非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物在病毒感染模型中的研究進(jìn)展

黃濤張海濤李志雄曹華?王心睿?

(1. 福建省兒童醫(yī)院,福州 350011; 2. 福建醫(yī)科大學(xué)附屬福建省婦幼保健院國(guó)家衛(wèi)健委非人靈長(zhǎng)類生育調(diào)節(jié)技術(shù)評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,福州 350001; 3. 福建醫(yī)科大學(xué)附屬福建省婦幼保健院醫(yī)學(xué)研究中心,福州 350001)

非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物(non-human primates,NHP)在生理、認(rèn)知能力、神經(jīng)解剖學(xué)、社會(huì)復(fù)雜性、繁殖和發(fā)育等方面與人類具有高度相似性[1]。與人類的遺傳物質(zhì)有75% ～98.5%的同源性[2],這種同源性在基礎(chǔ)和轉(zhuǎn)化生物醫(yī)學(xué)研究中發(fā)揮著重要的作用。嚙齒類動(dòng)物雖用途廣泛,對(duì)回答許多基礎(chǔ)研究問(wèn)題非常有幫助,但由于缺乏靈巧的大腦結(jié)構(gòu),免疫系統(tǒng)和運(yùn)動(dòng)技能欠佳以及新陳代謝功能的差異等,限制了它們的用途。許多病原體(如流感、HIV 或登革熱)對(duì)各自的宿主呈高度嗜性,用小鼠不能復(fù)制這種人類疾病,因此也限制了將小鼠用作某些傳染病的模型[3-4]。由于NHP 與人類在生理和解剖學(xué)上的相似性,在某些方面的研究具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和價(jià)值(表1),尤其對(duì)病原體的易感性,在病毒感染性疾病動(dòng)物模型上更具有優(yōu)勢(shì)[5],是研究人類傳染病最廣泛使用的動(dòng)物模型[6]。NHP 已經(jīng)用于研究人類感染已有數(shù)十年的歷史,在控制疾病參數(shù)和不受限制的組織獲取能力的輔助下,在疫苗、藥物療法和其他免疫治療方式的開(kāi)發(fā)中發(fā)揮了重要作用。本文著重介紹NHP 在病毒感染性疾病動(dòng)物模型中的研究進(jìn)展。

表1 非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的主要優(yōu)勢(shì)Table 1 Major advantages of non-human primate models for the areas of biomedical research

1 HIV 病毒感染模型

人類艾滋病(AIDS)是由HIV 病毒引起,該病毒被細(xì)分為 HIV-1 型(M、N、O 和 P 亞型)和 HIV-2 型(A 至I 亞型),其中HIV-1 型中M 亞型在世界上最普遍存在[7]。通過(guò)猿猴/人類免疫缺陷病毒(SHIV)感染NHP,能夠模擬人類HIV 感染的大多數(shù)病毒學(xué)、免疫學(xué)和臨床標(biāo)志,現(xiàn)已用來(lái)研究HIV/AIDS 的傳播、生理病理機(jī)制、免疫學(xué)和治療干預(yù)措施的最合適模型[8],促進(jìn)了有關(guān)cART(聯(lián)合抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法)治療、免疫細(xì)胞耗竭效應(yīng)、中和抗體的給藥或產(chǎn)生、疫苗療法和潛伏期逆轉(zhuǎn)劑等的更深入研究[9]。

病毒感染誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體(Abs)可被直接用作預(yù)防或治療,并且間接地用于幫助指導(dǎo)抗HIV 疫苗的設(shè)計(jì)[10]。HIV 病毒通過(guò)快速突變表面抗原蛋白位點(diǎn)從而避免被體內(nèi)免疫系統(tǒng)反應(yīng)產(chǎn)生的抗體而消滅,而廣義中和抗體(bnAbs)能夠靶向這些病毒帶有高度保守的功能相關(guān)暴露位點(diǎn)而發(fā)揮作用[11]。通過(guò)SHIV 感染的恒河猴,刺激宿主免疫反應(yīng)產(chǎn)生的中和HIV-1 特異性單克隆抗體具有強(qiáng)效的治療效果[12]。在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物中感染猿猴/人類免疫缺陷病毒(SHIV)能夠像人類一樣產(chǎn)生bnAbs,這類SHIV/NHP 感染的恒河猴模型可作為研究bnAbs 的理想動(dòng)物模型[13],為HIV-1 的單克隆抗體療法提供研究思路。研究者從HIV 感染者體內(nèi)分離出單獨(dú)抗體,通過(guò)三元特異性中和抗體組合,從中找出了最佳的組合方式: VRC01 搭配 PGDM1400 和10E8v4,(三種抗體分別與病毒的CD4+結(jié)合位點(diǎn),近膜外緣區(qū)域(MPER)和V1V2 多糖位點(diǎn)結(jié)合),在SHIV 非靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型中具有完全的免疫力[14-15]。

