• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    采自青海湖的剛毛藻屬一新種
    ——青海剛毛藻

    2021-06-02 08:28:36趙志娟何玉邦敖鴻毅吳辰熙胡愈炘劉國祥
    水生生物學報 2021年3期
    關(guān)鍵詞:剛毛進化樹青海湖

    趙志娟 朱 歡 熊 雄 何玉邦 敖鴻毅 吳辰熙 胡愈炘 劉國祥

    (1. 南寧師范大學北部灣環(huán)境演變與資源利用教育部重點實驗室, 南寧 530001; 2. 南寧師范大學廣西地表過程與智能模擬重點實驗室, 南寧 530001; 3. 中國科學院水生生物研究所淡水生態(tài)與生物技術(shù)國家重點實驗室, 武漢 430072;4. 青海湖國家級自然保護區(qū)管理局, 西寧, 810007)

    青海湖地處青藏高原東北部, 湖泊面積約4400 km2, 是我國最大的咸水湖泊(鹽度約6‰—12‰)。青海湖因其獨特的海拔、氣候和地理位置成為我國西部著名的旅游風景區(qū)。但是自2013年以來, 每年7—9月青海湖均頻頻暴發(fā)絲狀藻類水華, 大量黃綠色藻類漂浮于水體表面, 對水體生態(tài)系統(tǒng)造成了一定污染和危害。目前關(guān)于青海湖藻類的研究主要集中于浮游植物種類多樣性調(diào)查、生物量監(jiān)測及營養(yǎng)鹽對藻類生長的影響等方面[1—5]。已報道過的絲狀綠藻有轉(zhuǎn)板藻、無隔藻、絲藻、水綿、雙星藻和剛毛藻等,這些絲狀藻類的調(diào)查主要依靠形態(tài)學觀察, 極少結(jié)合分子序列進行分析[3]。

    本研究對青海湖岸邊暴發(fā)的水華絲狀藻類進行樣品采集, 并將其帶回實驗室開展顯微形態(tài)觀察和分子序列測定, 以分析絲狀藻類所屬種類及其典型特征, 以期為青海湖的水環(huán)境治理和生態(tài)建設提供理論參考和依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 樣品采集

    本研究分別在2013—2015年8月對青海湖沿岸發(fā)生絲狀藻類水華的位點進行樣品采集, 采集后的樣品同時進行3種方式保存: 10%的甲醛固定保存、干燥保存及低溫新鮮樣品保存。所有保存樣品均帶回實驗室處理, 樣品編號依次為QH1401、QH1402、QH1403、QH1404、QH1501、QH1502、QH1504和QH1505, 甲醛固定的樣品保存于中國科學院水生生物研究所。

    1.2 形態(tài)觀察

    顯微形態(tài): 在體式鏡(KL1500 LCD; Zeiss, G?ttingen, Germany)下用解剖針小心將目的藻絲分離,置于磷酸鹽緩沖液(PBS, pH 7.0)中反復清洗3次, 去除表面附著的雜質(zhì)。將干凈藻絲置于光學顯微鏡下進行顯微形態(tài)觀察并測量拍照。關(guān)注的形態(tài)特征包含藻絲分枝類型、直徑大小、細胞長寬比和有無固著器等, 同時收集干凈藻絲以備DNA提取使用。

    標本制作: 將新鮮藻樣置于放有清水和標本紙的干凈操作盤中, 在解剖鏡下用解剖針輕輕分開各分枝, 吸走多余水分, 待標本紙?zhí)幱诎敫蔂顟B(tài)時涂上適量膠水, 自然風干壓制成標本, 做好的干標本可用于藻絲宏觀形態(tài)觀察, 標本保存于中國科學院水生生物研究所。

    1.3 DNA提取

    單細胞法提取藻絲DNA: 將收集的絲狀綠藻用ddH2O反復洗滌3—4次, 置于顯微鏡下鏡檢。鏡檢后的藻絲轉(zhuǎn)移至滴有緩沖液的載玻片上, 用解剖刀切割單個細胞, 使內(nèi)含物釋放; 用移液槍收集細胞內(nèi)含物并轉(zhuǎn)移至已滅菌的PCR管中。加入合適比例的蛋白酶K, 混勻, 置于55℃水浴0.5h; 最后高溫(95℃, 5min)滅活蛋白酶K, 即獲得樣品總DNA。

