復(fù)方銀杏葉對(duì)免疫應(yīng)激仔豬生長(zhǎng)性能和血清代謝組學(xué)特征的影響

李 焰 岳 穩(wěn) 李 婷 潘佳佳 邱龍新* 黃 杰 李狀偉

(1.龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，龍巖 2364000；2.福建省生豬疫病防控工程技術(shù)研究中心，龍巖 2364000；3.福建省家畜傳染病防治與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，龍巖 2364000；4.福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院(蜂學(xué)學(xué)院)，福州 2350000)

在規(guī)?；B(yǎng)豬生產(chǎn)中，各種病原菌及其毒素侵襲，甚至是病原菌的感染、創(chuàng)傷都會(huì)使仔豬處于應(yīng)激狀態(tài)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)產(chǎn)生高燒、腹瀉、采食量下降等癥狀，造成仔豬生長(zhǎng)受阻，生長(zhǎng)性能下降。目前對(duì)仔豬應(yīng)激的防治措施很多，遵循中藥配伍的相須、相使原則，不斷開發(fā)新的復(fù)方中藥免疫增強(qiáng)劑進(jìn)行調(diào)控是一條行之有效的解決途徑。例如，陳燕凌等研制的復(fù)方中藥制劑可在一定程度上改善斷乳仔豬的生長(zhǎng)性能，預(yù)防腹瀉；陳張華等報(bào)道，在斷奶仔豬飼糧中添加1.0%“豬康散”能增強(qiáng)仔豬細(xì)胞免疫功能和提高仔豬生長(zhǎng)性能；程佳等研究證實(shí)，中藥制劑柴術(shù)抗激散對(duì)LPS導(dǎo)致的早期斷奶仔豬免疫應(yīng)激具有明顯的緩減作用。以上研究表明，復(fù)方中草藥制劑將成為理想的免疫調(diào)節(jié)劑應(yīng)用于養(yǎng)豬生產(chǎn)。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.2%復(fù)方銀杏葉制劑有助于提高愛拔益加(AA)肉仔雞的生長(zhǎng)性能和免疫功能；飼糧中添加1.00%的復(fù)方銀杏葉制劑可維持和養(yǎng)護(hù)斷奶肉兔的小腸黏膜組織；復(fù)方銀杏葉制劑還可維持和修復(fù)由免疫應(yīng)激引起的斷奶仔豬腸道損傷，并能增強(qiáng)腸道黏膜的免疫功能。為進(jìn)一步探究復(fù)方銀杏葉的作用機(jī)理，本試驗(yàn)采用超高效液相色譜和四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜(UHPLC-QTOF-MS)技術(shù)，研究LPS免疫應(yīng)激仔豬的血清代謝組學(xué)特征及復(fù)方銀杏葉的干預(yù)效果，尋找其干預(yù)免疫應(yīng)激仔豬的靶點(diǎn)及代謝通路，為復(fù)方銀杏葉免疫增強(qiáng)劑在仔豬上的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 復(fù)方銀杏葉制劑組成及制備

復(fù)方銀杏葉由銀杏葉、黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓、砂仁和陳皮按照10∶15∶15∶12∶15∶6∶9比例組成，藥物制備方法參照本課題組前期研究，每毫升藥液含1 g生藥(按照生藥量計(jì)算)，-20 ℃保存?zhèn)溆??；旌虾蟮膹?fù)方銀杏葉制劑送至青島科標(biāo)檢測(cè)研究院進(jìn)行主要活性成分含量檢測(cè)。經(jīng)檢測(cè)，試驗(yàn)所用復(fù)方銀杏葉制劑中：總多糖含量7.60%，總黃酮含量0.06%，總皂苷含量1.70%，總黃酮醇苷含量1 647.97 mg/kg，萜類內(nèi)酯含量650 mg/kg，黃芪甲苷含量95 mg/kg，毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量174.49 mg/kg，橙皮苷含量2 121.42 mg/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及樣品采集

