• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鈍葉草葉斑病病原鑒定

    2021-06-15 13:25:56鄭金龍劉文波賀春萍易克賢習(xí)金根粱艷瓊GbokieJrThomas吳楊
    熱帶作物學(xué)報 2021年4期
    關(guān)鍵詞:葉斑病

    鄭金龍 劉文波 賀春萍 易克賢 習(xí)金根 粱艷瓊 Gbokie Jr Thomas 吳楊

    摘? 要:為鑒定鈍葉草葉斑病的病原,通過對61份來自中國海南、廣東、廣西、云南、福建、江蘇,以及美國和南非的疑似鈍葉草葉斑病的葉片樣品進(jìn)行分離培養(yǎng),獲得120個菌株,對其進(jìn)行純化培養(yǎng)、形態(tài)學(xué)觀察、致病性測定,利用來自海南的鈍葉草為靶標(biāo)寄主,并利用rDNA-ITS、GAPDH、TUB2引物對55號菌株進(jìn)行分析鑒定。結(jié)果表明,經(jīng)柯赫氏法則驗證40株菌株不致病,70株致病性較弱,10株致病性強(qiáng);選擇55號致病性強(qiáng)菌株,進(jìn)行形態(tài)觀察,初步確定該病的病原菌為新月彎孢霉(Culvularia lunata),經(jīng)3種引物的PCR擴(kuò)增測序鑒定,和C. lunata相似性達(dá)到99%,進(jìn)一步確定鈍葉草葉斑病的致病菌為新月彎孢霉。研究結(jié)果將為今后對鈍葉草葉斑病的發(fā)病規(guī)律、防治方法及抗病機(jī)制等方面的研究提供理論依據(jù)。

    關(guān)鍵詞:鈍葉草;葉斑病;新月彎孢菌;病原菌鑒定;致病性測定

    中圖分類號:S436.8? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A

    Identification of the Pathogen of Stenotaphrum helferi Leaf Spot

    ZHENG Jinlong1, LIU Wenbo2*, HE Chunping1, YI Kexian1*, XI Jingen1, LIANG Yanqiong1, Gbokie Jr Thomas3, WU Yang4

    1. Environment and Plant Protection Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences / Key Laboratory of Integrated Pest Management on Tropical Crops, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Haikou, Hainan 571101, China; 2. College of Plant Protection, Hainan University, Haikou, Hainan 570228, China; 3. College of Plant Protection, Nanjing Agricultural University, Nanjing, Jiangsu 210095, China; 4. School of Life Sciences, Jinggangshan University, Jian, Jiangxi 343009, China

    Abstract: This study aimed to identify the pathogen of the leaf spot of Stenotaphrum helferi. A total of 61 leaf samples of S. helferi with suspected leaf spot disease were collected from six provinces in China (Hainan, Guangdong, Guangxi, Yunnan, Fujian and Jiangsu), the United States and the South Africa. The potential causal agents were isolated and 120 bacterial strains were obtained. The strains were identified in morphology, and by conducting pathogenicity assay in the accesions from Hainan. In addition, the strains were identified by the PCR method based on the rDNA internal transcribed spacer region (rDNA-ITS), glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) and β-tubulin (TUB2) sequences. The analysis followed Koch's law and showed 40 strains with no pathogenisis, 70 strains with weak pathogenisis, and 10 strains with strong pathogenisis. The strains of No.55 with strong pathogenisis were selected for morphological observation, and the pathogens of the disease were preliminarily determined. Sequence identities of rDNA-ITS, GAPDH and TUB2 between No.55 strains and Curvularia lunata reached 99%, suggesting that the pathogenic bacteria of the leaf spot in S. helferi was C. lunata. Our findings would provide data to support future studies on the epidemiology, resistance mechanism and control strategy of the leaf spot disease of bluestocked grass.

    Keywords: Stenotaphrum helferi; leaf spot; Curvularia lunata; pathogen identification; pathogenicity assay

    DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.04.026

    鈍葉草(Stenotaphrum helferi)為禾本科(Gramineae)鈍葉草屬(Stenotaphrum)的多年生草本植物,是一種新型、優(yōu)良的暖季型草坪草。因其抗寒性較差[1],適宜在熱帶與亞熱帶氣候條件下生長[2],除具有耐陰性強(qiáng)[3]、抗旱性好[4],具有一定的抗病性[5-6],土壤適應(yīng)性強(qiáng)、再生力強(qiáng)的生物學(xué)特性,還有耐踐踏、綠期較長、耐淹濕[7]等優(yōu)良性狀,適合用于城市的高架橋,疏林地帶的綠化植被,也可以用做草坪草[8]。