    1.4 PCR擴增及系統(tǒng)發(fā)育分析

    PCR擴增核糖體小亞基編碼基因(Small subunit ribosomal encoding gene, SSU)和大亞基編碼基因(Large subunit ribosomal encoding gene, LSU)的方法參照Boedeker等[6]和Leliaert等[7]對剛毛藻目藻樣的處理方法[6,7], 參照Hayakawa等[8]的方法擴增內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)ITS序列。PCR產(chǎn)物送生物公司(擎科生物, 武漢)測序。對于直接測序效果不佳的PCR產(chǎn)物, 用pMD18-T(寶生物, 大連, 中國)載體連接, 轉(zhuǎn)化至大腸桿菌E.coliDH5α中, 培養(yǎng)篩選后重新PCR并測序。測序結(jié)果使用Seqman軟件拼接(Swindell and Plasterer, 1997)[9]。利用Mafft 7.2(Katoh and Standley, 2013)進行序列比對[10], 使用Bioedit 7.0(Hall, 2004)手工校正[11], 人工校正后的序列提交GenBank數(shù)據(jù)庫。對ITS序列(序列間差異較大)開展獨立進化分析, 對于SSU和LSU序列(序列較為保守)開展聯(lián)合進化分析。分析前首先進行SSULSU聯(lián)合序列不相合長度差異檢驗,P>0.05, 表明數(shù)據(jù)集可聯(lián)合分析。以上數(shù)據(jù)集分別采用似然法(ML)和貝葉斯算法(BI)對數(shù)據(jù)進行運算。前者通過RaxML(Stamatakis等[12])軟件完成, 后者通過MrBayes 3.1.2完成(Huelsenbeck 和 Ronquist[13])。RaxML樹和BI貝葉斯樹分別在相應分支上獲得自展支持值(BP)和后驗概率值(PP)。

    2 結(jié)果

    2.1 新種確認

    青海剛毛藻Cladophora qinghaiensisZ.J.ZHAO & G.X. LIU, sp. nov. 圖版 Ⅰ-a—h

    植物體生長于咸水環(huán)境, 鹽度范圍: 6‰—12‰。藻絲纖細柔軟, 呈綠色或淺綠色, 分枝旺盛, 具明顯的頂端生長和居間生長(圖版Ⅰ-a—c)。葉綠體網(wǎng)狀, 周生。大多數(shù)藻絲通過固著器著生于岸邊沙石等基質(zhì)上(圖版Ⅰ-d)。細胞均勻, 多圓柱形, 頂細胞逐漸變細, 末端為鈍頂末梢(圖版Ⅰ-e)。細胞近頂端常產(chǎn)生分枝, 與主枝形成銳角(45°或更小), 典型的偽二歧分枝或者下方偽二歧分枝(圖版Ⅰ-f)。隨著生長, 有些細胞頂部可以產(chǎn)生3個、4個甚至5個分枝(圖版Ⅰ-g)。有時植物體末端分枝或細胞會呈現(xiàn)輕微彎曲或卷曲現(xiàn)象(圖版Ⅰ-h)。植物體細胞直徑較小, 主軸細胞直徑30.0—90.0 μm, 細胞長寬比2.4—8.0。分枝細胞直徑25.0—70.0 μm, 長寬比4.0—12.3。頂端細胞直徑25.0—50.0 μm, 長寬比3.6—12.0。溫度變化、水流沖擊或者植物體老化等因素可能導致植物體斷裂或變短, 進而形成絲狀團塊漂浮于水面上, 顏色趨于黃色或淺黃色。漂浮的藻絲有時也繼續(xù)保持頂端或居間生長。

