血清 25-(OH)D 通過(guò)巨噬細(xì)胞自我吞噬調(diào)節(jié)免疫功能對(duì)AD影響的相關(guān)研究*

董 穎

(佳木斯市中心醫(yī)院,黑龍江 佳木斯 154002)

0 引 言

特應(yīng)性皮炎(atopicdermatitis,AD)是一種好發(fā)于青少年及兒童的炎癥性皮膚疾病，特點(diǎn)是病程較長(zhǎng)、易反復(fù)。目前還未研究出AD的病因及發(fā)病機(jī)制[1]，但大部分AD患者同時(shí)伴有過(guò)敏性鼻炎或哮喘史，幾乎所有學(xué)者認(rèn)為AD不單純是一種皮膚疾病而是一種與免疫相關(guān)的系統(tǒng)性疾病。且發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)，已經(jīng)成為影響生活質(zhì)量的第二大疾病[2]。所以需要更多的AD的相關(guān)因素研究，更深入探索病例病因，尋找更好的治療藥物或方法，預(yù)防或避免AD的發(fā)生或加重。本次研究分析血清 25-(OH)D 通過(guò)巨噬細(xì)胞自我吞噬對(duì)自身免疫功能的調(diào)節(jié)是否對(duì)AD有影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)許可篩選本院皮膚科門(mén)診2019 年 1 月—2020 年 1 月診斷為AD患兒 50例，診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合Williams 制定的AD診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，同時(shí)篩選體檢健康兒童50例，檢測(cè)所有入選人員的血清中25-(OH)D的水平。所選人員中男性59例，女性41例，年齡均在2～12 歲，平均(3.25±2．99)歲，其中實(shí)驗(yàn)觀察組中男性患兒26例，女性患兒24例，年齡均在2～12 歲，平均(3.45±2．39)歲，實(shí)驗(yàn)健康組中男性患兒33例，女性患兒17例，年齡均在2～12 歲，平均(3.15±2．79)歲，并對(duì)觀察組患兒按照SCORAD評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病情輕重程度的判斷，其中輕度患兒24例，中度患兒18例，重度患兒8例。所選人員在年齡及性別上具有可比性，P>0.05。

1.1.1 實(shí)驗(yàn)觀察組入選標(biāo)準(zhǔn)

①符合Williams制定的特應(yīng)性皮炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，年齡2～12 歲；②生命體征正常；③患兒家屬知情同意，并簽署知情同意書(shū)。④無(wú)對(duì)實(shí)驗(yàn)所用相關(guān)藥物過(guò)敏史

1.1.2 實(shí)驗(yàn)觀察組排除標(biāo)準(zhǔn)

①存在嚴(yán)重肝腎疾病及自身免疫疾病者；②同時(shí)患有其他皮膚疾?、垡缽男暂^差，不能配合檢驗(yàn)觀察的患兒；④ 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前6個(gè)月內(nèi)曾進(jìn)行過(guò)維生素 D的補(bǔ)充治療及近期1 ～2周內(nèi)使用過(guò)糖皮質(zhì)激素類藥物。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)健康組選取同期體檢健康兒童即可

1.2 方 法

采用反相高效液相色譜熒光檢測(cè)法檢測(cè)兩組研究對(duì)象中的血清 25(OH)D 含量，內(nèi)標(biāo)法定量劑量。檢測(cè)結(jié)束后統(tǒng)計(jì)兩組研究對(duì)象的血清中25-(OH)D的情況，分析其在AD患兒及健康兒童中的分布情況是否具有差異。

給予實(shí)驗(yàn)觀察組的患兒進(jìn)行基礎(chǔ)抗過(guò)敏治療，口服地氯雷他定干混懸劑，用法為1 ～ 5歲，每日一次，每次1.25mg; 6 ～ 11歲，每日一次，每次2.5mg; ≥12歲，每日一次，每次5mg,基礎(chǔ)治療一個(gè)月，癥狀緩解后隨機(jī)將同意簽署《參與維生素 D 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)的知情同意書(shū)》的實(shí)驗(yàn)觀察組患兒分為對(duì)照組和治療組，治療組患兒口服維生素 D，用法為每日一次，每次1000IU， 連續(xù)2 個(gè)月，2個(gè)月后再次檢測(cè)定治療組及對(duì)照組的有效患兒血清中25-(OH)D的水平，并同時(shí)進(jìn)行 SCORAD評(píng)估。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)

