氮及氮素形態(tài)對(duì)烤煙葉片葉綠素光合熒光參數(shù)的影響

黃 丹 楊富文 劉 琳 王 月 賀國(guó)強(qiáng) 王洪瑞 孫廣玉 敖 紅

（1東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，150040，黑龍江哈爾濱；2牡丹江煙草科學(xué)研究所，150076，黑龍江哈爾濱）

烤煙與晾曬煙、白肋煙、香料煙、雪茄煙和黃花煙均為我國(guó)煙草（Nicotiana tabacum L.）的主要類型，由于各地區(qū)的土壤栽培條件、制煙工藝及煙草實(shí)際生產(chǎn)情況等存在差異，導(dǎo)致我國(guó)南北地區(qū)栽培的煙草類型不同[1-2]。黑龍江省是我國(guó)重要的烤煙產(chǎn)區(qū)，近年來選育出了高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的烤煙新品種。龍江911是黑龍江省2000年通過審定的烤煙品種，是東北地區(qū)主要烤煙品種之一，具有煙葉質(zhì)量上乘、產(chǎn)量較高、抗病性強(qiáng)且較為耐旱的特點(diǎn)[3-4]。龍江0520是2017年黑龍江省煙草專賣局選育并通過全國(guó)農(nóng)業(yè)評(píng)審的烤煙品種，在長(zhǎng)勢(shì)以及產(chǎn)量等方面均有突出表現(xiàn)。煙草品種在不良環(huán)境因素條件下的適應(yīng)性、生長(zhǎng)速度與狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累及煙葉的品質(zhì)與產(chǎn)量等方面存在一定差異，因此選擇與推廣更適合東北地區(qū)種植的烤煙品種仍需進(jìn)一步探究。

氮素是植物生長(zhǎng)過程中必不可少的一種營(yíng)養(yǎng)元素，是組成蛋白質(zhì)、核酸和葉綠素等的基本元素，通過參與復(fù)雜的生理過程來調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育[5-6]。施氮會(huì)影響多種植物的光合能力[7-8]。李小龍[9]研究發(fā)現(xiàn)，不同氮素形態(tài)及配比對(duì)蔬菜葉片光合氣體交換參數(shù)有直接影響；葉義全等[10]發(fā)現(xiàn)，NH4+-N處理下杉木幼苗葉片凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）和蒸騰速率（Tr）明顯高于其他氮素形態(tài)處理；金微微等[11]在桑樹對(duì)不同氮素形態(tài)響應(yīng)的研究中發(fā)現(xiàn)，NO3--N處理下主要的光合氣體交換參數(shù)和葉綠素?zé)晒鈪?shù)高于NH4+-N處理。對(duì)于烤煙而言，氮素營(yíng)養(yǎng)的供應(yīng)尤為關(guān)鍵，其對(duì)烤煙的影響是多方面的。黃化剛等[12]研究發(fā)現(xiàn)，施用有機(jī)氮肥有利于烤煙碳氮代謝途徑關(guān)鍵基因的表達(dá)，從而促進(jìn)上部煙葉總糖和煙堿含量增加；李得瑞等[13]研究表明，隨著硝銨比的提高，煙草中硝酸還原酶和鉀含量等都呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)；另外改變氮素形態(tài)及其配比會(huì)直接影響烤煙葉片光合作用碳代謝的協(xié)調(diào)程度、礦質(zhì)元素的吸收和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累等，從而進(jìn)一步影響烤煙的生長(zhǎng)發(fā)育及產(chǎn)量品質(zhì)等方面[14-17]。盡管目前關(guān)于氮素對(duì)烤煙光合作用的影響有所研究，但從氣體交換參數(shù)與葉綠素?zé)晒馓匦赃@兩方面研究烤煙在不同氮素形態(tài)下的相關(guān)表現(xiàn)不多，特別是氮素形態(tài)對(duì)光合系統(tǒng)Ⅱ（PSⅡ）功能的影響未見報(bào)道。因此本研究以具有表征特性的光合氣體參數(shù)以及具有本質(zhì)特征的快速葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)曲線（OJIP曲線）來探究不同氮素形態(tài)對(duì)烤煙光合作用和PSⅡ中光能吸收、轉(zhuǎn)化、傳遞及分配的影響，以期為不同烤煙品種氮肥的合理施用提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與試驗(yàn)地點(diǎn)

