血清HE4、Anti-CCP及AMH水平與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關(guān)性*

魏忠華，何思春，李先莉，吳 波

四川省達(dá)州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川達(dá)州 635000

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種發(fā)病機(jī)制尚不明確的自身免疫性疾病，臨床多表現(xiàn)為免疫復(fù)合物沉淀、自身抗體產(chǎn)生及系統(tǒng)損傷等特征，目前尚無有效的根治手段，患者多預(yù)后較差[1-2]。血清人附睪蛋白4(HE4)是乳清酸性4-二硫化中心蛋白家族一員，相關(guān)研究指出，HE4是預(yù)測(cè)SLE患者卵巢癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的腫瘤標(biāo)志物之一[3-4]?？弓h(huán)瓜氨酸肽抗體(Anti-CCP)是一種自身抗體，對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷具有較高的靈敏度，常用于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的早期診斷。而SLE與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎均為自身免疫性疾病，且均伴有關(guān)節(jié)損傷[5-6]?？箍娎帐瞎芗に?AMH)是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β超家族一員，是在原始卵泡向促卵泡激素依賴的竇狀卵泡發(fā)育過程中，由顆粒細(xì)胞表達(dá)[7]。相關(guān)研究顯示，育齡期女性SLE發(fā)病率是絕經(jīng)期女性的3倍[8]。這些研究提示HE4、Anti-CCP及AMH可能與SLE的發(fā)生有一定聯(lián)系。本研究擬觀察SLE患者血清HE4、Anti-CCP及AMH表達(dá)情況，旨在分析上述指標(biāo)與SLE發(fā)生的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性收集2020年2-5月本院收治的SLE患者67例作為觀察組，其中男6例，女61例；年齡20～69歲，平均(37.68±12.25)歲；病程9 d至23年，平均(5.24±1.25)年。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)SLE患者的診斷均符合《系統(tǒng)性紅斑狼瘡診療指南》[9]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)均為初診確診SLE后接受治療患者；(3)患者病歷資料的抽取及閱讀均獲得患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征、特發(fā)性炎性肌病等其他自身免疫性疾病患者；(2)合并高血壓、糖尿病及心血管疾病患者；(3)合并良惡性腫瘤及急性感染患者；(4)合并原發(fā)性腎功能及肝功能異?；颊撸?5)入組前6個(gè)月具有分娩史及服用過避孕藥物患者；(6)合并多囊卵巢綜合征及妊娠者。另選取同期本院健康體檢者67例作為對(duì)照組，其中男10例，女57例；年齡20～70歲，平均(38.02±12.34)歲。對(duì)照者均接受病史詢問、影像學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)等檢查。檢查結(jié)果顯示相關(guān)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)，明確診斷為健康者。2組的年齡、性別構(gòu)成比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1血清標(biāo)本獲取 健康體檢者于當(dāng)日，受試者于入院后次日清晨空腹抽靜脈血4 mL，以3 000 r/min離心5 min分離血清，取血清保存于-70 ℃冰箱中備用。

1.2.2血清指標(biāo)檢測(cè) 采用羅氏公司Roche e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒，按照試劑盒說明書操作流程檢測(cè)血清標(biāo)本，測(cè)定血清HE4、Anti-CCP及AMH水平，標(biāo)本于當(dāng)日完成測(cè)定，所有項(xiàng)目室內(nèi)質(zhì)控在控。