試驗(yàn)選取平均體重為(9.52±0.80) kg、(35±1)日齡的“杜×長(zhǎng)×大”雜交仔豬36頭，按體重、胎次等一致原則隨機(jī)分為3組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭。3組仔豬飼喂同一基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1998)仔豬營(yíng)養(yǎng)需要配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。其中對(duì)照組每頭每天灌服110 mL生理鹽水，LPS應(yīng)激組每頭每天灌服110 mL生理鹽水，LPS+復(fù)方銀杏葉組每頭每天灌服110 mL復(fù)方銀杏葉制劑。免疫應(yīng)激模型的建立和樣品采集參照文獻(xiàn)的方法進(jìn)行，即在正式試驗(yàn)第23天LPS應(yīng)激組和LPS+復(fù)方銀杏葉組仔豬腹膜注射LPS(大腸桿菌血清型O55∶B5，Sigma公司)，注射劑量為100 μg/kg，對(duì)照組仔豬腹膜注射等量的生理鹽水；注射LPS后3 h，所有豬只空腹前腔靜脈采血，3 000 r/min、4 ℃離心10 min制備血清，-80 ℃保存。試驗(yàn)于龍巖學(xué)院動(dòng)物房進(jìn)行，采用半開放豬舍，自然通風(fēng)，保持干燥，自由采食和飲水，消毒、免疫和管理按豬場(chǎng)常規(guī)程序進(jìn)行。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定

試驗(yàn)期每天記錄每個(gè)重復(fù)豬的采食量，并分別在試驗(yàn)第1、7、21、23和27天對(duì)所有試驗(yàn)豬進(jìn)行稱重(空腹12 h)，計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.3.2 血清生化指標(biāo)測(cè)定

采用邁瑞B(yǎng)S-420全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)、肌酐(CREA)、胰高血糖素樣肽-2(GLP-2)含量以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GGT)和堿性磷酸酶(ALP)活性，以上指標(biāo)均采用試劑盒(購自中生北控生物科技股份有限公司)測(cè)定，按照試劑盒說明書操作。

1.3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和LSD法多重比較，統(tǒng)計(jì)結(jié)果用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤(SE)表示，以P<0.05表示差異顯著。

1.4 血清代謝組學(xué)特征分析

1.4.1 代謝組學(xué)色譜和質(zhì)譜條件

采用1290 UHPLC超高效液相色譜儀進(jìn)行物質(zhì)分離，在AB 6600 Triple TOF質(zhì)譜儀下基于IDA采集模式進(jìn)行一級(jí)、二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)的采集。采集條件如下：轟擊能量為30 ev，每50 ms采集15張二級(jí)譜圖。電噴霧離子源(ESI)參數(shù)設(shè)置如下：霧化氣壓(GS1)、輔助氣壓及氣簾氣壓分別為60、60和35 Psi；溫度為650 ℃，噴霧電壓為5 000 V(正離子模式)或-4 000 V(負(fù)離子模式)。

1.4.2 代謝組學(xué)血清樣品處理

將存放于-80 ℃的血清樣品復(fù)融后吸取100 μL至EP管中，加入300 μL甲醇，再加入20 μL內(nèi)標(biāo)，渦旋混勻30 s，超聲10 min(冰水浴)，-20 ℃靜置1 h， 4 ℃、12 000 r/min離心15 min，吸取上清液備用。

1.4.3 代謝組學(xué)數(shù)據(jù)處理與生物標(biāo)志物鑒定

首先使用ProteoWizard軟件將原始質(zhì)譜轉(zhuǎn)成mzXML格式，再使用XCMS做保留時(shí)間矯正、峰識(shí)別、峰提取、峰積分、峰對(duì)齊等工作，并使用二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫對(duì)峰進(jìn)行物質(zhì)鑒定。

