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    過硫酸氫鉀復(fù)合物粉質(zhì)量研究

    2021-06-03 07:25:14黎健業(yè)梁勁康吳志玲黎乃添溫永茹梁惠蓮張桂君
    中國(guó)獸藥雜志 2021年5期
    關(guān)鍵詞:有效氯家兔懸液

    黎健業(yè),梁勁康,吳志玲,雍 燕,黎乃添,溫永茹,梁惠蓮,張桂君

    (廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司,云浮527400)

    過硫酸氫鉀復(fù)合物粉主要成分包括過硫酸氫鉀復(fù)合鹽、氯化鈉和表面活性劑等。過硫酸氫鉀復(fù)合物粉在水中溶解后可經(jīng)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)持續(xù)產(chǎn)生新生態(tài)氧、次氯酸和自由羥基等,可通過氧化作用使菌體蛋白質(zhì)變性凝固、改變細(xì)胞膜的通透性使之破裂;同時(shí)也可作用于DNA和RNA的磷酸二酯鍵,干擾病原菌DNA和RNA的合成,從而殺滅目標(biāo)病原菌[1-2]。過硫酸氫鉀復(fù)合物粉水溶液可自然分解,對(duì)水體和土壤無污染,在動(dòng)物疫病的防控中具有廣闊的應(yīng)用前景。在過硫酸氫鉀復(fù)合物粉現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中,規(guī)定了其性狀、溶解性、pH值、氯化鈉和有效氯的含量等理化指標(biāo)[3],卻未能為養(yǎng)殖臨床的合理使用提供更充分的技術(shù)指導(dǎo)。因此,在參考《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的基礎(chǔ)上[4],進(jìn)一步開展過硫酸氫鉀復(fù)合物粉的水中溶解度、有效氯穩(wěn)定性、金屬腐蝕性、局部刺激性以及對(duì)目標(biāo)病原微生物的殺滅效果等質(zhì)量評(píng)價(jià)工作,以期為其在養(yǎng)殖臨床中的科學(xué)使用提供一定的參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 儀器 PHS-3C pH計(jì),上海精密科學(xué)儀器有限公司;CPA225D電子天平,德國(guó)Sartorius公司;Milli-Q超純水儀,美國(guó)Millipore公司;LDZX-75KBS立式壓力蒸汽滅菌器,上海申安醫(yī)療器械廠;SW-CJ-1F超凈工作臺(tái),蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;LRH-250A生化培養(yǎng)箱,廣東省韶關(guān)市鑫騰科普儀器有限公司;ZQLY-180 N振蕩培養(yǎng)箱,上海知楚儀器有限公司。

    1.2 藥品與試劑 過硫酸氫鉀復(fù)合物粉,批號(hào):20190803,含有效氯不得少于10.0%,廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司動(dòng)物保健品廠提供;碳鋼、不銹鋼、銅和鋁等標(biāo)準(zhǔn)腐蝕試片:圓形,直徑24.0 mm,厚1.0 mm,穿一直徑為2.0 mm 小孔,表面積總值約為9.80 cm2,購自揚(yáng)州科力環(huán)保設(shè)備有限公司;碘化鉀和冰乙酸均為分析純,購自上海潤(rùn)捷化學(xué)試劑有限公司;硫代硫酸鈉,分析純,購自天津福晨化學(xué)試劑有限公司;營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,均購自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

    1.3 試驗(yàn)動(dòng)物 6只普通級(jí)新西蘭雄性長(zhǎng)耳兔,2.0~2.5 kg,由廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司提供(動(dòng)物使用許可證號(hào):SYXK(粵)2018-0087)。試驗(yàn)前先飼養(yǎng)5 d,試驗(yàn)期間自由飲水和飼喂。

    1.4 試驗(yàn)菌株、毒株及細(xì)胞 金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC 6538和ATCC 29213)、大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(8099和ATCC 25922)、沙門氏桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC 14028)以及鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(ATCC 43765),均來源于中國(guó)醫(yī)學(xué)細(xì)菌保藏管理中心。非洲豬瘟病毒毒株:ASFV/China/GZ201801,由國(guó)家非洲豬瘟區(qū)域?qū)嶒?yàn)室(廣州)分離鑒定;原代豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs),由華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院分離鑒定。