    據(jù)文獻(xiàn)報道,鈍葉草病害約15種,病原菌約36種[5],主要包括尾孢菌葉斑病(Cercospora festucae Hardison)、幣斑病(Sclerotinia homoeocarpa F. T. Bennett)、霜霉病(Sclerospora macrospora Sacc.)、蘑菇圈(Agaricals)、灰斑病(Pyricularia grisea Sacc.)[9-12]、絲核菌葉斑?。≧hizoctoria oryzae Ryk. et Gooch)[13]、散黑粉病(Ustilago affinis Ell. & Ev.)[11]、黑孢枯萎?。∟igrospora sphaerica Mason)[11]、褐曲?。≧hizoctonia solani Kuhn)[10, 11, 13]、根腐?。℅aeumannomyces graminis Var.graminis Arx. & D. Oliver)[14]、銹病(Puccinia stenotaphri)[9-11]、葉鞘腐爛病(Rhizoctoria oryzae Ryk. et Gooch)[13]、粘菌病(Fuligo spp.)[13]、鈍葉草衰退病(Panicum mosaic virus)[10-11]等。其中已報道在我國福建的花斑鈍葉草上發(fā)生比較普遍的是尾孢菌葉斑病[15]。但由新月彎孢霉(Curvularia lunata)引起的鈍葉草葉斑病在我國尚未見報道。

    新月彎孢菌屬無性型真菌彎孢霉屬,其有性態(tài)為新月旋孢腔菌(Cochliobolus lunata Nelson & Haasis),屬于子囊菌門旋孢腔菌屬真菌(Cochliobolus),二者是異源的[16]。新月彎孢菌(Curvularia lunata,有性態(tài)Cochliobolus lunata)是一種常見的植物病原菌,其寄生兼營腐生,該菌可以侵染水稻、玉米、辣椒、香蕉、番茄、高粱、唐菖蒲等多種作物[17],引起玉米葉斑病、高粱葉枯病、大麻葉斑病、甘蔗幼苗枯萎病等[18],該菌甚至對人體也有致病性,可引起真菌性角膜炎、足菌腫和腹膜炎等疾病[19],是少見的條件致病菌。由新月彎孢菌引起的鈍葉草葉斑病是鈍葉草生產(chǎn)上最為嚴(yán)重的病害之一,多從葉軸發(fā)病,引起葉片大面積枯萎,重則致其枯死。本研究通過病原菌分離純化、形態(tài)學(xué)觀察、致病性測定和分子生物學(xué)鑒定等手段對61份鈍葉草品種(系)的葉斑病進(jìn)行病原鑒定,以期為該病害的綜合防治提供理論依據(jù)。

    1? 材料與方法

    1.1? 材料

    61份鈍葉草材料收集自中國的海南、福建、廣西、廣東、江蘇、云南,以及美國和南非等不同原產(chǎn)地(表1),種質(zhì)資源種植在海南大學(xué)熱帶農(nóng)林學(xué)院實驗基地。每份材料采1份共采取61份疑似鈍葉草葉斑病病葉作為實驗材料。

    1.2? 方法

    1.2.1? 致病菌分離純化? 采用常規(guī)組織分離法從葉片病斑處分離病原菌[20],后切取大小約4~5 mm的組織塊,用75%的乙醇浸30 s,0.1%升汞表面消毒2~3 min,然后用無菌水沖洗3次,之后將其分別轉(zhuǎn)移到馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上。放置于28 ℃全光照恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),觀察并記錄病原菌的生長情況。

    1.2.2? 致病性測定? (1)損傷接種測定。選取分離的病原菌,用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)搖菌,使孢子濃度為107個/mL。從田間采集61份健康、大小均一的鈍葉草植株,每株含12~14片健康新鮮的葉片。將葉片放置于保鮮盒進(jìn)行刺傷接種,每片葉接種1處(具體操作:搖勻病菌,用移液器移50 μL孢子懸浮液于葉片刺傷處),接種處以薄脫脂棉保濕,然后全部用油紙袋封好做保濕處理,7 d后觀察并記錄發(fā)病情況。

    (2)非損傷接種測定。選取分離的病原菌,用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)搖菌,使孢子濃度為107個/mL。從田間采集61份健康、大小均一的鈍葉草植株,每株含12~14片健康新鮮葉片。將其放置在三角瓶中進(jìn)行扦插水培,待恢復(fù)生長24 h后接種。將孢子懸浮液均勻噴霧于所有的葉片上,對照組噴清水。共噴2次,間隔3 d噴第2次。實驗植株全部放在透明的大塑料箱中,用油紙袋封好做保濕處理,7 d后觀察并記錄發(fā)病情況,選取致病性最強(qiáng)的菌株做后續(xù)的實驗。

    1.2.3? 病原菌形態(tài)學(xué)鑒定? 將1.2.2篩選出的致病性最強(qiáng)的病原菌分別接種到水瓊脂(WA)培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上,經(jīng)過28 ℃全光照恒溫培養(yǎng)一段時間,待生長出菌落,?觀察并記錄菌落的培養(yǎng)性狀,包括菌落的形狀、顏色、氣生菌絲的有無及其是否發(fā)達(dá)。