1.4.4 代謝組學(xué)統(tǒng)計(jì)分析及通路分析

將上述得到的化合物信息導(dǎo)入SIMCA 14.1軟件進(jìn)行主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)，將篩選出的差異化合物導(dǎo)入KEGG Pathway數(shù)據(jù)庫，注釋到差異代謝物相關(guān)的代謝通路，最后通過MetaboAnalyst網(wǎng)站進(jìn)行通路富集。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)方銀杏葉對(duì)免疫應(yīng)激仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，在第23天之前，3個(gè)試驗(yàn)組間的ADFI、ADG和F/G差異均不顯著(P>0.05)。在試驗(yàn)第24～27天，LPS應(yīng)激組的ADFI較對(duì)照組和LPS+復(fù)方銀杏葉組分別降低了21.52%和15.07%(P<0.05)，LPS應(yīng)激組的ADG較對(duì)照組降低了51.22%(P<0.05)，LPS+復(fù)方銀杏葉組的ADG雖然較對(duì)照組降低了21.95%(P>0.05)，但較LPS應(yīng)激組提高了60%(P>0.05)；在試驗(yàn)第24～27天，LPS+復(fù)方銀杏葉組的F/G較LPS應(yīng)激組降低了35.77%(P<0.05)，與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)。以上結(jié)果表明復(fù)方銀杏葉制劑可促進(jìn)免疫應(yīng)激仔豬的生長(zhǎng)，提高飼料利用率。

表2 復(fù)方銀杏葉對(duì)免疫應(yīng)激仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 復(fù)方銀杏葉對(duì)免疫應(yīng)激仔豬血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，注射LPS后，與對(duì)照組相比，LPS應(yīng)激組血清γ-GGT、ALT和ALP活性以及UN、CREA含量均顯著升高(P<0.05)，GLP-2含量則顯著降低(P<0.05)；與LPS應(yīng)激組相比，復(fù)方銀杏葉顯著緩解了LPS刺激引起的血清UN、CREA含量和γ-GGT活性的升高(P<0.05)，以及LPS刺激引起的血清GLP-2含量降低(P<0.05)。

表3 復(fù)方銀杏葉對(duì)免疫應(yīng)激仔豬血清生化指標(biāo)的影響

2.3 代謝組學(xué)的多元統(tǒng)計(jì)分析

3組血清樣品及QC樣本PCA見圖1。在正、負(fù)2種離子模式下，對(duì)照組與LPS+復(fù)方銀杏葉組和LPS應(yīng)激組分離明顯，而LPS+復(fù)方銀杏葉組與對(duì)照組和LPS應(yīng)激組之間存在交叉。在正離子模式下，74.1%樣本符合模型判別(R2X=0.741)，模型的預(yù)測(cè)能力66.9%(Q2=0.669)；在負(fù)離子模式下，R2X=0.668、Q2=0.534，表明在2種離子模式下模型擬合均良好。為了篩選得到由組間差異而形成的潛在標(biāo)志物，減少干擾因素對(duì)相似性聚類分析的影響，在LPS應(yīng)激模型基礎(chǔ)上，使用有監(jiān)督的模式識(shí)別方法正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DAS)進(jìn)一步區(qū)分LPS+復(fù)方銀杏葉組與LPS應(yīng)激組的血清代謝模式的變化，如圖2所示。在負(fù)離子模式下，R2X=0.284，R2Y=0.851，Q2=-0.430；在正離子模式下R2X=0.268，R2Y=0.828，Q2=-0.272。

K：對(duì)照組 control group； M：LPS應(yīng)激組LPS-stressed group；S： LPS+復(fù)方銀杏葉組 LPS+GBC group； QC：質(zhì)控樣本 quality control sample。圖2同 the same as Fig.2.

