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    羅氏cobasE602 發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)項(xiàng)目的溯源研究

    2021-05-19 03:52:22沈素晶葉青李靄文鄧超譚俊青
    關(guān)鍵詞:檢測(cè)系統(tǒng)

    沈素晶,葉青,李靄文,鄧超,譚俊青

    (廣東省第二中醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510095)

    電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)具有性能穩(wěn)定、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好、靈敏度高等特點(diǎn),可測(cè)定內(nèi)分泌激素、腫瘤標(biāo)志物、心血管疾病標(biāo)志物、血藥濃度和傳染病等項(xiàng)目[1-4],近年來也為各大實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。不難發(fā)現(xiàn),一個(gè)實(shí)驗(yàn)室同時(shí)使用幾個(gè)不同的發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)也是常事。因此各檢測(cè)系統(tǒng)間的可比性和結(jié)果的同質(zhì)性研究也成了臨床檢驗(yàn)工作中一個(gè)亟需解決的問題[5,6]。對(duì)新建檢測(cè)系統(tǒng)的溯源是一個(gè)復(fù)雜而且必需的過程,同時(shí)也需要投入大量的人力、物力和財(cái)力。而技術(shù)不成熟也將對(duì)人力和財(cái)力造成較大的浪費(fèi)。本文將對(duì)實(shí)驗(yàn)室新引進(jìn)的羅氏cobas E 602 發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)與已溯源的目標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng)雅培I 2000 進(jìn)行一次系統(tǒng)的溯源比對(duì)試驗(yàn),驗(yàn)證其性能及是否滿足臨床需求; 也為臨床檢驗(yàn)進(jìn)行溯源性研究提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料 ⑴檢測(cè)系統(tǒng)。新建檢測(cè)系統(tǒng):Roche cobas E 602 電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀模塊及其配套校準(zhǔn)物、試劑和第三方朗道質(zhì)控物 目標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng):雅培I2000 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀,雅培試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品)。選擇的5 個(gè)具有代表性的檢測(cè)項(xiàng)目作為檢測(cè)對(duì)象,T3、T4、CEA、CA125II、ProgIII,五個(gè)項(xiàng)目分別代表內(nèi)分泌系統(tǒng),腫瘤標(biāo)志物及性激素。本次溯源用到的羅氏E 602 檢測(cè)系統(tǒng)的試劑,校準(zhǔn)品,質(zhì)控品批號(hào),見表1。

    表1 5 個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的試劑,校準(zhǔn)品,質(zhì)控品批號(hào)

    1.2 方法 ⑴可報(bào)告范圍分析:從患者的血清樣品中分別挑選5 個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的低值(L)和高值(H)樣本,高值濃度達(dá)廠家說明書線性范圍的上限,低值樣品濃度盡可能低,將 H 和 L 樣品按:5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、lL+4H、0.5L +4.5H、5H 的比例混合配制,形成7 個(gè)系列濃度的實(shí)驗(yàn)樣品。7 個(gè)待測(cè)樣品濃度呈比例關(guān)系并涵蓋說明書的線性范圍。每個(gè)濃度的樣品均重復(fù)6 次測(cè)定,前3 次由低到高進(jìn)行,后3 次順序相反。首先計(jì)算出混合的待測(cè)樣品的濃度作為這些樣品的預(yù)期值,再與這些樣品的實(shí)際測(cè)定值進(jìn)行回歸關(guān)系驗(yàn)證; 確認(rèn)是直線回歸關(guān)系且具有相關(guān)性(P<0.05)后,計(jì)算相關(guān)系數(shù)(r)和直線回歸方程(Y=bX+a)的斜率b 和截距a,最后作截距a 檢驗(yàn),確認(rèn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    ⑵精密度的測(cè)定:選擇與患者標(biāo)本相近且性能穩(wěn)定的第三方質(zhì)控品:朗道質(zhì)控品,作為批內(nèi)和批間精密度檢測(cè)的樣本。在羅氏和雅培兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的第三方質(zhì)控均在控的前提下,5 個(gè)待檢項(xiàng)目每天檢測(cè)1 次,連續(xù)檢測(cè)20d,累積得到20 個(gè)結(jié)果,經(jīng)計(jì)算得到20 個(gè)數(shù)據(jù)的CV 值, 即是各個(gè)項(xiàng)目在兩個(gè)系統(tǒng)的日間精密度。另外將待測(cè)樣品隨機(jī)插入患者標(biāo)本一起檢測(cè),一個(gè)批內(nèi)選4 個(gè)時(shí)間段,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)連續(xù)測(cè)5 次,總共得到20 個(gè)數(shù)據(jù),經(jīng)計(jì)算得出CV 值即是待測(cè)項(xiàng)目在兩個(gè)系統(tǒng)的批內(nèi)精密度。

    ⑶準(zhǔn)確度的分析: 為5 個(gè)溯源項(xiàng)目分別隨機(jī)選取2O 份患者標(biāo)本,標(biāo)本濃度分布盡量覆蓋項(xiàng)目的可報(bào)告范圍,其中濃度在參考區(qū)間內(nèi)外各1O份。每天分別在規(guī)定時(shí)間內(nèi)檢測(cè)選取的標(biāo)本4 份,每份標(biāo)本一分為二,分別在雅培I2000 和羅氏cobas E 602 檢測(cè)系統(tǒng)上檢測(cè)。先按 l、2、3、4 順序測(cè)1 次,然后相反順序再測(cè)1 次,以相同的方法連續(xù)檢測(cè)5d。對(duì)所得的數(shù)據(jù)先進(jìn)行離群值分析,剔除離群值后進(jìn)行直線回歸與相關(guān)分析,得直線回歸方程(Y=bX+a)和相關(guān)系數(shù)(r)。