HIV 病毒的感染有時(shí)會(huì)導(dǎo)致各種神經(jīng)系統(tǒng)癥狀,統(tǒng)稱為神經(jīng)艾滋病(Neuro AIDS)。艾滋病感染早期,Neuro AIDS 最明顯的表現(xiàn)形式為HIV 癡呆,在晚期表現(xiàn)為認(rèn)知、運(yùn)動(dòng)和行為癥狀[16]。建立AIDS 和Neuro AIDS 的非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型對(duì)于研究HIV 感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)、神經(jīng)病理學(xué)中發(fā)生的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞蓄積至關(guān)重要。巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)移在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)病中具有重要的作用[17],通過(guò)單克隆抗體實(shí)驗(yàn)性耗竭 CD8 淋巴細(xì)胞后感染的SIVmac251 恒河猴得到CD8 淋巴細(xì)胞耗竭模型,能夠快速引起艾滋病感染和持續(xù)的高病毒血癥[18],并加速巨噬細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的聚集[19]。同樣使用重組抗CD4 抗體(CD4R1)在 SIVmac251 感染前消耗RM CD4+T 細(xì)胞建立的恒河猴模型,顯示病毒復(fù)制大量增加并發(fā)展為艾滋病,巨噬細(xì)胞占淋巴結(jié)和粘膜組織中所有SIV vRNA+細(xì)胞的80%,促炎性單核細(xì)胞發(fā)生大量擴(kuò)增,小膠質(zhì)細(xì)胞也導(dǎo)致感染并異常激活[20]。通過(guò)分子克隆得到 SIVsm804ECL757(CL757)衍生病毒進(jìn)一步開(kāi)發(fā)了Neuro AIDS模型,誘導(dǎo)神經(jīng)系統(tǒng)疾病過(guò)程中沒(méi)有快速進(jìn)展,因此更能反映出HIV 感染中Neuro AIDS 的進(jìn)程,為研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病進(jìn)展和研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒庫(kù)提供有效模型[21]。

2 HBV 感染模型

乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球慢性肝病的主要原因之一。病毒感染與細(xì)胞炎癥、氧化應(yīng)激和DNA 損傷相關(guān),可能導(dǎo)致肝損傷,例如慢性肝炎、纖維化、肝硬化,最后引起肝細(xì)胞癌[22]。

黑猩猩是第一個(gè)被報(bào)道用于急性HBV 感染的動(dòng)物模型,并在HBV 疫苗的研發(fā)上做出了巨大貢獻(xiàn)[23],但是黑猩猩由于倫理的問(wèn)題使用受到限制。一些大型猿猴如長(zhǎng)臂猿猴和狒狒也被證明具有易感性,但是不及黑猩猩更接近于人類,在新的抗HBV 療法研究中尤其是免疫治療的發(fā)展受到了限制,而小型靈長(zhǎng)類動(dòng)物(新、舊世界猴)(圖1)模型因此得到發(fā)展。由于種屬特異性因素,導(dǎo)致其他靈長(zhǎng)類動(dòng)物難以感染,為了模擬HBV,通過(guò)離體桿狀病毒介導(dǎo)HBV 基因組轉(zhuǎn)移得到重組桿狀病毒(Bac-HBV),在轉(zhuǎn)導(dǎo)至原代恒河猴肝細(xì)胞第9 天后,檢測(cè)到乙肝表面抗原分泌,以及病毒DNA、RNA 和共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA,因此顯示了桿狀病毒具有介導(dǎo)穿越物種屏障的作用[24],這種跨物種作用成功地建立了HBV 新世界猴模型。HBV 通過(guò)preS1 多肽與?；悄懰徕c共轉(zhuǎn)運(yùn)多肽(NTCP,由SLC10A1 編碼)結(jié)合侵入肝細(xì)胞[25-26],NTCP 是恒河猴肝細(xì)胞中乙型肝炎病毒感染的限制性宿主因子[27]。通過(guò)病毒載體介導(dǎo)NTCP 在恒河猴肝細(xì)胞中表達(dá),能夠使其易于感染HBV,并能夠在血清中檢測(cè)HBV 的DNA 以及肝細(xì)胞中檢測(cè)HBV 的DNA、RNA 和HBV 核心抗原(HBcAg),成功建立了與HBV 感染相關(guān)的生理學(xué)模型[28]?；谌伺c松鼠猴之間NTCP 的高度同源性,用嵌入WMHBV(絨毛猴乙肝病毒)傳染性基因組的相關(guān)腺病毒(AAV-WMHBV)感染松鼠猴,在肝中能夠檢測(cè)到共價(jià)閉合環(huán)狀DNA,在新生和成年的松鼠猴感染模型中達(dá)到病毒血癥持續(xù)時(shí)間比其他NHP 的長(zhǎng)兩倍多,持續(xù)維持6 ～8 個(gè)月的病毒血癥,這可能作為測(cè)試HBV 治療藥物的合適模型,用于替代其他HBV-NHP 動(dòng)物模型[29]。

