不同品種家蠶蠶蛹脂肪酸組分分析

于少芳，盧紅伶，陳琳，王紅芬，祝新榮

(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 蠶桑與茶葉研究所，浙江 杭州 310021)

人類食物的種類豐富多樣，隨著人們生活水平的提高和科技的快速發(fā)展，人們對食物中營養(yǎng)元素的組分構(gòu)成越來越關(guān)注、對食物的品質(zhì)要求越來越高。昆蟲具有不飽和脂肪酸含量高、氨基酸種類齊全、營養(yǎng)成分構(gòu)成合理等優(yōu)點，是開發(fā)功能性食品的重要來源。家蠶蛹含有豐富的蛋白質(zhì)，其中8種氨基酸是人體生長發(fā)育所必需的氨基酸[1-3]。家蠶蛹含有大量的油脂，不飽和脂肪酸含量高[4-5]，特別是油酸、亞油酸和α-亞麻酸等多種人體必需的不飽和脂肪酸，具有較高的營養(yǎng)保健價值[6]。因此，評估不同家蠶品種蠶蛹的脂肪酸組成及含量對優(yōu)質(zhì)家蠶蛹蠶品種的培育與食藥用家蠶資源的開發(fā)利用具有重要意義。

浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑與茶葉研究所有豐富的家蠶種質(zhì)資源，但高食藥用價值的蠶品種仍是一個空白。

本實驗采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)檢測技術(shù)，針對市場利用家蠶蛹資源開發(fā)優(yōu)質(zhì)保健食品的需求，對蠶桑與茶葉研究所16個現(xiàn)行家蠶品種的蛹油脂肪酸組成及含量進行測定分析，評估16個家蠶品種的蠶蛹品質(zhì)，為培育優(yōu)質(zhì)食藥用蠶品種提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹，均由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑與茶葉研究所提供。

1.2 蠶蛹油的提取

選取上蔟第9天的新鮮雌、雄蠶蛹樣品，經(jīng)65 ℃烘干、粉碎并過40目篩。稱取該蠶蛹粉0.2 g，加3 mL石油醚、3 mL乙醚，再加入9 mL 0.4 mol·L-1KOH-CH3OH溶液，搖勻，放置反應(yīng)約16 h。而后加入飽和的NaCl溶液加速分層，靜置20 min，取上層液，離心后取上層，揮干，加入1 mL石油醚，6 000 r·min-1離心30 min，取上層液，過膜，進氣相。

標液：稱取標準品適量，用石油醚配制成1 mg·mL-1濃度的液體。

標準品名稱：GLC 68A，公司：NU-CHEK PREP，INC。

1.3 氣相色譜-質(zhì)譜分析

采用安捷倫7890A-5975C氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)。色譜柱為DB-FFAP毛細管柱，載氣N2，柱前壓49 kPa，進樣口溫度270 ℃，傳輸線溫度250 ℃；程序升溫設(shè)置為起始溫度170 ℃，以15 ℃·min-1升至220 ℃，保持30 min；進樣量1 μL；分流比40∶1。

1.4 出油率檢測

采用索氏提取法檢測蠶蛹出油率。稱取粉碎過篩后的蠶蛹粉1 g，全部移入稱重過的濾紙筒內(nèi)。將濾紙筒放入脂肪抽提器內(nèi)，連接已干燥至恒重的接收瓶，由抽提器抽提冷凝管上端加入無水乙醚或石油醚至瓶內(nèi)容積的2/3處，于水浴上加熱，使乙醚或石油醚不斷回流提取，一般抽提6～12 h。取下接收瓶，回收乙醚或石油醚，待接收瓶內(nèi)乙醚剩1～2 mL時在水浴上蒸干，再用95～105 ℃干燥2 h，放入干燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱量。將提取油脂后的蠶蛹粉包烘干稱重，重復(fù)2次，結(jié)果取平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 家蠶蛹脂肪酸成分與含量

利用GC-MS檢測16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹脂肪酸含量，并對比脂肪酸標準品確定家蠶蛹脂肪酸的成分(表1)。16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹脂肪酸含量為25%～45%，品種間差異明顯，且雌、雄蛹之間含量差別大。其中含油率最高是平30B的雄蛹，最低的是卵明的雌蛹。將脂肪酸相對含量<0.15%的忽略，蠶蛹樣品中檢測到的脂肪酸成分為7～10個，不同品種之間成分差別不明顯。而蠶蛹樣品中脂肪酸含量>0.5%的成分有6類，分別是C18∶3亞麻酸、C18∶1油酸、C16∶0棕櫚酸、C18∶2亞油酸、C18∶0硬脂酸、C16∶1棕櫚油酸，其中C18∶3亞麻酸的含量高達30%。