    1.5 水中最大溶解度試驗(yàn) 稱取10.0 g過硫酸氫鉀復(fù)合物粉樣品于燒杯中,加入1 L水,充分?jǐn)嚢?,待樣品全部溶解后,繼續(xù)加入1.0 g樣品,重復(fù)上述操作,直至樣品溶液變渾濁或燒杯底部出現(xiàn)不溶物,即為過硫酸氫鉀復(fù)合物粉在水中的最大溶解度。

    1.6 水中穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密稱取10.0 g過硫酸氫鉀復(fù)合物粉樣品于1000 mL容量瓶中,加入適量水振搖使溶解并稀釋至刻度,搖勻。將上述樣品溶液轉(zhuǎn)移至燒杯中,室溫下放置,分別于第0、1、2、3、5、8、10 d取樣,并按照有效氯含量測(cè)定方法的相關(guān)要求檢測(cè)各樣品溶液中有效氯的含量[3],計(jì)算有效氯含量的下降率。

    1.7 金屬腐蝕性試驗(yàn) 參考《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的相關(guān)要求[4],采用浸泡法開展過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)金屬的腐蝕性試驗(yàn)。待碳鋼、不銹鋼、銅和鋁等標(biāo)準(zhǔn)樣片進(jìn)行充分清洗、干燥和恒重后,分別將其完全浸泡在濃度為5.0 g/L的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液中;同時(shí)另取上述金屬標(biāo)準(zhǔn)樣片浸泡于相同體積的超純水中,作為空白對(duì)照。室溫下浸泡72 h后,取出各金屬樣片,觀察其外觀性狀變化,并按規(guī)定進(jìn)行水沖洗、去除腐蝕物、干燥和稱重,計(jì)算各金屬腐蝕速率。

    1.8 局部刺激性試驗(yàn)

    1.8.1 皮膚刺激性試驗(yàn) 參考《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的相關(guān)要求[4],開展過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)家兔的皮膚刺激性試驗(yàn)。在試驗(yàn)前24 h,用脫毛劑去除3只家兔背部脊柱兩側(cè)的毛且不得損傷皮膚,去毛范圍為左、右各約3 cm×3 cm。次日將濃度為10.0 g/L的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液滴到面積為2.5 cm×2.5 cm的兩層紗布上,并敷貼在左側(cè)去毛皮膚表面,用一層無刺激塑料膜覆蓋,然后用無刺激膠布固定。另取等體積的生理鹽水同法操作,敷貼在右側(cè)去毛皮膚表面,作為空白對(duì)照。敷貼時(shí)間為4 h。試驗(yàn)結(jié)束后,用溫水除去殘留過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液。分別于去除過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液后1、24和48 h觀察皮膚局部反應(yīng),并對(duì)其進(jìn)行刺激反應(yīng)評(píng)分[1,4]。

    1.8.2 急性眼刺激性試驗(yàn) 參考《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的相關(guān)要求[4],開展過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)家兔的急性眼刺激性試驗(yàn)。吸取新配制濃度為10.0 g/L的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液0.1 mL,滴入家兔左側(cè)眼結(jié)膜囊內(nèi),右側(cè)眼以生理鹽水作為正常對(duì)照。滴入消毒劑溶液后,將兔眼被動(dòng)閉合4 s,30 s后用生理鹽水沖洗。在滴眼后24、48、72 h,肉眼觀察兔眼結(jié)膜、角膜和虹膜的損傷與恢復(fù)情況,并對(duì)眼角膜、虹膜和結(jié)膜的急性刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分[1,4]。

    1.9 細(xì)菌殺滅評(píng)價(jià)試驗(yàn)

    1.9.1 中和劑鑒定試驗(yàn) 以金黃色葡萄球菌ATCC 6538和大腸桿菌8099為試驗(yàn)菌,按照《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)中消毒劑殺微生物試驗(yàn)項(xiàng)下中和劑鑒定試驗(yàn)的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行操作及結(jié)果判定[4]。