    生境及分布: 咸水(鹽度6‰—12‰), 著生, 生長后期或漂浮。

    新種詞源學: 新種主要基于樣品采集地命名。

    模式標本: QH1501。

    模式標本產(chǎn)地: 青海湖(N36°38′25″, E100°27′01″)。

    模式標本保存地: 酒精及甲醛標本均保存于中國科學院水生生物研究所。

    樣品編號: QH1401, QH1402, QH1403, QH1404,QH1501, QH1502, QH1504和QH1505。

    2.2 系統(tǒng)發(fā)育分析

    基于SSU-LSU序列的聯(lián)合進化分析(圖 1): 序列比對產(chǎn)生了一個包含53條SSU-LSU rDNA序列的矩陣, 以細弱根枝藻Rhizoclonium subtile和分枝根枝藻R. ramosum作為外類群。序列手工校正后的矩陣長度為2230 bp。其中SSU全長1651 bp, 有保守位點(Conserved sites)1594個(96.5%), 45個簡約信息位點(Parsimony-informative sites)。LSU全長579 bp, 有保守位點496個(85.7%), 57個簡約信息位點。堿基組成分析結(jié)果顯示平均的堿基組成為A=25.3%, T=23.2%, C=22.9%, G=28.7%, A+T的含量(48.4%)略低于G+C的含量(51.6%)。

    基于ITS 序列的剛毛藻科系統(tǒng)發(fā)育分析(圖 2):本研究共選取86條ITS序列用于剛毛藻科的系統(tǒng)進化分析, 選取細弱根枝藻R. subtile、厚壁根枝藻R.pachydermum和分枝根枝藻R. ramosum作為外類群。序列比對后產(chǎn)出一個長度為1484 bp的基因序列矩陣。其中有820個可變位點(Variable sites),713個簡約信息位點(Parsimony-informative sites)。堿基組成分析結(jié)果顯示平均的堿基組成為A=20.6%,T=21.9%, C=29.6%, G=27.9%, A+T的含量(42.5%)略低于G+C的含量(57.5%)。此外, 堿基的轉(zhuǎn)換/顛換偏好為0.89。

    基于SSU-LSU和ITS序列所構(gòu)建的進化樹中均包含了淡水、咸水和海洋剛毛藻樣品, 這兩個系統(tǒng)發(fā)育樹的拓撲結(jié)構(gòu)基本一致。其中淡水剛毛藻(以團集剛毛藻C. glomerata為代表)單獨聚于一支, 位于進化樹頂部, 與咸水剛毛藻(以散束剛毛藻C.vagabunda為代表)獨立開來。而海洋剛毛藻(以蒼白剛毛藻C. albida為代表)則位于進化樹的基部。在SSU-LSU聯(lián)合分析構(gòu)建的進化樹中, QH1401和QH1402與其他5株青海湖的剛毛藻樣品存在一定遺傳差異, 其中QH1401/QH1402的SSU序列與其他樣品SSU序列存在1個堿基的差異、LSU序列存在4個堿基的差異。所有青海湖剛毛藻樣品(QH1401、QH1402、QH1403、QH1404、QH1501、QH1502、QH1504和QH1505)的ITS序列100%一致, 無遺傳差異。3個分子標記比對結(jié)果表明青海湖剛毛藻樣品序列具有高度相似性, 堿基差異未達到種以上水平。SSU-LSU聯(lián)合分析顯示青海剛毛藻和達爾馬提亞剛毛藻C.cf.dalmatica和帕里亞迪剛毛藻C.cf.parriaudii具有較近親緣關(guān)系。青海剛毛藻與咸水剛毛藻聚為一個大支, 形成姐妹類群, 且支持率較高(1.00/88, 0.97/62)。在ITS進化樹中, 青海剛毛藻C. qinghaiensis與史氏剛毛藻C. stimpsonii有較近的親緣關(guān)系, 支持值1.00/95。綜合比較構(gòu)建的2個進化樹, ITS構(gòu)建的進化樹顯示了更大的基因序列差異, 各分支區(qū)分明顯, 支持度高。

    圖 1 基于核糖體小亞基SSU和大亞基LSU聯(lián)合構(gòu)建的系統(tǒng)樹Fig. 1 Molecular phylogenetic tree inferred based on sequences of SSU and LSU of the nuclear rDNA