表1 不同品種家蠶蛹的脂肪酸成分和含量分析

2.2 不同品種雌蠶蛹脂肪酸相對含量

在雌蛹中，不飽和脂肪酸相對含量C18∶3亞麻酸>C18∶1油酸>C16∶0棕櫚酸>C18∶2亞油酸>C18∶0硬脂酸>C16∶1棕櫚油酸(圖1)。雌蛹中相對含量最高的脂肪酸為C18∶3亞麻酸，其相對含量>40%的品種有11個，最高的品種為限菁A，高達45.59%。最低的品種為云7，為36.66%。蠶蛹中相對含量最低的脂肪酸為C16∶1棕櫚油酸；C18∶1油酸的相對含量與C16∶0棕櫚酸的相對含量接近；C18∶2亞油酸的相對含量與C18∶0硬脂酸的相對含量相差無幾。

圖1 不同品種雌蠶蛹的脂肪酸相對含量

2.3 不同品種雄蠶蛹脂肪酸相對含量

在雄蛹中，不飽和脂肪酸相對含量C18∶3亞麻酸>C18∶1油酸>C16∶0棕櫚酸>C18∶2亞油酸>C18∶0硬脂酸>C16∶1棕櫚油酸(圖2)。雄蛹中相對含量最高的脂肪酸為C18∶3亞麻酸。其中最高的品種為限菁A，高達38.50%；最低的品種為卵82B雄，為32.37%。各種脂肪酸相對含量趨勢與雌蛹一致。

圖2 不同品種雄蠶蛹的脂肪酸相對含量

2.4 家蠶雌、雄蛹脂肪酸組成

家蠶雌、雄蛹中均含有C18∶3亞麻酸、C18∶1油酸、C16∶0棕櫚酸、C18∶2亞油酸、C18∶0硬脂酸、C16∶1棕櫚油酸這6大類脂肪酸，且其相對含量趨勢一致，都是C18∶3亞麻酸>C18∶1油酸>C16∶0棕櫚酸>C18∶2亞油酸>C18∶0硬脂酸>C16∶1棕櫚油酸。從圖2可知，蠶蛹各脂肪酸C18∶3亞麻酸、C18∶1油酸與C18∶2亞油酸三者具有相關(guān)關(guān)系，本文將16個不同家蠶品種蠶蛹的6種脂肪酸進行相關(guān)關(guān)系分析，相關(guān)系數(shù)見表2。相關(guān)系數(shù)的絕對值>0.8為強相關(guān)關(guān)系，0.3～0.8為弱相關(guān)關(guān)系。其中，C18∶1油酸與C18∶2亞油酸和C18∶3亞麻酸均呈負相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為-0.878和-0.800。C16∶1棕櫚油酸與C18∶2亞油酸呈負相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為-0.810。其他脂肪酸之間相關(guān)關(guān)系均為弱相關(guān)關(guān)系。

表2 蠶蛹中各脂肪酸之間的相關(guān)性

3 小結(jié)與討論

本實驗利用GC-MS測定了16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹脂肪酸含量和成分。分析結(jié)果顯示，不論是蠶蛹的出油率還是脂肪酸相對含量，品種間的差異較大，具有一定的品種和性別特異性。雄蛹的含油率高于雌蛹，但是雌蛹中的不飽和脂肪酸C18∶3亞麻酸高于雄蛹。其中含油率最高的是平30B品種的雄蛹，而不飽和脂肪酸C18∶3相對含量最高的是限菁A品種的雌蛹。蠶蛹各脂肪酸之間具有一定的相關(guān)關(guān)系。此結(jié)果對選育高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)家蠶蛹油蠶品種具有指導(dǎo)意義，為蠶蛹的食用化產(chǎn)業(yè)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

我國家蠶種質(zhì)資源豐富，蠶桑產(chǎn)業(yè)在世界上占據(jù)主導(dǎo)地位。但目前為止，家蠶品種應(yīng)用仍注重于繭絲的利用，綜合開發(fā)與利用嚴重不足，長期以來蠶蛹僅作為動物的飼料或廢棄物，浪費相當嚴重，家蠶蛹作為食藥用資源開發(fā)尚處于初期。開發(fā)家蠶的食藥用價值需要品種與技術(shù)的創(chuàng)新，具有特定食藥用價值蠶品種的培育是家蠶食藥用產(chǎn)業(yè)化利用的基礎(chǔ)，對促進蠶絲產(chǎn)業(yè)綜合效益的提高具有一定的現(xiàn)實意義。