棉的MYB蛋白的同源性更高。

圖4 黃秋葵與擬南芥、亞洲棉等MYB家族系統(tǒng)進化樹

2.6 基因表達分析

2.6.1 黃秋葵HeMYB基因家族在果實發(fā)育中的表達HeMYB46、HeMYB86、HeMYB44、HeMYB28和，HeMYB26 5個基因在黃秋葵果實發(fā)育過程中表達量先上升后下降；HeMYB59的表達量在花后2～8 d基本一致，花后10 d表達量下降，HeMYB86表達量的峰值出現(xiàn)在花后6 d，HeMYB44、HeMYB46、HeMYB26、HeMYB28表達量的峰值出現(xiàn)在花后8 d(圖5-A)。HeMYB4、HeMYB6、HeMYB108在花后表達持續(xù)上升，HeMYB4花后8 d表達急劇增強，花后10 d保持高水平表達，HeMYB6在花后6 d表達量迅速增強，花后8～10 d保持平穩(wěn)表達，HeMYB108則在花后6 d表達量持續(xù)增加，尤其在花后8～10 d表達量迅速增加(圖5-B)，HeMYB113在果實發(fā)育過程中表達量持續(xù)降低。

注：同基因不同小寫字母表示不同花后天數(shù)間差異顯著(P<0.05)。下同。

2.6.2 黃秋葵HeMYB基因家族在采后果實中的表達HeMYB46、HeMYB59的表達在采后0～4 d持續(xù)增強；HeMYB6、HeMYB44、HeMYB108、HeMYB113果實采后表達量先上升后下降；HeMYB4、HeMYB26、HeMYB28、HeMYB86果實采后0～1 d表達量快速下降，隨后表達量平穩(wěn)下降(圖6)。

圖6 黃秋葵果實采后MYB的表達

2.7 相關(guān)性分析

2.7.1 黃秋葵HeMYB基因家族RNA-seq數(shù)據(jù)庫的表達與qRT-PCR表達的相關(guān)性分析 通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，黃秋葵HeMYB基因家族RNA-seq數(shù)據(jù)庫的表達與qRT-PCR表達相關(guān)性較好，相關(guān)系數(shù)R2為0.854 2(圖7)。說明轉(zhuǎn)錄組RNA-seq測得HeMYB基因的表達量與應(yīng)用qRT-PCR得到的表達值的變化趨勢基本一致。

圖7 黃秋葵HeMYB基因家族RNA-seq數(shù)據(jù)庫的表達與qRT-PCR表達的相關(guān)性分析

2.7.2 黃秋葵HeMYB基因qRT-PCR表達與纖維素、木質(zhì)素含量變化的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)(表4)，黃秋葵果實發(fā)育時期HeMYB46、HeMYB59、HeMYB86、HeMYB108與纖維素含量呈顯著或極顯著正相關(guān)，10個基因除HeMYB4、HeMYB28、HeMYB86外均與木質(zhì)素含量呈顯著或極顯著相關(guān)；黃秋葵果實采后處理過程除HeMYB6、HeMYB26外，其余8個基因均與纖維素含量呈顯著或極顯著相關(guān)，HeMYB26、HeMYB108外其余8個基因均與木質(zhì)素含量呈顯著或極顯著相關(guān)；HeMYB46、HeMYB86、HeMYB108表達量與纖維素含量呈極顯著正相關(guān)，HeMYB46、HeMYB59均與木質(zhì)素含量呈極顯著相關(guān)，HeMYB4、HeMYB113與纖維素、木質(zhì)素含量呈顯著負相關(guān)。