    3 討論

    3.1 青海剛毛藻和相似種的形態(tài)學比較

    青海剛毛藻具有剛毛藻屬的典型特征: 即植物體通過頂端分裂或居間分裂進行生長, 具分枝, 色素體緊密排列在細胞側(cè)壁, 形成一個網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。細胞長寬比較大, 細胞核多數(shù), 蛋白核多數(shù)[14,15]。同時青海剛毛藻也具有咸水/海水剛毛藻類群的一些獨特特征, 如一個細胞頂部有時可同時形成4—5個分枝, 淡水類群一個細胞頂部通常則僅形成2—3個分枝[14]。此外, 青海剛毛藻藻絲分枝還具有內(nèi)折或輕微彎曲現(xiàn)象, 呈鐮刀形, 該特征也出現(xiàn)于散束剛毛藻、達爾馬提亞剛毛藻和亮剛毛藻C. laetevirens等剛毛藻中[14]。但此特征并不在同一個種的所有樣品或者培養(yǎng)樣品中均出現(xiàn), 說明分枝內(nèi)折現(xiàn)象具有一定可塑性, 可能是受水流波動影響所導致。

    通過和目前已知的咸水剛毛藻種進行比較, 青海剛毛藻具有一些較為細微的差異性特征。最明顯的區(qū)別是細胞直徑大小。史氏剛毛藻、散束剛毛藻、達爾馬提亞剛毛藻、束生剛毛藻C. fascicularis和亮剛毛藻等的細胞直徑均大于青海剛毛藻[14]。帕里亞迪剛毛藻植物體纖細, 主枝和分枝細胞(14—20 μm)直徑小于青海剛毛藻[14]。此外, 分布、顏色及分枝特征也存在種間差異, 史氏剛毛藻主要分布于沿海和潮間帶地區(qū), 藻絲呈絹絲狀, 分枝多偏生[16,17]。細弱剛毛藻C. gracilis主要生長與潮間帶石沼中, 藻絲亮灰綠色, 密集叢生, 有較多側(cè)生小枝[14,16,17]。

    圖 2 基于內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)樹Fig. 2 Molecular phylogenetic tree inferred based on sequences of ITS

    3.2 剛毛藻類群的系統(tǒng)進化分析

    從系統(tǒng)發(fā)育樹看, 剛毛藻屬目前可劃分為3大類群: 淡水類群(Freshwater group)、海洋類群(Marine water group)及咸水(過渡性)類群(Brackish water group)。海洋類群位于進化樹的基部, 淡水類群位于進化樹的頂部, 咸水支系則居于二者之間。這一進化結(jié)果進一步印證了剛毛藻是一個起源于海洋, 并逐漸向淡水過渡的類群[18—20]。Hayakawa等[8]對不同類型剛毛藻進行的鹽度適應性實驗顯示團集剛毛藻在鹽度低于10‰的水環(huán)境有較好的生長速率; 束生剛毛藻和亮剛毛藻在鹽度較高的水環(huán)境(海洋)中適宜生長, 鹽度低于16‰時, 生長速率降低;散束剛毛藻則對鹽度的耐受范圍較廣。這表明剛毛藻在進化過程中, 面對不同生境產(chǎn)生了不同類型的種類, 這些種類具有各自的生理生態(tài)適應范圍,這一范圍反過來又會影響剛毛藻的分布。因此本研究推測, 青海剛毛藻這一種類的出現(xiàn)可能是剛毛藻適應青海湖這一特殊生境的結(jié)果。

    與形態(tài)特征相比, 分子數(shù)據(jù)可以較好的用于區(qū)分不同的剛毛藻類群。朱歡等[21]曾借助分子手段將淡水剛毛藻分為8個分支。盡管借助形態(tài)特征來清晰區(qū)分青海剛毛藻、史氏剛毛藻和散束剛毛藻較為困難, 但在系統(tǒng)進化樹上三者則明顯分開, 形成不同種。此外, 剛毛藻屬樣品的SSU-LSU序列相對保守, 不同種間堿基差異較小, ITS序列卻呈現(xiàn)了較大的序列差異, 說明在今后對剛毛藻進行系統(tǒng)發(fā)育分析時選擇進化速度相對較快的ITS序列可能更為有效。

