消毒技術(shù)在非洲豬瘟防控中的應(yīng)用現(xiàn)狀與問題

王巍, 羅玉子, 張麗, 馬吉飛, 仇華吉*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所， 獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 哈爾濱 150069；2.天津農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)學(xué)院, 天津 300384)

非洲豬瘟(African swine fever, ASF)是由非洲豬瘟病毒(ASFV)感染引起豬的一種烈性傳染病。目前該病尚無商品化的疫苗和有效的治療藥物[1]，已經(jīng)給全球養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。ASFV屬于蟲媒DNA病毒，是非洲豬瘟相關(guān)病毒科、非洲豬瘟病毒屬的成員[2-4]，對環(huán)境的抵抗力強(qiáng)，傳染源眾多且傳播途徑廣泛，嚴(yán)格的生物安全措施是目前防控該病最有效的手段，其中最重要的環(huán)節(jié)是消毒和檢測。

ASF消毒效果不佳是導(dǎo)致疫情未得到有效控制的重要原因。此外，檢測技術(shù)也是防控ASF的重要手段，由于目前的分子及免疫學(xué)檢測技術(shù)僅能測定樣品中是否存在病毒的核酸或抗原，無法確定其感染性，因此也無法對消毒效果進(jìn)行快速評價。1960年，Malmquist等[5]建立紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)，其原理是感染ASFV的豬外周血單核細(xì)胞或組織巨噬細(xì)胞能吸附在紅細(xì)胞表面形成“玫瑰花環(huán)”，根據(jù)該特性可鑒別具有感染性的ASFV。但該方法耗時、成本高,僅適用于專業(yè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確診，不適用于常規(guī)、快速檢測，也不適用于非血細(xì)胞吸附毒株的診斷。本文針對目前ASF的滅活方法進(jìn)行了總結(jié)和分析，同時對快速鑒別感染性及失活的ASFV檢測技術(shù)探索提出了新見解，以期為該病生物安全防控中消毒劑的正確選擇和使用、ASFV消毒效果的快速評價以及現(xiàn)地防控提供參考。

1 ASFV消毒技術(shù)簡介

目前常見消毒方式主要分成4大類：化學(xué)、物理、生物以及環(huán)境生態(tài)修復(fù)法。每種消毒方式的作用機(jī)理、適用范圍和優(yōu)缺點(diǎn)等各不相同(表1)。對各類常見消毒方式的原理和特點(diǎn)予以概述，以期為ASFV的滅活提供參考。

1.1 化學(xué)消毒劑

化學(xué)消毒劑主要包括醛類、鹵素類等化學(xué)制劑，具有廣譜性消毒效果。其中，醛類消毒劑能破壞病毒的囊膜結(jié)構(gòu)，還可與DNA相互作用，干擾蛋白質(zhì)-DNA交聯(lián)代謝[6]。這類消毒劑具有潛在的致癌、致突變[7]和致呼吸道過敏反應(yīng)的風(fēng)險[8]。鹵素類消毒劑包括氯、碘、氟、溴、砹5種元素以及它們與金屬離子形成的化合物(鹽類)。其主要通過滲透膜并氧化蛋白質(zhì)，中斷氧化磷酸化過程滅活病毒。其性狀溫和、抗有機(jī)物能力很強(qiáng)[8]，但穩(wěn)定性較差。氧化物及過氧化物類消毒劑能氧化包膜蛋白，使病毒包膜通透性增加，內(nèi)容物外流從而失去活性。其作用時間短且不留殘余毒性，但氧化能力易受到溫度和酸堿度的影響[9]。酚類及苯酚衍生物能使蛋白質(zhì)變性和凝固從而引起膜損傷。這類消毒劑性狀穩(wěn)定但具有腐蝕性，其消毒效果易受堿性物質(zhì)影響[10]。堿類消毒劑屬于單組分高效消毒劑。其在水溶液中解離的大量氫氧根離子能溶解ASFV的囊膜結(jié)構(gòu)，其殺滅效果隨氫氧根離子的濃度的增加而增強(qiáng)[9]。這類消毒劑極易受潮且安全性較差[10]。季銨化合物類消毒劑按照其結(jié)構(gòu)組成特點(diǎn)可歸納為單鏈季銨鹽、雙鏈季銨鹽、聚季銨鹽、混合季銨鹽4大類。單鏈季銨鹽的烷烴鏈可與病毒包膜類脂層發(fā)生疏水相互作用而插入其中,導(dǎo)致酶失活和蛋白質(zhì)變性[11]。雙鏈季銨鹽能結(jié)合到病毒包膜上影響新成代謝，干擾核酸和蛋白質(zhì)合成，影響能量代謝[12]。使用時應(yīng)避免與陰離子表面活性劑(肥皂、吐溫80)和一些拮抗物質(zhì)(碘化鉀、蛋白銀、水楊酸、升汞)同時使用[13]。