供試烤煙品種龍江911（LJ911）和龍江0520（LJ0520）均由牡丹江煙草科學(xué)研究所提供。于2019年4月初在中國(guó)煙草總公司黑龍江省公司煙草科學(xué)研究所賓西試驗(yàn)場(chǎng)溫室內(nèi)進(jìn)行常規(guī)漂浮育苗[18]，幼苗長(zhǎng)至5葉1心期時(shí)，將其移栽至東北林業(yè)大學(xué)植物生理實(shí)驗(yàn)室。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與指標(biāo)測(cè)定

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)置4組處理（表1），分別為無氮Hoagland營(yíng)養(yǎng)液（對(duì)照，CK）、只含有硝態(tài)氮氮源（NO3--N）營(yíng)養(yǎng)液（T1）、只含有銨態(tài)氮氮源（NH4+-N）營(yíng)養(yǎng)液（T2）和硝態(tài)氮與銨態(tài)氮氮源比例為1∶1（NO3--N∶NH4+-N=1∶1）營(yíng)養(yǎng)液（T3）。挑選長(zhǎng)勢(shì)一致的完整幼苗移栽，每缽定植1株，營(yíng)養(yǎng)缽直徑12cm，高14cm，將營(yíng)養(yǎng)缽放入容積為10L的營(yíng)養(yǎng)盒中，向營(yíng)養(yǎng)盒中分別加入2L各處理的營(yíng)養(yǎng)液，營(yíng)養(yǎng)液每隔3d更換1次。每個(gè)處理均設(shè)3個(gè)重復(fù)，分別于培養(yǎng)后第15天（5月25日）和第30天（6月9日）選取同一葉片進(jìn)行光合氣體參數(shù)和葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測(cè)定。

表1 不同處理硝態(tài)氮與銨態(tài)氮營(yíng)養(yǎng)液主要成分比例及摩爾數(shù)Table 1 Principal component ratio and number of moles of nitrate nitrogen and ammonium nitrogen nutrient solution under different treatments mmol/L

1.2.2 氣體交換參數(shù)的測(cè)定 選擇長(zhǎng)勢(shì)基本一致的煙草樣品，利用Li-6400光合儀測(cè)定氣體交換參數(shù)。選擇天氣晴朗的上午進(jìn)行測(cè)定，待測(cè)煙草植株在自然光條件下先誘導(dǎo)1.0～1.5h。光合測(cè)定系統(tǒng)的光強(qiáng)設(shè)定為1 000μmol/（m2·s）、流量500μmol/s、溫度20℃，并利用緩沖桶裝置來維持CO2濃度的穩(wěn)定性。選擇從頂部向下數(shù)第3片完全展開的功能葉片進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定指標(biāo)包括葉片的Pn、Tr、胞間CO2濃度（Ci）和Gs等。

1.2.3 熒光動(dòng)力學(xué)曲線的測(cè)定 于氣體交換參數(shù)測(cè)定的同一時(shí)期利用便攜式脈沖調(diào)制熒光儀M-PEA測(cè)定樣品同一葉片的葉綠素?zé)晒鈪?shù)。選擇待測(cè)葉片第3與第4葉脈之間（以葉基部數(shù)為起始），并與主葉脈距離約2cm處的位置作為測(cè)定部位，使用熒光儀配備的專用暗適應(yīng)葉夾進(jìn)行30min的暗適應(yīng)。測(cè)定得到的數(shù)據(jù)包括初始熒光（Fo）、最大熒光（Fm）、PSⅡ的最大光化學(xué)效率（Fv/Fm）及光合性能指數(shù)（PIabs）。

