3種保護劑對60Co-γ射線輻射梔子的保護效應

劉 亮 王 丹 王 誠 陳 紅 胡國宇 黎 青

(1西南科技大學生命科學與工程學院，四川 綿陽 621010；2 四川省農業(yè)科學院生物技術核技術研究所，四川 成都 610011)

梔子(Gardenia jasminoidesEllis)，又名黃梔子、山梔，茜草科(Rubiaceae)梔子屬(Gardenia)常綠灌木，枝葉繁茂，葉色常青，花朵潔白芳香，是城市中廣泛運用的園林觀賞植物之一，主要分布于全球熱帶和亞熱帶地區(qū)，尤其在我國長江以南[1]。目前對于梔子的研究主要集中在藥理作用[2-5]、栽培生長[6-8]、工藝價值[9-10]等方面，而關于觀賞性品種的培育較少。

選用適宜的輻射劑量是提高誘變效率的關鍵。一般認為輻射種子或枝條的最佳劑量應該選擇在臨界劑量附近[11]。但高劑量輻射會破壞生長啟動子并誘發(fā)生長抑制劑以及各種染色體畸變，導致植株存活率降低，后期育種可供選擇的植物量較少，限制了突變體的選擇與鑒定[12]。因此，需要篩選適宜的輻射保護劑，對輻射誘變過程的植株進行保護，以期提高變異植株成活率，獲得更多優(yōu)良變異。有研究發(fā)現(xiàn)氯化鈉(NaCl)[13]、半胱氨酸(cysteine，Cys)[14-15]、維生素C(vitamin C，Vc)[16]具有一定的輻射保護作用。但植物輻射誘變育種中運用保護劑的研究相較于動物仍然較少。本研究運用3 種保護劑浸泡60Co-γ 射線輻射后的梔子插條，分析梔子插條的輻射損傷效應及3 種保護劑的保護效應，以期為梔子的輻射誘變育種及保護劑應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

2019年5月13日于西南科技大學選取桅子觀賞型品種白蟾(G. jasminoidesvar.fortuniana)長勢優(yōu)良的樹上半木質化、無病蟲害的1年生枝條，剪成10 ～15 cm，2～3 片余葉的插條。每輻射劑量840 根插條，共4 200 根，每20 根一捆，綁好用濕毛巾保濕。

NaCl、Vc 購自成都市科隆化學品有限公司；Cys 購自上海阿拉丁生化科技股份有限公司，均為分析純。

1.2 輻射及保護劑處理

60Co-γ 射線輻射源由四川省農業(yè)科學院生物技術核技術研究所提供。輻射劑量分別為0(CK)、5、10、20、40 Gy，劑量率為1.42 Gy·min-1。將完成輻射后的插條按照每個輻射劑量下設置不作任何浸泡處理(CK1)和泡水處理(CK2)兩個對照組，再分別設置3 種保護劑處理:NaCl(2.00、3.00、4.00、5.00 g·L-1)，Cys(0.12、0.18、0.24、0.30 g·L-1)，Vc(0.05、0.06、0.07、0.08 g·L-1)，分組進行保護劑浸泡，遮光密封浸泡36 h。每組60 根插條，3 個重復。

1.3 扦插及生長管理

使用吲丁誘抗素(江西新瑞豐生化股份有限公司生產)浸泡輻射處理后的插條下端3 cm 處30 s。然后按裂區(qū)試驗設計區(qū)組扦插。場地為西南科技大學溫室大棚，以50 孔穴盆，規(guī)格54 cm×28 cm×9 cm 為扦插容器，扦插基質為蛭石∶珍珠巖＝1 ∶1。澆透水后進行扦插。使用75%遮陰網，控制棚內溫濕度為梔子插條適宜溫濕度。2019年5月15日扦插，7月2日統(tǒng)計插條生根情況及存活率后進行移栽。將每10 株生根插條移栽至40 cm×15 cm×18 cm 種植盆，栽培基質為有機基質∶蛭石∶珍珠巖＝1 ∶1 ∶1酸性土壤，并進行生長期管理。12月20日觀察統(tǒng)計植株分枝數(shù)、葉片數(shù)、節(jié)間長度、葉長葉寬等生長形態(tài)指標。