含碘消毒劑包括碘和以碘為主要成分的各種制劑，碘主要通過鹵化作用與ASFV蛋白質(zhì)氨基結(jié)合，使其失活[14]。它的消毒效果易受pH和有機(jī)物影響。

1.2 物理消毒法

紫外線能使病毒核酸內(nèi)鍵和鏈發(fā)生斷裂、形成光化產(chǎn)物等，其穿透力弱、輻射能量低，對人體有刺激和損傷作用，嚴(yán)重時可致癌。γ射線對分子的損傷主要源于初級電離(直接)和自由基的產(chǎn)生(間接)[15]，其穿透力強(qiáng)、滅活速度快且不影響病原微生物的抗原性和免疫原性[16]。

1.3 生物消毒法

生物消毒劑是指用生物分泌的化學(xué)物質(zhì)，如植物消毒劑、抗菌肽、噬菌體、生物酶等制備的消毒劑[17]。

1.4 環(huán)境生態(tài)修復(fù)法

環(huán)境生態(tài)修復(fù)是通過創(chuàng)造不利于病原微生物生存的條件來凈化和修復(fù)環(huán)境。生態(tài)修復(fù)劑主要由微生物菌體和微量化學(xué)元素組成[18]，其掉落地面形成的生物膜在物體表面發(fā)酵能消耗有機(jī)物和氧氣[19]。這類消毒劑可在環(huán)境中穩(wěn)定長效，具有很好的發(fā)展前景。

1.5 其他病毒清除技術(shù)

低 pH 孵放法是靜脈注射人免疫球蛋白常用的病毒滅活方法，已有很多研究者對其滅活效果進(jìn)行了驗(yàn)證[20-21]。低pH可改變病毒表面的抗原電荷，使其囊膜結(jié)構(gòu)發(fā)生變性從而無法侵染細(xì)胞。

表1 ASFV主要消毒方式的特點(diǎn)及推薦消毒劑效果評價方法Table 1 Characteristics of main disinfection methods of ASFV and evaluation methods of recommended disinfectant effectiveness

它的特點(diǎn)是安全、高效且穩(wěn)定。

納濾(nanofiltration, NF)又稱低壓反滲透或“疏松反滲透”(loose)，是一種介于反滲透和超濾之間的壓力驅(qū)動膜分離過程，納濾膜的孔徑范圍在幾個納米左右，能去除二價及多價離子和分子量大于200的各類物質(zhì)[22]。

陰離子交換色譜(anion-exchange chromatography, AEX)是根據(jù)混合物中不同分子所帶電荷性質(zhì)的差異進(jìn)行分離的一種色譜技術(shù), 根據(jù)該原理也可用于樣品中病毒的純化或清除[23]，其特點(diǎn)是操作簡單、條件溫和、重復(fù)性強(qiáng)。

2 不同消毒技術(shù)在疫病防控中的應(yīng)用

2.1 化學(xué)消毒法在在疫病防控中的應(yīng)用

2.1.1醛類1979年，Cunliffe等[24]發(fā)現(xiàn)，戊二醛能有效滅活暴露于22～26 ℃ 11 d的豬心臟組織中的ASFV。某醛制劑產(chǎn)品(12.74%戊二醛+ 4.84% 癸甲氯銨)于20 ℃作用30 min，稀釋比例為1∶50，可使含1%有機(jī)物的磷酸緩沖液(PBS)中的ASFV滴度降低4.6 log，其在高溫下的作用效果較好[25]?，F(xiàn)地常用500 mL 40%的福爾馬林與200 g高錳酸鉀混合對封閉畜舍進(jìn)行熏蒸消毒，時間為24 h，熏蒸后開窗通風(fēng)8 h[26]。

2.1.2鹵素類研究顯示2.3%的氯(次氯酸鹽)作用30 min能有效滅活A(yù)SFV[27]。豬場常用5%的次氯酸鈉溶液噴灑至地面、墻壁、通道、排污溝、用具和設(shè)備等，包括漏縫地板背面等物體表面徹底濕潤，2 h后再噴灑1次，4 h后用清水沖洗，自然干燥2～3 d[26]。