OJIP曲線的測(cè)定需利用脈沖紅光進(jìn)行誘導(dǎo)，其光強(qiáng)為3 000μmol/（m2·s）。相對(duì)熒光強(qiáng)度（Fv）的起始記錄時(shí)間從10μs開始，至結(jié)束共記錄1s。記錄過程中時(shí)間軸為0.02、2、30以及1 000ms，在曲線中對(duì)應(yīng)的點(diǎn)分別稱為O、J、I和P，其對(duì)應(yīng)的熒光強(qiáng)度分別用FO、FJ、FI和FP表示，取記錄中10次重復(fù)的平均值繪制OJIP曲線。時(shí)間軸中0.15與0.30ms在曲線上對(duì)應(yīng)的特征點(diǎn)分別為L(zhǎng)點(diǎn)與K點(diǎn)，其代表的相對(duì)熒光強(qiáng)度分別用FL和FK表示。進(jìn)一步研究2個(gè)烤煙品種在不同處理OJIP曲線的特異性，需進(jìn)行O-P、O-J和O-K的標(biāo)準(zhǔn)化。設(shè)O點(diǎn)對(duì)應(yīng)的相對(duì)熒光強(qiáng)度（FO）為0，將P、J、K點(diǎn)對(duì)應(yīng)的相對(duì)熒光強(qiáng)度定義為1，F(xiàn)t為不同時(shí)間點(diǎn)的相對(duì)熒光強(qiáng)度，可以得到VO-P=（Ft-FO）/（FP-FO）、VO-J=（Ft-FO）/（FJ-FO）、（Ft-FO）、VO-K=（Ft-FO）/（FK-FO）。在標(biāo)準(zhǔn)化曲線中特征點(diǎn)L、K、J和I對(duì)應(yīng)的相對(duì)可變熒光強(qiáng)度分別用VL、VK、VJ和VI表示。將2個(gè)品種不同處理的VO-P、VO-J、VO-K與各自的CK作差值，分別以ΔVO-P、ΔVO-J、ΔVO-K表示。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用Excel 2013、SPSS 19.0及SigmaPlot 12.5進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，采用Duncan法進(jìn)行多重比較，顯著水平為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同氮素形態(tài)對(duì)烤煙葉片光合氣體交換參數(shù)的影響

2.1.1 對(duì)Pn和Ci的影響 由表2可見，不同施氮處理的Pn均大于CK，且差異顯著，而不同形態(tài)的氮素處理間也存在顯著差異（P＜0.05）。LJ911測(cè)定的Pn均為T1處理最高，2次的測(cè)定值分別為9.61和12.15μmol/（m2·s），與CK相比分別提高46.62%和83.21%。LJ0520在T3處理中Pn最大，分別為11.36和11.82μmol/（m2·s），較CK分別高出78.17%和96.16%。對(duì)2次的測(cè)定結(jié)果比較可以看出，施氮組第2次測(cè)定時(shí)Pn的提高幅度要大于第1次。

表2 不同氮素形態(tài)對(duì)兩種烤煙葉片光合氣體參數(shù)的影響Table 2 Effects of different nitrogen forms on photosynthetic gas parameters of leaves of two flue-cured tobacco varieties

不同施氮處理Ci在品種間及在2次測(cè)定中表現(xiàn)出的特點(diǎn)不同，處理15d時(shí)LJ911 T2處理顯著低于T1處理；LJ0520在T2處理下Ci高于其他處理組。處理30d時(shí)LJ911在T2處理下較CK高15.47%；LJ0520在T2和T3處理下分別較CK低23.02%和11.96%。

2.1.2 對(duì)Tr和Gs的影響 在不同處理中2個(gè)品種Tr及Gs表現(xiàn)出的特征基本上與Pn一致。第1次測(cè)定中，LJ911在T1處理下Tr和Gs均大于其他處理，分別較CK提高45.44%和67.74%；LJ0520在T3處理中Tr和Gs均大于其他處理，分別較CK提高86.97%和91.67%。第2次測(cè)定中，LJ911的Tr在T3處理下較大，Gs在T1處理下最大，較CK高81.56%；LJ0520在T3處理中Tr和Gs均大于其他處理，分別較CK提高95.32%和96.43%（表2）。