圖2 OPLS-DA模型得分散點(diǎn)圖(LPS+復(fù)方銀杏葉組vs.LPS應(yīng)激組)

2.4 代謝組學(xué)生物標(biāo)志物篩選

根據(jù)UHPLC-QTOF-MS所得數(shù)據(jù)，利用SIMCA14.1軟件在建立OPLS-DA模型基礎(chǔ)上，通過S-plot分析指標(biāo)篩選LPS+復(fù)方銀杏葉組與LPS應(yīng)激組之間的差異變量作為潛在的生物標(biāo)志物(P<0.05且VIP>1)。如圖3中紅色標(biāo)記，這些差異變量可能是LPS+復(fù)方銀杏葉組與LPS應(yīng)激組的關(guān)鍵代謝物。在正、負(fù)2種離子模式下，分別檢測(cè)到831(正離子模式)、834(負(fù)離子模式)種物質(zhì)，通過比對(duì)數(shù)據(jù)庫，鑒定出得分值高于0.6分的化合物作為內(nèi)源性生物標(biāo)志物，正離子模式下定性到141個(gè)，負(fù)離子模式下定性到118個(gè)。使用SIMCA14.1軟件進(jìn)行多元變量分析，在正離子模式下，共篩選出2個(gè)內(nèi)源性生物標(biāo)志物；在負(fù)離子模式下，共篩選出5個(gè)內(nèi)源性生物標(biāo)志物。將正、負(fù)離子的所有標(biāo)志物結(jié)合在一起，通過KEGG通路分析，進(jìn)一步篩選得到有KEGG號(hào)的7個(gè)生物標(biāo)志物，見表4。

圖3 S-plot(LPS+復(fù)方銀杏葉組vs.LPS應(yīng)激組)

由表4可見，在正離子模式下，共篩選出2個(gè)內(nèi)源性生物標(biāo)志物，分別是L-焦谷氨酸、N6-甲基-L-賴氨酸；在負(fù)離子模式下，共篩選出5個(gè)內(nèi)源性生物標(biāo)志物，分別是羥(基)脯氨酸、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、棕櫚酸和甘氨石膽酸。與LPS應(yīng)激組相比，LPS+復(fù)方銀杏葉組血清N6-甲基-L-賴氨酸和L-谷氨酸含量顯著上升(P<0.05)，血清L-焦谷氨酸、羥(基)脯氨酸、左旋谷氨酰胺、棕櫚酸和甘氨石膽酸含量顯著下降(P<0.05)。

表4 主要差異代謝物(LPS+復(fù)方銀杏葉組vs. LPS應(yīng)激組)

2.5 代謝通路分析

將上述篩選的有KEGG號(hào)的7個(gè)內(nèi)源性生物標(biāo)志物導(dǎo)入MetaboAnalyst網(wǎng)站進(jìn)行富集通路分析，篩選得到12個(gè)代謝通路，見圖4。將潛在的靶標(biāo)路徑臨界值設(shè)置為0.25，得到2個(gè)代謝通路，分別是D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代謝通路以及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝通路。

圖4 用MetaboAnalyst軟件進(jìn)行富集通路分析結(jié)果

3 討 論

3.1 免疫應(yīng)激仔豬生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)的變化以及復(fù)方銀杏葉干預(yù)的效果

目前腹腔注射一定劑量的LPS是模擬免疫應(yīng)激最典型的方式之一。LPS是革蘭氏陰性菌的重要組分多糖，能誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生強(qiáng)烈的應(yīng)激，導(dǎo)致動(dòng)物精神不振、發(fā)熱、采食量下降。本試驗(yàn)臨床效果顯示，第23天注射LPS后，仔豬出現(xiàn)精神沉郁、嘔吐、畏寒成堆躺臥、腹瀉、體溫升高至40.5 ℃左右。已有報(bào)道證實(shí)，LPS應(yīng)激可造成仔豬生長(zhǎng)性能顯著降低[9-10]，本試驗(yàn)結(jié)果與上述報(bào)道一致，不僅說明本次試驗(yàn)用LPS制作免疫應(yīng)激模型是成功的，也證實(shí)用復(fù)方銀杏葉制劑干預(yù)后可促進(jìn)免疫應(yīng)激仔豬生長(zhǎng)，提高飼料利用率。