圖1 非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物病毒感染模型Figure 1 Non-human Primate virus infection model

3 流感病毒感染模型

流感病毒分為甲型、乙型和丙型三類。乙型和丙型流感病毒能夠分別導(dǎo)致季節(jié)性流感和小兒高熱伴上呼吸道疾病[30]。甲型流感病毒能引起人類大流行和季節(jié)性流感,其表面包含血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)兩種糖蛋白,并有多種亞型,HA在病毒結(jié)合和內(nèi)化中執(zhí)行關(guān)鍵功能,而NA 則促進(jìn)病毒從細(xì)胞表面釋放。人類甲型流感病毒亞型主要包括1918 年和2009 年的 H1N1 病毒,1957 年的H2N2 病毒和1968 年的H3N2 病毒,甲型流感病毒還包括新興高致病流感病毒H5N1(1997 年香港爆發(fā))和H7N9(2013 年在我國(guó)報(bào)道人類感染)等。由于大流行流感病毒人畜共患病死亡率較高,且比季節(jié)性流感病毒的感染性還要強(qiáng),目前已成為重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。

3.1 H1N1 流感病毒模型

研究表明,用1918 年流感病毒感染食蟹猴能夠引起高致病性呼吸道感染,最終導(dǎo)致急性呼吸窘迫和死亡[31]。此外,受感染的動(dòng)物出現(xiàn)了以抗病毒應(yīng)答失調(diào)為特征的免疫應(yīng)答,但是不足以提供機(jī)體保護(hù),這表明非典型的宿主固有免疫反應(yīng)可能導(dǎo)致致死性。流感病毒調(diào)節(jié)宿主免疫反應(yīng)的能力可能是高致病流感病毒的一個(gè)共同特征。Skinner 等[32]用2009 年大流行H1N1(pH1N1)流感病毒感染初生恒河猴,在感染的第1 天至第6 天未觀察到臨床癥狀,而是出現(xiàn)亞臨床雙相熱。用帶有血凝素(HA)或核蛋白(NP)的候選疫苗進(jìn)行免疫,在亞臨床恒河猴模型中,發(fā)現(xiàn)血液干擾素的活性是一個(gè)顯著的標(biāo)志物,并可作為評(píng)價(jià)流感病毒疫苗效力的指標(biāo)。Safronetz 等[33]在建立食蟹猴模型的基礎(chǔ)上,用大流行 初 期 ( A/Mexico/4108/2009 和 A/Mexico/InDRE4487/2009)兩種遺傳相似但臨床上不同的SOIV(swine-origin influenza virus(SOIV)(H1N1))分離株感染食蟹猴,在臨床疾病、病毒學(xué)、宿主反應(yīng)以及組織病理學(xué)參數(shù)與季節(jié)性H1N1 病毒進(jìn)行比較,顯示出了更嚴(yán)重的感染,并觀察到兩種SOIV 分離株在病毒復(fù)制、宿主轉(zhuǎn)錄和細(xì)胞因子反應(yīng)以及疾病進(jìn)展方面的異質(zhì)性。用豬源性大流行H1N1 菌株A/Mexico/InDRE4487/2009 對(duì)食蟹猴、恒河猴和普通絨猴進(jìn)行比較研究發(fā)現(xiàn),三種猴都容易受到感染,并發(fā)展為上下呼吸道感染[34]。食蟹猴和恒河猴疾病易感性進(jìn)行比較,食蟹猴在上呼吸道和肺中的病毒復(fù)制水平顯著更高,涉及病毒生產(chǎn)的峰值水平和持續(xù)時(shí)間,以及體溫都較高,而在恒河猴中更容易觀察到呼吸窘迫等臨床癥狀。引起病毒的差異復(fù)制的原因可能是食蟹猴的氣管和支氣管中唾液酸-α-2,6-Gal 糖(人類甲型流感病毒的受體)的表達(dá)水平顯著比恒河猴高(50 ～73 倍),結(jié)果顯示出食蟹猴具有更均勻、更高水平的病毒復(fù)制以及體溫的升高,這可作為大流行H1N1 流感病毒研究的模型[34-35]。在進(jìn)行流行性病毒傳播研究中,用2009年大流行性病毒A/California/07/2009(H1N1pdm)證明了人類流感病毒分離株可以有效地感染并在新世界猴種普通絨猴(Callithrix Jacchus)之間傳播,被感染的動(dòng)物經(jīng)血清轉(zhuǎn)化,表現(xiàn)出類似人的癥狀,這可能是研究流感病毒傳播的可行模型[36],并且普通絨猴可作為季節(jié)性或高致病性禽流感病毒感染的動(dòng)物模型[37]。

