圓耳管鼻蝠在云南西雙版納的新發(fā)現(xiàn)

周全，李彥男，余文華，黃正瀾懿，劉碩，王巧燕，權(quán)銳昌，李松*，吳毅*

(1.廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣州510006；2.中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所,昆明動(dòng)物博物館，昆明650223；3.西雙版納傣族自治州國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理局科研所，云南景洪666100；4.中國(guó)科學(xué)院西雙版納熱帶植物園，云南勐臘666303)

圓耳管鼻蝠Murina cyclotis隸屬于翼手目Chiroptera蝙蝠科Vespertilionidae管鼻蝠亞科Murininae(Simmons，2005；Smith，解焱，2009；Sonetal.，2015)，為典型的森林型蝙蝠。由于該類(lèi)群常棲于遠(yuǎn)離人煙的森林區(qū)域，標(biāo)本難于捕獲，基礎(chǔ)數(shù)據(jù)缺乏，故早期管鼻蝠研究進(jìn)展緩慢(Fransicetal.，2010)。但隨著針對(duì)森林型蝙蝠調(diào)查強(qiáng)度的提高與豎琴網(wǎng)的逐漸使用，近10年該類(lèi)群國(guó)內(nèi)外研究發(fā)展迅速。目前全世界已報(bào)道管鼻蝠合計(jì)41種(Wilson &Mittermeier，2019；Yuetal.，2020)，中國(guó)分布19種(王應(yīng)祥，2003；Simmons，2005；劉少英，吳毅，2019；Yuetal.，2020)。在我國(guó)管鼻蝠新分布報(bào)道也逐漸增多(黎舫等，2017；吳毅等，2017；陳子禧等，2018；黃正瀾懿等，2018)，但涉及圓耳管鼻蝠的研究相對(duì)較少(Soisooketal.，2013；Yueetal.，2019；李彥男等，2020)。

本課題組近年來(lái)持續(xù)在中國(guó)南部區(qū)域開(kāi)展森林型蝙蝠多樣性資源調(diào)查。在2019年4—5月利用蝙蝠豎琴網(wǎng)在云南西雙版納采集到中等偏小體型管鼻蝠5只(3♀，孕期；2♂)。根據(jù)其外形、頭骨和毛色特征，并結(jié)合分子系統(tǒng)學(xué)證據(jù)將其鑒定為圓耳管鼻蝠，為該種在云南省分布的新發(fā)現(xiàn)。

1 標(biāo)本采集

該批標(biāo)本采集于云南省勐臘縣龍林新村水溝(101°29.967′E，21°32.186′N(xiāo)，海拔1 024 m)，屬典型的熱帶雨林氣候，森林覆蓋率高，氣候溫暖潮濕，生物多樣性極為豐富。通過(guò)架設(shè)蝙蝠豎琴網(wǎng)共采集到5只中等體型管鼻蝠(GZHU 19207～09、19217、19332)，標(biāo)本現(xiàn)保存于廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院。

2 研究方法

根據(jù)Corbet和Hill(1992)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行外部形態(tài)鑒定，參照楊奇森等(2007)的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)，使用電子天平(精度0.1 g)和數(shù)顯游標(biāo)卡尺(精度0.01 mm，上海量具刃具廠)進(jìn)行測(cè)量。外部形態(tài)指標(biāo)7項(xiàng)(表1)：體質(zhì)量(body weight，Wt)、頭體長(zhǎng)(head and body length，HB)、前臂長(zhǎng)(forearm length，F(xiàn)A)、耳長(zhǎng)(ear length，EL)、后足長(zhǎng)(hindfoot length，HF)、脛骨長(zhǎng)(tibia length，Tib)和尾長(zhǎng)(tail length，TL)。頭骨指標(biāo)測(cè)量10項(xiàng)：顱全長(zhǎng)(greatest length of skull，GTL)、枕犬長(zhǎng)(condylo-canine length，CCL)、腦顱寬(breadth of braincase，BB)、顴寬(zygomatic width，ZW)、眶間寬(interorbital of width，IOW)、上齒列長(zhǎng)(maxillary tooth row length，C1-M3)、上犬齒寬(upper canine width，C1-C1)、上臼齒寬(upper third molar width，M3-M3)、下齒列長(zhǎng)(mandibular tooth row length，C1-M3)和下頜長(zhǎng)(mandibular length，ML)。

使用通用總DNA提取試劑盒(AG通用型基因組AG21009，艾科瑞生物)提取總DNA。根據(jù)管鼻蝠亞科種類(lèi)在NCBI-nt(GenBank)數(shù)據(jù)庫(kù)基因覆蓋豐度篩選使用線粒體細(xì)胞色素氧化酶亞基Ⅰ基因(cytochrome oxidase subunitⅠgene，COⅠ)片段和核基因重組激活基因2(recombination activating protein 2，Rag2)片段為分子標(biāo)記。PCR引物、擴(kuò)增體系及PCR程序設(shè)置參考Yu等(2020)。擴(kuò)增成功的PCR產(chǎn)物送往上海生工生物工程公司進(jìn)行測(cè)序。利用Geneious 4.8.5對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行人工拼接與校對(duì)。從NCBI-nt數(shù)據(jù)庫(kù)下載管鼻蝠屬的COⅠ和Rag2各物種代表性序列，將毛翼管鼻蝠Harpiocephalus harpia設(shè)置為外群，MUSCLE排序比對(duì)(Edgar，2004)，MEGA 5.0構(gòu)建最大似然樹(shù)(Tamuraetal.，2011)，自展100次估計(jì)節(jié)點(diǎn)支持度。