    病原菌形態(tài)觀察包括觀察分子孢子類型、大小、形狀、分隔數(shù);孢子梗的形態(tài)、長度、寬度和顏色等。

    1.2.4? 病原菌分子鑒定? PCR序列擴(kuò)增和測序。提取DNA后,分別利用ITS、GAPDH和TUB2基因的部分序列引物對基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,引物序列、退火溫度及延伸時間等見表2。

    PCR體系總體積為25 μL:0.1 μL TaqDNA聚合酶(5U/μL);2.5 μL Loading buffer(含Mg2+);2 μL dNTPs;1 μL引物(10 μmol/L);2 μL模板DNA,用滅菌ddH2O補足25 μL。后用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物,拍照記錄,并采用凝膠成像系統(tǒng)分析片段的大小,目的片段經(jīng)回收送往深圳華大基因科技有限公司進(jìn)行測序。

    病原菌rDNA~I(xiàn)TS序列同源性比較。在NCBI數(shù)據(jù)庫檢索測序所得的基因部分序列后,得到序列號分別為:引物ITS對應(yīng)系列號為HF934911,引物GAPDH對應(yīng)系列號為MG018252,引物TUB2對應(yīng)系列號為KT021349。經(jīng)過MEGA 6.0軟件的“W”功能比對校正后,用Bootstrap test構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,并采用Neighbor joining法計算遺傳距離。同時對病原菌分別進(jìn)行ITS、TUB2和GAPDH單基因聚類分析,并將基因按照ITS~ GAPDH~TUB2的順序進(jìn)行序列拼接后重新采用上述方法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,以進(jìn)一步分析確定該病原菌。

    2? 結(jié)果與分析

    2.1? 病害癥狀

    新月彎孢霉鈍葉草葉斑病是一種真菌病害,發(fā)病初期,病部出現(xiàn)半透明小斑點,呈淡黃色或水漬狀;隨后,病斑逐漸擴(kuò)大,在病葉產(chǎn)生沿葉軸平行伸長的深褐色、邊緣褪綠的橢圓形或不規(guī)則病斑;發(fā)病后期,病斑中央呈黃褐色或灰白色,且產(chǎn)生一些黑色小粒點,環(huán)境潮濕時發(fā)病嚴(yán)重,產(chǎn)生灰白色霉層和大量分生孢子(圖1),重則整葉枯黃至死亡。

    2.2? 病原菌分離和致病力測定

    共分離獲得120份菌株,通過損傷接種和非損傷接種2種方法分別對這些分離菌株進(jìn)行病原菌致病力測定,經(jīng)觀察,結(jié)果表明,2種接種方法均能使葉片發(fā)病,且癥狀與初始分離所選的葉片病癥相同(圖1),發(fā)病癥狀和發(fā)病時間無明顯區(qū)別。以接種后發(fā)病葉片作為分離材料再次進(jìn)行分離,重復(fù)接種后,所得病原菌與初次分離所得菌落在分生孢子形態(tài)等方面相同(圖1),符合柯赫氏法則。經(jīng)柯赫氏法則驗證,40株菌株不致病,70株致病較弱,10株致病性強(qiáng),其中55號菌株經(jīng)2種方法接種,其發(fā)病面積最大,說明其致病性最強(qiáng)。

    2.3? 病原菌形態(tài)特征

    病原菌在馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上28 ℃全光照恒溫培養(yǎng)4 d后菌落直徑超過5 cm,7 d后長滿培養(yǎng)基,直徑約為9 cm。菌絲體呈絨毛狀,初始為白色,后隨著培養(yǎng)時間增加,由中央向邊緣部位漸變?yōu)榈撞炕液谏厦娌紳M灰白色絨毛狀菌絲;培養(yǎng)基背面在第3天起中部呈灰黑色,近邊緣處呈黃色,后期全部變?yōu)樗{(lán)黑色。分生孢子呈淡褐色,梭形,具3個隔膜,由基部向上第3個細(xì)胞較大;分生孢子梗呈深褐色,有橫膈,頂端多彎曲(圖2)。分生孢子測量大小為(19.39~37.45)μm×(7.78~15.80)μm,分生孢子梗測量大小為(40.41~224.92)μm×(3.84~7.69)μm。通過以上對培養(yǎng)性狀和形態(tài)學(xué)的觀察,并進(jìn)行相關(guān)資料的查閱[21-23],可初步鑒定引起該病害的病原菌為彎孢霉屬(Curvularia sp.)新月彎孢霉(C. lunata)。

    2.4? 病原菌的分子鑒定

    分別利用ITS、GAPDH和TUB2基因的部分序列引物對55號菌株基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,后用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物(圖3)。目的片段經(jīng)回收測序后,應(yīng)用核酸數(shù)據(jù)庫中的BLAST軟件,在DNA序列數(shù)據(jù)庫中檢索出同源DNA序列并比較分析。根據(jù)與其親緣關(guān)系較近的DNA序列進(jìn)行比對,顯示均為新月彎孢菌基因組。根據(jù)ITS、TUB2和GAPDH部分序列分別做聚類分析,然后根據(jù)ITS~GAPDH~TUB2這3個基因序列拼接后聚類(圖4)。結(jié)果與各單基因分析類似,進(jìn)一步表明可以將該病原菌歸屬于新月彎孢霉屬。