2.2 不同氮素形態(tài)對(duì)烤煙葉片熒光動(dòng)力學(xué)曲線的影響

2.2.1 不同氮素形態(tài)對(duì)烤煙葉片OJIP曲線的影響LJ911和LJ0520在不同氮素形態(tài)下葉片OJIP曲線表現(xiàn)出不同特點(diǎn)，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，2個(gè)烤煙品種在各處理中葉片OJIP曲線也在不斷變化。

從圖1可以看出，處理15d時(shí)，2個(gè)烤煙品種OJIP曲線的變化趨勢(shì)與規(guī)律大致相同，均表現(xiàn)為在T1處理中的熒光強(qiáng)度顯著高于CK，但品種間差異不顯著；LJ0520在T2處理中的熒光強(qiáng)度顯著高于CK，而LJ911在T2處理中的熒光強(qiáng)度低于CK，LJ0520的FP比LJ911高93.55%，且差異顯著（P＜0.05）；LJ911在T3處理中的熒光強(qiáng)度顯著高于CK，而LJ0520在T3處理中的熒光強(qiáng)度低于CK，LJ911的FP比LJ0520高93.31%，且差異顯著（P＜0.05）。

圖1 不同氮素形態(tài)對(duì)2個(gè)烤煙品種葉片OJIP曲線的影響Fig.1 Effects of different nitrogen forms on OJIP curves of leaves of two flue-cured tobacco varieties

與處理15d時(shí)相比，處理30d時(shí)2個(gè)品種不同氮素處理下熒光強(qiáng)度總體表現(xiàn)為下降趨勢(shì)。比較FP的測(cè)定結(jié)果，LJ911在T1及T3處理下的下降幅度較大，分別下降了48.80%和52.06%，LJ0520在T2處理下的下降幅度較大，為49.35%。

2.2.2 不同氮素形態(tài)對(duì)烤煙葉片標(biāo)準(zhǔn)化J點(diǎn)和I點(diǎn)相對(duì)可變熒光強(qiáng)度的影響 將OJIP曲線進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理（圖2），處理15d時(shí)施氮處理的2個(gè)烤煙品種I點(diǎn)總體呈下降趨勢(shì)，且T1處理LJ911的VI比CK降低9.89%，T1及T2處理LJ0520的VI比CK分別降低7.19%和4.61%，差異均顯著（P＜0.05）。

圖2 不同氮素形態(tài)對(duì)2個(gè)烤煙品種葉片標(biāo)準(zhǔn)化J點(diǎn)和I點(diǎn)相對(duì)可變熒光強(qiáng)度的影響Fig.2 Effects of different nitrogen forms on the relative variable fluorescence intensity of standardized J and I points in two flue-cured tobacco leaves

處理30d時(shí)，LJ911施氮處理組VI均低于CK，且差異顯著（P＜0.05）；2個(gè)烤煙品種的J點(diǎn)總體亦呈下降趨勢(shì)，且T1及T3處理LJ911的VJ分別比CK低29.65%和36.76%，差異均顯著（P＜0.05），T1、T2及T3處理LJ0520的VJ分別比CK低29.74%、13.53%和37.92%，差異均顯著（P＜0.05）。

綜合分析測(cè)定結(jié)果可以看出，在2次測(cè)定過程中2個(gè)品種在不同處理下相對(duì)可變熒光強(qiáng)度的變化趨勢(shì)基本一致，而在同一氮素處理下2個(gè)品種間VJ和VI均未表現(xiàn)出顯著的差異。

2.2.3 不同氮素形態(tài)對(duì)烤煙葉片PSⅡ光化學(xué)活性的影響 從圖3可以看出，2個(gè)烤煙品種在不同氮素形態(tài)下葉片的Fv/Fm和PIabs均具有不同特點(diǎn)，且隨培養(yǎng)時(shí)間的變化而改變。

圖3 不同氮素形態(tài)對(duì)2個(gè)烤煙品種葉片PSⅡ光化學(xué)活性的影響Fig.3 The influence of different nitrogen forms on PSⅡ photochemical activities of leaves of two flue-cured tobacco varieties