(1) 評(píng)估。該方法主要包括①皮膚受累面積( A) ：總分是100分

依據(jù)SCORAD 評(píng)分法[4]對(duì)AD觀察組患兒進(jìn)行病情嚴(yán)重程度評(píng)估。該方法主要包括①皮膚受累面積( A) ：總分是100分，按人體受累面積的百分比計(jì)分，每受累1%為1分；②皮損表現(xiàn)嚴(yán)重程度( B) ：總分為18分，按6項(xiàng)體征表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)分，這6項(xiàng)體征表現(xiàn)是：紅斑、丘疹/水腫、表皮剝脫情況、苔蘚化程度、滲出/結(jié)痂、未受累皮膚的皮膚干燥情況，每項(xiàng)評(píng)分為0 ～ 3 分；③瘙癢和睡眠影響程度( C)：總分是20分，以VITAS法進(jìn)行評(píng)估，主要評(píng)價(jià)AD患者的瘙癢程度及個(gè)體自覺(jué)癥狀對(duì)睡眠的影響程度，每個(gè)項(xiàng)目0 ～ 10 分。觀察每個(gè)患兒的具體表現(xiàn)，按公式A/5 + 7B /2 + C( 0 ～ 103 分)進(jìn)行 SCORAD 總分的評(píng)價(jià)，即SCORAD 總分 = A/5 + 7B /2 + C( 0 ～ 103 分)

(2) 血清中25-(OH)D 水平判定根據(jù)美國(guó)內(nèi)分泌學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)分為三種情況：①≤20ng /mL為缺乏；②21 ～ 29ng /mL為不足，③≥30ng /mL為足夠。其中血清中25-(OH)D 水平(1)依據(jù)SCORAD 評(píng)分法[4]對(duì)AD觀察組患兒進(jìn)行病情嚴(yán)重程度的評(píng)估。該方法主要包括①皮膚受累面積( A) ：總分是100分，按人體受累面積的百分比計(jì)分，每受累1%為1分；②皮損表現(xiàn)嚴(yán)重程度( B) ：總分為18分，按6項(xiàng)體征表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)分，這6項(xiàng)體征表現(xiàn)是：紅斑、丘疹/水腫、表皮剝脫情況、苔蘚化程度、滲出/結(jié)痂、未受累皮膚的皮膚干燥情況，每項(xiàng)評(píng)分為0 ～ 3 分；③瘙癢和睡眠影響程度( C)：總分是20分，以VITAS法進(jìn)行評(píng)估，主要評(píng)價(jià)AD患者的瘙癢程度及個(gè)體自覺(jué)癥狀對(duì)睡眠的影響程度，每個(gè)項(xiàng)目0 ～ 10 分。觀察每個(gè)患兒的具體表現(xiàn)，按公式A/5 + 7B /2 + C( 0 ～ 103 分)進(jìn)行 SCORAD 總分的評(píng)價(jià)，即SCORAD 總分 = A/5 + 7B /2 + C( 0 ～ 103 分)

(2)血清中25-(OH)D 水平判定根據(jù)美國(guó)內(nèi)分泌學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)分為三種情況：①≤20ng /mL為缺乏；②21 ～ 29ng /mL為不足，③≥30ng /mL為足夠。其中血清中25-(OH)D 水平不足例數(shù)+血清中25-(OH)D 水平缺乏例數(shù)=異常例數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié) 果

1)實(shí)驗(yàn)觀察組和實(shí)驗(yàn)健康組血清血清中25-(OH)D 水平比較，見(jiàn)下表1

實(shí)驗(yàn)觀察組中患兒血清中25-(OH)D 水 平 異常例數(shù)比例較高明顯高于正常兒童血清血清中25-(OH)D水平異常例數(shù)比例，分別為(90%，72%)；實(shí)驗(yàn)觀察組中健康對(duì)照組患兒血清中25-(OH)D水平明顯高于實(shí)驗(yàn)觀察組，分別為(24.23 ± 8.99，18.79 ± 7． 84) ng /mL ，P<0． 05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 該組數(shù)據(jù)表明：①AD患兒血清中25-(OH)D水平低 于 正 常值的比率大于正常健康兒童②健康兒童血清中25-(OH)D水平高于AD患兒的血清中25-(OH)D水平。

2)血清中25-(OH)D 水平與 AD 患兒 SCORAD 得分之間的相關(guān)性，見(jiàn)圖1。

如圖1所示：各點(diǎn)分布總體分布而言，SCORAD 評(píng)分降低，血清中25-(OH)D水平則有所增加，反之亦然，所以可以看出二者呈負(fù)相關(guān)性，且有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0． 05，r=- 0．371) 。

3)參與維生素 D 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)觀察組患兒實(shí)驗(yàn)前后血清中25-(OH)D 水 平變化情況見(jiàn)表2、表3。

