快速石蠟切片技術(shù)在病理檢驗(yàn)中的應(yīng)用

譚超華 李紅全 李立 蔡曉燕

（廣東省臺(tái)山市人民醫(yī)院病理科 廣東臺(tái)山 529200）

1 前言

在外科手術(shù)中， 快速病理診斷對(duì)選擇手術(shù)方式具有重要意義。 在21 世紀(jì)發(fā)展的今天，我國醫(yī)療技術(shù)在不斷進(jìn)步，對(duì)于病情的檢查也更加快速準(zhǔn)確。快速石蠟切片方案，操作既簡單又迅速，取得良好檢驗(yàn)效果，其應(yīng)用價(jià)值高[1-2]。 改良之后的石蠟切片技術(shù)對(duì)設(shè)備以及技術(shù)的要求都有一定程度的降低， 減少了成本投入，而且所需的時(shí)間也大為縮短，在一定程度上避免了人力的浪費(fèi)， 而且檢查結(jié)果也更加的準(zhǔn)確，應(yīng)該在臨床上得到推廣[3]。 本研究采用快速石蠟切片檢驗(yàn)，報(bào)道如下：

2 資料與方法

2.1 一般資料

本研究經(jīng)過本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)， 研究對(duì)象為我院2017 年1 月～2020 年1 月病理科接受收治的190 例病理檢驗(yàn)患者，均經(jīng)過患者知情同意，其中男86 例，女 104 例，年齡 24～63 歲，平均（44.58±4.29）歲，受檢組織分為：乳腺35 例；淋巴結(jié)15 例；宮頸25 例；卵巢 15 例；甲狀腺 25 例；腮腺 15 例；膽囊 15例；闌尾10 例；胃腸鏡活檢20 例；支氣管內(nèi)膜活檢15 例。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）依從性較好者。（2）資料完整。（3）無其他重要臟器功能受損。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1） 機(jī)體嚴(yán)重疾患且影響研究結(jié)果者。（2）合并其他腫瘤、心衰者。（3）中途因各種原因無法繼續(xù)接受相關(guān)治療而退出者。

2.2 方法

常規(guī)切片方案： 取新鮮病變組織， 實(shí)施常規(guī)固定、脫水、透明、浸蠟以及包埋切片，切片厚度在4 μm～5 μm 之間，并對(duì)切片實(shí)施HE 染色，最后在顯微鏡下進(jìn)行觀察。

進(jìn)行快速石蠟切片方案： 此次研究所用設(shè)備有染片機(jī)、 包埋機(jī)、 烤片機(jī)以及切片機(jī)等； 試劑有af液、石蠟、硬脂酸以及丙酮等。啟動(dòng)快速處理儀，予以預(yù)熱，使其溫度達(dá)到72℃后，對(duì)病灶組織進(jìn)行合理修整，使其呈現(xiàn)出薄片狀，厚度以1.0～1.5 mm 為最佳，以甲醇固定液對(duì)其進(jìn)行浸泡，約10 min 左右。 將標(biāo)本組織取出后，予以水洗，約10 s 后，置于濾紙表面，使其水分被充分吸盡，再用丙醇進(jìn)行浸泡，并予以超聲處理，時(shí)長約15 min 即可，確保其上浮。 調(diào)制石蠟以及硬脂酸，兩者間比例是3/1，將組織放入混合液中，約20 min 后，組織會(huì)逐漸沉底，再以鑷子對(duì)其進(jìn)行清壓，確保無氣泡出現(xiàn)。予以常規(guī)包埋以及常規(guī)切片， 使其快速冷卻。 將切片的厚度控制在3.0 μm～4.0 μm 之間，于載玻片表面均勻攤鋪切片后，將其置入烤片機(jī)中，予以烤片約10～15 s 即可，且將烤片溫度控制在80℃以內(nèi)。予以HE 染色，時(shí)長控制約43 min，并以中性樹膠對(duì)其進(jìn)行封固。

2.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)并比較這2 種切片制作技術(shù)對(duì)病理檢驗(yàn)技術(shù)的影響，通過2 種切片不同流程操作時(shí)間、標(biāo)本制作時(shí)間進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)全文數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，t 檢驗(yàn)，P 小于0.05判定其有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

與常規(guī)切片方案固定操作時(shí)間、 第一次浸蠟操作時(shí)間、透明膠水操作時(shí)間、第二次浸蠟操作時(shí)間、切片制作時(shí)間相比， 快速石蠟切片方案顯著較短（P＜0.05），參考表1。