1.4 生長發(fā)育指標測定

插條大量生根后，挖出統(tǒng)計生根插條數(shù)、存活插條數(shù)及根長、根數(shù)，計算生根率和存活率。存活插條數(shù)為截止移栽時生根插條數(shù)及未生根但未失綠死亡插條數(shù)的總和。將生根插條進行移栽，每兩周觀察統(tǒng)計移栽后插條的成活情況。11月20日統(tǒng)計最終成活植株數(shù)，計算成株率。成活后一個月進行植株節(jié)間長度、分枝數(shù)、葉片數(shù)、葉長葉寬等形態(tài)指標統(tǒng)計。植株生長過程中，觀察統(tǒng)計各處理組相比對照組葉片形態(tài)有所區(qū)別的植株數(shù)，計算葉片形態(tài)變異率。

1.5 數(shù)據分析

采用SPSS 25.0 對數(shù)據進行統(tǒng)計分析，采用Origin 9.0、Office 2003 軟件作圖。數(shù)據均為3 次及以上重復的平均值±標準差。

2 結果與分析

2.1 不同劑量60Co-γ 射線輻射梔子插條的損傷效應

2.1.1 輻射處理對梔子插條生根率、存活率及成株率的影響 由表1 可知，經4 種不同輻射劑量的60Co-γ射線輻射后，梔子插條的生根率、存活率及成株率變化明顯。其中生根率及成株率除5 Gy 劑量組略高外，其余均低于CK，隨著輻射劑量的增加逐漸降低；20 Gy輻射劑量下，生根率為CK 的43.66%，顯著低于0 ～10 Gy；40 Gy 輻射劑量下生根率最低，僅為CK 的1.97%。20 Gy 輻射劑量下，成株率下降為CK 的37.94%；40 Gy 輻射劑量下，成株率下降為僅CK 的1.97%。經不同劑量輻射后的梔子插條存活率總體呈下降趨勢；20和40 Gy 輻射劑量下梔子插條的存活率顯著低于CK，分別比CK 下降了14.17 和22.75 個百分點。

通過對輻射后插條的相對生根率(y1)、相對存活率(y2)及相對成株率(y3)與輻射劑量(x)的相關性進行回歸分析，得到標準曲線方程分別為y1＝-2.709 4x＋107.49，y2＝-0.619 1x＋100.55，y3＝-2.682 7x＋104.46，相關系數(shù)分別為-0.957 8、-0.962 7、-0.953 1。計算得梔子插條的半生根劑量(half-rooting dose，RD50)為21.22 Gy，半致死劑量(half-lethal dose，LD50)為81.65 Gy，半成株劑量(half-planting dose，PD50)為20.30 Gy。

2.1.2 輻射處理對梔子插條形態(tài)指標的影響 由表2 可知，隨著輻射劑量的增加，插條各形態(tài)指標總體呈下降趨勢。5 Gy 輻射劑量下單根插條生根數(shù)、葉片數(shù)、葉長、葉寬，以及10 Gy 輻射劑量下節(jié)間長度、葉長、葉寬均高于CK，但不顯著，說明5 ～10 Gy 輻射劑量對插條生長有一定的促進作用。除了分枝數(shù)和葉寬，梔子單根插條的生根數(shù)及根長、節(jié)間長度、葉片數(shù)和葉長均呈現(xiàn)相同的變化規(guī)律，即5 ～10 Gy 輻射劑量處理組與CK 無顯著差異，20 Gy 及以上輻射劑量組插條各形態(tài)指標均明顯低于0 ～10 Gy 輻射處理組。而經輻射處理后插條分枝數(shù)均明顯低于CK，其中40 Gy輻射劑量下分枝數(shù)顯著低于5～20 Gy 輻射處理組，5～20 Gy 輻射處理間無顯著差異。梔子葉片寬度在5 ～20 Gy 輻照劑量下與CK 無顯著差異，20 Gy 輻射下葉寬較5～10 Gy 顯著降低，40 Gy 輻射處理下，顯著低于其他處理組。由此可知，輻射劑量增大，對梔子插條的生根和生長抑制作用增大，對插條損傷效應增大。

表1 不同輻射劑量對梔子插條生根率、存活率、成株率的影響Table 1 Effects of 60Co-γ ray with different doses on rooting rate，survival rate and planting rate of gardenia cuttings /%

表2 不同輻射劑量對梔子插條形態(tài)指標的影響Table 2 Effects of 60Co-γ ray with different doses on morphological indexes of gardenia cuttings

