鈉?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)多肽缺陷病的臨床特點(diǎn)及分子遺傳特征的研究進(jìn)展

陳蕊 王美芬

摘要：鈉?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)多肽缺陷病是由于SLC10A1基因變異，導(dǎo)致膽汁酸代謝障礙的疾病。臨床表現(xiàn)主要以兒童期持續(xù)、頑固的高膽汁酸為主，部分患兒早期伴有膽紅素升高、膽汁淤積癥。NTCP鑒定為人類肝癌細(xì)胞中乙肝病毒感染的關(guān)鍵受體，為建立該病毒的新型培養(yǎng)系統(tǒng)及抗病毒開辟了一條新途徑。本文對該病的臨床特點(diǎn)、分子特征研究進(jìn)展及乙肝病毒感染的關(guān)系進(jìn)行綜述。

關(guān)鍵詞：鈉?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)多肽，乙肝病毒，分子特征，研究進(jìn)展

【中圖分類號】R633 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）04-306-02

一、臨床表現(xiàn)及疾病歷史

鈉?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)多肽（Sodium taurocholate cotranSPorting PolyPePtide，NTCP）缺陷病是因基因SLC10A1變異導(dǎo)致膽汁酸代謝障礙的一種近年來新發(fā)現(xiàn)疾病。主要臨床表現(xiàn)為顯著、持續(xù)性高膽汁酸，膽汁酸升高的程度與其他肝功能指標(biāo)不匹配。

SLC10A1基因于1994年被克隆[1]，國際上報道的首例NTCP缺陷病，是荷蘭學(xué)者Vaz等[2]在2015年報道的。報道的患兒是一名5歲阿富汗裔女孩，1歲前出現(xiàn)的持續(xù)而顯著的高膽烷血癥（hyPercholanemia）為主要實(shí)驗(yàn)室表現(xiàn)，血清總膽汁酸水平峰值高達(dá)1531umol/L，但沒有肝酶、直接膽紅素升高，伴有輕微肌張力減低和生長發(fā)育落后;SLC10A1 基因測序發(fā)現(xiàn)患兒系突變c.755G>A（P.R252H）的復(fù)合雜合子。2016年，我國兒科界報道了國際第2例NTCP缺陷病患兒[3]。該患兒也以顯著且持續(xù)的高膽汁酸血癥（峰值達(dá)738.7umol/L）為突出特征，嬰兒早期出現(xiàn)過膽汁淤積性黃疸。中文文獻(xiàn)中首例NTCP缺陷病患兒報道于2017年，患兒以新生兒期早發(fā)性、遷延性、頑固性黃疸為主要臨床特征，血生化符合肝內(nèi)膽汁淤積癥特點(diǎn)[4]，黃疸消退后高膽汁酸血癥仍持續(xù)存在，但無瘙癢癥狀。

二、分子特征

NTCP是一種在肝細(xì)胞基側(cè)膜表達(dá)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，是一種作為參與膽汁酸腸肝循環(huán)的重要載體，能從血漿中的結(jié)合膽汁酸鹽攝取入肝細(xì)胞[5-6]，SLC10A1基因突變，導(dǎo)致NTCP從血漿中攝取膽汁酸鹽障礙，膽汁酸淤積，形成顯著、持續(xù)的高膽汁酸血癥。NTCP依賴鈉轉(zhuǎn)運(yùn)通道，能從血漿中攝取結(jié)合型膽汁酸進(jìn)入肝細(xì)胞，但是也能通過代償機(jī)制轉(zhuǎn)運(yùn)膽汁酸。其代償機(jī)制包括了以非鈉依賴性方式通過肝細(xì)胞基側(cè)膜有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白異二聚體OATP1B1/1B3轉(zhuǎn)運(yùn)膽汁，在肝細(xì)胞膜表達(dá)的異二聚體OSTα/OSTβ，也可以攝取膽汁酸[7]。二聚體OATP1B1/1B3隨著年齡的增長其表達(dá)量增多，使兒童期患NTCP缺陷病患兒的高膽汁酸隨著年齡的增長而逐步下降，甚至逐漸恢復(fù)正常。由于存在代償機(jī)制，使NTCP缺陷病患兒短期臨床結(jié)局良好，尚無肝硬化甚至致死病例的報道。

NTCP的編碼基因SLC10A1位于染色體14q24.2，全長約21.9kb，其編碼區(qū)由5個外顯子和4個內(nèi)含子構(gòu)成，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物長2049bP，包含一個1050bP的開放讀碼框;非編碼區(qū)除了5和3非翻譯區(qū)，還包含一個長約1.2kb的啟動子區(qū)域，而5′非翻譯區(qū)和啟動子區(qū)域含多種順式調(diào)控元件，其中CEBP-β和HNF3β已經(jīng)被證實(shí)參與人類SLC10A1基因表達(dá)的調(diào)控[8-9]。目前已經(jīng)報道的突變位點(diǎn)包括c.800C>T（P.Ser267Phe）[10]、P.Ar9252HiS[5]、c.615-618del（P.Ser206Prof*12）[11]，隨著基因檢測技術(shù)的發(fā)展，以及研究者對該病研究的不斷加深，發(fā)現(xiàn)T（P.Ser267Phe）（S267F，c.800 C> T，rS2296651）在SLC10A1基因變異最為常見，在東南亞國家中，屬于高頻變異。尤其在我國患者中，其基因變異頻率高達(dá)95.5%[12，13，14]，在SLC10A1變異譜中占有領(lǐng)先地位。根據(jù)千人基因組計劃的研究數(shù)據(jù)表明，P.Ser267Phe等位基因在非裔、歐裔美國人和西班牙語人群中暫時無發(fā)現(xiàn)，而在東南亞人群變異頻率較高，說明該基因變異具有種族差異[15];在我國華南漢族和傣族以及越南人群中，該變異等位基因頻率分別高達(dá)8%、12%和11%，NTCP缺陷病我國華南漢族人群中發(fā)病率有0.64%，傣族人群有1.44%，越南族人群有1.21%[16]。

