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    CK和P63與原位雜交EBER在診斷復(fù)發(fā)性鼻咽癌中的價值分析

    2021-06-11 03:03:14陸妹英通訊作者
    醫(yī)藥前沿 2021年7期
    關(guān)鍵詞:原位雜交復(fù)發(fā)性鼻咽癌

    陸妹英,以 敏(通訊作者)

    (柳州市工人醫(yī)院病理科 廣西 柳州 545005)

    鼻咽癌是我國常見的惡性腫瘤之一,多發(fā)于鼻咽黏膜處,據(jù)全國鼻咽癌學(xué)術(shù)會議表明,世界上有80%的鼻咽癌發(fā)生在中國,南方地區(qū)高于北方地區(qū)?;颊甙l(fā)病早期比較隱匿,不易被發(fā)現(xiàn),但是較容易出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移或淋巴結(jié)節(jié)轉(zhuǎn)移情況。臨床研究顯示,鼻咽癌的發(fā)病機制不明確,治療效果有限,患者5年的生存率為50%左右[1]。臨床上對鼻咽癌多應(yīng)用放射治療,但是通過放射治療后依然有20%左右的患者會出現(xiàn)復(fù)發(fā)情況,而且復(fù)發(fā)性鼻咽癌的預(yù)后性較差,再次放射治療后患者5年生存率僅為30%左右[2]。為了判斷患者是否為復(fù)發(fā)性鼻咽癌,本文選取我院200例鼻咽癌患者作為研究對象,探討CK、P63與原位雜交EBER在診斷復(fù)發(fā)性鼻咽癌中的應(yīng)用價值,具體報告如下。

    1.資料與方法

    1.1 一般資料

    選取我院2018年1月—2020年12月200例鼻咽癌患者作為研究對象,其中首發(fā)患者123例,復(fù)發(fā)患者77例。納入標(biāo)準(zhǔn):所有患者均經(jīng)病理診斷確診為鼻咽癌且相關(guān)病例資料完整;復(fù)發(fā)患者在鼻咽癌復(fù)發(fā)之前已經(jīng)確診為鼻咽癌并經(jīng)過相關(guān)放射治療;首發(fā)患者在病理診斷前未經(jīng)過相關(guān)治療。所有患者對本研究知情并簽署同意書。所有鼻咽癌患者中男性152例,女性48例;年齡為12~89歲,平均年齡(65.31±3.25)歲。

    1.2 方法

    原位雜交EBER檢測:實驗設(shè)置外部陰性對照、陽性對照及組織內(nèi)對照,切片組織粘附在APES處理的載玻片上,將切片于65 ℃烘烤1 h之后,脫蠟及水化,進行原位雜交預(yù)處理,雜交,依照泰普生物地高辛染色液試劑說明書操作規(guī)范操作,用三步法檢測組織切片中地高辛標(biāo)記的核酸靶點,用DAB作為底物顯色,在陰、陽性對照成立的基礎(chǔ)上,依據(jù)雜交信號有無判斷結(jié)果,陽性結(jié)果為組織切片中的細胞核見黃色、棕黃色或棕褐色著色,而細胞質(zhì)和細胞膜無著色,只有當(dāng)核分裂時可以出現(xiàn)細胞質(zhì)著色。

    CK、P63免疫組化檢測,實驗設(shè)置外部陰性對照、陽性對照及組織內(nèi)對照,將組織切片于65 ℃烘烤1 h之后,使用羅氏全自動免疫組化染色機,應(yīng)用邁新生物技術(shù)有限公司提供的試劑盒,嚴格按照儀器操作規(guī)程進行免疫組化染色,結(jié)果P63陽性為細胞核呈棕褐色著色,CK陽性為細胞質(zhì)或上皮細胞胞膜呈棕黃色或黃色著色。

    1.3 觀察指標(biāo)

    記錄并分析首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例患者的性別、年齡、組織學(xué)類型、病灶部位等臨床資料;應(yīng)用免疫組化檢測和原位雜交檢測首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例CK、P63與原位雜交EBER水平,并記錄分析。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

    本研究數(shù)據(jù)采取統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 23.0進行數(shù)據(jù)分析,計數(shù)資料以例數(shù)、百分比(n,%)表示,進行χ2檢驗;計量資料以符合正態(tài)分布則用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間比較采用t檢驗;采用Logistic回歸分析分析CK、P63與原位雜交EBER在復(fù)發(fā)性鼻咽癌中的診斷價值;以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2.結(jié)果

    2.1 首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例臨床病理資料比較

    首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例的性別、年齡、組織學(xué)類型和病灶部位比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),見表1。

    表1 首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例臨床病理資料對比分析(例)

    2.2 首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例CK、P63與原位雜交EBER表達分析

    復(fù)發(fā)病例的CK、P63與原位雜交EBER表達陽性人數(shù)高于首發(fā)病例,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