表1 兩種檢驗(yàn)方案的操作時(shí)間對(duì)照（n=60，min）

4 討論

外科手術(shù)在術(shù)中常會(huì)遇到診斷困難的情況，常常需要病理科提供快速準(zhǔn)確的診斷， 術(shù)中病理具有局限性大、組織樣本小、時(shí)間緊等特點(diǎn)，對(duì)診斷準(zhǔn)確性影響較大。 傳統(tǒng)診斷方法為冰凍切片與加溫石蠟切片，加溫石蠟切片方法在檢驗(yàn)過程中，易出現(xiàn)收縮及組織變形等問題[4]；冰凍切片方法成本較高，只適合于小范圍應(yīng)用[5]。

研究發(fā)現(xiàn)，病理檢驗(yàn)工作中，病理切片技術(shù)是否精良，不僅會(huì)影響檢驗(yàn)時(shí)間，而且還會(huì)對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量造成影響，因此需重視[6]。 就目前而言，臨床檢驗(yàn)技術(shù)以冷凍技術(shù)以及石蠟技術(shù)為主， 但是在病理診斷工作中，冷凍技術(shù)往往無法繼續(xù)切片，同時(shí)無法對(duì)切片厚度進(jìn)行有效把握， 而石蠟技術(shù)操作程序呈現(xiàn)出復(fù)雜性特征，可能會(huì)使機(jī)體病理組織異常收縮，或者是在短時(shí)間內(nèi)變硬，影響其診斷質(zhì)量，以至于出錯(cuò)率異常升高[7]。 鑒于此，在快速病理檢驗(yàn)工作中，落實(shí)快速石蠟切片方案體現(xiàn)出重要價(jià)值， 該檢驗(yàn)方案除了不會(huì)受到地域因素、氣候因素的影響外，同樣不會(huì)受到環(huán)境因素影響，價(jià)值操作程序具有方便性，因此實(shí)踐性較高[8]。 不僅如此，該檢驗(yàn)方案所用設(shè)備以及儀器的普及性較高，予以切片鏡檢，除了能提升組織結(jié)構(gòu)的整體清晰度外， 還能確保細(xì)胞組織形態(tài)的完整性，因此有助于提升檢驗(yàn)工作質(zhì)量，進(jìn)一步控制固定操作、第一次浸蠟、透明脫水以及第二次浸蠟等程序的操作時(shí)間。本次研究結(jié)果表明，與常規(guī)切片方案固定操作時(shí)間、第一次浸蠟操作時(shí)間、透明膠水操作時(shí)間、第二次浸蠟操作時(shí)間、切片制作時(shí)間相比，快速石蠟切片方案顯著較短（P＜0.05）。 快速石蠟切片技術(shù)可以對(duì)病人的患病部位進(jìn)行精確診斷， 對(duì)于病人患病部位的病情以及病例特點(diǎn)都能夠進(jìn)行針對(duì)性的檢測，大大提高了診斷的精確性。該技術(shù)對(duì)環(huán)境的包容度高，可以適應(yīng)惡劣的環(huán)境條件，對(duì)于設(shè)備的要求也比較低，對(duì)于部分基層縣級(jí)醫(yī)院來說，還是便于操作的，而且該技術(shù)對(duì)人員技術(shù)要求也較為簡單，應(yīng)該在更多的臨床中進(jìn)行推廣使用， 一定可以給更多人帶來福音。為提升快速石蠟切片方案實(shí)踐價(jià)值，在具體操作程序中，還需重視：（1）對(duì)脫水機(jī)中水槽的溫度進(jìn)行合理調(diào)整，以70℃～72℃為最佳，避免過高；（2）在取材中，需對(duì)病灶組織厚度進(jìn)行合理把握，以1.0～1.5mm 為最佳， 避免過后影響檢驗(yàn)質(zhì)量；（3）在給予病理組織脫水時(shí)，要注意觀察，根據(jù)氣泡、組織質(zhì)地、組織顏色等情況確定脫水的時(shí)間。 （4）石蠟以及硬脂酸的質(zhì)量比設(shè)定為3∶1，對(duì)硬脂酸整體濃度進(jìn)行有效控制，防止其濃度過高導(dǎo)致掉片問題出現(xiàn)，而濃度過低可能影響切片透明度；（5）烤片之前，為控制烤片時(shí)長，需用濾紙對(duì)余液進(jìn)行有效吸除。（6）檢驗(yàn)人員要與臨床醫(yī)師進(jìn)行及時(shí)有效的溝通，以便明確對(duì)病理診斷相關(guān)的要求，為臨床提供最佳診斷結(jié)果。

綜上所述，臨床病理檢驗(yàn)工作中，選擇快速石蠟切片技術(shù)，可行性高，可縮短各環(huán)節(jié)操作時(shí)長，同時(shí)還能確保檢驗(yàn)工作質(zhì)量，此方法可廣泛應(yīng)用于臨床。