表4 黃秋葵轉(zhuǎn)錄因子MYB基因家族qRT-PCR表達量與纖維素含量變化的相關(guān)性分析

3 討論

許多果實的老化由木質(zhì)化和纖維化引起，其中木質(zhì)素和纖維素的產(chǎn)生及調(diào)控與果實老化息息相關(guān)。黃秋葵果實花后8 d或采后常溫貯存3 d就無法食用，此時果實纖維素和木質(zhì)素均大量積累，細胞壁增厚明顯[6]。植物MYB轉(zhuǎn)錄因子參與木質(zhì)素和纖維素生物合成與沉積，在次生細胞壁形成中具有重要的調(diào)控作用。Yang等[26]研究發(fā)現(xiàn)，擬南芥AtMYB26基因可以調(diào)控花藥內(nèi)皮層次生細胞壁合成；過量表達AtMYB26基因，可以誘導(dǎo)次生壁合成相關(guān)基因的表達，導(dǎo)致次生壁異位沉積。AtMYB46/83、PtrMYB003和PtrMYB020可以激活纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的生物合成導(dǎo)致植株細胞次生壁異位沉積。AtMYB58與AtMYB63是木質(zhì)素合成的特異調(diào)控基因，在次生壁加厚的纖維和導(dǎo)管中發(fā)現(xiàn)有上述基因的特異性表達，抑制其表達則會導(dǎo)致次生壁缺陷、木質(zhì)素含量降低，而過量表達兩者則會激活木質(zhì)素合成基因的表達且伴隨木質(zhì)素異位沉積[27]。本研究表明，與次生壁形成相關(guān)的MYB轉(zhuǎn)錄因子具有較高的同源性，在不同物種間的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能較為保守。Du等[28]分析玉米、擬南芥等的MYB序列進化、結(jié)構(gòu)及功能，發(fā)現(xiàn)有4個亞組的MYB與木質(zhì)素合成以及次生壁增厚相關(guān)。Zhao等[29]對擬南芥、水稻、玉米、楊樹以及柳枝稷MYB轉(zhuǎn)錄因子進行功能分組，得到一致的結(jié)論。MYB類轉(zhuǎn)錄因子成員之間同源性越高，其功能的相似程度越大，因此可以通過擬南芥中MYB類轉(zhuǎn)錄因子家族成員已有的功能研究，預(yù)測同一分支上其他MYB類轉(zhuǎn)錄因子家族成員的功能特性。本研究從黃秋葵果實中獲得HeMYB4、HeMYB6、HeMYB26、HeMYB28、HeMYB44、HeMYB46、HeMYB59、HeMYB86、HeMY108、HeMYB113等10個MYB家族基因，10個MYB基因均定位于質(zhì)膜上，進化分析發(fā)現(xiàn)與擬南芥等物種中參與纖維素和木質(zhì)素合成的MYB蛋白親緣關(guān)系較近，其中，黃秋葵中HeMYB46、HeMYB59、HeMYB86、HeMYB108與次生壁增厚相關(guān)的AtMYB58、AtMYB46、AtMYB63、AtMYB85、AtMYB26、PtrMYB020等基因同源性高，黃秋葵中HeMYB4、HeMYB113分別與負調(diào)控次生壁合成的AtMYB75、AtMYB68基因同源性高，暗示HeMYB46、HeMYB59、HeMYB86、HeMYB108在黃秋葵次生壁增厚及果實老化過程中起著重要作用。

MYB類轉(zhuǎn)錄因子基因家族，是一個多基因家族，不同的MYB家族成員在木質(zhì)素和纖維素生物合成調(diào)控及果實老化中的作用可能不同。AtMYB4、AtMYB32、AtMYB58、AtMYB75負調(diào)控次生壁合成相關(guān)基因的表達，AtMYB32過量表達會造成花藥的扭曲，影響花藥細胞壁的形成[15]，AtMYB75缺失，木質(zhì)纖維和束間纖維的次生壁加厚增強，纖維素、木聚糖和木質(zhì)素增加[30]。棉花(GossypiumherbaceumL.)GhMYB1和GhMYB25參與了毛狀體的分化與發(fā)育，在煙草中過量表達的GhMYB25葉表皮毛分支增加，相關(guān)試驗也證明GhMYB25在有纖維起始細胞中富集表達[31]。煙草中過量表達火炬松PtMYB4和蘋果桉EgMYB2基因，使次生細胞壁加厚顯著并且木質(zhì)素異位沉積[16,19]。玉米(Zeamays)ZmMYB31通過增強CAD基因的表達，ZmMYB4則下調(diào)C4H和CAD的表達，進而影響木質(zhì)素的積累，玉米ZmMYB31和ZmMYB4過量表達木質(zhì)素含量降低[32]；柳枝稷(Panicumvirgatum)PvMYB4基因與參與木質(zhì)素生物合成途徑的基因中AC元素結(jié)合，進而影響木質(zhì)素的合成，過量表達的柳枝稷木質(zhì)素含量顯著下降[33]。本研究從黃秋葵果實中獲得HeMYB4、HeMYB6、HeMYB26、HeMYB28、HeMYB44、HeMYB46、HeMYB59、HeMYB86、HeMY108、HeMYB113等10個MYB家族基因，利用實時熒光定量PCR分析黃秋葵MYB基因家族10個基因在果實發(fā)育過程、采后常溫貯藏的表達，不同黃秋葵MYB基因家族呈現(xiàn)出不同的表達模式。對黃秋葵MYB基因家族表達與纖維素及木質(zhì)素含量的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，HeMYB46、HeMYB86、HeMY108的表達量與纖維素含量呈極顯著正相關(guān)，推測上述基因在黃秋葵果實衰老過程纖維素合成中起重要作用，HeMYB46、HeMYB59的表達量與木質(zhì)素含量呈極顯著正相關(guān)，推測其在木質(zhì)素合成中起到重要調(diào)控作用。本研究初步明確黃秋葵MYB轉(zhuǎn)錄因子在黃秋葵老化過程中的作用，為黃秋葵的生產(chǎn)、分子育種等提供理論基礎(chǔ)。

4 結(jié)論

本研究通過顯微鏡觀察黃秋葵果實發(fā)育過程和采后貯藏期間細胞纖維素組織結(jié)構(gòu)變化及纖維素含量變化，發(fā)現(xiàn)纖維素和木質(zhì)素大量積累是黃秋葵果實老化的主要因素。通過對10個HeMYB基因的生物信息及qRT-PCR表達分析，推測在黃秋葵果實老化過程中，HeMYB46、HeMYB86、HeMYB108對纖維素合成起重要作用，HeMYB46、HeMYB59對木質(zhì)素合成起重要調(diào)控作用；HeMYB46、HeMYB59、HeMYB86、HeMYB108在黃秋葵果實老化中起重要調(diào)控作用。