    基于以上形態(tài)和分子結(jié)果, 本研究建議將采集于青海湖的剛毛藻作為一個新種, 同時定名為青海剛毛藻。盡管剛毛藻類群形態(tài)具有一定可塑性, 種的鑒定相對困難, 但相信在今后更多分子數(shù)據(jù)和形態(tài)數(shù)據(jù)提供的基礎上, 剛毛藻的分類將日益清晰。

    圖版Ⅰ 青海剛毛藻PlateⅠ Cladophora qinghaiensis sp. nov.

    猜你喜歡
    剛毛進化樹青海湖
    基于心理旋轉(zhuǎn)的小學生物進化樹教學實驗報告
    常見的進化樹錯誤概念及其辨析*
    生物學通報(2021年9期)2021-07-01 03:24:44
    那美麗的青海湖
    小讀者(2020年2期)2020-11-26 09:34:07
    輕輕松松聊漢語 青海湖
    金橋(2020年7期)2020-08-13 03:07:10
    德國小蠊足跗節(jié)腹面及側(cè)面的超微結(jié)構(gòu)觀察
    《青海湖》
    散文詩(2019年21期)2019-01-21 12:03:20
    艾草白粉病的病原菌鑒定
    御風而行的朝圣之旅——青海湖騎行記
    學生天地(2016年22期)2016-03-25 13:12:12
    光照強度和磷濃度對寡枝剛毛藻生長的影響
    層次聚類在進化樹構(gòu)建中的應用
    久久99蜜桃精品久久| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 久久精品国产a三级三级三级| 午夜免费观看性视频| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 久久青草综合色| 国产成人aa在线观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久久国产精品麻豆| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | av福利片在线| 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品久久久久久久久免| 一个人看视频在线观看www免费| 久久热精品热| 国产精品三级大全| 亚洲精品国产av成人精品| 久久久久久久大尺度免费视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 午夜激情久久久久久久| 亚洲精品日本国产第一区| av在线app专区| 久久久久久久久久久免费av| 精品久久久久久电影网| 精品久久久精品久久久| 97在线人人人人妻| 全区人妻精品视频| 亚洲怡红院男人天堂| 久久 成人 亚洲| 久久精品久久久久久久性| 99久久精品一区二区三区| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 亚洲av免费高清在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美xxⅹ黑人| 久久久国产一区二区| 高清欧美精品videossex| 亚洲国产精品国产精品| av.在线天堂| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲四区av| 丁香六月天网| 人成视频在线观看免费观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 午夜激情av网站| 久久狼人影院| 亚洲精品自拍成人| 国产成人av激情在线播放 | 99精国产麻豆久久婷婷| 日日撸夜夜添| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产精品偷伦视频观看了| 国产视频首页在线观看| 亚洲av综合色区一区| 亚洲无线观看免费| 视频区图区小说| 中文字幕av电影在线播放| 国产精品久久久久久久久免| 欧美最新免费一区二区三区| 日韩三级伦理在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| av视频免费观看在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| av在线老鸭窝| 亚洲av日韩在线播放| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 亚洲精品日本国产第一区| 青春草视频在线免费观看| 国产成人精品久久久久久| 色吧在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 青春草视频在线免费观看| 天天操日日干夜夜撸| 大片电影免费在线观看免费| 免费黄色在线免费观看| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产精品女同一区二区软件| 国产精品久久久久久久久免| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲国产色片| 久久婷婷青草| 国产永久视频网站| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产不卡av网站在线观看| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲图色成人| 国产熟女欧美一区二区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 五月天丁香电影| 精品视频人人做人人爽| 这个男人来自地球电影免费观看 | 伦精品一区二区三区| 欧美日韩在线观看h| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲少妇的诱惑av| 男的添女的下面高潮视频| 多毛熟女@视频| 人妻系列 视频| 欧美人与善性xxx| 哪个播放器可以免费观看大片| 久久97久久精品| 嘟嘟电影网在线观看| 久久久久国产网址| 爱豆传媒免费全集在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产成人一区二区在线| 久久久久久久久大av| 我要看黄色一级片免费的| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲av中文av极速乱| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲av综合色区一区| 