SysmexUF-5000全自動(dòng)尿液有形成分分析儀流水線性能驗(yàn)證分析

曹春花，周丹

（青海省人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，青海 西寧）

0 引言

尿液有形成分檢測(cè)是診斷泌尿生殖系統(tǒng)疾病及相關(guān)疾病重要實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，其檢測(cè)結(jié)果的及時(shí)準(zhǔn)確性與臨床診斷密切相關(guān)[1-2]。SysmexUF-5000尿液有形成分分析儀的檢測(cè)原理與UF-1000i的原理一樣，是基于流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)2種技術(shù)相結(jié)合，具有快速篩選異常標(biāo)本、精密度高、偏差小等特點(diǎn)，是現(xiàn)代臨床實(shí)驗(yàn)室不可缺少的儀器之一。根據(jù)ISO15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)的要求，本檢驗(yàn)中心對(duì)所引進(jìn)的SysmexUF-5000尿液有形成分分析儀進(jìn)行了性能驗(yàn)證驗(yàn)證參數(shù)包括紅細(xì)胞（Red Blood Cell, RBC）白細(xì)胞（White Blood Cell, WBC）、上皮細(xì)胞（Epithelial cell,EC）、管型（CAST）、細(xì)菌（Bacteri Uin, BACT），現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

2019年5～6月就診于青海省人民醫(yī)院門診患者及健康體檢者的尿液標(biāo)本。

1.2 儀器和試劑

Sysmex公司UF-5000尿液有形成分分析儀及配套試劑、質(zhì)控品和校準(zhǔn)品。所用試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品均為該公司配套產(chǎn)品。試劑在有效日期內(nèi)，每日室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.3 方法

1.3.1 精密度驗(yàn)證

（1）批 內(nèi) 精 密 度：各 參 數(shù)（WBC、RBC、EC、CAST、BACT）均選擇高值和低值2個(gè)濃度，收集新鮮尿液樣本12份，充分混勻后連續(xù)做20次測(cè)定，計(jì)算平均值（），標(biāo)準(zhǔn)差（s）和變異系數(shù)（CV）。所有測(cè)定在2 h內(nèi)完成。參照EP15A方 案，結(jié) 果 需 符 合1/4TEa CLIA’88要 求：RBC＜10.0%、WBC＜10.0%、EC＜30.0%、CAST＜40.0%、BACT＜20.0%。

（2）批間精密度：采用原裝定值高、低值質(zhì)控品，按照說明書要求混勻測(cè)定，每日測(cè)定1次，連續(xù)測(cè)定20次，計(jì)算平均值（），標(biāo)準(zhǔn)差（s）和變異系數(shù)（CV）。

1.3.2 線性范圍

取富含對(duì)應(yīng)項(xiàng)目的高值尿樣5份（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、細(xì)菌數(shù)在10000/μL左右，EC在200/μL左右，CAST在30 μL左右）以鞘液做1:2，1:4，1:16，1:64，1:256……的系列等比稀釋，每個(gè)稀釋度測(cè)定3次，取均值作為測(cè)定值。以理論值為橫坐標(biāo)，實(shí)際檢測(cè)值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行相關(guān)和回歸分析，計(jì)算回歸方程（y=ax+b）和相關(guān)系數(shù)（r）。要求：a值在（1.00±0.05），相關(guān)系數(shù)r≥0.975。

1.3.3 攜帶污染率驗(yàn)證

先對(duì)3份高值尿液標(biāo)本（建議RBC和WBC＞5000/μL、EC＞100/μL、CAST＞20/μL、BACT＞5000/μL）混 勻 后 連續(xù)檢測(cè)3次（H1、H2、H3）；然后立即對(duì)接近預(yù)期3份低值尿液 樣 本（建 議RBC和WBC＜20/μL、EC＜5/μL、CAST＜2/μL、BACT＜100/μL）混勻連續(xù)檢測(cè)3次（L1、L2、L3），按照以下公式計(jì)算：攜帶污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%。要求：RBC、WBC、EC、CAST、BACT攜帶污染率≤0.05%。