    3? 討論

    鈍葉草葉斑病是目前鈍葉草生產(chǎn)上的最主要病害之一,特別是海南高溫高濕的氣候環(huán)境,更有利于該病的暴發(fā)流行。本研究從61份疑似鈍葉草葉斑病的葉片中分離到120個菌株,通過形態(tài)觀察,并經(jīng)文獻(xiàn)比對[21-23],確定均為彎孢屬。但是絕大部分菌株不致病或致病性較弱,只有少部分比較強(qiáng),這可能與彎孢菌為弱寄生而又能腐生的習(xí)性有關(guān),這與金敏忠等[17]的研究結(jié)果一致。另外,實驗只選取來自海南的鈍葉草葉片為靶標(biāo),可能其他的鈍葉草屬對該病原菌具有抗性,這有待于后期的研究進(jìn)一步驗證。

    國外對彎孢霉的研究較早,馬丁于1936年報道了由C. lunata嚴(yán)重侵染水稻引起的谷粒變色[24]。1956年,Nelson等[25]報道了玉米彎孢霉葉斑病的發(fā)生,此后,Mandokhot[26]、Macrì[27]及Gao等[28]在20多個國家也相繼報道了該病[29]。我國對彎孢霉的研究起步較晚,1972年出版的《中國真菌總匯》中報道了5種彎孢菌[30],1979年出版的《真菌鑒定手冊》報道了4個種[31],張猛等[32-34]從形態(tài)分類與RAPD技術(shù)相結(jié)合的方式解決了彎孢屬種間的分類。近年來,在Plant Disease上關(guān)于病原物為彎孢屬的報道較多,Chen等[35]首次報道了郁金香葉斑病病原棒彎孢(Curvularia clavata),Bagwari等[36]也報道了由畫眉草彎孢霉(C. eragrostidis)引起的楊樹葉片葉斑病,但未見彎孢霉侵染鈍葉草的報道。

    本研究僅對鈍葉草葉斑病病原菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、致病性測定和分子生物學(xué)鑒定,明確了該病的病原菌為新月彎孢霉(C. lunata),這對于該病害的防治具有指導(dǎo)意義。但由于新月彎孢霉一年四季均可侵染鈍葉草引發(fā)葉斑病,病原菌不需要越冬,而且由于南方地區(qū)高溫高濕的環(huán)境特征,導(dǎo)致該病易發(fā)、頻發(fā),因此,防治鈍葉草葉斑病除了選用低毒高效的殺菌劑外,還需加強(qiáng)人工栽培管理措施,盡可能減少植株機(jī)械傷口,以減少病原菌侵入,達(dá)到鈍葉草作為一種新型草坪草的最佳利用效果。

    參考文獻(xiàn)

    [1]何會蓉, 李志東, 周而衛(wèi), 等. 幾種暖季型草坪草對低溫的生理反應(yīng)[J]. 草地學(xué)報, 2008, 16(2): 150-153.

    [2]徐毓皎, 周宇杰, 羅? 瑛, 等. 鈍葉草鹽脅迫的臨界濃度初步研究[J]. 草業(yè)科學(xué), 2018, 3(4): 816-821.

    [3]黃? 娟, 夏漢平, 蔡錫安. 遮光處理對三種鈍葉草的生長習(xí)性與光合特性的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志, 2006, 25(7): 759-764 .

    [4]葛晉綱. 高羊茅和鈍葉草對干旱脅迫的適應(yīng)性及生理響應(yīng)[D]. 南京: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 2004.

    [5]翁啟勇, 何玉仙, 余德億, 等. 鈍葉草的病害種類及癥狀[J]. 國外畜牧學(xué)(草原與牧草), 1995(4): 26-27, 32.

    [6]余德億, 湯葆莎, 翁啟勇. 幾種暖季型草坪草病害及病原種類[J]. 草業(yè)科學(xué), 2001, 18(4): 60-64.

    [7]盧雪琴, 夏漢平, 彭長連. 淹水對5種禾本科植物光合特性的影響[J]. 福建林學(xué)院學(xué)報, 2004(4): 374-378.

    [8]黃? 娟, 夏漢平, 楊冰冰. 一種新的暖季型草坪草—鈍葉草[J]. 草原與草坪, 2004(2): 61-62.

    [9]沈瑞詳, 段道懷, 周仲銘. 花木病蟲害[M]. 北京: 中國建筑工業(yè)出版社, 1987: 25-26.

    [10]李? 敏. 草坪品種指南[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 1990: 124-134.

    [11]Coueh H B. Conrmon Names for plant diseases[J]. Plant Disease, 1985, 69(8): 672-675.

    [12]Haygood R A. Geographical and seasonal distribution of turfgrass diseases in Mississippi[J]. Plant Disease Reported, 1979, 63(10): 852-855.