1.2.3SLE疾病活動(dòng)度判斷 根據(jù)SLE疾病活動(dòng)度評(píng)分[10](SLEDAI)進(jìn)行評(píng)估：(1)精神癥狀、癲癇發(fā)作、視覺障礙、器質(zhì)性腦病、狼瘡性頭痛及脈管炎等為8分項(xiàng)；(2)肌炎、關(guān)節(jié)炎、管型尿、血尿(紅細(xì)胞計(jì)數(shù)>5個(gè)/高倍視野)、膿尿(白細(xì)胞計(jì)數(shù)>5個(gè)/高倍視野)、蛋白尿(>0.5 g/d)為4分項(xiàng)；(3)新出皮疹、脫發(fā)、胸膜炎、黏膜潰瘍?yōu)?分項(xiàng)；(4)發(fā)熱>38 ℃、白細(xì)胞計(jì)數(shù)<3.0×109/L、血小板計(jì)數(shù)<100×109/L為1分項(xiàng)。SLE疾病活動(dòng)度判定標(biāo)準(zhǔn)：SLEDAI<10分為非活動(dòng)期；≥10分為活動(dòng)期，中度活動(dòng)期為10～14分，重度活動(dòng)期≥15分。

2 結(jié) 果

2.12組血清HE4、Anti-CCP及AMH水平比較 觀察組血清HE4、Anti-CCP及AMH水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 2組血清HE4、Anti-CCP及AMH水平比較

2.2活動(dòng)期與非活動(dòng)期患者基本資料及血清HE4、Anti-CCP及AMH水平比較 根據(jù)SLEDAI及SLE疾病活動(dòng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)，將67例SLE患者分為活動(dòng)期37例(55.22%)，非活動(dòng)期30例(44.78%)?；顒?dòng)期與非活動(dòng)期患者性別構(gòu)成、年齡、病程、腎炎及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；活動(dòng)期患者SLEDAI及血清HE4、Anti-CCP、AMH水平均高于非活動(dòng)期患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 基本資料及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)在活動(dòng)期與非活動(dòng)期患者間的比較

2.3血清HE4、Anti-CCP及AMH水平與SLE疾病活動(dòng)度的相關(guān)性分析 采用Pearson相關(guān)分析血清HE4、Anti-CCP及AMH水平與SLE疾病活動(dòng)度的相關(guān)性，結(jié)果顯示，SLE患者血清HE4、Anti-CCP、AMH水平與SLE疾病活動(dòng)度均呈正相關(guān)(r=0.319、0.594、0.482，P<0.05)。

2.4血清HE4、Anti-CCP、AMH水平對(duì)SLE發(fā)生的影響 將血清HE4、Anti-CCP及AMH作為協(xié)變量，SLE發(fā)生作為因變量(0=未發(fā)生SLE，1=發(fā)生SLE)，經(jīng)Logistic回歸分析顯示，血清HE4、Anti-CCP、AMH水平升高可能是誘發(fā)SLE的因素(OR=1.087、1.125、2.982，P<0.05)，見表3。

表3 血清HE4、Anti-CCP及AMH水平對(duì)SLE發(fā)生影響的回歸分析

2.5血清HE4、Anti-CCP、AMH水平對(duì)SLE發(fā)生的診斷價(jià)值 將血清HE4、Anti-CCP及AMH作為檢驗(yàn)變量，將SLE發(fā)生作為狀態(tài)變量(0=未發(fā)生SLE，1=發(fā)生SLE)，評(píng)價(jià)血清HE4、Anti-CCP、AMH水平診斷SLE的診斷價(jià)值，結(jié)果顯示，當(dāng)血清HE4、Anti-CCP、AMH診斷SLE的最佳臨界值分別為52.65 pmol/L、16.25 U/mL、2.83 ng/mL時(shí)，約登指數(shù)最大分別為0.763、0.717、0.684，AUC均>0.8，HE4、Anti-CCP、AMH對(duì)SLE均有一定的診斷價(jià)值，并可獲得最佳診斷價(jià)值，見表4。