2 結(jié)果

2.1 批內(nèi)、批間精密度

5個(gè)定量參數(shù)批內(nèi)、批間精密度高、低值的CV均在標(biāo)準(zhǔn)CV的范圍內(nèi)，具體見表1和表2。

2.2 線性范圍

5個(gè)定量參數(shù)回歸方程和線性范圍與廠商給定范圍較一致，具體見表3。

3 討論

尿液有形成分分析儀通過對(duì)尿液中有形成分計(jì)數(shù)和形態(tài)學(xué)分析，可提供紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌等定量結(jié)果，還可以對(duì)某些異常成分進(jìn)行提示性報(bào)告[3-4]。目前國內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用的尿液有形成分分析儀主要有兩種，一種是基于流式細(xì)胞核酸熒光染色技術(shù)的尿沉渣儀，比如SysmexUF系列，另一種是基于數(shù)字成像自動(dòng)識(shí)別的分析儀。本實(shí)驗(yàn)室使用的就是前者，SysmexUF系列生產(chǎn)的UF5000全自動(dòng)尿液分析系統(tǒng)，它可用藍(lán)色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過核酸熒光染色后在鞘流貫流分析池中形成的鞘流樣本，并通過對(duì)從各粒子產(chǎn)生的前方散射光、側(cè)向散射光、消偏振的側(cè)向散射光以及側(cè)向螢光信號(hào)轉(zhuǎn)換成的光電信號(hào)進(jìn)行分析，從而對(duì)各個(gè)粒子進(jìn)行識(shí)別[5-6]。根據(jù)從細(xì)胞中染色元素發(fā)出的熒光可基于熒光標(biāo)記抗體和熒光顏料的屬性對(duì)細(xì)胞表面、胞漿屬性和細(xì)胞核（RNA和DNA數(shù)量）等細(xì)胞特性進(jìn)行定量測(cè)定?；诹魇郊?xì)胞儀原理，全自動(dòng)尿有形成份分析儀UF-5000可將尿液中的粒子分離為RBC（紅細(xì)胞）、WBC（白細(xì)胞）、EC（上皮細(xì)胞）、Squa.EC（上皮細(xì)胞）、CAST（管型）和 BACT（細(xì)菌）等，并予以定量標(biāo)示。尿液有形成分分析儀的廣泛使用有效地減少了鏡檢，提高了工作效率，也因此對(duì)于分析儀的性能有了更高的要求[7-8]。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)建立一套規(guī)范且適合的驗(yàn)證方案對(duì)儀器性能進(jìn)行驗(yàn)證及評(píng)估，以保證儀器檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性及可靠性。

表1 批內(nèi)精密度

表2 批間精密度

表3 UF-5000各參數(shù)線性范圍檢測(cè)結(jié)果

此次驗(yàn)證的結(jié)果表明，RBC、WBC、EC、CAST、BACT各項(xiàng)參數(shù)均在生物參考區(qū)間內(nèi)，該生物參考區(qū)間可直接使用。由于衛(wèi)生部和省級(jí)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)項(xiàng)目只有干化學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目而沒有尿液有形成分定量的檢測(cè)，因此通過測(cè)定廠家配套的定值質(zhì)控品獲得RBC、WBC、EC、CAST、BACT的偏倚程度。結(jié)果顯示，5項(xiàng)定量指標(biāo)的相對(duì)偏差偏倚程度均在廠家所要求范圍內(nèi)，由此可見，UF5000尿液有形成分分析儀具有良好的重復(fù)性、精密度較好，攜帶污染率較低、線性范圍較寬、準(zhǔn)確度較高、結(jié)果具有可比性等特點(diǎn)，是一臺(tái)性能優(yōu)良的全自動(dòng)尿沉渣分析儀，可用于臨床尿液有形成分的定量分析。UF5000新增加的消偏振側(cè)向散射光（Depolarized Side Scatter Light），能捕捉具有雙折射性的結(jié)晶等，以更高的精度分離紅細(xì)胞和結(jié)晶，可以減少結(jié)晶對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)的干擾作用。尿液標(biāo)本成分多樣，黏液絲、膿細(xì)團(tuán)胞、細(xì)菌等對(duì)管型成分容易產(chǎn)生干擾，易出現(xiàn)假陽性[9-10]。所以對(duì)儀器篩查結(jié)果結(jié)晶、管型、真菌等為陽性的標(biāo)本，應(yīng)采用離心尿顯微鏡檢法或尿沉渣定量計(jì)數(shù)板法進(jìn)行人工確認(rèn)，陽性結(jié)果以鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)。減少假陽性率和假陰性率。合理的使用該儀器，充分發(fā)揮尿液有形成分在臨床診斷中的作用。