    [13]Haygood R A. Characterization and pathgenicity of species of Rhizoctonia associated with centipedegrass and St. Augustinerass in South Caroline[J]. Plant Disease, 1990, 74(7): 510-514.

    [14]Elliott M L. Fungi similar to Gaeumannomyces associated with root rot ofterfgrass in Floride[J]. Plant Disease, 1991, 75(3): 238-241.

    [15]翁啟勇, 王青松, 何玉仙, 等. 福建草坪草病害初報[J]. 草業(yè)學(xué)報, 1997, 6(2): 70-73.

    [16]Nelson R R, Haasis F A. The perfect stage of Curvularia lunata[J]. Mycologia, 1964, 56(2): 316-317.

    [17]金敏忠, 柴榮耀, 張慶生. 彎孢菌(Curvularia)對大、小麥致病性的初步研究[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué), 1991(2): 93-95.

    [18]Lanisnik R T, Wheeler M H. Melanin biosynthesis in the fungus Curvularia lunata (teleomorph: Cochliobolus lunatus)[J]. Canadian Journal of Microbiology, 2003, 49(2): 110-119.

    [19]李和蓮. 腹膜透析伴發(fā)新月彎孢霉腹膜炎[J]. 國外醫(yī)學(xué). 皮膚性病學(xué)分冊, 1995, 21(5): 314- 315.

    [20]孫廣宇, 宗兆峰. 植物病理學(xué)實驗技術(shù)[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2002: 142-144.

    [21]鄭? 楠, 趙? 敏. 真菌新月彎孢霉的研究進(jìn)展[J]. 黑龍江醫(yī)藥, 2010(2): 165-167.

    [22]方中達(dá). 植病研究方法[M]. 北京: 農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 1998: 110-111.

    [23]謝聯(lián)輝. 普通植物病理學(xué)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2006: 117.

    [24]Ou S H. Rice diseases[M]. 2nd Edition, Commonwealth Mycological Institute, Kew, 1985.

    [25]Nelson R R, Blanco M, Dalmacio S, et al. A new race of Helmintho sporium carbonum on corn[J]. Plant Disease Reporter, 1973.

    [26]Mandohkot A M, Singh D P, Kcb C, et al. Chemical changes in maize leaves in response to leaf spot pahtogens[J]. Indian Phytopahtology, 1979, 32(4): 658-660.

    [27]Macrì F, Vianello A. Isolation and partial characterization of phytotoxins from Curvularia lunata (Wakk.) Boed[J]. Physiological Plant Pathology, 1976, 8(3): 325-331.

    [28]Gao J X, Liu T, Chen J, et al. Identification of proteins associated with the production of methyl 5-(hydroxymethyl) furan-2-carboxylate toxin in Curvularia luncta[J]. Tropical Plant Pathology, 2015, 40(2): 1-8.

    [29]鄢洪海, 高增貴, 陳? 捷, 等. 玉米彎孢菌葉斑病研究進(jìn)展[J]. 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 1999, 30(3): 369-371.

    [30]戴芳瀾. 中國真菌總匯[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1979: 801-806.

    [31]魏景超. 真菌鑒定手冊[M].上海: 上??茖W(xué)技術(shù)出版, 1979: 780.

    [32]張? 猛, 武海燕, 陳文超, 等. 彎孢屬斑點組種間隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)分析[J]. 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 2009, 43(5): 548-551.

    [33]張? 猛, 武海燕, 裴洲洋, 等. 彎孢屬—新種和一新變種[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報, 2007, 20(5): 1144-1145.

    [34]張? 猛, 謝桂英, 劉建華, 等. 禾本科植物上的彎孢屬真菌[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué), 2006(11): 58-60.

    [35]Chen X Y, Feng J D, Su Z, et al. First report of Curvularia leaf blight on Curcuma wenyujin caused by Curvularia clavata in China[J]. Plant Disease, 2013(1): 36-38.

    [36]Bagwari A, Singh Y P, Kumar J, et al. First report of Curvularia eragrostidis leaf spot on Populus deltoids[J]. Forest Pathology, 2015, 45(1): 86-87.

