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    Ash2L、抗內(nèi)皮細胞抗體與川崎病患兒冠脈血管損傷的關(guān)系

    2021-05-19 03:52:30馮迎軍王芳潔呂愛婷孫琪青
    實驗與檢驗醫(yī)學(xué) 2021年2期
    關(guān)鍵詞:血清

    馮迎軍,王芳潔,呂愛婷,孫琪青

    (鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 河南省兒童醫(yī)院 鄭州兒童醫(yī)院,河南 鄭州450018)

    川崎病屬于一類全身血管性炎癥疾病,炎癥反應(yīng)的過度活化誘發(fā)血管基質(zhì)代謝異??稍斐晒跔顒用}損傷,因此冠狀動脈損傷是川崎病發(fā)生率最高的并發(fā)癥,但截至目前川崎病異常炎癥反應(yīng)的相關(guān)機制尚不明晰[1]。相關(guān)研究[2,3]結(jié)果顯示內(nèi)皮細胞的功能紊亂和損傷可能是川崎病并發(fā)血管類并發(fā)癥的重要原因,但具體還需要進一步研究證實。

    血管內(nèi)皮細胞抗體(anti-endothelial cell antibody,AECA) 可在多種血管炎癥免疫疾病中遇到,其屬于血管內(nèi)皮細胞表面的異質(zhì)性抗體,系統(tǒng)性紅斑狼瘡等多種常見血管炎癥疾病中均發(fā)現(xiàn)AECA不僅是炎癥和血管損傷的標(biāo)記,還可能參與疾病的發(fā)生、發(fā)展過程[4]。Ash2 樣蛋白(Ash2-like protein,Ash2L)是重要的炎癥介導(dǎo)蛋白,相關(guān)研究[5]已經(jīng)證實其在白細胞分化階段起重要作用。本研究探討了Ash2L、AECA 與川崎病患兒冠脈血管損傷的關(guān)系,旨在為臨床川崎病的治療和預(yù)后提供更多的數(shù)據(jù)參考,報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取 2017 年 1 月-2019 年 2 月在我院治療的川崎病患兒87 例(觀察組),其中伴有冠脈損傷患兒50 例,納入標(biāo)準(zhǔn):⑴川崎病診斷符合《小兒川崎病的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)》中的標(biāo)準(zhǔn)[6];⑵均為初治急性期患兒;⑶患兒監(jiān)護人知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):合并有惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病等。同時選取健康兒童80 例作為對照組(血常規(guī)、肝腎功等無異常),觀察組和對照組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1。

    表1 觀察組和對照組一般資料比較

    1.2 實驗方法 取所有患者空腹靜脈血5ml,3000r/min 離心10min 后分離上清并分成兩份,分別檢測血清Ash2L 和AECA,酶聯(lián)免疫法檢測血清Ash2L和AECA 水平,酶標(biāo)儀購于美國貝克曼公司,血清Ash2L 和AECA 試劑盒購于南京建成生物研究所;超聲心動圖檢測觀察組左冠狀動脈內(nèi)徑(LCA)/主動脈瓣環(huán)內(nèi)徑(AAO)。

    1.3 冠脈損傷標(biāo)準(zhǔn) 采用超聲心動圖進行判斷[8]:⑴出現(xiàn)冠狀動脈內(nèi)膜回聲增強; ⑵左冠狀動脈內(nèi)徑超鄰近節(jié)段內(nèi)徑的1.5 倍; ⑶左冠狀動脈內(nèi)徑(LCA)/主動脈瓣環(huán)內(nèi)徑(AAO)>0.2。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 統(tǒng)計分析采用SPSS22.0 軟件,計量資料采用(±s)表示,兩組間比較使用t 檢驗,計數(shù)資料采用頻數(shù)或百分比表示,兩組間比較使用非參數(shù)χ2檢驗,相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)分析。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 觀察組和對照組血清Ash2L、AECA 水平比較觀察組血清Ash2L 和AECA 明顯高于對照組,差異比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

    表2 觀察組和對照組血清Ash2L、AECA水平比較

    2.2 觀察組有無冠脈損傷患兒血清Ash2L、AECA及LCA/AAO 比較 有冠脈損傷患兒血清Ash2L、AECA 及LCA/AAO 明顯高于無冠脈損傷患兒(P<0.05)。見表3。

    表3 觀察組有無冠脈損傷患兒血清Ash2L、AECA及LCA/AAO比較

    2.3 相關(guān)性分析 將觀察組患兒血清Ash2L、AECA 與 LCA/AAO 進行相關(guān)分析,結(jié)果顯示: 血清Ash2L、AECA 與 LCA/AAO 呈正相關(guān) (r=0.825 和0.876,P<0.05),見圖1。

    2.4 Ash2L、AECA 及 LCA/AAO 診斷價值 Ash2L、AECA 及LCA/AAO 診斷有冠脈損傷的ROC 曲線下面積分別為 0.736、0.734 和 0.755,P<0.05, 截斷值分別為 3.60pg/ml、920.50pg/ml 和 0.20,靈敏性分別為78.00%、77.50%和 80.00%, 特異性分別為66.00%、64.00%和67.80%,見圖2。