2.1.3氧化物及過氧化物類近期研究發(fā)現(xiàn)，5 mg·L-1臭氧水能有效殺滅ASFV[28]，其殺滅效果受到臭氧分子向液體中轉(zhuǎn)移總速率的限制[29-30]。衛(wèi)可消毒劑(VirkonS)[31]的有效成分是過硫酸氫鉀三鹽復(fù)合物，1%的衛(wèi)可作用10 min能完全滅活不銹鋼表面3.2 log10 TCID50·mL-1的ASFV，5%的衛(wèi)可作用10 min能完全滅活多孔混凝土中的ASFV[32]?，F(xiàn)地常將1% 過硫酸氫鉀溶液噴灑于環(huán)境物體表面，作用2 h后再噴灑1次，4 h后用清水沖洗，自然干燥2～3 d[26]。

2.1.4酚類1%鄰苯酚能有效滅活A(yù)SFV，最短滅活時間為1 h[33]。苯酚對有機(jī)物具有良好的滲透力，主要用于含有機(jī)物質(zhì)(如感染食物和排泄物等)的場所消毒。

2.1.5堿類2%的碳酸鈉腌制28 d能有效滅活生皮中的ASFV。2%氫氧化鈉24 h內(nèi)能殺死血液中ASFV[34]。豬場常采用3%的NaOH溶液對畜舍噴灑消毒1～2次，4 h后用清水沖洗，干燥3～5 d 后用5% NaOH+20%的石灰水進(jìn)行白化處理[26]。

2.1.6季銨鹽類近期研究發(fā)現(xiàn)，單雙鏈季銨鹽復(fù)配使用能大幅增加抗有機(jī)物能力，其主要用于環(huán)境表面ASFV的消毒[35]。

2.1.7碘制劑類消毒劑碘制劑抗有機(jī)物能力差，不適用于環(huán)境消毒，常用于手術(shù)部位、皮膚、粘膜消毒以及發(fā)生疫情時帶豬、帶禽消毒[12]。近期研究發(fā)現(xiàn)，三碘氧化合物能克服傳統(tǒng)碘制劑抗有機(jī)物能力差的缺陷[36]。

2.2 物理消毒法在疫病防控中的應(yīng)用

2.2.1高溫消毒ASFV高度耐低溫不耐高溫。Mazur等[37]根據(jù)非線性回歸模型估計半衰期值，預(yù)測ASFV在-20 ℃能存活353～713 d，4 ℃能存活35～136 d，23 ℃能存活9～17 d。實(shí)驗(yàn)室條件下，100 ℃持續(xù)1 min可徹底滅活106TCID50·mL-1病毒懸液，火焰溫度下可瞬間滅活A(yù)SFV?，F(xiàn)地由于高溫滅活效果會受到現(xiàn)地污物(糞便、泔水、血漿等)的影響。在絕對壓力為300 kPa(3 Bar)的情況下，應(yīng)將泔水保持在121 ℃至少10 min[35]。pH為8的條件下，將豬糞水按照100 L·h-1的速度通過53 ℃的泥漿，可有效滅活A(yù)SFV。在密閉容器中最低溫度為70 ℃時維持30 min以上可滅活肉中的ASFV[38]。對于豬肉為原料的血液制品的消毒，采用的噴霧干燥設(shè)備溫度應(yīng)不低于220 ℃，干燥后的物料要在60 ℃以上維持20 min以上才能確保ASFV完全滅活[38]。

2.2.2紫外線消毒紫外線(ultraviolet, UV)是實(shí)驗(yàn)室和現(xiàn)地室內(nèi)場所常采用的消毒方式。Risa等[39]發(fā)現(xiàn)，不同波長的UV照射能使受感染細(xì)胞內(nèi)甲型流感病毒(IAVs)的核酸總量減少，并抑制細(xì)胞內(nèi)mRNA(信使RNA)、vRNA(病毒RNA)和cRNA(互補(bǔ)RNA)的積累。UV滅活的ASFV刺激外周血單核細(xì)胞時能使T細(xì)胞系CD4+亞群和CD8+亞群同時增加[40]。900 J·m-2的UV照射劑量能使纖維蛋白原和凝血酶中的脂包膜病毒滴度下降至少4 log，且紫外照射前后纖維蛋白原和凝血酶的蛋白含量和結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生明顯變化[41]。近期有研究發(fā)現(xiàn)，254～257 nm的UV能使ASFV的核酸拷貝數(shù)隨照射時間的增長而減少[42]。此外，由于經(jīng)水傳播的腸道病毒對紫外線具有一定的抵抗力[43]，因此，針對病毒的滅活需要提供至少186 J·m-2的有效消毒劑量[44]。當(dāng)空氣濕度大于60%，應(yīng)適當(dāng)延長照射時間。