    責(zé)任編輯:謝龍蓮

    猜你喜歡
    葉斑病
    不同植物免疫誘抗劑與10%葉菌唑懸浮劑混配對甜葉菊葉斑病及產(chǎn)量的影響
    番茄糖轉(zhuǎn)運蛋白SlSTP2在防御細(xì)菌性葉斑病中的功能
    “二月蘭葉斑病菌甘藍(lán)鏈格孢生物學(xué)特性觀察實驗”的教學(xué)設(shè)計
    甘肅教育(2021年10期)2021-11-02 06:14:26
    不同施氮量對花生葉片衰老和產(chǎn)量的影響
    蘭花真菌性葉斑病研究進(jìn)展
    芹菜葉斑病的識別及綜合防控技術(shù)
    玉米葉斑病綜合防治技術(shù)
    雪蓮果鐮刀葉斑病病原菌鑒定及殺菌劑室內(nèi)毒力測定
    芒萁葉斑病病原菌分離鑒定和生物學(xué)特性
    花生青枯病與葉斑病的發(fā)生及防治
    欧美人与善性xxx| 三级国产精品欧美在线观看| 日本欧美国产在线视频| 欧美日韩乱码在线| 舔av片在线| 国产成年人精品一区二区| 日日撸夜夜添| 深夜精品福利| 亚洲自偷自拍三级| 免费电影在线观看免费观看| 精品一区二区免费观看| 在线免费观看的www视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 久久久国产成人精品二区| 99久久精品一区二区三区| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲自偷自拍三级| 国产淫片久久久久久久久| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 久久鲁丝午夜福利片| 午夜福利在线在线| 欧美性感艳星| 91精品国产九色| 久久亚洲国产成人精品v| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 高清日韩中文字幕在线| 俺也久久电影网| 久久精品国产亚洲av天美| 搞女人的毛片| 日本与韩国留学比较| av中文乱码字幕在线| 99国产精品一区二区蜜桃av| 午夜a级毛片| 欧美日韩在线观看h| 一个人看视频在线观看www免费| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美潮喷喷水| 尾随美女入室| 日韩精品中文字幕看吧| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 免费人成视频x8x8入口观看| 俺也久久电影网| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品久久久久久久久免| 99热全是精品| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 嫩草影院入口| 性插视频无遮挡在线免费观看| 色播亚洲综合网| 99国产精品一区二区蜜桃av| 日韩高清综合在线| 国内精品宾馆在线| 久久久久九九精品影院| 国内精品宾馆在线| 人妻少妇偷人精品九色| 秋霞在线观看毛片| 少妇熟女欧美另类| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 99在线视频只有这里精品首页| 久久久久性生活片| 午夜久久久久精精品| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲va在线va天堂va国产| 久久久国产成人免费| 成人二区视频| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久久久国产网址| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产精品免费一区二区三区在线| 舔av片在线| 97热精品久久久久久| 国产麻豆成人av免费视频| 色av中文字幕| 可以在线观看毛片的网站| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产极品精品免费视频能看的| 久久久午夜欧美精品| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 中出人妻视频一区二区| 欧美潮喷喷水| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 人妻久久中文字幕网| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲色图av天堂| 亚洲av中文av极速乱| 国产精品免费一区二区三区在线| 日韩欧美免费精品| 久久午夜亚洲精品久久| 午夜福利成人在线免费观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 免费av不卡在线播放| 欧美又色又爽又黄视频| 国产精品久久久久久精品电影| 综合色av麻豆| 春色校园在线视频观看| 国产精品久久久久久久久免| 国产av麻豆久久久久久久| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲国产精品合色在线| 男女那种视频在线观看| 免费av观看视频| 听说在线观看完整版免费高清| 久久韩国三级中文字幕| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 国产淫片久久久久久久久| 国产亚洲欧美98| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 日韩欧美 国产精品| 村上凉子中文字幕在线| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲av不卡在线观看| 成人欧美大片| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 成人美女网站在线观看视频| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 乱人视频在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产成人aa在线观看| 三级毛片av免费| 最近最新中文字幕大全电影3| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲高清免费不卡视频| 乱系列少妇在线播放| 免费看av在线观看网站| 欧美国产日韩亚洲一区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 赤兔流量卡办理| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品国产高清国产av| 精品熟女少妇av免费看| 欧美又色又爽又黄视频| 哪里可以看免费的av片| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | .国产精品久久| 91av网一区二区| 搡老岳熟女国产| 黑人高潮一二区| 我要搜黄色片| 久久精品夜色国产| 性欧美人与动物交配| 国产成人a区在线观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 在线播放无遮挡| 99久久成人亚洲精品观看| 久久久欧美国产精品| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲av美国av| 亚洲精品久久国产高清桃花| 黄色视频,在线免费观看| 俺也久久电影网| 国产精品久久电影中文字幕| 国产av一区在线观看免费| 午夜日韩欧美国产| 看十八女毛片水多多多| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产一区亚洲一区在线观看| videossex国产| 最近最新中文字幕大全电影3| 少妇熟女aⅴ在线视频| 免费观看在线日韩| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 香蕉av资源在线| 久久久久久大精品| 中国国产av一级| 精品欧美国产一区二区三| 成人鲁丝片一二三区免费| 日本一本二区三区精品| 久久精品国产亚洲av涩爱 | h日本视频在线播放| av在线蜜桃| 一a级毛片在线观看| 亚洲av一区综合| 午夜精品在线福利| 欧美成人精品欧美一级黄| 尾随美女入室| 永久网站在线| 欧美bdsm另类| av在线播放精品| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 