3.2 H5N1 流感病毒模型

1997 年高致病性禽流感病毒(HPAIV)H5N1 在我國(guó)香港爆發(fā),在禽類雞中的感染死亡率高達(dá)75%,并在人類中引發(fā)嚴(yán)重疾病,死亡率高于50%[38]。較高的死亡率迫使需要NHP 感染模型來(lái)研究人類HPAIV 的發(fā)病機(jī)理以及開(kāi)發(fā)針對(duì)HPAIV的新疫苗或藥物。Kuiken 等[39]用甲型流感病毒A/Hong Kong/156/97(H5N1)感染四只食蟹猴,感染病變中壞死性支氣管間質(zhì)性肺炎在病理上與人類原發(fā)性流感病毒性肺炎相似,表明食蟹猴是用于研究人類H5N1 病毒感染的發(fā)病機(jī)制的合適動(dòng)物模型。Muramoto 等[40]為了了解H5N1 病毒誘發(fā)人類嚴(yán)重疾病的機(jī)制,用6 種H5N1 病毒感染食蟹猴,比較了它們的致病性和對(duì)病毒感染的整體宿主反應(yīng),確定了由這些H5N1 病毒引起的病毒復(fù)制能力和疾病嚴(yán)重程度的差異,為哺乳動(dòng)物中H5N1 病毒的發(fā)病機(jī)理提供了新的認(rèn)識(shí)。Chen 等[41]用流感病毒 A/Tiger/Harbin/01/2002(H5N1)感染恒河猴,產(chǎn)生了急性間質(zhì)性肺炎和彌漫性肺泡損傷,表明肺是H5N1 病毒感染的主要目標(biāo)器官,證實(shí)恒河猴適合作為H5N1 病毒研究的新靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型尤其是H5N1 病毒傳播的研究。

建立更接近自然傳播途徑的動(dòng)物感染模型對(duì)研究病毒傳播以及發(fā)病機(jī)制具有重要意義。在研究一種冷適應(yīng)的減毒疫苗(AH/AAca)時(shí),鼻內(nèi)免疫兩次的恒河猴能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生強(qiáng)大的中和抗體反應(yīng)以及HA 特異性CD4+T 細(xì)胞免疫反應(yīng),引發(fā)針對(duì)高致病性H5N1 病毒感染的保護(hù)性免疫[42]。在前期NHP 感染模型中,是在氣管內(nèi)將含有流感病毒的懸浮液倒入肺中[43],而這在自然傳播中并不會(huì)發(fā)生。Fujiyuki 等[44]使用日本分離株(A/whooper swan/Hokkaido/1/2008, H5N1 clade 2.3.2.1)對(duì)恒河猴和食蟹猴以小液滴接觸方式在氣管內(nèi)進(jìn)行接種,兩種猴均觀察到上下呼吸道感染及病毒脫落,較高劑量下接種恒河猴引起更嚴(yán)重的流感癥狀。通過(guò)氣溶膠途徑(吸入霧化)對(duì)高致病性H5N1 流感病毒進(jìn)行了NHP 的實(shí)驗(yàn)性感染,食蟹猴吸入霧化的H5N1 流感病毒會(huì)導(dǎo)致暴發(fā)性肺炎,迅速發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合征,在整個(gè)肺葉引起更廣泛的感染[45-46]。這種新方式感染的非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型將推進(jìn)疫苗的研發(fā)和新的治療方法,以預(yù)防和治療由高致病性禽流感病毒引起的人類疾病。