3 研究結(jié)果

3.1 外形及頭骨特征

該批標(biāo)本均為中等偏小體型管鼻蝠，鼻孔呈管狀(圖1：a)。雄性前臂長(zhǎng)(30.03 mm，30.41 mm)較雌性(33.03 mm±0.24 mm)略小；顱全長(zhǎng)在雌雄間同樣存在差異，雄性(16.21 mm，16.42 mm)較雌性(17.15 mm±0.15 mm)略小。上述度量指標(biāo)與貴州和廣西圓耳管鼻蝠基本吻合(表1)。在外部形態(tài)方面，耳廓較圓，無(wú)明顯凹痕，耳前緣內(nèi)側(cè)底部具黃色毛發(fā)；背部毛尖呈褐色，中段為金黃色，毛基淺灰色；尾部毛色相對(duì)暗淡，為灰褐色，中間具有黃褐色剛毛；頸部與喉部毛發(fā)呈黃褐色，與胸部以下的淺灰色腹毛截然不同；體側(cè)膜連于第一趾的基部，足部覆蓋些許金黃色毛發(fā)(圖1：a、b、c)。頭骨方面，整體略呈半球形，人字嵴和矢狀嵴較明顯；顴弓較發(fā)達(dá)；第一上前臼齒(P2)較發(fā)達(dá)，大小接近第二上前臼齒(P4)；犬齒(C)、第一上前臼齒(P2)和第二上前臼齒(P4)的尖端均有后傾趨勢(shì)；第一上臼齒(M1)和第二上臼齒(M2)的中齒尖退化，呈“U”型咬合面；下頜具有較發(fā)達(dá)的冠狀突，齒式為2.1.2.3/3.1.2.3=34(圖1：d～g)。其外形和頭骨特征也與貴州和廣西同種標(biāo)本相符(Corbet &Hill，1992；Eger &Lim，2011)。

表1 不同地區(qū)圓耳管鼻蝠的外形及頭骨特征Table 1 External and skull measurements of Murina cyclotis from different locales

3.2 分子鑒定

基于線粒體基因COⅠ和核基因Rag2片段所構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)均支持該批標(biāo)本為圓耳管鼻蝠(圖2：a、b)?；贑OⅠ基因的系統(tǒng)樹(shù)中該支系支持度為100，Rag2標(biāo)記的系統(tǒng)樹(shù)中為99。值得注意的是COⅠ標(biāo)記提示圓耳管鼻蝠中存在多個(gè)高支持度的支系，且本研究標(biāo)本與NCBI-nt數(shù)據(jù)庫(kù)上來(lái)自老撾的圓耳管鼻蝠COⅠ序列JF443973有更近的親緣關(guān)系(圖2：a)。

4 討論

由于管鼻蝠常棲息于植被較好且遠(yuǎn)離人煙的森林，其小體型和敏捷飛行能力導(dǎo)致標(biāo)本捕獲相對(duì)困難，且物種間形態(tài)相似、難以區(qū)分，故其本底資料和基礎(chǔ)生物學(xué)資料匱乏，分類(lèi)學(xué)問(wèn)題爭(zhēng)議較多(Fransicetal.，2010；Yuetal.，2020)。在我國(guó)，圓耳管鼻蝠的研究報(bào)道一直較少，本底狀況未明。本研究參考Corbet和Hill(1992)外形、頭骨和毛色等形態(tài)學(xué)特征，結(jié)合系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)證據(jù)，確認(rèn)該批標(biāo)本為圓耳管鼻蝠，為該種在云南省的翼手類(lèi)分布新記錄。國(guó)內(nèi)與本種形態(tài)及大小類(lèi)似的管鼻蝠有3種，即：中管鼻蝠Murina huttoni、哈氏管鼻蝠Murina harrisoni和圓耳管鼻蝠，前2種管鼻蝠的第一上臼齒和第二上臼齒具有明顯的中齒尖(陳子禧等，2018；黃正瀾懿等，2018)，而本研究標(biāo)本上述臼齒中齒尖不明顯，外形與頭骨的度量數(shù)據(jù)和特征也與圓耳管鼻蝠吻合(Eger &Lim，2011；Soisooketal.，2013)。歷史文獻(xiàn)指出該種在我國(guó)的分布區(qū)主要集中在華南區(qū)域，即：江西、廣東、廣西、海南(蔣志剛等，2016)和貴州(李彥男等，2020)，而其國(guó)外分布區(qū)則包括尼泊爾、緬甸、越南、泰國(guó)、老撾和印度等地(Wilson &Mittermeier，2019)。故本次分布新發(fā)現(xiàn)，明確了該物種在中國(guó)西部區(qū)域存在的可能性，豐富了該物種的本底分布資料。值得注意的是，該種管鼻蝠在廣東僅發(fā)現(xiàn)分布于粵西云開(kāi)大山一帶，在粵北和粵東僅見(jiàn)其近似種中管鼻蝠分布，因此，對(duì)二者展開(kāi)細(xì)致的親緣地理學(xué)和種群歷史動(dòng)態(tài)分析，將有助于進(jìn)一步明確二者分布界限，加深對(duì)管鼻蝠類(lèi)群在我國(guó)歷史演化進(jìn)程與物種形成機(jī)制的理解。