男人舔女人下体高潮全视频| 色吧在线观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 综合色丁香网| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲成a人片在线一区二区| 十八禁国产超污无遮挡网站| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲乱码一区二区免费版| 免费av毛片视频| 成人漫画全彩无遮挡| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产大屁股一区二区在线视频| 中文资源天堂在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 我的女老师完整版在线观看| 中国国产av一级| 国模一区二区三区四区视频| 麻豆av噜噜一区二区三区| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产 一区精品| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| videossex国产| 在线播放国产精品三级| 最近最新中文字幕大全电影3| 欧美+日韩+精品| 午夜福利高清视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲va在线va天堂va国产| 欧美成人免费av一区二区三区| 老女人水多毛片| 在线观看免费视频日本深夜| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产高清三级在线| 在线国产一区二区在线| 22中文网久久字幕| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产精品一区www在线观看| 亚洲第一电影网av| 欧美+日韩+精品| 12—13女人毛片做爰片一| 国产高清激情床上av| 国产精品女同一区二区软件| 日本欧美国产在线视频| 中文字幕免费在线视频6| 搞女人的毛片| 久久精品人妻少妇| 日韩强制内射视频| 春色校园在线视频观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 在线国产一区二区在线| 波多野结衣高清无吗| 国产高清视频在线观看网站| 色播亚洲综合网| 校园春色视频在线观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 一进一出抽搐gif免费好疼| 天堂√8在线中文| 97热精品久久久久久| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美日本视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产黄a三级三级三级人| 最后的刺客免费高清国语| 91精品国产九色| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产欧美日韩精品一区二区| 精品福利观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 丝袜美腿在线中文| 午夜爱爱视频在线播放| 日韩成人伦理影院| 亚洲成人久久性| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产精品三级大全| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜久久久久精精品| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 日韩强制内射视频| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 一进一出抽搐gif免费好疼| 少妇人妻一区二区三区视频| 舔av片在线| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产av一区在线观看免费| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产三级中文精品| 亚洲熟妇熟女久久| 最后的刺客免费高清国语| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产成人freesex在线 | 乱人视频在线观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产久久久一区二区三区| 久久亚洲国产成人精品v| 91狼人影院| 亚洲乱码一区二区免费版| 舔av片在线| 日韩亚洲欧美综合| 成人欧美大片| 搞女人的毛片| 男女啪啪激烈高潮av片| 哪里可以看免费的av片| 一个人免费在线观看电影| 最近的中文字幕免费完整| 内地一区二区视频在线| 尾随美女入室| 午夜福利18| 国产av不卡久久| 99九九线精品视频在线观看视频| 夜夜爽天天搞| 老司机福利观看| 看黄色毛片网站| 成年女人看的毛片在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看| 久久久久久大精品| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 久久这里只有精品中国| 两个人视频免费观看高清| 久久久国产成人精品二区| 三级经典国产精品| 亚洲综合色惰| 久久国内精品自在自线图片| 国产高清三级在线| 看十八女毛片水多多多| 国产高清激情床上av| 欧美激情在线99| av黄色大香蕉| 国内精品一区二区在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美成人精品欧美一级黄| 内射极品少妇av片p| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精品久久视频播放| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 黄片wwwwww| av视频在线观看入口| 人妻久久中文字幕网| 美女被艹到高潮喷水动态| 中文字幕av在线有码专区| 看片在线看免费视频| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 黄片wwwwww| 丝袜美腿在线中文| 亚洲第一电影网av| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产欧美日韩精品亚洲av| 可以在线观看的亚洲视频| 看片在线看免费视频| 精品久久久久久久久亚洲| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 国产亚洲精品综合一区在线观看| avwww免费| 欧美成人一区二区免费高清观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 国产成人91sexporn| 亚洲七黄色美女视频| 特大巨黑吊av在线直播| 精品一区二区三区人妻视频| 日日撸夜夜添| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 成人美女网站在线观看视频| 色哟哟哟哟哟哟| 97超视频在线观看视频| 国产精品久久久久久av不卡| 精品久久久久久久久久久久久| 两个人的视频大全免费| 露出奶头的视频| 欧美极品一区二区三区四区| 国内精品一区二区在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久精品欧美日韩精品| 精品午夜福利视频在线观看一区| 三级国产精品欧美在线观看| 91久久精品国产一区二区三区| 成人二区视频| 亚洲成人久久性| 免费看美女性在线毛片视频| 观看免费一级毛片| 91久久精品电影网| 亚洲精品国产成人久久av| 日本三级黄在线观看| 欧美区成人在线视频| 亚洲自偷自拍三级| 99久国产av精品| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产三级在线视频| 亚洲四区av| 亚洲成av人片在线播放无| 国产成人91sexporn| 久99久视频精品免费| 看片在线看免费视频| 黄片wwwwww| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 美女被艹到高潮喷水动态| 日本 av在线| 