2.2.3γ射線消毒1983年，研究者采用20 kGy的γ射線滅活了ASF急性發(fā)病豬組織樣品中的ASFV,病毒的感染效價為104.6～107.8之間[45]。25 kGy鈷60-γ射線可有效滅活動物源性膜材中的病毒[46]。趙彥濤等[47]證實(shí)，γ射線輻照可使同種異體肌腱上的病毒滴度下降超過4 log，且不會影響肌腱的極限拉伸載荷和組織結(jié)構(gòu)。

2.3 生物消毒法

生物消毒劑對囊膜病毒(如ASFV)可能具有良好的殺滅作用。但通常具有消毒作用的天然活性物質(zhì)產(chǎn)量少，不能滿足大規(guī)模應(yīng)用，因此，美國科學(xué)家研發(fā)出以人工合成維生素作為生物活性物質(zhì)的消毒劑產(chǎn)品，已用于船舶壓艙水處理[48]。

2.4 環(huán)境生態(tài)修復(fù)法

研究人員對實(shí)施生態(tài)修復(fù)的試驗(yàn)水體進(jìn)行連續(xù)7個月的監(jiān)控，結(jié)果顯示，水體的各項(xiàng)理化指標(biāo)中總有機(jī)碳(TOC)、化學(xué)需氧量(COD)和總磷(TP)濃度均較使用修復(fù)劑之前大幅下降[48]。

2.5 其他新型病毒清除工藝

2.5.1低pH孵放法低pH孵放法對水皰性口炎病毒(VSV)和偽狂犬病毒(PRV)等脂包膜病毒滅活效果顯著。研究顯示，該法對VSV滅活效果≥4. 62 log TCID50·0. 1 mL-1，對PRV的滅活效果≥6.12 log TCID50·0.1 mL-1[49]。

2.5.2納濾膜技術(shù)傳統(tǒng)的水處理工藝中，跟超濾膜相比，納濾截留低分子量的能力更強(qiáng)，其可有效去除粒徑在納米級范圍的病毒[50]。2018年，Bao等[51]通過19 nm濾膜成功去除甘氨酸溶液中的豬圓環(huán)病毒(porcine circovirus，PCV)。

2.5.3陰離子交換層析陰離子交換色譜法(anion-exchange chromatography , AEX)是純化單克隆抗體藥物、蛋白質(zhì)及血液等的常用方法[52-53]。Sivanathan等[54]采用陰離子交換色譜與二乙基氨基乙基(DEAE)纖維素作為弱陰離子交換器清除了血液中的寄生蟲。該法也被用于某些包膜病毒的清除，例如，逆轉(zhuǎn)錄病毒(MuLV)和偽狂犬病病毒(PRV)[55]。

3 現(xiàn)階段消毒與檢測技術(shù)存在的問題

3.1 消毒效果不佳

消毒不徹底導(dǎo)致少量病毒殘留是豬場復(fù)養(yǎng)失敗、引發(fā)重大疫情和加大疫情傳播風(fēng)險的重要原因?，F(xiàn)地消毒劑使用不規(guī)范，部分豬場為圖便宜選擇不符合規(guī)定的劣質(zhì)消毒藥[56]；不明確消毒劑的適用范圍，盲目選擇消毒藥；為省事不按照規(guī)范嚴(yán)格控制消毒周期、消毒劑量和消毒時間；對于消毒藥的藥性不熟知[57]，保存不當(dāng)導(dǎo)致藥效減弱或喪失；消毒設(shè)施不完善[58]；消毒意識淡薄，沒有建立健全的消毒制度[59]等主觀原因是導(dǎo)致消毒不徹底的重要因素。