女人久久www免费人成看片| 极品人妻少妇av视频| 春色校园在线视频观看| 尾随美女入室| 3wmmmm亚洲av在线观看| 老司机亚洲免费影院| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲熟女精品中文字幕| 一本大道久久a久久精品| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲精品视频女| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲不卡免费看| 最近中文字幕2019免费版| 久久人人爽人人爽人人片va| 婷婷色av中文字幕| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国国产精品蜜臀av免费| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产av精品麻豆| 午夜激情久久久久久久| 丰满饥渴人妻一区二区三| 九草在线视频观看| 桃花免费在线播放| 国产精品一二三区在线看| 伊人久久精品亚洲午夜| 2018国产大陆天天弄谢| 久久久久久人妻| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品三级大全| 亚洲图色成人| 男女边摸边吃奶| 久久久久久久精品精品| 97在线人人人人妻| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲成人手机| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 简卡轻食公司| 久久精品人人爽人人爽视色| 夫妻午夜视频| 亚洲图色成人| 久久99精品国语久久久| 日韩免费高清中文字幕av| 久热这里只有精品99| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 亚州av有码| 欧美日韩av久久| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 午夜福利,免费看| 精品亚洲成a人片在线观看| 丝袜喷水一区| 国产有黄有色有爽视频| 婷婷色综合大香蕉| 久久久久人妻精品一区果冻| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 乱人伦中国视频| 欧美人与善性xxx| 一级,二级,三级黄色视频| 午夜激情久久久久久久| 亚洲综合精品二区| 99久久人妻综合| 久久久久国产网址| 只有这里有精品99| 男女高潮啪啪啪动态图| 日韩亚洲欧美综合| 在线观看人妻少妇| 免费高清在线观看日韩| 最黄视频免费看| 国产免费视频播放在线视频| 欧美97在线视频| 男人操女人黄网站| 曰老女人黄片| 老司机影院毛片| 精品久久国产蜜桃| 新久久久久国产一级毛片| 男女啪啪激烈高潮av片| 精品少妇内射三级| 伦精品一区二区三区| 成人国产av品久久久| 91精品伊人久久大香线蕉| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲成人手机| 91精品三级在线观看| av免费在线看不卡| 飞空精品影院首页| 日韩一本色道免费dvd| 91精品国产国语对白视频| 欧美97在线视频| 精品久久久久久久久亚洲| 99久国产av精品国产电影| 久久亚洲国产成人精品v| 色婷婷av一区二区三区视频| 99热6这里只有精品| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品一区二区在线不卡| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 91aial.com中文字幕在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 久久久久久久久久成人| 日韩中文字幕视频在线看片| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 99热这里只有是精品在线观看| 色网站视频免费| 在线观看国产h片| 乱码一卡2卡4卡精品| av在线观看视频网站免费| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产又色又爽无遮挡免| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲精品视频女| 久久午夜福利片| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 欧美激情国产日韩精品一区| 一级a做视频免费观看| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 午夜老司机福利剧场| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 婷婷色麻豆天堂久久| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 麻豆成人av视频| 大片电影免费在线观看免费| 国产色爽女视频免费观看| 91国产中文字幕| 在现免费观看毛片| 人体艺术视频欧美日本| 日日摸夜夜添夜夜爱| 久久久精品免费免费高清| 亚洲伊人久久精品综合| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲av国产av综合av卡| a 毛片基地| 99精国产麻豆久久婷婷| 日韩成人av中文字幕在线观看| 男女无遮挡免费网站观看| 国产国语露脸激情在线看| 少妇 在线观看| 国产av码专区亚洲av| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 日韩av免费高清视频| 国产深夜福利视频在线观看| 日本午夜av视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲人与动物交配视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 中文字幕av电影在线播放| 蜜桃在线观看..| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 涩涩av久久男人的天堂| 久久精品国产自在天天线| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产精品久久久久久久电影| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产午夜精品一二区理论片| 有码 亚洲区| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 中文天堂在线官网| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品一区二区在线观看99| 国产精品一区二区在线不卡| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 男女国产视频网站| 精品视频人人做人人爽| 午夜激情久久久久久久| 欧美97在线视频| 久久久久久久久大av| 18禁动态无遮挡网站| 最新的欧美精品一区二区| 在线 av 中文字幕| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 最近手机中文字幕大全| 高清午夜精品一区二区三区| 精品国产国语对白av| 精品少妇黑人巨大在线播放| 视频中文字幕在线观看| 日韩成人伦理影院| av天堂久久9| h视频一区二区三区| 桃花免费在线播放| 日本91视频免费播放| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产视频内射| 国产精品 国内视频| 99久国产av精品国产电影| 色网站视频免费| 久久 成人 亚洲| 亚洲在久久综合| 成人影院久久| 中国美白少妇内射xxxbb| √禁漫天堂资源中文www| 黄色欧美视频在线观看| 亚州av有码| 涩涩av久久男人的天堂| 中国三级夫妇交换| 丝袜喷水一区| 大码成人一级视频| 欧美97在线视频| 久久久久视频综合| 在线观看一区二区三区激情| 97超视频在线观看视频| 一级爰片在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 97在线人人人人妻| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲国产av新网站| 精品人妻一区二区三区麻豆| av免费在线看不卡| tube8黄色片| 国产成人免费观看mmmm| 日日啪夜夜爽| 最近最新中文字幕免费大全7| 丝瓜视频免费看黄片| av免费观看日本| 妹子高潮喷水视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产精品国产三级专区第一集| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲av欧美aⅴ国产| 一本一本综合久久| 亚洲精品aⅴ在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 熟女电影av网| 一本一本综合久久| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲国产色片| 大话2 男鬼变身卡| 美女国产高潮福利片在线看| 男女免费视频国产| 欧美精品亚洲一区二区| 视频在线观看一区二区三区| 国产亚洲一区二区精品| 成人黄色视频免费在线看| 天堂俺去俺来也www色官网| 欧美日韩成人在线一区二区| 成人二区视频| 只有这里有精品99| 美女视频免费永久观看网站| 美女主播在线视频| 久久精品国产a三级三级三级| 草草在线视频免费看| 自线自在国产av| 亚洲美女视频黄频| 十八禁高潮呻吟视频| 亚洲伊人久久精品综合| 欧美精品高潮呻吟av久久| 色吧在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 免费av中文字幕在线| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 成人二区视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 高清在线视频一区二区三区| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲第一av免费看| 欧美国产精品一级二级三级| 国产午夜精品一二区理论片| 人人澡人人妻人| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久女婷五月综合色啪小说| 免费观看的影片在线观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 丝袜美足系列| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲人成网站在线播| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲精品国产av蜜桃| 少妇人妻 视频| av线在线观看网站| 五月玫瑰六月丁香| 另类亚洲欧美激情| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲人成77777在线视频| videossex国产| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 日韩亚洲欧美综合| 最新的欧美精品一区二区| 欧美丝袜亚洲另类| 一区二区av电影网| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 一边亲一边摸免费视频| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久国产亚洲av麻豆专区| 免费高清在线观看日韩| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 久久免费观看电影| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 欧美日韩在线观看h| 三上悠亚av全集在线观看| 极品人妻少妇av视频| tube8黄色片| 九色成人免费人妻av| 考比视频在线观看| 在线观看国产h片| 国产成人freesex在线| 久久 成人 亚洲| 九九在线视频观看精品| 久久久久精品性色| 国产精品无大码| 国产爽快片一区二区三区| 极品人妻少妇av视频| 国产成人精品一,二区| 免费av中文字幕在线| 人妻一区二区av| 免费观看无遮挡的男女| av.