日韩亚洲欧美综合| 欧美人与善性xxx| 日韩精品青青久久久久久| 岛国在线免费视频观看| 国产色爽女视频免费观看| 91久久精品电影网| 日日摸夜夜添夜夜爱| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 在线观看美女被高潮喷水网站| 高清毛片免费看| 男女啪啪激烈高潮av片| 一个人免费在线观看电影| 久久久久精品国产欧美久久久| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 欧美激情在线99| 九九爱精品视频在线观看| 国产高清视频在线播放一区| av在线天堂中文字幕| 国产精品伦人一区二区| 波野结衣二区三区在线| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 色尼玛亚洲综合影院| 色哟哟哟哟哟哟| av在线天堂中文字幕| 黄色欧美视频在线观看| 国产av在哪里看| 色播亚洲综合网| 久久久久久久久久成人| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲真实伦在线观看| 免费搜索国产男女视频| 欧美极品一区二区三区四区| 91在线观看av| 亚洲成人av在线免费| 色哟哟·www| 级片在线观看| av天堂在线播放| 免费观看的影片在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| av中文乱码字幕在线| 国产真实乱freesex| 黄色一级大片看看| 黄色视频,在线免费观看| 日本在线视频免费播放| 欧美一区二区精品小视频在线| 午夜福利视频1000在线观看| 国产午夜精品论理片| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 免费观看的影片在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲成人久久性| 国产精品爽爽va在线观看网站| 午夜精品国产一区二区电影 | 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 久久亚洲国产成人精品v| 在线观看66精品国产| 黄片wwwwww| 69人妻影院| 黄色欧美视频在线观看| 国产 一区精品| 99riav亚洲国产免费| 国产在视频线在精品| 悠悠久久av| 一本久久中文字幕| 久久久久久久久中文| 国产成年人精品一区二区| 成人漫画全彩无遮挡| 偷拍熟女少妇极品色| eeuss影院久久| 午夜福利在线在线| 色综合站精品国产| 亚洲在线观看片| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 长腿黑丝高跟| 熟女人妻精品中文字幕| 在线a可以看的网站| 卡戴珊不雅视频在线播放| 真人做人爱边吃奶动态| 在线观看一区二区三区| 男女之事视频高清在线观看| 别揉我奶头 嗯啊视频| 我的老师免费观看完整版| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美高清性xxxxhd video| 国产精品久久久久久久久免| 国产高潮美女av| 一进一出抽搐动态| 亚洲中文字幕日韩| 97热精品久久久久久| 中文字幕av在线有码专区| 国产黄a三级三级三级人| 日韩欧美精品免费久久| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美日本视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 六月丁香七月| 亚洲在线观看片| 全区人妻精品视频| 久久久久久九九精品二区国产| 国产精品一区二区三区四区久久| 一进一出抽搐动态| 亚洲欧美日韩东京热| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 成人无遮挡网站| 国产伦一二天堂av在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 99国产极品粉嫩在线观看| videossex国产| 18+在线观看网站| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 色噜噜av男人的天堂激情| 人妻少妇偷人精品九色| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 精品无人区乱码1区二区| 白带黄色成豆腐渣| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产激情偷乱视频一区二区| 男女边吃奶边做爰视频| 十八禁国产超污无遮挡网站| 久久久久久久久久黄片| 亚洲av不卡在线观看| 91久久精品电影网| 成人av在线播放网站| 成年女人看的毛片在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 在线观看66精品国产| 欧美成人一区二区免费高清观看| 婷婷精品国产亚洲av| 美女内射精品一级片tv| 欧美人与善性xxx| 深爱激情五月婷婷| 国产探花在线观看一区二区| 成人三级黄色视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久久久久九九精品二区国产| 成人av在线播放网站| 全区人妻精品视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 中文资源天堂在线| 久久99热这里只有精品18| 99九九线精品视频在线观看视频| 婷婷六月久久综合丁香| 99久国产av精品国产电影| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 中文字幕熟女人妻在线| 国产 一区 欧美 日韩| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 免费看日本二区| 12—13女人毛片做爰片一| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 久久亚洲国产成人精品v| 久久久成人免费电影| 久久久国产成人精品二区| 亚洲精品在线观看二区| 久久国内精品自在自线图片| 两个人的视频大全免费| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 精品久久久久久久末码| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日本爱情动作片www.在线观看 | 日本 av在线| 日本黄色片子视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 精品久久久久久久末码| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产精品,欧美在线| 日本黄色片子视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 成年女人看的毛片在线观看| 日韩欧美精品免费久久| 国产老妇女一区| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 国产亚洲91精品色在线| 国产精品伦人一区二区| 亚洲乱码一区二区免费版| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲电影在线观看av| 欧美色视频一区免费| 欧美三级亚洲精品| 乱系列少妇在线播放| 国产精品一区二区性色av| 亚洲高清免费不卡视频| 亚洲欧美日韩东京热| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲最大成人av| 少妇熟女aⅴ在线视频| а√天堂www在线а√下载| 精品福利观看| 99热这里只有是精品在线观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲av免费在线观看| 国产精品亚洲美女久久久| 国产真实乱freesex| 少妇人妻一区二区三区视频| 在线免费十八禁| 91av网一区二区| 看片在线看免费视频| 午夜亚洲福利在线播放| 老熟妇仑乱视频hdxx| 天堂影院成人在线观看| 国产一区二区激情短视频| 熟女电影av网| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲国产高清在线一区二区三| 精品午夜福利视频在线观看一区| 久久久精品94久久精品|