處理15d時(shí)，F(xiàn)v/Fm表現(xiàn)為L(zhǎng)J911除T2處理較CK略有降低外，其余施氮處理與CK相比差異均不顯著。PIabs表現(xiàn)為L(zhǎng)J911在T1及T3處理中較CK分別增加了87.80%和76.42%，在T2處理中較CK降低了57.67%，差異具有顯著性（P＜0.05）。LJ0520施氮處理與CK相比差異均不顯著（P＞0.05）。

培養(yǎng)30d時(shí)，LJ911在T3處理下的Fv/Fm較CK增加了9.27%，LJ0520不同氮素處理組的Fv/Fm較CK均有增加，且差異顯著（P＜0.05）。T1及T3處理使2個(gè)烤煙品種的PIabs較CK大幅度提高，差異達(dá)到極顯著水平（P＜0.01），而T2處理使LJ911的PIabs較CK降低，LJ0520的PIabs較CK升高，差異顯著（P＜0.05）?？傮w來看，T1及T3處理下PIabs的增加幅度表現(xiàn)為L(zhǎng)J911＞LJ0520；T2處理下PIabs的增加幅度表現(xiàn)為L(zhǎng)J0520＞LJ911。

2.2.4 不同氮素形態(tài)對(duì)烤煙葉片L點(diǎn)和K點(diǎn)相對(duì)可變熒光強(qiáng)度的影響 從O-J和O-K的標(biāo)準(zhǔn)化曲線（圖4）中可以發(fā)現(xiàn)，不同氮素條件對(duì)2個(gè)品種的VO-J和VO-K均有一定影響。分別將各標(biāo)準(zhǔn)曲線與CK作差得到ΔVO-J和ΔVO-K，進(jìn)一步明確2個(gè)品種在不同處理中表現(xiàn)出的差異，可以發(fā)現(xiàn)T2處理下LJ911的VO-J和VO-K顯著高于CK，并且處理30d時(shí)除T2處理下的LJ911外，2個(gè)品種在其他氮素條件下的VO-J和VO-K均低于CK。定量分析中，T2處理下LJ911 2次測(cè)定的VL和VK的升高趨勢(shì)較為明顯，而其他處理組的VL和VK均表現(xiàn)為處理15d時(shí)與CK無顯著性差異，處理30d時(shí)顯著低于CK（P＜0.05）。對(duì)處理30d時(shí)進(jìn)行定量分析，T1處理下LJ911和LJ0520的VL分別較CK降低64.13%和50.92%，T3處理VL分別降低65.90%和81.68%，T1處理VK分別降低64.48%和71.02%，T3處理VK分別降低64.77%和78.34%。

圖4 不同氮素形態(tài)對(duì)2個(gè)烤煙品種葉片K點(diǎn)和L點(diǎn)相對(duì)可變熒光強(qiáng)度的影響Fig.4 Effects of different nitrogen forms on the relative variable fluorescence intensity at point K and point L of leaves of two flue-cured tobacco

2.3 氣體交換參數(shù)及葉綠素?zé)晒鈪?shù)的相關(guān)性分析

從表3可以看出，氣體交換參數(shù)Pn、Gs和Tr之間呈極顯著正相關(guān)；葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fo和Fm之間呈極顯著正相關(guān)，PIabs和Fv/Fm之間呈顯著正相關(guān)。兩種參數(shù)間，Ci與Fv/Fm之間存在極顯著負(fù)相關(guān)，即Ci越高其相應(yīng)PSⅡ的Fv/Fm越低；PIabs與Ci和Tr之間存在顯著負(fù)相關(guān)，說明影響光合性能指數(shù)的因素較為復(fù)雜，需要從多個(gè)方面進(jìn)行分析與考慮。

表3 氣體交換參數(shù)及葉綠素?zé)晒鈪?shù)的相關(guān)性分析結(jié)果Table 3 Correlation analysis result of gas exchange parameters and chlorophyll fluorescence parameters

