ELISA檢測(cè)抗-HCV灰區(qū)、弱反應(yīng)標(biāo)本與FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果比較研究

王真真

(南陽市中心醫(yī)院,河南 南陽 473000)

丙型肝炎是一種傳染性疾病，傳播途徑主要有血液傳播、血液制品及靜脈吸毒等，該病的病發(fā)較為隱匿，臨床癥狀極不典型，若不及時(shí)的進(jìn)行診斷及治療，將會(huì)引發(fā)肝硬化、肝臟的慢性炎性變化，對(duì)生命健康造成極為嚴(yán)重的威脅。目前，診治丙型肝炎最常用的指標(biāo)是抗-HCV，檢測(cè)方式主要為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，ELISA檢測(cè)法雖具有快速、低成本、操作簡(jiǎn)單、高靈敏度及高特異性等特點(diǎn)，但其易出現(xiàn)誤診及漏診情況，特別是檢測(cè)某些變異病毒、免疫靜默期的感染病毒及“窗口期”的感染病毒，誤診、漏檢情況時(shí)有發(fā)生。對(duì)此，本研究采取熒光定量PCR法(FQ-PCR)復(fù)測(cè)LISA檢測(cè)抗-HCV灰區(qū)、弱反應(yīng)標(biāo)本情況，對(duì)比兩種檢測(cè)方法的結(jié)果，分析其在HCV感染檢測(cè)中的意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1 一般資料

選取2018年4月～2019年4月在南陽市中心醫(yī)院進(jìn)行無償獻(xiàn)血者的450例血樣標(biāo)本作為研究對(duì)象，根據(jù)ELISA檢測(cè)抗-HCV檢測(cè)結(jié)果，將血液標(biāo)本分為三組，即甲組：陰性(S/C0<0.3)200例；乙組：灰區(qū)(0.7≦S/CO<1)240例，其中雙試劑灰區(qū)64例，單試劑灰區(qū)176例；丙組:弱反應(yīng)標(biāo)本〈1≦S/C0<3.0)210例。將所有血樣標(biāo)本進(jìn)行分離，并將分離后的血清標(biāo)本置于-20℃以下的冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存，備用。

1.2 方法

采取ELISA法檢測(cè)三組研究對(duì)象的抗-HCV灰區(qū)、弱反應(yīng)標(biāo)本，若標(biāo)本的S/CO的檢測(cè)值均在0.7～3.8之內(nèi)，則采用同一種試劑檢測(cè)，若標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果顯示為灰區(qū)、弱反應(yīng)性，則采取FQ-PCR法進(jìn)行檢測(cè)。ELISA檢測(cè)所用是試劑、質(zhì)控物來源于上海潤(rùn)裕生物科技有限公司，抗-HCV的質(zhì)控物一般含量有200 IU/mL；HCV-DNA FQ-PCR檢測(cè)的試劑盒來源于上海酶聯(lián)生物科技有限公司，試劑檢測(cè)的限度為100 IU/mL[1]。檢測(cè)設(shè)備：濟(jì)南光耀醫(yī)療設(shè)備有限公司提供的TL988型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀，上海京工實(shí)業(yè)有限公司提供的PHOTO全自動(dòng)酶標(biāo)儀，深圳市盛信康科技有限公司提供的ADACLIA400全自動(dòng)洗板機(jī)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采取SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計(jì)數(shù)資料采取%表示，組間對(duì)比檢驗(yàn)采取χ2表示，P<0.05時(shí)表明數(shù)據(jù)間比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ELISA檢測(cè)抗-HCV和FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(見表1)

表1 血液樣本ELISA檢測(cè)弱反應(yīng)性與陰性標(biāo)本FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

2.2 ELIsA檢測(cè)抗-HCV灰區(qū)、弱反應(yīng)性與FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果對(duì)比(見表2、3)

表2 不同灰區(qū)與HBV-DNA FQ-PCR復(fù)測(cè)結(jié)果對(duì)比

表3 不同弱反應(yīng)性標(biāo)本與HBV-DNA FQ-PCR復(fù)測(cè)結(jié)果對(duì)比

3 討論

目前，臨床一般采取ELISA法檢測(cè)抗-HCV來診斷HCV感染。但ELISA法具有較大的局限性，加之不同廠家的試劑的特異性、靈敏度存在差異，在檢測(cè)過程中往往出現(xiàn)一些數(shù)值在臨界點(diǎn)時(shí)無法正確的判斷結(jié)果[2]。因此，如何準(zhǔn)確判斷、診治HCV感染，避免發(fā)生醫(yī)患糾紛一直深受臨床的重視。FQ-PCR檢測(cè)技術(shù)是一種核酸定量檢測(cè)法，高靈敏性是其一項(xiàng)重要的特點(diǎn)，當(dāng)檢測(cè)HCV感染時(shí)，能有效檢測(cè)HCV感染的水平含量，且該方式還能檢測(cè)出病毒突變株，其結(jié)果能顯示出病毒具有多高強(qiáng)度是傳染性，還能顯示病毒的復(fù)制水平[3]。 本文結(jié)果顯示，在650例抗-HCV灰區(qū)標(biāo)本中，共有23例(3.534%)HBV-DNA的濃度大于100 IU/mL，這表明，采取ELISA法對(duì)抗-HCV進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，其結(jié)果顯示S/CO<1時(shí)，仍不能全部排除HCV感染。有關(guān)研究認(rèn)為，當(dāng)檢測(cè)的試劑盒的靈敏度弱、HCV感染處于“窗口期”、HCV變異株感染等情況下，ELISA檢測(cè)時(shí)并不可以產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答，這就會(huì)導(dǎo)致抗-HCV的漏檢、誤診情況發(fā)生[1，3]。而本研究結(jié)果顯示，采取ELISA檢測(cè)抗-HCV時(shí)，呈現(xiàn)弱反應(yīng)性(1≤S/C0<3.0)的210例研究對(duì)象中，有188例(89.52%)檢出HBV-DNA。當(dāng)抗-HCV呈現(xiàn)弱反應(yīng)性時(shí)，則表明已有HCV感染，但這時(shí)并不能明確感染是現(xiàn)癥感染還是以往感染，而HBV-DNA卻是明確為現(xiàn)癥感染的一個(gè)特異性指標(biāo)。因此，應(yīng)用FQ-PCR檢測(cè)標(biāo)本灰區(qū)及弱反應(yīng)性對(duì)檢測(cè)丙型肝炎具有十分重要的意義。

綜上所述，采取ELISA法聯(lián)合FQ-PCR法檢測(cè)抗-HCV結(jié)果灰區(qū)、弱反應(yīng)樣標(biāo)本，能降低感染HCV誤診、漏診情況發(fā)生，利于疾病的早期診治，避免醫(yī)患糾紛發(fā)生。