    3 討論

    圖1 相關(guān)分析圖

    圖2 ROC曲線圖

    川崎病屬于臨床兒科常見病,全身血管性炎癥反應(yīng)時本病的主要病理特征,可誘發(fā)炎癥心血管病變,對兒童的身體健康產(chǎn)生嚴重威脅,而冠狀動脈損傷是川崎病的最常見并發(fā)癥之一[8,9]。大量文獻[10-13]均提示內(nèi)皮細胞功能障礙是造成川崎病患者冠狀動脈損傷和血管炎癥疾病的重要原因。AECA 屬于B 淋巴細胞分泌的非特異性自身抗體,先前的研究[14]提示川崎病患兒治療后AECA 顯著下降并提示AECA 水平可能與KD 患兒疾病的活動性具有相關(guān)性。研究[15,16]發(fā)現(xiàn) Ash2L 可催化 IFN-γ 基因組蛋白發(fā)生H3K4me3 甲基化,進而發(fā)揮介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的T 細胞亞群的作用。本研究結(jié)果顯示觀察組血清Ash2L 和AECA 明顯高于對照組,上述結(jié)果提示Ash2L 和AECA 可能是川崎病患兒發(fā)病過程中特有標(biāo)志物, 具有成為診斷川崎病重要指標(biāo)的潛力。AECA 結(jié)合內(nèi)皮細胞后可通過多種途徑介導(dǎo)血管內(nèi)皮的功能障礙和內(nèi)皮損傷[17,18]:⑴增加趨化因子、炎性細胞因子的合成,活化內(nèi)皮細胞;⑵促進內(nèi)皮細胞表面黏附分子表達,促進中性粒細胞和單核細胞的聚集和遷移;⑶通過抗體和補體細胞毒作用引起內(nèi)皮細胞的溶解和損傷,這也間接提示檢測AECA 水平對診斷和評估川崎病可能具有提示作用。

    觀察組有無冠脈損傷患兒血清Ash2L、AECA及LCA/AAO 比較結(jié)果顯示有冠脈損傷患兒血清Ash2L、AECA 及 LCA/AAO 明顯高于無冠脈損傷患兒。上述結(jié)果提示川崎病并發(fā)冠狀動脈損傷患兒血清 Ash2L、AECA 及 LCA/AAO 明顯升高。釋放蛋白溶解酶、活性氧、細胞因子等毒性介質(zhì)、誘導(dǎo)中性粒細胞的活化是AECA 的關(guān)鍵作用,進而損傷血管內(nèi)皮細胞并造成機體局部血管功能障礙,參與川崎病并發(fā)冠狀動脈的發(fā)生、發(fā)展過程。因此通過檢測血清Ash2L、AECA 有助于判斷川崎病并發(fā)冠狀動脈的發(fā)生及所處于的發(fā)展階段。

    本研究進一步將觀察組患兒血清Ash2L、AECA 與 LCA/AAO 進行相關(guān)分析,結(jié)果顯示: 血清Ash2L、AECA 與 LCA/AAO 呈正相關(guān)。該結(jié)果提示川崎病患兒血清Ash2L、AECA 明顯升高,與冠脈血管損傷存在一定相關(guān)性,血清Ash2L、AECA 水平越高,冠狀動脈損害越嚴重。故而,筆者推測對外周血Ash2L、AECA 表達水平檢測,有助于早期診斷川崎病合并冠狀動脈損害及預(yù)后。

    相關(guān)文獻[19,20]提示T-bet 的高表達可能是川崎病患兒IFN-γ 基因H3K4me3 修飾異常的重要原因,IFN-1 可結(jié)合靶細胞表面受體結(jié)合, 促使STAT1 磷酸化,并誘導(dǎo)T-bet 的表達,因此基于本研究結(jié)果筆者推測在內(nèi)、外源性配體及炎癥因子的共同作用誘導(dǎo)TLR4 信號,T-bet 表達水平升高并促進IFN-γ 基因組蛋白甲基化酶Ash2L 結(jié)合,促進IFN-γ 基因組蛋白發(fā)生甲基化修飾及H3K4me3水平顯著升高,進而導(dǎo)致IFN-γ 和Thl 細胞表達異常,進一步加重炎癥反應(yīng)和內(nèi)皮細胞功能障礙。

    綜上所述,川崎病患兒血清Ash2L、AECA 明顯升高,與冠脈血管損傷存在一定相關(guān)性,值得進一步研究。本研究對Ash2L、抗內(nèi)皮細胞抗體與川崎病患兒冠脈血管損傷的關(guān)系進行了分析探討并分析了可能存在的相關(guān)機制,實驗結(jié)果更加全面,能夠為臨床川崎病的治療和預(yù)后提供更多的數(shù)據(jù)參考,具有一定的臨床意義。

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