    2.3 CK、P63與原位雜交EBER在復(fù)發(fā)性鼻咽癌中的診斷價值

    Logistic回歸分析結(jié)果顯示:CK、P63與原位雜交EBER并非復(fù)發(fā)性鼻咽癌的獨立診斷指標(biāo)(P>0.05),聯(lián)合診斷對復(fù)發(fā)性鼻咽癌具有診斷價值(P<0.05),見表3。

    表3 CK、P63與原位雜交EBER在復(fù)發(fā)性鼻咽癌中的診斷價值

    3.討論

    鼻咽癌病理診斷中常應(yīng)用原位雜交與免疫組化,其中主要包含CK、P63與原位雜交EBER檢測,其中CK屬于上皮細胞的標(biāo)記物,能夠勾畫出細胞的輪廓,顯微鏡下可看到呈篩孔狀或網(wǎng)狀排列,而且大多患者會呈陽性表達情況。而P63為基底細胞標(biāo)志物,P36主要表達臨床上皮源性惡性腫瘤,在腺癌中幾乎不表達。而且臨床研究顯示,在鼻咽癌患者中P63高表達可能是鼻咽癌發(fā)生的早期事件[3]。EB病毒(EBV)是γ皰疹病毒科的一員,它的編碼小分子RNA-EBER在EB病毒感染細胞核中會出現(xiàn)高拷貝現(xiàn)象。所以,應(yīng)用原位雜交法能夠特異性的進行EBV檢測,其主要原理是應(yīng)用EBER特有的序列設(shè)計特異性探針和EBER的靶序列互相結(jié)合、互補,達到檢測目的。原位雜交EBER檢測可以準(zhǔn)確定位細胞,明確組織細胞中EB病毒的位置及感染程度,有利于病理診斷及分級。大量研究表明,EB病毒在鼻咽癌患者體內(nèi)參與了疾病的發(fā)生與惡變的過程,幾乎所有鼻咽癌患者的癌組織之中都能夠檢測出EB病毒特異性抗體與DNA[4-5]。由此可見,應(yīng)用CK、P63與原位雜交EBER對復(fù)發(fā)性鼻咽癌診斷是具有科學(xué)依據(jù)的。

    本研究結(jié)果表明,首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例的性別、年齡、組織學(xué)類型和病灶部位對比無明顯差異(P>0.05),由此證明,無論是首發(fā)病例還是復(fù)發(fā)病例患者的性別、年齡、組織學(xué)類型和病灶部位都沒有明顯差異。相關(guān)研究顯示,首發(fā)鼻咽癌患者超過5年之后可能是因為新的腫瘤而導(dǎo)致復(fù)發(fā)[6],因此,可能與患者的病理情況無明顯關(guān)系;首發(fā)病例與復(fù)發(fā)病例的CK、P63與原位雜交EBER表達對比差異顯著,復(fù)發(fā)病例的CK、P63與原位雜交EBER表達陽性人數(shù)明顯高于首發(fā)病例(P<0.05),由此證明,CK、P63與原位雜交EBER表達與鼻咽癌的復(fù)發(fā)性可能存在一定關(guān)系。相關(guān)報道顯示,有10.8%的復(fù)發(fā)性鼻咽癌患者EBER檢測為陰性[7]。本研究結(jié)果中的陰性患者人數(shù)較低,這可能是因為與組織學(xué)處理欠佳有關(guān)。而且腫瘤成分比較少的時候鏡下容易出現(xiàn)漏診現(xiàn)象,因此在檢測過程中要特別注意。相關(guān)研究表明,CK作為細胞的靶結(jié)構(gòu),會參與輻射,從而導(dǎo)致細胞的變化與活動,但是并不能作為鼻咽癌患者復(fù)發(fā)性的獨立判斷指標(biāo)[8],與本研究結(jié)果具有相似性。Logistic回歸分析結(jié)果顯示:CK、P63與原位雜交EBER并非復(fù)發(fā)性鼻咽癌的獨立診斷指標(biāo)(P>0.05),聯(lián)合診斷對復(fù)發(fā)性鼻咽癌具有診斷價值(P<0.05)。由此證明,應(yīng)用CK、P63與原位雜交EBER聯(lián)合診斷能夠判斷患者是否為復(fù)發(fā)性鼻咽癌,從而為患者的臨床診斷與治療提供參考。

    綜上所述,CK、P63與原位雜交EBER水平與復(fù)發(fā)性鼻咽癌的發(fā)展密切相關(guān),可以結(jié)合形態(tài)學(xué),免疫組化CK、P63與原位雜交EBER聯(lián)合判定患者是否為復(fù)發(fā)性鼻咽癌,但是3種診斷并非為復(fù)發(fā)性鼻咽癌的獨立預(yù)測指標(biāo)。

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