實(shí)驗(yàn)觀察組中參與維生素 D 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)的患兒共 43 例，其中未按要求完成實(shí)驗(yàn)觀察的患兒19 例，最終有效實(shí)驗(yàn)患兒 24 例，其中實(shí)治療組 13 例，對(duì)照組 11例，且兩組患兒性別、年齡均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0． 05)，具有可比性 。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：實(shí)驗(yàn)治療前治療組和對(duì)照組患兒血清中25-(OH)D水平及 SCORAD 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0． 05) 。維生素 D 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)后治療組患兒血清中25-(OH)D 水 平由(17.8±5.99)變?yōu)?25.3±7.2)，對(duì)照組患兒血清中25-(OH)D 水 平由(17.5±6.01)變?yōu)?18.1±6.5 ) ; 治療組SCORAD 評(píng)分由(43.98±10.6)下降至(22． 2 ± 7． 3)，對(duì) 照 組SCORAD 評(píng)分由(44.29±11.1)下降至(30.1±7.1 ) 兩組數(shù)據(jù)均具 有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 差 異(P< 0． 05) 。由以上數(shù)據(jù)可以推測(cè)補(bǔ)充維生素 D可以輔助AD 患兒的治療，有助于癥狀的減輕及病情的好轉(zhuǎn)。

表1 實(shí)驗(yàn)觀察組和實(shí)驗(yàn)健康組血清中25-(OH)D 水平比較(%)

表2 兩組患兒治療前后血清中25-(OH)D水平變化情況

表3 兩組患兒治療前后SCORAD評(píng)分變化情況

圖1 血清中25-(OH)D 水平與 AD 患兒 SCORAD 得分之間的相關(guān)性

3 討 論

25 羥基維生素 D[25-hydroxyvitamin D，25-(OH)D]是維生素 D的活性方式，是外周血中衡量維生素 D 水平的最佳指標(biāo)。 至今為止很多學(xué)者認(rèn)為AD的發(fā)生及發(fā)展與血清中的 25-(OH)D 水平是有相關(guān)性的[5]，但也有一些研究認(rèn)為兩者無(wú)相關(guān)性[6]。本實(shí)驗(yàn)旨在進(jìn)一步論證兩者是否具有相關(guān)性。研究表明維生素 D 能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞自我吞噬或是誘導(dǎo) KC表達(dá)，可以參與先天性和適應(yīng)性免疫的調(diào)節(jié)，對(duì)皮膚的定植，皮膚屏障功能的維護(hù)均有一定的作用[7]，而就目前對(duì)AD主要發(fā)病因素的推論免疫應(yīng)答和皮膚屏障破壞就是其中較為重要的兩大因素，而維生素 D 可以在免疫反應(yīng)中起到降低皮膚的炎性反應(yīng)的作用，并且可以抑制激素所產(chǎn)的耐藥性，同時(shí)也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞中的超氧化物歧化酶(SOD)存與血清中的 25-(OH)D 也有顯著的正相關(guān)性，而 SOD 是可以促進(jìn)AD恢復(fù)的因素之一[9].實(shí)驗(yàn)推論血清中25-(OH)D水平 與AD的是有相關(guān)性的，并且對(duì)其其病情的嚴(yán)重程度及疾病本身的恢復(fù)都是有影響性的。

在本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)AD患兒血清中25-(OH)D水平明顯低于正常健康兒童，且AD患兒中25-(OH)D水平異常的比率也較正常健康兒童的比率高，在進(jìn)行維生素D補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)后，其治療組患兒的SCORAD評(píng)分出現(xiàn)明顯的下降，而對(duì)照組SCORAD評(píng)分無(wú)明顯下降，這就進(jìn)一步證實(shí)了25-(OH)D是與AD相關(guān)的一種因素，而且對(duì)疾病的嚴(yán)重程度及病情的恢復(fù)也是有影響的

4 結(jié) 語(yǔ)

綜上所述：血清中25-(OH)D水平的降低可以導(dǎo)致機(jī)體免疫功能的失衡，影響皮膚的屏障功能，同時(shí)加重皮膚的炎性反應(yīng)，增加了AD的患病率，進(jìn)一步影響疾病的臨床癥狀及疾病本身的痊愈程度；所以定期的進(jìn)行 Vit D 的檢查并且及時(shí)補(bǔ)充Vit D對(duì)于AD的預(yù)防和治療是有意義的。本次實(shí)驗(yàn)的不足主要是樣本量較少，檢測(cè)人群比較單一，所以需要更多的實(shí)驗(yàn)去進(jìn)一步印證此結(jié)論。