表4 血清HE4、Anti-CCP及AMH水平對(duì)SLE的診斷價(jià)值

3 討 論

SLE是一種多因素參與并相互作用而引起的復(fù)發(fā)自身免疫性疾病，常導(dǎo)致機(jī)體多臟器及組織損傷，SLE具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前主要認(rèn)為與遺傳、免疫、性激素等因素密切相關(guān)[11]。SLE發(fā)病呈女性優(yōu)勢(shì)，男女發(fā)病率占比約為1∶9，針對(duì)這種女性優(yōu)勢(shì)的原因尚未明確，推測(cè)均可能與性激素水平相關(guān)[12]。此外，SLE主要以活動(dòng)期和非活動(dòng)期交替及重型和輕型之間轉(zhuǎn)化為特征，故延緩SLE疾病進(jìn)程，促使SLE長(zhǎng)期穩(wěn)定在疾病緩解狀態(tài)是目前治療SLE的主要目標(biāo)[13]。

HE4是一種由124個(gè)氨基酸組成的N-糖基化蛋白質(zhì)，屬于一種跨界蛋白酶抑制劑[14]。研究顯示，HE4基因?qū)?xì)胞增殖具有明顯抑制作用，可用過ERK通絡(luò)及蛋白類系統(tǒng)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、凋亡及遷移等[15]。血清HE4水平可調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的活化及增殖，促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌及釋放，繼而調(diào)控機(jī)體免疫系統(tǒng)，促使免疫調(diào)節(jié)通路發(fā)生紊亂，誘發(fā)SLE[16]。Anti-CCP是環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段，是將19個(gè)氨基酸殘基組成瓜氨酸肽鏈中的2個(gè)絲氨酸替換成半胱氨酸人工方法合成而來，可能與含瓜氨酸分子的細(xì)胞骨架抗原存在不同抗原決定簇，導(dǎo)致SLE患者機(jī)體內(nèi)Anti-CCP存在一定異質(zhì)性[17]。AMH是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β超家族中的一員，在女性卵泡生長(zhǎng)過程中扮演著重要角色。女性出生時(shí)外周血中幾乎檢測(cè)不到AMH，但在性成熟后可達(dá)到最高水平，直至絕經(jīng)消失，且AMH在整個(gè)月經(jīng)周期均呈穩(wěn)定表達(dá)，比卵泡刺激素及黃體生成素能更加客觀地反映卵巢儲(chǔ)備功能[18-19]。AMH主要由卵巢顆粒細(xì)胞產(chǎn)生，可通過位于顆粒細(xì)胞及膜細(xì)胞上的AMHⅡ型受體發(fā)揮作用，能間接或直接降低生長(zhǎng)卵泡對(duì)卵泡刺激素的應(yīng)答，繼而通過抑制卵泡刺激素依賴性的卵泡發(fā)育及優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇，間接抑制卵泡成熟[20]。本研究顯示，觀察組患者血清HE4、Anti-CCP、AMH水平均高于對(duì)照組，且活動(dòng)期患者高于非活動(dòng)期，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，初步提示HE4、Anti-CCP、AMH可能參與了SLE的發(fā)生、發(fā)展。

為了分析HE4、Anti-CCP、AMH與SLE的關(guān)系，本研究進(jìn)一步做了直線相關(guān)性、線性回歸、ROC曲線分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SLE患者血清HE4、Anti-CCP、AMH水平與SLE疾病活動(dòng)程度均呈正相關(guān)(r=0.594、0.482,P<0.05)，血清HE4、Anti-CCP、AMH水平升高可能是誘發(fā)SLE的因素，血清HE4、Anti-CCP、AMH對(duì)SLE的診斷均有一定價(jià)值，可用于SLE的早期風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及診治指導(dǎo)。但本研究作為回顧性分析，納入研究樣本量較少，且尚未對(duì)患者用藥情況分析，研究結(jié)果的準(zhǔn)確性及可信度尚需進(jìn)一步增加研究樣本量，進(jìn)行前瞻性大樣本研究加以證實(shí)。

綜上所述，血清HE4、Anti-CCP、AMH水平升高可能參與了SLE的發(fā)生與發(fā)展，并與SLE患者的疾病活動(dòng)度密切相關(guān)。臨床上可考慮通過檢測(cè)HE4、Anti-CCP、AMH水平以評(píng)估SLE的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)及病情發(fā)展情況，為SLE的早期防治提供依據(jù)。