3 討論

吳成林等[19]研究發(fā)現(xiàn)，白肋煙的煙葉質(zhì)量與Pn具有一定的相關(guān)性，說明烤煙的光合能力與其品質(zhì)具有緊密的聯(lián)系。提高烤煙的光合能力，對(duì)提高烤煙的品質(zhì)有著重要的實(shí)際意義。

植物的光合作用能力強(qiáng)弱主要從Pn、Tr、Gs和Ci等方面進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)[20]。通常Pn、Tr和Gs三者呈顯著正相關(guān)，本研究的試驗(yàn)結(jié)果支持這一結(jié)論。光合作用不僅與自身因素有著密切的聯(lián)系，同時(shí)也受環(huán)境因素的影響，如光照、水分和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)等[21]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，CK中光合缺氮效應(yīng)表現(xiàn)得愈發(fā)明顯，這與王曉琳[22]的研究結(jié)果一致，進(jìn)一步的研究表明氮素形態(tài)同樣也影響光合作用。對(duì)于LJ911烤煙品種而言，首次測(cè)定時(shí)其在NO3--N處理中光合能力最強(qiáng)，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)其在NH4+-N和硝銨混合氮處理中的Pn等參數(shù)也逐漸增大，這表明一方面氮素對(duì)LJ911的光合有促進(jìn)作用，另一方面其在氮素形態(tài)上偏向于對(duì)NO3--N的喜好，同時(shí)具有較強(qiáng)的適應(yīng)力。對(duì)于LJ0520品種而言，2次測(cè)定中均表現(xiàn)為在硝銨混合氮處理的光合能力最強(qiáng)，且隨著時(shí)間的增加這一優(yōu)勢(shì)不斷增強(qiáng)，說明在氮素形態(tài)上其更偏向于對(duì)硝銨混合氮的喜好。

葉綠素?zé)晒鈪?shù)是反映植物葉片光化學(xué)活性的重要指標(biāo)，可用于具體分析光合機(jī)構(gòu)受外界因素影響的部位，從而更細(xì)致地表現(xiàn)植物對(duì)光能的吸收、轉(zhuǎn)化、分配與利用等過程[23]。Fm（FP）表示最大熒光強(qiáng)度，在OJIP曲線中與P點(diǎn)相對(duì)應(yīng)，NO3--N及硝銨混合氮處理下LJ911的Fm處于較高水平，而LJ0520的Fm在第2次測(cè)定時(shí)才表現(xiàn)出在硝銨混合氮處理下較高，這可能與2個(gè)烤煙品種對(duì)不同氮素形態(tài)的響應(yīng)時(shí)間不同有關(guān)。比較2次測(cè)定結(jié)果，第2次測(cè)定時(shí)FO、FJ、FI和FP低，而光合速率高，兩者的變化趨勢(shì)相反，推測(cè)這種現(xiàn)象的出現(xiàn)是由于較強(qiáng)的光合作用中光化學(xué)反應(yīng)消耗了更多的能量，從而使以熒光形式釋放出的能量減少造成的[24-25]。

Fv/Fm和PIabs分別為PSⅡ的光化學(xué)效率及光合性能指數(shù)，它們反映植物受脅迫的情況[26]。不同處理對(duì)Fv/Fm的影響在處理15d時(shí)并不顯著，但在處理30d時(shí)表現(xiàn)為NO3--N、硝銨混合氮處理高于CK、NH4+-N處理，說明長(zhǎng)時(shí)間缺氮影響了烤煙幼苗PSⅡ的光化學(xué)效率，而NH4+-N不利于烤煙光化學(xué)效率的提高。處理30d時(shí)NO3--N和硝銨混合氮處理的PIabs顯著高于CK和NH4+-N處理，且LJ0520在硝銨混合氮處理下PIabs為最高，進(jìn)一步說明LJ0520更偏好于硝銨氮配比為1∶1的氮源條件，此時(shí)其光合性能指數(shù)更高[27]。綜合來看，NO3--N和硝銨混合氮提高烤煙光合性能指數(shù)及PSⅡ的光化學(xué)效率的作用更加明顯，可以使PSⅡ表現(xiàn)出更好的光化學(xué)活性。