    1.9.2 懸液定量殺菌試驗(yàn) 參考《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的相關(guān)要求[4],分別制備金黃色葡萄球菌ATCC 6538和大腸桿菌8099菌懸液,并用0.03 mol/L PBS緩沖液(pH=7.2)稀釋至3.0×107~5.0×107CFU/mL。用無菌標(biāo)準(zhǔn)硬水將過硫酸氫鉀復(fù)合物粉分別配制成5.0 g/L和2.5 g/L的溶液,置于20 ℃±1 ℃水浴中備用。分別吸取0.5 mL菌懸液與4.5 mL過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液混勻,置于20 ℃±1 ℃水浴中作用至預(yù)定時(shí)間,立即吸取上述菌懸液1.0 mL,加入9.0 mL中和劑混勻,中和10 min后,吸取1.0 mL樣液,進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)培養(yǎng),計(jì)算殺菌率。對(duì)照組以無菌標(biāo)準(zhǔn)硬水代替過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液,同時(shí)進(jìn)行上述步驟。上述試驗(yàn)重復(fù)3次。

    1.9.3 定性殺菌試驗(yàn) 參考《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的相關(guān)要求[4],分別制備金黃色葡萄球菌ATCC 29213、大腸桿菌ATCC 25922、沙門氏桿菌ATCC 14028和鏈球菌ATCC 43765菌懸液,并用0.03 mol/L PBS緩沖液(pH=7.2)稀釋至1.0×107~1.0×109CFU/mL。用無菌標(biāo)準(zhǔn)硬水將過硫酸氫鉀復(fù)合物粉分別配制成5、2.5、1.25和1.0 g/L等4個(gè)濃度的溶液,分別移取上述各濃度溶液8.0 mL于無菌試管中,然后于每管內(nèi)加入1.0 mL菌懸液混勻。待作用至預(yù)定時(shí)間,立即吸取上述菌懸液1.0 mL,加入9.0 mL中和劑混勻,中和10 min后,再取出0.5 mL加入至4.5 mL營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,同時(shí)接種陽性對(duì)照,37 ℃培養(yǎng)24 h。若培養(yǎng)基管發(fā)生渾濁即表示有細(xì)菌生長(zhǎng);若培養(yǎng)基管不渾濁,繼續(xù)培養(yǎng)至第7天,若仍不渾濁則判定為無菌生長(zhǎng)。以無菌生長(zhǎng)管消毒液的最低濃度為最低殺菌有效濃度。上述試驗(yàn)重復(fù)3次。

    1.10 非洲豬瘟病毒殺滅評(píng)價(jià)試驗(yàn) 在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部頒布的《非洲豬瘟疫情應(yīng)急實(shí)施方案(2020年第二版)》中[5],推薦使用過硫酸氫鉀類消毒劑,并按推薦使用的高濃度進(jìn)行非洲豬瘟疫情的消毒防控。因此,本文委托了國(guó)家非洲豬瘟廣州區(qū)域?qū)嶒?yàn)室開展過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)非洲豬瘟病毒(ASFV)的殺滅效果評(píng)價(jià)試驗(yàn)。

    1.10.1 載體細(xì)胞毒性驗(yàn)證試驗(yàn) 用PBS溶液配制濃度為100 g/L的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉貯備溶液,進(jìn)行逐級(jí)稀釋后配得10.0、1.0、0.1、0.01 g/L等系列濃度的試液。同法采用含20%胎牛血清的PBS溶液配制相同系列濃度的試液。分別取上述試液與原代豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs)作用2 h,然后棄去消毒劑溶液,另加細(xì)胞維持培養(yǎng)液,置于37 ℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h,采用CCK8法測(cè)定細(xì)胞的活性,以確定消毒劑對(duì)PAMs的安全濃度范圍。