三、HBV感染的受體

有研究表明，NTCP被破壞，膽汁酸只能以非鈉依賴性方式，通過肝細(xì)胞基側(cè)膜的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白異二聚體OATP1B1/1B3來維持代謝，但是膽汁酸的攝取率較低[17]。NTCP為人類肝癌細(xì)胞中不可缺少的 HBV感染的關(guān)鍵受體[18]。NTCP不僅有攝取膽汁酸的作用，也能介導(dǎo)HBV、HDV進(jìn)入肝細(xì)胞[19]。一方面，NTCP可直接與HBV的L蛋白的PreS1區(qū)結(jié)合感染肝細(xì)胞，HBV PreS1區(qū)的第2-48個氨基酸是HBV和NTCP的結(jié)合位點(diǎn)，NTCP的第84-87和157-165個氨基酸是最主要的結(jié)合位點(diǎn)[20]。尤其是存在NTCP表達(dá)的肝癌HePG2細(xì)胞（HePG2-NTCP）易受 HBV 和 HDV感染[21]。被感染的HePG2 / NTCP細(xì)胞比HePG2細(xì)胞釋放更多的病毒抗原[22]。在體外實(shí)驗(yàn)中，HePG2 / NTCP細(xì)胞也是HBV和 HDV感染受體，為病毒入胞提供了便利的通道[18]。而當(dāng)肝細(xì)胞增值時，在肝細(xì)胞基側(cè)膜表達(dá)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NTCP表達(dá)下調(diào)，與HBV的L蛋白結(jié)合減少，新生的肝細(xì)胞與HBV感染降低，對HBV有一定的抵抗性[23]。另一方面，F(xiàn)XR作為HBV的前病毒因子，可以和膽汁酸結(jié)合。FXR被膽汁酸激活后，增強(qiáng)PreS1、PreS2啟動子的活性和HBV核心啟動子的轉(zhuǎn)錄，增加前基因組RNA合成并促進(jìn)HBeAg的表達(dá)，進(jìn)而影響病毒復(fù)制水平[24，25]。膽汁酸也可以通過持續(xù)下調(diào)FXR或減少EnhⅡ/CP處FXR的數(shù)量，抑制EnhⅡ/CP激活，從而降低cccDNA的轉(zhuǎn)錄活性，減少病毒基因表達(dá)及蛋白質(zhì)合成[26]。而95%的膽汁酸通過腸肝循環(huán)，由NTCP攝取。因此NTCP除了參與HBV前期感染環(huán)節(jié)，也參與后期HBV轉(zhuǎn)錄調(diào)控環(huán)節(jié)[27]。

SLC10A1基因有2個突變位點(diǎn)會降低HBV的感染。其中高頻變異P.Ser267Phe不僅能讓NTCP無法攝取膽汁酸，而且消除了HBV感染肝細(xì)胞的能力[28]。An P等研究發(fā)現(xiàn)Ser267Phe突變者感染HBV的風(fēng)險降低65%，肝硬化的風(fēng)險降低85%，但不能阻止肝硬化發(fā)展為肝癌[29]。Ser267Phe突變者在感染HBV后有利于成為無癥狀攜帶者，該突變也可能自限性的清除HBV病毒[30]。另一個突變點(diǎn)R252H的變異，NTCP的細(xì)胞表面表達(dá)降低[5]。

抑制NTCP表達(dá)而抗HBV的藥物已有文獻(xiàn)報道，通過維甲酸受體（RAR）抑制NTCP表達(dá)減少HBV進(jìn)入啟動子活性[18]。

四、總結(jié)

NTCP缺陷病主要以高膽汁酸為臨床表現(xiàn)，自2015年首次發(fā)現(xiàn)，目前已有的病例報道不多，至今未發(fā)現(xiàn)肝硬化及死亡的病例報道。研究發(fā)現(xiàn)NTCP是HBV的功能蛋白，介導(dǎo)HBV入胞。HBV標(biāo)志物檢測和SLC10A1基因分析，可以區(qū)分HBV攜帶及NTCP缺陷病。早期診斷、早期治療，盡量減少并發(fā)癥，改善預(yù)后。

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項(xiàng)目基金：云南省昆明市重點(diǎn)項(xiàng)目（編號：2019-1-S-25318000001139）

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