3.3 N7N9 流感病毒模型

低致病性N7N9 流感病毒(LPAIV)于2013 年在中國(guó)報(bào)道,2017 年突變?yōu)楦咧虏⌒跃?導(dǎo)致人類嚴(yán)重感染并在中國(guó)八省家禽中爆發(fā)疫情[47]。用A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒株感染食蟹猴,可發(fā)展為短暫、輕度至重度疾病,肺的組織病理學(xué)變化與人類相似,雖然程度較輕,但有彌漫性肺泡損傷、多形核細(xì)胞浸潤(rùn)、透明膜形成、肺細(xì)胞增生和纖維增生變化,在呼吸組織上的附著模式與在人的附著模式更為相似[48-49]。與其他流感病毒相比,H7N9菌株 NA 中容易出現(xiàn) R289 K、E119 V、A246T 或H274Y 突變,降低了神經(jīng)氨酸酶抑制劑(NAI)的敏感性。食蟹猴模型可以預(yù)測(cè)體內(nèi)出現(xiàn)抗NAI 鈉抑制劑的H7N9 病毒的幾率,這對(duì)新的NAI 的開(kāi)發(fā)具有重要作用[50-51]。

4 登革熱病毒(DENV)感染模型

登革熱是伊蚊在人與人之間傳播的全身性病毒感染性疾病,嚴(yán)重威脅著人的生命。目前已有128 個(gè)國(guó)家發(fā)現(xiàn)登革熱病毒,影響全球一半以上人口,隨著氣候變化和城市化,登革熱的傳播范圍也將進(jìn)一步擴(kuò)大[52]。由于可能缺乏反映登革熱臨床癥狀的動(dòng)物模型,目前的預(yù)防和治療策略還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足。有研究開(kāi)發(fā)了小鼠登革熱模型,用于研究DENV 發(fā)病機(jī)理和免疫應(yīng)答[53]。但是小鼠模型在病理和病毒學(xué)分析方面具有一定局限性[54]。用新世界猴普通狨猴接種DENV,能夠表現(xiàn)出高水平的病毒血癥,并在淋巴結(jié)、脾和胸腺在內(nèi)的淋巴器官及非淋巴器官檢測(cè)到DENV 基因組,可作為研究繼發(fā)性和原發(fā)性DENV 感染的動(dòng)物模型,用于疫苗開(kāi)發(fā)[55-56]。但是新世界猴在免疫反應(yīng)方面與舊世界猴有所不同,主要包括在組織相容性復(fù)雜等位基因和抗體交叉反應(yīng)性的差異[57]。用舊世界恒河猴接種DENV,出現(xiàn)較低水平的病毒滴度和較輕的癥狀[58],由于缺乏與DENV 相關(guān)的臨床體征,登革熱恒河猴模型可能不夠完善,但通過(guò)改良的登革熱恒河猴模型可能在早期評(píng)估登革熱疫苗的效力和安全性可能存在作用[59]。通過(guò)接種DENV-409-48 株的舊世界猴冠毛獼猴(Macaca radiata),實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到DENV 非結(jié)構(gòu)蛋白1 抗原,并觀察到高病毒血癥,表明用DV-409-48 感染的冠毛獼猴可以用作研究DENV 的可靠靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型[60]。盡管非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型存在固有局限性,但通過(guò)一些模型改進(jìn),以及新的模型發(fā)現(xiàn),這些模型結(jié)果仍然對(duì)研究致病機(jī)理,測(cè)試DENV 藥物和評(píng)估登革熱疫苗效力方面有重要價(jià)值。

