優(yōu)化五味常青顆粒中青蒿的提取工藝研究

周 衡，宋 祺，申金燕，張艷麗，張 寧，張 旭

（鄭州百瑞動物藥業(yè)有限公司，河南 鄭州451163）

五味常青顆粒具有抗球蟲作用，獸藥標(biāo)準(zhǔn)中的提取方法為水煎煮[1]。項目組分別對不同產(chǎn)地的青蒿按獸藥標(biāo)準(zhǔn)中五味常青顆粒提取工藝制備的10批樣品進(jìn)行檢測知，鑒別（1）均不合格，供試品與對照藥材在薄層色譜圖上的斑點(diǎn)對應(yīng)不一致。經(jīng)分析知，在鑒別（1）中，青蒿對照藥材溶液是經(jīng)乙醚過夜浸制而成[1-2]，而供試品溶液是水提后浸膏制成顆粒，再經(jīng)乙醚提取制備所得，即供試品中青蒿藥材與對照藥材的提取方法有區(qū)別。為探其原因，我們對青蒿提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，比較不同提取方法及不同產(chǎn)地的青蒿藥材所制備的顆粒的質(zhì)量，以生產(chǎn)出符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的成品顆粒。

1 材料與試劑

青蒿對照藥材（中國藥品生物制品檢定所 批號：121016-201005）；青蒿（安徽亳州、湖南常德、四川酉陽、廣西柳州、貴州遵義、廣東清遠(yuǎn)、四川成都等地）；三氯甲烷、乙醚、硫酸、乙醇、甲醇等均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 不同產(chǎn)地青蒿制得的樣品質(zhì)量研究

2.1.1 不同產(chǎn)地青蒿水提制得的樣品質(zhì)量研究

參照《獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)匯編——獸藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)（第二冊）》五味常青顆粒提取工藝，對不同產(chǎn)地青蒿制得樣品進(jìn)行質(zhì)量研究。

青蒿100g、柴胡90g、苦參185g、常山250g、白茅根90g，加10倍量水，煎煮1.5h，過濾，藥渣加8倍量水，煎煮1.5h，過濾，合并2次水煎液，濃縮至相對密度為1.28～1.30（60℃），得浸膏。浸膏、糖、糊精按1：3.5：1的比例制成顆粒，干燥，制成350g顆粒，即得。

取顆粒10g，加水25ml使溶解，加乙醚15ml振搖，分取乙醚層，揮干乙醚，殘渣加乙醚2ml使溶解，作為供試品溶液。另取青蒿對照藥材1g，加乙醚10ml，浸泡過夜，濾過，揮干乙醚，殘渣加乙醚5ml使溶解，作為對照溶液。吸取上述2種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙醚（2：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105℃條件下加熱至斑點(diǎn)顯色清晰為止。不同產(chǎn)地青蒿水提樣品薄層分析結(jié)果分別見表1和圖1。

由表1和圖1可知，不同產(chǎn)地青蒿水煎煮制得樣品質(zhì)量均不符合規(guī)定。所以此法不宜作為青蒿提取工藝。

2.1.2 不同產(chǎn)地青蒿不同提取方法制得的樣品質(zhì)量研究

分別考察青蒿乙醚回流、乙醇回流及甲醇回流提?。ㄌ幏狡渌?味藥材仍采用水煎煮）對制得顆粒質(zhì)量的影響。

取各產(chǎn)地青蒿藥材100g各3份，分別加入乙醚、95%乙醇[3～4]、甲醇各1000mL，水浴60℃～70℃回流1.5h，過濾，藥渣再分別加入乙醚、95%乙醇、甲醇各800mL，同法提取1.5h，過濾，合并2次濾液，減壓蒸餾濃縮至相對密度為1.28～1.30（60℃），得浸膏。將其他4味藥材的浸膏與青蒿浸膏合并后，按比例加輔料制粒，干燥，即得350g。按“2.1.1”五味常青顆粒鑒別（1）的方法對不同產(chǎn)地青蒿不同提取方法所得樣品進(jìn)行薄層分析，見表2和圖2。

表1 不同產(chǎn)地青蒿水提樣品檢測結(jié)果

圖1 不同產(chǎn)地青蒿水提樣品薄層結(jié)果

表2 不同產(chǎn)地青蒿不同提取方法制得的樣品檢測結(jié)果

圖2 不同產(chǎn)地青蒿乙醚（圖A）、乙醇（圖B）及甲醇（圖C）提取樣品薄層結(jié)果

由表2知，不同產(chǎn)地青蒿采用乙醚，95%乙醇和甲醇進(jìn)行提取所得樣品均符合規(guī)定。圖2中3種溶劑提取制得的樣品在薄層板上的斑點(diǎn)與對照藥材一致，所以三種溶劑都可作為青蒿提取的溶劑，但乙醚和甲醇具有毒性，故以95%乙醇為溶劑。

2.2 不同濃度乙醇提取青蒿的工藝研究

為確定乙醇的最佳濃度同時降低成本，本組考慮對乙醇濃度進(jìn)一步優(yōu)化，分別用30%、50%、60%、70%的乙醇回流提取不同產(chǎn)地的青蒿2次（處方其他4味藥材仍采用水煎煮），每次1.5h，每次溶劑量分別為10倍、8倍，并以成品顆粒的性狀、鑒別及檢查項為評價指標(biāo)。結(jié)果見表3、表4和圖3。

由表3、表4和圖3知，30%乙醇的提取方法較差，其鑒別（1）不符合規(guī)定。50%以上乙醇能滿足五味常青顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對鑒別（2）的檢測無干擾，且其他項目的檢查結(jié)果也均符合規(guī)定，故以50%乙醇為溶劑。

3 討論

（1）試驗(yàn)表明，按照《獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)匯編——獸藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)（第二冊）》中的提取工藝，對不同產(chǎn)地的青蒿提取，采取沸騰干燥制粒，用薄層色譜法對青蒿進(jìn)行鑒別檢測，色譜圖中供試品溶液與對照藥材色譜相應(yīng)位置上的斑點(diǎn)不一致。而改用乙醚、甲醇、95%乙醇對7個產(chǎn)地的青蒿回流提取制得顆粒，其成品的鑒別（1）均符合規(guī)定，表明有機(jī)溶劑的提取效果優(yōu)于水煎煮法。

（2）不同濃度乙醇試驗(yàn)可知：30%乙醇效果差，其鑒別（1）不符合規(guī)定。50%以上的乙醇能滿足五味常青顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對鑒別（2）的檢測無干擾，且成品的其他項目的結(jié)果也均符合規(guī)定，表明50%乙醇回流提取對成品顆粒質(zhì)量無影響。

表3 不同濃度乙醇對成品質(zhì)量的影響

圖3 不同濃度乙醇提取樣品薄層結(jié)果

表4 不同濃度乙醇對成品質(zhì)量中其他項目的影響

4 結(jié)束語

本文改進(jìn)五味常青顆粒藥典的提取工藝，單獨(dú)醇提青蒿，制備五味常青顆粒，與藥典規(guī)定鑒別相符，故采用如下青蒿提取工藝：以50%乙醇回流提取2次，每次1.5h，每次固液比1g：10ml、1g：8ml。