    1.10.2 非洲豬瘟病毒殺滅試驗(yàn) 為了避免消毒劑溶液影響PAMs細(xì)胞的生長(zhǎng),根據(jù)1.10.1項(xiàng)下的試驗(yàn)結(jié)果,將過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液與ASFV懸液反應(yīng)后的試液稀釋至安全濃度后再轉(zhuǎn)移至細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行后續(xù)的考察試驗(yàn)。分別用無菌PBS溶液或含20%胎牛血清的PBS溶液將過硫酸氫鉀復(fù)合物粉稀釋成5.0 g/L和2.5 g/L等濃度的試液。分別將0.5 mL上述試液與0.5 mL ASFV懸液(病毒滴度為1.0×105HAD/50)混勻。待作用至預(yù)定滅活時(shí)間,將反應(yīng)產(chǎn)物稀釋100倍,稀釋液接種到PAMs細(xì)胞上,孵育2 h,棄去反應(yīng)產(chǎn)物,另加細(xì)胞維持培養(yǎng)液,置37 ℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h。另將病毒懸液分別稀釋100倍和10000倍后接種到PAMs細(xì)胞上,作為陽性對(duì)照組;將PBS溶液接種到PAMs細(xì)胞上,作為陰性對(duì)照組,同法進(jìn)行培養(yǎng)處理。培養(yǎng)結(jié)束后,向上述不同處理試驗(yàn)組中加入豬紅細(xì)胞,觀察紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象,以判斷ASFV的殺滅效果。上述活病毒操作試驗(yàn)均在華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 水中最大溶解度試驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)過硫酸氫鉀復(fù)合物粉現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),其溶解性檢查項(xiàng)要求:0.5 g樣品在50 mL水中經(jīng)充分?jǐn)嚢韬髴?yīng)全部溶解[3]。本文采用的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉樣品在水中的最大溶解度為60.0 g/L,為現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)溶解性要求的6倍,能夠滿足養(yǎng)殖臨床消毒防控的需求。

    2.2 水中穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果 由表1可知,過硫酸氫鉀復(fù)合物粉水溶液在常溫下放置8 d后,有效氯含量仍保持在10%左右;10 d后,有效氯含量仍保持在9.5%以上,穩(wěn)定性較好。因此,過硫酸氫鉀復(fù)合物粉在水中溶解后有效氯的穩(wěn)定性可維持10 d左右。

    表1 過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液中有效氯的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果(n=2)Tab 1 The available chlorine stability results of potassium peroxymonosulphate solution

    2.3 金屬腐蝕性試驗(yàn)結(jié)果 由表2可知,過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液在常溫下對(duì)不銹鋼、鋁、銅和碳鋼等金屬的腐蝕速率分別為0.0002、0.0598、0.3498和0.4515 mm/a,表明過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)不銹鋼基本無腐蝕作用,但是對(duì)鋁具有輕度腐蝕作用以及對(duì)銅和碳鋼具有中度腐蝕作用。

    表2 過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)不同金屬的腐蝕性試驗(yàn)結(jié)果(n=2)Tab 2 Different metal corrosion results in potassium peroxymonosulphate solution

    2.4 刺激性試驗(yàn)結(jié)果

    2.4.1 皮膚刺激性試驗(yàn)結(jié)果 由表3可知,在試驗(yàn)結(jié)束1 h后,部分家兔皮膚出現(xiàn)了輕微的紅斑癥狀,但24 h后紅斑癥狀消失,皮膚恢復(fù)正常。由于在48 h觀察期內(nèi),家兔的皮膚刺激指數(shù)均小于0.5,則可認(rèn)為上述試驗(yàn)濃度的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)家兔皮膚無刺激性,與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[1]。

    表3 家兔皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果Tab 3 Results of rabbit skin irritation test

    2.4.2 急性眼刺激性試驗(yàn)結(jié)果 由表4可知,在試驗(yàn)結(jié)束24 h后,部分家兔的虹膜或者結(jié)膜出現(xiàn)了輕微的充血或者水腫癥狀,但是48 h后充血或水腫癥狀消失,家兔的虹膜和結(jié)膜均恢復(fù)正常。在72 h觀察期內(nèi),3只家兔急性眼刺激試驗(yàn)的平均評(píng)分為:角膜損害<1、虹膜損害<1、結(jié)膜充血<2和結(jié)膜水腫<2。因此,可認(rèn)為上述試驗(yàn)濃度的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)家兔眼睛無明顯刺激性,與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[1]。

    2.5 細(xì)菌殺滅評(píng)價(jià)試驗(yàn)結(jié)果

    2.5.1 中和劑鑒定試驗(yàn)結(jié)果 經(jīng)驗(yàn)證,以含0.5%硫代硫酸鈉的PBS緩沖液(pH=7.2)作為中和劑,可有效中和過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)試驗(yàn)菌的作用,滿足試驗(yàn)要求。

    2.5.2 懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果 由表5可知,濃度為5.0 g/L和2.5 g/L的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液與兩種試驗(yàn)菌作用5 min后,殺滅率均達(dá)到99.99%以上,表現(xiàn)出較強(qiáng)的殺菌活性。