在线天堂| 午夜激情av网站| 91国产中文字幕| 99热这里只有精品一区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 欧美一级a爱片免费观看看| 男女国产视频网站| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 丝袜喷水一区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 一个人看视频在线观看www免费| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 内地一区二区视频在线| 亚洲精品色激情综合| 久久婷婷青草| xxxhd国产人妻xxx| 最近中文字幕2019免费版| a级毛片黄视频| 国产极品天堂在线| 亚洲不卡免费看| 亚洲av福利一区| 久久毛片免费看一区二区三区| 日本av手机在线免费观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲av免费高清在线观看| 国产黄色免费在线视频| 熟妇人妻不卡中文字幕| 国产成人精品婷婷| 国产毛片在线视频| 丰满少妇做爰视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 七月丁香在线播放| 免费看不卡的av| 久久青草综合色| 在线天堂最新版资源| 日韩 亚洲 欧美在线| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产片内射在线| 大香蕉久久网| 色婷婷久久久亚洲欧美| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 国产毛片在线视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 日韩视频在线欧美| 校园人妻丝袜中文字幕| 天堂中文最新版在线下载| 国产乱来视频区| 国产伦精品一区二区三区视频9| 欧美97在线视频| 视频中文字幕在线观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 免费黄色在线免费观看| 亚洲美女视频黄频| 成人午夜精彩视频在线观看| 国精品久久久久久国模美| 在线天堂最新版资源| 少妇熟女欧美另类| 一区二区av电影网| 考比视频在线观看| 99久久综合免费| 国产永久视频网站| 内地一区二区视频在线| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品.久久久| 亚洲国产精品成人久久小说| 日韩中字成人| 精品一区二区三卡| 国产黄片视频在线免费观看| 国产免费福利视频在线观看| 婷婷色av中文字幕| 日韩中文字幕视频在线看片| 久久久久久久久久成人| 大香蕉97超碰在线| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 国产高清不卡午夜福利| 亚洲精品第二区| 日韩制服骚丝袜av| av视频免费观看在线观看| 91精品伊人久久大香线蕉| 久久久久久久久久久久大奶| 熟妇人妻不卡中文字幕| 欧美另类一区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日韩 亚洲 欧美在线| 日韩精品有码人妻一区| 美女中出高潮动态图| av在线播放精品| 两个人的视频大全免费| 三上悠亚av全集在线观看| 日韩av免费高清视频| 黄色一级大片看看| 国产成人aa在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 精品人妻在线不人妻| 男男h啪啪无遮挡| 日韩av不卡免费在线播放| 老熟女久久久| 制服人妻中文乱码| 插逼视频在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲性久久影院| 日本欧美国产在线视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 热re99久久国产66热| 国产黄色免费在线视频| 精品亚洲成国产av| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| av.在线天堂| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲内射少妇av| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 水蜜桃什么品种好| 亚洲综合色惰| av专区在线播放| 高清不卡的av网站| 一级,二级,三级黄色视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 男女高潮啪啪啪动态图| 99视频精品全部免费 在线| 啦啦啦啦在线视频资源| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 精品酒店卫生间| 亚洲精品第二区| 日韩大片免费观看网站| 免费看光身美女| 欧美精品亚洲一区二区| 99热网站在线观看| 尾随美女入室| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩精品有码人妻一区| 国产精品人妻久久久久久| 春色校园在线视频观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲综合精品二区| 哪个播放器可以免费观看大片| av专区在线播放| av国产久精品久网站免费入址| av播播在线观看一区| 男人添女人高潮全过程视频| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲av中文av极速乱| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| av免费在线看不卡| 精品人妻在线不人妻| 校园人妻丝袜中文字幕| 人妻少妇偷人精品九色| 中文天堂在线官网| 丰满饥渴人妻一区二区三| 精品久久久久久电影网| 国产免费又黄又爽又色| 高清av免费在线| 亚洲久久久国产精品| 午夜91福利影院| 美女大奶头黄色视频| 嘟嘟电影网在线观看| 国产成人91sexporn| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 搡女人真爽免费视频火全软件| 天天影视国产精品| 亚洲国产精品一区三区| 色94色欧美一区二区| 国产片特级美女逼逼视频| 国产精品偷伦视频观看了| 乱人伦中国视频|