2.2 3 種保護劑對60Co-γ 射線輻射后梔子插條的保護效應

2.2.1 保護劑對輻射后梔子插條生根率及存活率的影響 采用不同濃度NaCl、Cys、Vc 浸泡輻射后的梔子插條，并統(tǒng)計其生根率和存活率(表3)，0 ～10 Gy 輻射劑量處理下，3 種保護劑對梔子插條生根率影響不明顯。20 Gy 輻射劑量下，3.00 g·L-1NaCl 處理的桅子插條生根率比CK2明顯提高了23.90 個百分點。而經0.12 g·L-1Cys 處理的梔子插條生根率比CK2顯著降低了36.82 個百分點，說明20 Gy 輻射劑量下，0.12 g·L-1Cys 處理增加了對梔子插條的損傷。不同濃度Vc 處理間插條生根率與CK2無顯著差異。40 Gy 輻射劑量下，0.12 g·L-1Cys 和0.08 g·L-1Vc 處理顯著提高了插條生根率，相比CK2分別提高了16.99 和15.76 個百分點。由此可知，保護劑對高劑量輻射下的梔子插條生根情況具有一定的保護作用，而對低劑量輻射的插條保護作用不明顯。

對經保護劑處理后的梔子插條存活率進行分析發(fā)現(xiàn)，3 種保護劑不同濃度處理對梔子插條存活率保護作用不顯著。而Cys 不同濃度處理對除10 Gy 輻射劑量外的其他輻射劑量處理組梔子插條存活率有一定降低作用，死亡插條主要表現(xiàn)為表皮腐爛。0 Gy 輻射劑量下，0. 30 g·L-1Cys 處理顯著降低了插條存活率。5 Gy 輻射劑量下，0. 18 ～0. 30 g·L-1Cys 處理顯著降低了插條存活率。20 Gy 輻射劑量下，0. 12 g·L-1Cys 處理后的插條存活率顯著降低。40 Gy 輻射劑量下，0. 18 和0. 30 g·L-1Cys 處理組存活率顯著降低，表明Cys 具有一定的毒副作用[17]，在不同的輻射劑量下，不同濃度Cys可能產生毒副作用也可能產生保護作用。

2.2.2 保護劑對輻射后梔子插條根長根數(shù)的影響 由圖1 可知，3.00 g·L-1NaCl 處理對5 Gy 劑量輻射后梔子插條的根長具有顯著的抑制作用，但對20 Gy 劑量輻射處理具有顯著的促進作用。20 Gy 劑量輻射處理下，3.00 和4.00 g·L-1NaCl 處理組根長分別是對照的1.87 和1.66 倍。不同濃度Cys 對各輻射劑量下梔子插條根長影響不顯著。0.05～0.07 g·L-1Vc 處理對0 Gy 輻射劑量下梔子插條根長具有明顯提高；且40 Gy 輻射劑量時，0.06 和0.08 g·L-1Vc 處理較對照顯著提高了根長，分別為對照的3.78 和4.74 倍。

表3 保護劑對輻射后梔子插條生根率及存活率的影響Table 3 Effects of protective agents on rooting rate and survival rate of gardenia cuttings after radiation treatment /%

由圖2 可知，NaCl 對高劑量輻射下的插條生根數(shù)有明顯的促進作用。20 Gy 劑量輻射時，3.00 g·L-1NaCl 處理組單根插條生根數(shù)為對照的1.63倍。40 Gy 劑量輻射時，4.00 和5.00 g·L-1NaCl 處理生根數(shù)明顯增加，分別是對照的2.68 和3.68 倍。0.12 和0.18 g·L-1Cys 處理對40 Gy 輻射處理組生根數(shù)具有明顯提高作用，插條生根數(shù)分別是對照的3.74 和2.52 倍。但0.30 g·L-1處理對5 Gy 輻射處理組生根數(shù)具有顯著抑制作用。說明Cys 對低劑量輻射處理組插條加劇了傷害作用，對高劑量輻射處理插條具有保護作用。0.07 和0.08 g·L-1Vc 處理顯著提高了40 Gy 輻射劑量組生根數(shù)，分別是對照的3.28 和4.79 倍。

由此可知，3 種保護劑對低劑量輻射的梔子插條生根保護效應不顯著。而高劑量輻射時，3 種保護劑不同濃度處理對插條生根數(shù)及根長具有較好的促進作用。

圖1 保護劑處理對輻射后梔子插條根長的影響Fig.1 Effects of protective agents on root length of gardenia cuttings after radiation treatment

圖2 保護劑處理對輻射后梔子插條生根數(shù)的影響Fig.2 Effects of protective agents on root number of gardenia cuttings after radiation treatment