5 SARS-CoV-2 感染模型

由新型β冠狀病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)[61]已擴(kuò)散全球,病例數(shù)迅速增加,截止2020 年9 月6 日,累計(jì)感染人數(shù)達(dá)2676 萬(wàn),死亡人數(shù)達(dá)87 萬(wàn),全球疫情異常嚴(yán)峻。動(dòng)物模型對(duì)于研究病毒感染發(fā)病機(jī)制以及特異的治療藥物或疫苗不可或缺,因此開(kāi)發(fā)針對(duì)SARS-CoV-2的動(dòng)物模型用于研究病毒發(fā)病機(jī)制,評(píng)估和篩選針對(duì)于新冠肺炎的候選藥物或疫苗迫在眉睫。秦川團(tuán)隊(duì)利用ACE2 轉(zhuǎn)基因小鼠率先制備了新冠病毒模型,研究病毒在小鼠模型中的組織病理學(xué),闡明了hACE2 小鼠中 SARS-CoV-2 的致病性[62]。并建立了年輕和老年恒河猴感染模型,揭示了SARS-CoV-2引起的老年猴間質(zhì)性肺炎比幼猴嚴(yán)重[63],提供了深入了解其致病機(jī)制的信息,并促進(jìn)了針對(duì)預(yù)防SARS-CoV-2 的疫苗和COVID-19 治療藥物的開(kāi)發(fā)。通過(guò)對(duì)恒河猴氣管接種,組織病理學(xué)觀察表明,SARS-CoV-2 感染可引起間質(zhì)性肺炎,其特征在于充血和水腫,以及肺泡中單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)。在呼吸道組織(包括氣管、支氣管和肺)中鑒定出SARS-CoV-2 RNA。并且還分別從口咽拭子、支氣管和肺中分離出病毒[64-66]。并有研究小組建立了年輕和老年食蟹猴 SARS-CoV-2 感染模型,與MERS-CoV 和SARS-CoV 發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了比較,顯示出不同的臨床特征,為疾病的預(yù)防和治療提供了依據(jù)[67]。研究顯示原發(fā)性SARS-CoV-2 感染可以激發(fā)免疫保護(hù)機(jī)制,并能夠避免再次感染[68-69]。非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物在此次SARS-CoV-2 的研究中提供了一個(gè)有價(jià)值的動(dòng)物模型平臺(tái),為疾病的預(yù)防提供了重要依據(jù),并為該疾病機(jī)制的研究,藥物的研發(fā)疫苗的評(píng)價(jià)提供有用模型,大大加快了人們攻克新冠肺炎的速度。

6 其他病毒感染模型

除以上NHP 病毒感染模型外,NHP 還用于寨卡病毒(ZIKV)[70]和巨細(xì)胞病毒(CMV)[71]等病毒感染模型(圖1)。NHP 在闡明ZIKV 發(fā)病機(jī)理和評(píng)價(jià)候選疫苗方面已經(jīng)發(fā)揮了巨大作用[72],并在新舊世界猴中恒河猴[73]、食蟹猴[74]、普通狨猴[75]、松鼠猴和梟猴[76]等中制造出早期懷孕期間感染模型,證實(shí)了胎兒神經(jīng)病理學(xué),以及小兒畸形和其他先天性寨卡綜合征[77]。CMV 非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型已被用于研究CMV 發(fā)病機(jī)制、原發(fā)感染的免疫應(yīng)答以及后遺癥,這種非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型為研發(fā)HCMV 疫苗帶來(lái)進(jìn)一步的可能[78-80]。NHP 還用于 EBOV、GBV-B 等病毒感染研究,并必將為今后可能出現(xiàn)的新型病毒繼續(xù)做出重要貢獻(xiàn)。

7 小結(jié)與展望

NHP 對(duì)人類致病性病毒具有極度易感性,能夠有效模擬人類病毒感染性疾病,并隨著NHP 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制備的不斷完善,對(duì)疾病的發(fā)病機(jī)制研究,以及藥物的開(kāi)發(fā)和疫苗評(píng)價(jià)具有不可估量的作用。但是非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物作為國(guó)家保護(hù)動(dòng)物,資源比較稀缺,所以進(jìn)一步發(fā)展并擴(kuò)大NHP 種質(zhì)資源具有重要意義,尤其是SPF 級(jí)(無(wú)特定病原體)非人靈長(zhǎng)類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。NHP 不僅在病毒感染性疾病中的具有重要應(yīng)用,還在腦科學(xué)、生殖生育、器官移植、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域也具有重要應(yīng)用,相信在未來(lái)的醫(yī)學(xué)發(fā)展與進(jìn)步上,NHP 將會(huì)發(fā)揮出更加不可估量的價(jià)值。