化學(xué)消毒劑的消毒效果受pH、被消毒物質(zhì)質(zhì)地、消毒劑濃度和作用時間以及病原微生物對外界環(huán)境抵抗力等因素的影響。近期研究發(fā)現(xiàn)，1% Virkon S 作用10 min能完全殺滅無孔表面和病毒懸液中的ASFV，不能完全殺滅經(jīng)5% CO2(pH<8.5)處理過的多孔混凝土中的ASFV[60]。2 000 ppm次氯酸鈉能滅活無孔表面的ASFV和FMDV，但無法滅活木制材料上的FMDV[61]。據(jù)報道，4%的碳酸鈉溶液能使FMDV降低4個log單位以上，但只能降低3 log單位的ASFV[62]。因此，pH小于8.5、多孔質(zhì)地、病毒囊膜結(jié)構(gòu)均會影響消毒劑的消毒效果。此外，由于南北地域差異，空氣濕度、環(huán)境溫度、氣候條件、氣壓等因素也會使ASFV的滅活效果存在差異。

3.2 當(dāng)前檢測技術(shù)的局限性

由于ASF的臨床特征與經(jīng)典豬瘟等類似，臨床上難以鑒別，需要經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測以確診。實(shí)驗(yàn)室檢測包括病原學(xué)和血清學(xué)檢測。病原學(xué)檢測是通過檢測ASFV的核酸、抗原或病毒進(jìn)行診斷。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和實(shí)時熒光定量PCR(qPCR)是國際貿(mào)易中OIE指定的ASFV檢測方法[63-64]。Tignon等[65]基于p72基因設(shè)計的PCR引物和探針能檢測到的陽性率比OIE推薦的PCR和qPCR高21%和26%。研究顯示，現(xiàn)地經(jīng)3% NaOH和5%次氯酸鈉消毒后，對部分環(huán)境樣品進(jìn)行熒光定量PCR檢測，結(jié)果為陽性。因此，PCR陽性僅表明樣品中存在靶核酸序列但并不能說明樣品含有感染性的病毒[66]。雙抗體夾心ELISA常與qPCR方法平行對現(xiàn)地樣品進(jìn)行檢測，敏感性、特異性較高，但仍無法確定目標(biāo)抗原是否具有活性[67]。Heuschele等[68]通過免疫熒光法(IFA)快捷地檢測ASFV，該方法對急性ASF的診斷具有很高的靈敏度，但是對亞急性和慢性ASF的檢測靈敏度較低，而且熒光素的非特異性反應(yīng)會造成假陽性結(jié)果。新型檢測技術(shù)，如微滴數(shù)字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)、等溫擴(kuò)增技術(shù)、熒光微球免疫層析試紙法等大幅提高了檢測的靈敏度和效率[69]，它們有望替代傳統(tǒng)的檢測方法,但同樣無法鑒別活病毒和滅活病毒。

針對活豬血液樣品，不需要確定其是否具有感染性，但針對曾經(jīng)爆發(fā)過ASF的現(xiàn)地環(huán)境樣品，通過常規(guī)檢測手段就無法確定其中是否存在活病毒?；贏SFV的EP402R基因編碼的外囊膜蛋白CD2v能夠誘導(dǎo)紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象[70]，研究者建立了血細(xì)胞吸附試驗(yàn)(hemadsorption, HAD)用以鑒別ASFV的感染性，但實(shí)驗(yàn)所需的豬肺泡巨噬細(xì)胞等價格昂貴，且ASFV細(xì)胞感染試驗(yàn)需要在Ⅲ級生物安全實(shí)驗(yàn)室(BSL-3)內(nèi)進(jìn)行，對于強(qiáng)陽性樣品通常在接種細(xì)胞的最初24 h內(nèi)可觀察到紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象,而對于不具有紅細(xì)胞吸附特性的ASFV則無法用該方法進(jìn)行檢測。建議將HAD作為參考試驗(yàn)用于確認(rèn)ELISA、PCR或FAT的陽性結(jié)果。因此，目前還沒有檢測技術(shù)能夠完全、準(zhǔn)確、快速地區(qū)分具有感染性的ASFV。

4 活病毒與滅活病毒鑒別檢測技術(shù)探討

非洲豬瘟感染性病毒的鑒別及消毒效果的評價是該病防控亟需攻克的重要難題，徹底清除病毒殘留是豬場復(fù)養(yǎng)的先決條件[71]，除了合理使用消毒劑外，感染性測定是必不可少的。針對現(xiàn)地樣品(除生豬血液樣品外)，檢測技術(shù)是檢驗(yàn)消毒效果的必要手段，然而目前的感染性測定方法，如細(xì)胞感染試驗(yàn)和紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)等，均具有一定的局限性，因此，鑒別檢測技術(shù)的建立對ASF的有效防控至關(guān)重要。