將OJIP曲線進(jìn)行O-P標(biāo)準(zhǔn)化，得到2個(gè)烤煙品種在各個(gè)處理中的VJ和VI，其中VJ代表的意義是J點(diǎn)具有關(guān)閉反應(yīng)中心的數(shù)量，也可以用Q-A的積累量來表示。如果在電子傳遞過程中，去鎂葉綠素（Pheo）將電子傳遞給QA生成QA-后，接下來電子由QA-向QB傳遞這一過程受到抑制，則表現(xiàn)出VJ增加[28]。從2次測(cè)定的結(jié)果可以看出，NO3--N和硝銨混合氮使VJ下降，而NH4+-N處理與CK間差異不顯著，說明NO3--N和硝銨混合氮可以促進(jìn)電子從QA-向QB傳遞的過程，而NH4+-N的作用不明顯。

將OJIP曲線進(jìn)行O-J和O-K標(biāo)準(zhǔn)化，得到2個(gè)烤煙品種在各個(gè)處理中的VK和VL，它們能夠表現(xiàn)植物葉片放氧復(fù)合體OEC活性和葉片類囊體膜的解離狀態(tài)。K點(diǎn)越高說明電子傳遞從供體側(cè)進(jìn)入反應(yīng)中心和離開反應(yīng)中心到受體側(cè)這一過程越不平衡[29]。處理15d時(shí)施氮處理組的VK和VL與CK相比無顯著性差異，說明缺氮在短時(shí)間內(nèi)未對(duì)放氧復(fù)合體OEC和類囊體膜產(chǎn)生顯著影響；處理30d時(shí)CK組VK和VL顯著升高，同時(shí)NO3--N和硝銨混合氮VK和VL顯著下降，說明隨著栽培時(shí)間的延長(zhǎng)，缺氮使放氧復(fù)合體OEC和類囊體膜受到損傷，而NO3--N和硝銨混合氮可以提高OEC的活性和維持類囊體膜的穩(wěn)定性。相比于上述2種氮素形態(tài)，NH4+-N的作用并不明顯，對(duì)于LJ911有時(shí)甚至加劇了OEC和類囊體膜的損傷。

葉片的氣體交換參數(shù)以及葉綠素?zé)晒鈪?shù)之間既相互獨(dú)立又存在一定的關(guān)系。相關(guān)性分析可以通過函數(shù)關(guān)系進(jìn)一步明確二者的關(guān)系，可以發(fā)現(xiàn)烤煙葉片光化學(xué)活性更容易受到Ci的負(fù)面影響，即隨著Ci的上升，葉片光化學(xué)活性可能會(huì)隨之降低，這不利于葉片對(duì)光能的吸收、轉(zhuǎn)化與利用。

4 結(jié)論

從光合氣體交換參數(shù)和葉綠素?zé)晒鈪?shù)綜合來看，氮素的形態(tài)對(duì)其能夠產(chǎn)生一定的影響，進(jìn)而可以在提高烤煙光合能力方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。通過對(duì)3種氮素條件的對(duì)比，發(fā)現(xiàn)NO3--N及NO3--N∶NH4+-N=1∶1更有利于烤煙進(jìn)行高效的光合作用。品種LJ0520更偏愛硝銨氮配比為1∶1的氮素形態(tài)；品種LJ911更偏愛硝態(tài)氮氮源，同時(shí)在其他氮素形態(tài)下其光合作用也表現(xiàn)出較強(qiáng)的適應(yīng)力，但在長(zhǎng)期施用銨態(tài)氮肥時(shí)，可能會(huì)降低其葉片放氧復(fù)合體的工作效率。據(jù)此，根據(jù)黑龍江地區(qū)特定的氣候條件及土壤條件，在LJ911及LJ0520種植過程中應(yīng)合理施用不同種類的氮肥，盡可能促進(jìn)其光合性能的提高，提高黑龍江煙區(qū)的烤煙產(chǎn)量及品質(zhì)。