血液ALT、AST和ALP是反映肝臟功能的重要指標(biāo)，三者活性的升高不僅表示肝臟受到嚴(yán)重?fù)p傷，也是機(jī)體受到應(yīng)激反應(yīng)的標(biāo)志[11]；血清中γ-GGT主要來自肝膽系統(tǒng)，當(dāng)肝臟內(nèi)合成亢進(jìn)或膽汁排出受阻時(shí)，血清γ-GGT活性增高[12]。本試驗(yàn)中，LPS應(yīng)激組血清中的ALT、ALP、γ-GGT活性較對(duì)照組均顯著升高，說明免疫應(yīng)激造成仔豬肝功能受損。GLP-2是一種腸道多肽類激素，具有多種腸道效應(yīng)，包括刺激腸黏膜生長(zhǎng)、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物的消化和吸收、提高腸屏障功能、抑制胃能動(dòng)性和胃酸分泌等[13-14]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)LPS應(yīng)激組血清中GLP-2含量較對(duì)照組顯著降低，說明免疫應(yīng)激還造成了仔豬腸道屏障功能受損，與車煉強(qiáng)等[15]報(bào)道一致。而用復(fù)方銀杏葉干預(yù)免疫應(yīng)激仔豬后，LPS+復(fù)方銀杏葉組血清ALT、AST、ALP、γ-GGT活性及ALT/AST較LPS應(yīng)激組均有所下降，血清GLP-2含量較LPS應(yīng)激組顯著提高，說明復(fù)方銀杏葉可緩解免疫應(yīng)激導(dǎo)致的仔豬肝臟和腸道屏障功能的損傷。血液中的UN和CREA是蛋白質(zhì)代謝的主要產(chǎn)物，蛋白質(zhì)代謝良好時(shí)，血液中這些非蛋白氮的含量會(huì)降低[16]。本試驗(yàn)中，LPS+復(fù)方銀杏葉組血清中UN和CREA含量顯著低于LPS應(yīng)激組，這與ADG的變化趨勢(shì)相一致，說明復(fù)方銀杏葉是通過提高GLP-2含量、降低仔豬血清中非蛋白氮含量，在一定程度上改善了免疫應(yīng)激仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)方銀杏葉通過調(diào)控細(xì)胞因子生成，能有效拮抗環(huán)磷酰胺對(duì)肝臟和脾臟組織造成的損傷[17]，還有修復(fù)脾虛性斷奶仔豬小腸組織的作用[18]。因此，可將復(fù)方銀杏葉開發(fā)成一種理想的免疫調(diào)節(jié)劑。

3.2 基于血清代謝組學(xué)的復(fù)方銀杏葉干預(yù)免疫應(yīng)激仔豬的作用機(jī)制研究

本研究基于LPS誘導(dǎo)建立的免疫應(yīng)激模型，將LPS應(yīng)激組與LPS+復(fù)方銀杏葉組進(jìn)行比較，PCA得分圖顯示，LPS應(yīng)激組血清代謝物與對(duì)照組分離明顯，說明LPS應(yīng)激后仔豬的生理代謝環(huán)境受到明顯干擾，病理狀態(tài)下代謝網(wǎng)絡(luò)出現(xiàn)紊亂；正、負(fù)離子模式下LPS+復(fù)方銀杏葉組血清代謝物與對(duì)照組均有少許重疊，與LPS應(yīng)激組之間存在交叉，但負(fù)離子模式下LPS+復(fù)方銀杏葉組和LPS應(yīng)激組之間區(qū)分較明顯，綜合OPLS-DA說明復(fù)方銀杏葉干預(yù)LPS免疫應(yīng)激仔豬后，雖不能完全逆轉(zhuǎn)病理到正常狀態(tài)，但顯示已經(jīng)發(fā)揮一定的藥效作用，提示復(fù)方銀杏葉制劑在干預(yù)LPS免疫應(yīng)激仔豬的應(yīng)用方面在使用劑量、劑型或者時(shí)間上還有改進(jìn)空間。