    表5 過硫酸氫鉀復(fù)合物粉懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果Tab 5 Suspension quantitative germicidal test results of potassium peroxymonosulphate powder

    2.5.3 定性殺菌試驗(yàn)結(jié)果 在懸液定量殺菌試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,本文進(jìn)一步通過定性殺菌試驗(yàn)來評(píng)價(jià)過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏桿菌和鏈球菌等禽畜養(yǎng)殖臨床中常見致病菌的殺滅活性[6]。由表6可知,濃度為1.0 g/L的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液,作用5 min后可有效殺滅大腸桿菌和金黃色葡萄球菌,作用10 min后可有效殺滅沙門氏菌和鏈球菌。

    表6 過硫酸氫鉀復(fù)合物粉定性殺菌試驗(yàn)結(jié)果Tab 6 Qualitative germicidal test results of potassium peroxymonosulphate powder

    2.6 非洲豬瘟病毒殺滅評(píng)價(jià)試驗(yàn)

    2.6.1 載體細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果 在ASFV殺滅效果評(píng)價(jià)試驗(yàn)中,為了避免消毒劑影響載體細(xì)胞的生長(zhǎng),需開展不同濃度消毒劑溶液對(duì)PAMs細(xì)胞的毒性作用。試驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)過硫酸氫鉀復(fù)合物粉分別用PBS溶解稀釋至0.1 g/L或者用含20%胎牛血清PBS溶解稀釋至1.0 g/L時(shí),對(duì)PAMs細(xì)胞生長(zhǎng)無影響。因此,在開展ASFV殺滅試驗(yàn)中,綜合消毒劑的考察濃度,宜將過硫酸氫鉀復(fù)合物粉與病毒懸液反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行稀釋100倍后再繼續(xù)后續(xù)的評(píng)價(jià)試驗(yàn)。

    2.6.2 非洲豬瘟病毒殺滅試驗(yàn)結(jié)果 如圖1所示,PBS陰性組未觀察到紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象(HAD陰性);如圖2所示,ASFV病毒懸液組則可觀察到典型的紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象(HAD陽性)。根據(jù)以上判定依據(jù)得出試驗(yàn)結(jié)果,如表7所示,過硫酸氫鉀復(fù)合物粉用PBS溶液按1∶400倍稀釋后(即濃度為2.5 g/L),與5×104HAD/50的非洲豬瘟病毒作用5 min后能夠完全殺滅ASFV;而用含胎牛血清的PBS溶液將過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶解稀釋至同樣濃度時(shí)(胎牛血清最終含量為10%),與5×104HAD/50的非洲豬瘟病毒作用5 min后也能夠完全殺滅ASFV。

    圖1 紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)陰性Fig 1 Negative result of erythrocyte adsorption test

    圖2 紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)陽性Fig 2 Positive result of erythrocyte adsorption test

    表7 過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)非洲豬瘟病毒殺滅效果試驗(yàn)結(jié)果Tab 7 Results of killing effect of potassium peroxymonosulphate powder on ASFV

    3 討論與結(jié)論

    過硫酸氫鉀復(fù)合物粉主要由過硫酸氫鉀復(fù)合鹽、氯化鈉和表面活性劑等水溶性成分組成,因此水溶解性較好,但不同的制劑工藝會(huì)在一定程度上影響其在水中的溶解性。本文所采用的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉在水中最大溶解度可達(dá)到60 g/L(約為推薦使用最高濃度的12倍),完全能夠滿足養(yǎng)殖臨床使用的需求。過硫酸氫鉀復(fù)合物粉在水中溶解后,可經(jīng)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)持續(xù)產(chǎn)生有效氯和活性氧等殺菌成分,這也是過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液中有效氯能維持穩(wěn)定的主要原因。