    ⑷臨床可接受性分析: 將5 個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的臨界值分別代入各自相應(yīng)的回歸方程得相應(yīng)的Y值,SE=Y-X, %SE=—Y-X|/X*100%判斷臨床的可接受性。

    ⑸統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 不同檢測(cè)系統(tǒng)的質(zhì)控及血清標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果統(tǒng)計(jì)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)資料的方差分析、可靠性分析、相關(guān)分析和回歸分析。所有數(shù)據(jù)均在Excel 2000 和SPSS 20.0 軟件包上進(jìn)行。

    2 結(jié)果

    2.1 可報(bào)告范圍;5 個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的測(cè)定值與理論值間的回歸方程均為直線回歸檢驗(yàn),且具有相關(guān)性(P<0.05)?;貧w直線斜率 b 在 1.0±0.03 范圍內(nèi),截距a 檢驗(yàn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05); 相關(guān)系數(shù)r 均>0.975,說明直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠;見表2。經(jīng)驗(yàn)證,5 個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目廠家說明書提供的線性范圍可以作為Roche cobas E 602 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)的可報(bào)告范圍,見表3。

    表2 5 個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的回歸方程和相關(guān)系數(shù)

    表3 5 個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證的線性范圍與說明書線性范圍比較

    2.2 精密度 按照設(shè)計(jì)的方法分別計(jì)算的羅氏C 602 檢測(cè)系統(tǒng)和雅培I2000 檢測(cè)系統(tǒng)的批內(nèi)和批間的精密度,兩者均能滿足文件對(duì)不精密度的要求,結(jié)果見表4~7。

    表4 羅氏cobasE602 檢測(cè)系統(tǒng)批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    表5 羅氏cobasE602 檢測(cè)系統(tǒng)批間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    表6 雅培I2000 檢測(cè)系統(tǒng)批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    表7 雅培I2000 檢測(cè)系統(tǒng)批間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    2.3 準(zhǔn)確度 去除離群值后進(jìn)行直線回歸與相關(guān)分析,得直線回歸方程Y=bX+a 和相關(guān)系數(shù)(r)。r均>0.975,說明直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠,可以用于回歸統(tǒng)計(jì)。見表8。

    表8 5 個(gè)項(xiàng)目用于驗(yàn)證不確定度的回歸方程和相關(guān)系數(shù)

    2.4 檢測(cè)系統(tǒng)可接受性能分析結(jié)果與結(jié)論 將5個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的臨界值分別代入各自相應(yīng)的回歸方程得相應(yīng)的Y 值,與雅培系統(tǒng)比較其偏倚。系統(tǒng)間比對(duì)結(jié)果的誤差全部小于CLIA 88 允許誤差的1/2,結(jié)果臨床全部能夠接受。見表9。

    表9 5 個(gè)項(xiàng)目的評(píng)價(jià)

    3 討論

    電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法發(fā)展于1996 年,它在發(fā)光反應(yīng)中加入了電化學(xué)反應(yīng),是繼放射免疫、酶免疫、 化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定之后的新一代標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù),是電化學(xué)和免疫測(cè)定相結(jié)合的產(chǎn)物,具有高敏感度,精密度,高準(zhǔn)確度的特點(diǎn),也是世界公認(rèn)的最先進(jìn)的臨床免疫檢測(cè)技術(shù)[7-10]。因此各大醫(yī)院也相繼引進(jìn)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng); 但由于其試劑成本高,很少實(shí)驗(yàn)室可以對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行完整的溯源性研究。本文參照EP9 文件要求[11,12],選擇了羅氏E 602 檢測(cè)系統(tǒng)常規(guī)項(xiàng)目中的5 個(gè)代表性項(xiàng)目進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果顯示新建檢測(cè)系統(tǒng)羅氏cobas E 602 的精密度,準(zhǔn)確度,可報(bào)告范圍及臨床可接受度均具有良好的溯源性,可投入臨床使用。隨著科技不斷發(fā)展,檢驗(yàn)儀器推陳出新速度也不斷加快,實(shí)驗(yàn)室同個(gè)系列項(xiàng)目同時(shí)使用幾臺(tái)儀器也常見,檢測(cè)系統(tǒng)間的可比性也成為頭等任務(wù)。不少?gòu)S家也有提供一定的溯源性資料,若實(shí)驗(yàn)室直接使用廠家的數(shù)據(jù),不僅不夠嚴(yán)謹(jǐn),也為實(shí)驗(yàn)室埋下隱患,有可能掩蓋了實(shí)驗(yàn)室一些不穩(wěn)定因素。因此每個(gè)實(shí)驗(yàn)室為儀器作溯源性研究也是必要的。本文就科室新引進(jìn)的羅氏E 602 發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行系統(tǒng)的溯源性研究,驗(yàn)證其性能,達(dá)到結(jié)果的可比性[13-15]為臨床治療和診斷提供指導(dǎo)。

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