通過差異代謝物分析，與LPS應(yīng)激組相比，LPS+復(fù)方銀杏葉組血清N6-甲基-L-賴氨酸和L-谷氨酸含量顯著上升，血清L-焦谷氨酸、羥(基)脯氨酸、左旋谷氨酰胺、棕櫚酸和甘氨石膽酸含量顯著下降。谷氨酸作為一種功能性氨基酸，是腸上皮的主要能源物質(zhì)[19]，不僅參與蛋白質(zhì)的合成和氧化供能[20]，還具有改善腸道上皮完整性、增強(qiáng)腸道屏障功能和抗氧化能力、提高腸道干細(xì)胞的活性和促進(jìn)腸道發(fā)育的作用[21-24]；賴氨酸作為第一限制性氨基酸，參與豬體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂肪代謝以及肉毒堿的形成等，還有利于鈣的吸收，有助于抗體、激素、酶等的形成，增強(qiáng)機(jī)體免疫力[25-26]；雖然谷氨酰胺和谷氨酸一樣具有為腸上皮細(xì)胞提供能量的功能，并且還能增加腸道對(duì)亮氨酸和脯氨酸的吸收量[27]，但是當(dāng)谷氨酸和谷氨酰胺同時(shí)存在時(shí)，腸上皮細(xì)胞會(huì)優(yōu)先利用谷氨酸，從而抑制谷氨酰胺氧化供能[28]，故推測(cè)LPS+復(fù)方銀杏葉組谷氨酰胺、脯氨酸的代謝產(chǎn)物羥(基)脯氨酸和焦谷氨酸含量較LPS應(yīng)激組顯著下降與其血清中谷氨酸含量顯著增加有關(guān)，由此也降低了由谷氨酰胺轉(zhuǎn)化為有害的焦谷氨酸的缺陷。肝細(xì)胞代謝障礙時(shí)會(huì)致使血液中膽汁酸含量升高[29]。差異代謝物分析結(jié)果顯示，LPS+復(fù)方銀杏葉組血清甘氨石膽酸含量較LPS應(yīng)激組顯著下降，進(jìn)一步說明復(fù)方銀杏葉可緩解LPS應(yīng)激導(dǎo)致的肝臟損傷。代謝通路分析發(fā)現(xiàn)，復(fù)方銀杏葉對(duì)預(yù)防免疫應(yīng)激仔豬藥效作用的靶標(biāo)代謝通路主要為D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代謝以及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝通路，涉及到機(jī)體內(nèi)碳水化合物、氨基酸、脂類等物質(zhì)代謝。本試驗(yàn)盡管已經(jīng)初步篩選出復(fù)方銀杏葉緩解仔豬免疫應(yīng)激相關(guān)的生物標(biāo)志物，但是仍需要進(jìn)一步通過試驗(yàn)和臨床驗(yàn)證。

4 結(jié) 論

① 復(fù)方銀杏葉可顯著緩解LPS應(yīng)激導(dǎo)致的仔豬血清生化指標(biāo)的改變，減輕肝臟損傷，改善仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的消化和吸收，提高機(jī)體對(duì)含氮物質(zhì)的利用效率以及腸黏膜屏障功能，從而保證仔豬的正常生長(zhǎng)發(fā)育，提高飼料利用率。

② 復(fù)方銀杏葉預(yù)防仔豬LPS應(yīng)激、提高生產(chǎn)性能的藥效作用的靶標(biāo)代謝通路主要為D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代謝以及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝通路。