    由于過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液呈較強(qiáng)的酸性(pH為2.35~2.65),其對(duì)各類金屬仍具有一定的腐蝕作用。經(jīng)驗(yàn)證,濃度為5.0 g/L的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液在常溫下對(duì)不銹鋼、鋁、銅和碳鋼的腐蝕速率分別為0.0002、0.0598、0.3498、0.4515 mm/a,但其腐蝕速率卻遠(yuǎn)低于1.0 g/L單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽溶液對(duì)上述金屬的腐蝕速率[7]。這主要因?yàn)檫^硫酸氫鉀復(fù)合物粉中含有一定量的緩蝕劑,能夠在一定程度上降低過硫酸氫鉀復(fù)合物溶液對(duì)金屬的腐蝕性。為了降低消毒劑對(duì)金屬容器的腐蝕作用,在實(shí)際應(yīng)用時(shí)應(yīng)注意及時(shí)用清水擦拭等方式去除殘留的消毒液。

    雖然過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)碳鋼等金屬具有一定的腐蝕性,但是濃度為10.0 g/L(推薦使用最高濃度的2倍)的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)家兔并未表現(xiàn)出明顯的皮膚刺激性或眼刺激性,與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果基本一致[1]。這也進(jìn)一步驗(yàn)證了過硫酸氫鉀復(fù)合物粉的使用安全性,甚至可以應(yīng)用于帶畜消毒。

    為了驗(yàn)證過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液對(duì)目標(biāo)病原菌的殺滅活性,本文也開展了不同使用濃度以及不同作用時(shí)間對(duì)不同目標(biāo)病原微生物的殺滅評(píng)價(jià)試驗(yàn)。依據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的相關(guān)要求[4],本文通過懸液定量殺菌試驗(yàn)驗(yàn)證了推薦使用最高濃度(5.0 g/L)以及稀釋一倍后(2.5 g/L)的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液在5 min內(nèi)能夠完全殺滅金黃色葡萄球菌和大腸桿菌等病原微生物。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步通過定性殺菌試驗(yàn)驗(yàn)證了過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)4種禽畜養(yǎng)殖臨床中常見致病菌的最低殺滅濃度為1.0 g/L,但對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌最短作用時(shí)間為5 min;而對(duì)沙門氏菌和鏈球菌最短作用時(shí)間則為10 min。上述試驗(yàn)結(jié)果均表明了過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)禽畜致病菌具有較良好的殺滅活性。但是,也要注意有機(jī)干擾物、溫度和水質(zhì)等環(huán)境因素對(duì)其消毒效果的影響[6]。因此,在畜牧養(yǎng)殖臨床實(shí)際應(yīng)用中,宜先用水將糞便和飼料等有機(jī)殘余物沖洗干凈后,再使用過硫酸氫鉀復(fù)合物溶液進(jìn)行消毒防控。同時(shí),也可以通過適當(dāng)提高消毒劑的使用濃度、適當(dāng)升高環(huán)境溫度和延長(zhǎng)作用時(shí)間等措施來提高消毒劑的殺菌效果[8-9]。

    根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部頒布的《非洲豬瘟疫情應(yīng)急實(shí)施方案(2020年第二版)》的相關(guān)要求[5],開展高濃度過硫酸氫鉀復(fù)合物溶液對(duì)非洲豬瘟病毒的殺滅效果評(píng)價(jià)試驗(yàn)。結(jié)果表明,2.5 g/L(推薦使用最高濃度稀釋一倍)的過硫酸氫鉀復(fù)合物粉溶液能夠在5 min內(nèi)有效殺滅非洲豬瘟病毒,且在該作用濃度下過硫酸氫鉀復(fù)合物溶液對(duì)ASFV的殺滅作用不受有機(jī)物的影響。而實(shí)際上,過硫酸氫鉀復(fù)合物粉對(duì)非洲豬瘟的最低有效濃度可達(dá)到1000 mg/L,且在該濃度下作用5 min即可有效殺滅ASFV,充分表明了過硫酸氫鉀復(fù)合物粉在非洲豬瘟疫情生物安全的防控中也具有廣闊的應(yīng)用前景[10-11]。

    在過硫酸氫鉀復(fù)合物粉現(xiàn)行國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步開展了其水中溶解度、有效氯穩(wěn)定性、金屬腐蝕性、局部刺激性以及對(duì)目標(biāo)病原微生物的殺滅效果等質(zhì)量評(píng)價(jià)試驗(yàn),建立了過硫酸氫鉀復(fù)合物粉更全面的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系,同時(shí)也為該消毒劑的養(yǎng)殖臨床科學(xué)使用提供了參考依據(jù)。

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