目前，已確定物理消毒對核酸分子結(jié)構(gòu)具有破壞作用，化學(xué)消毒劑則主要破壞病原微生物的包膜結(jié)構(gòu)，因此，根據(jù)不同消毒方式可采用相應(yīng)的檢測技術(shù)。針對ASFV活病毒和滅活病毒的鑒別，應(yīng)該在確定ASFV各種滅活方法的機(jī)理基礎(chǔ)上通過分析ASFV基因組結(jié)構(gòu)和序列特點(diǎn)，挖掘ASFV的代謝脆弱區(qū)進(jìn)行核酸檢測，以及從檢測包膜完整性的角度入手，建立一種快速、敏感、適用范圍廣且經(jīng)濟(jì)實(shí)用的檢測技術(shù)。還可以借助目前的新技術(shù)檢測方法如等溫擴(kuò)增技術(shù)、微滴數(shù)字PCR、熒光微球免疫層析等，提高檢測的簡便性和敏感性。這項(xiàng)技術(shù)的研發(fā)將對ASF的現(xiàn)地防控提供新技術(shù)支持，減少疫病傳播風(fēng)險，降低經(jīng)濟(jì)損失，同時，也能夠?yàn)槲磥砜赡艿腁SF弱毒疫苗的質(zhì)控提供檢測手段。

武漢病毒研究所最近采用光敏熒光染料疊氮溴化丙錠(PMA)結(jié)合qPCR用于檢測樣品中是否具有感染性的ASFV粒子[72]。其原理是利用PMA不能穿透病毒包膜結(jié)構(gòu)，但能非特異性修飾核酸分子，使其不能通過PCR或qPCR擴(kuò)增，可用于鑒別包膜結(jié)構(gòu)完整的ASFV。但其精確性和靈敏度還有待進(jìn)一步檢驗(yàn)?，F(xiàn)地檢測中建議針對紫外和生物消毒法等主要通過破壞核酸使病毒失活的消毒方式滅活的樣品，可以相應(yīng)采用核酸檢測技術(shù)(表1)，如PCR、定量PCR、多重PCR、套式PCR方法等；針對絡(luò)合碘、酚類、雙胍類等主要通過破壞病毒包膜結(jié)構(gòu)的消毒劑滅活后的樣品，則應(yīng)采用抗原檢測方法，如ELISA配合免疫熒光法；若是針對熱滅活、醛類、鹵素類、季銨化合物類消毒劑或新型病毒清除工藝滅活的樣品，以上檢測技術(shù)均可使用。非洲豬瘟對我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大打擊，我國豬肉供應(yīng)離不開散養(yǎng)戶，散養(yǎng)戶在養(yǎng)殖過程中選用合理的消毒劑，規(guī)避消毒劑的缺陷，采用相對應(yīng)的檢測技術(shù)是我國疫病防控的重要手段。

5 展望

ASF嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)，消毒和檢測是防控該病的重要手段。目前的研究顯示，福爾馬林、戊二醛、次氯酸鹽、過氧化物、臭氧水和苯酚均是ASFV的高效消毒劑。高溫、紫外和射線照射、生態(tài)修復(fù)劑、低pH敷放法和納濾等廣譜消毒方式對ASF也有殺滅作用?；瘜W(xué)消毒法主要通過破壞ASFV的蛋白質(zhì)包膜結(jié)構(gòu)使其失活，物理消毒法主要通過破壞其核酸結(jié)構(gòu)使其失活。針對化學(xué)消毒劑滅活的環(huán)境樣品，建議選擇抗原檢測方法，針對物理消毒法消毒的樣品建議采用核酸檢測手段。

了解不同消毒方式的優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍，規(guī)避消毒劑的缺陷，針對不同場所采用合適的消毒劑，針對不同質(zhì)地和不同病原微生物適當(dāng)調(diào)整滅活時間和消毒劑濃度。按規(guī)定合理使用消毒劑，并不斷完善檢測技術(shù)，根據(jù)消毒劑的滅活特點(diǎn)合理選擇檢測技術(shù)進(jìn)行消毒效果評價對疫病的有效防控至關(guān)重要。同時，活病毒與滅活病毒的快速鑒別也是亟待解決的重大難題。