2.2.3 保護劑對輻射后梔子插條成株率的影響 由表4 可知，不同保護劑處理對不同輻射劑量下的梔子插條成株率影響不同。0～10 Gy 輻射處理，除0 Gy 輻射劑量下0.30 g·L-1Cys 處理時成株率顯著低于對照，其余經保護劑處理組均無顯著差異。20 Gy 輻射劑量下3.00 g·L-1NaCl 處理組梔子插條成株率比對照顯著提高了27.31 個百分點，而5.00 g·L-1NaCl 及0.12 g·L-1Cys 處理組成株率顯著低于對照其他保護劑處理組保護效應不顯著。說明在20 Gy 輻射劑量時，3.00 g·L-1NaCl 處理對輻射后插條具有保護作用，而5.00 g·L-1NaCl 及0.12 g·L-1Cys 處理加劇了對輻射后插條的損傷作用。40 Gy 輻射劑量下，0.12 g·L-1Cys 處理組成株率比對照顯著提高了15.08 個百分點，0.08 g·L-1Vc 處理組成株率比對照提高了17.10個百分點。由此可知，3 種保護劑對梔子插條成株率總體表現(xiàn)為高劑量輻射下具有保護效應，而低劑量輻射下保護作用不顯著。

2.2.4 保護劑對輻射后梔子節(jié)間長度的影響 由圖3 可知，對照組節(jié)間長度隨著輻射劑量的增加，逐漸減小。不同保護劑處理對不同輻射劑量下的梔子節(jié)間長度影響存在差異。其中未經輻射處理組各保護劑處理間無顯著性差異。大于10 Gy，NaCl 不同濃度開始呈現(xiàn)出保護作用。20 Gy 輻射劑量時，3.00 g·L-1NaCl 處理顯著提高了植株節(jié)間長度，是對照的1.46 倍，而相同保護劑處理對5 Gy 輻射后梔子節(jié)間長度具有抑制作用。40 Gy 輻射劑量下，0.12 g·L-1Cys 和0.08 g·L-1Vc 處理顯著提高了植株節(jié)間長度，分別是對照的1.46 和1.50 倍；而5 和20 Gy 劑量輻射下，0.30 和0.12 g·L-1Cys 處理顯著降低了植株節(jié)間長度。結果表明Cys 對高劑量輻射處理具有較好的保護效應。

2.2.5 保護劑對輻射后梔子分枝數(shù)的影響 由圖4可知，3 種不同濃度保護劑在不同輻射劑量下對梔子分枝數(shù)的影響不同。20 Gy 輻射劑量下，與對照相比，3.00 g·L-1NaCl 處理組分枝數(shù)顯著增加了42.91%，而5.00 g·L-1NaCl 處理分枝數(shù)顯著減少。Cys 浸泡處理對0～10 Gy 輻射后梔子分枝數(shù)影響不明顯；20 Gy 處理下，0.12 g·L-1Cys 處理組分枝數(shù)明顯減少；40 Gy 輻射劑量下，0.18 g·L-1Cys 處理組分枝數(shù)較對照顯著增加了69.17%。20 Gy 輻射劑量下，0.08 g·L-1Vc 浸泡輻射后插條，分枝數(shù)相比對照顯著增加了32.39%；40 Gy 輻射劑量下，Vc 各處理組分枝數(shù)隨濃度升高呈遞增趨勢。說明高劑量輻射下適宜的Vc 濃度通常也較高。

表4 保護劑對輻射后梔子插條成株率的影響Table 4 Effects of protective agents on planting rate of gardenia cuttings after radiation treatment /%

圖3 保護劑對輻射后梔子節(jié)間長度的影響Fig.3 Effects of protective agents on internode length of gardenia after radiation treatment

2.2.6 保護劑對輻射后梔子葉片數(shù)的影響 由圖5可知，NaCl 與Vc 浸泡0 ～10 Gy 輻射后梔子葉片數(shù)變化不明顯。在5 Gy 輻射劑量下，0.30 g·L-1Cys 處理組葉片數(shù)顯著低于對照。20 Gy 輻射劑量下，3.00 g·L-1NaCl 和0.08 g·L-1Vc 處理組葉片數(shù)分別比對照顯著增加了32.74%和28.95%；而5.00 g·L-1NaCl 和0.12 g·L-1Cys 處理組葉片數(shù)相比對照顯著減少。40 Gy 輻射劑量下，5.00 g·L-1NaCl、0.12 和0.30 g·L-1Cys 以及0.08 g·L-1Vc 處理組葉片數(shù)比對照分別顯著增加了43.38%、87.45%、34.87%和120.08%；而0.05 g·L-1和0.07 g·L-1Vc 處理組葉片數(shù)相比對照顯著降低，說明高劑量輻射下對葉片數(shù)促進效果較好的保護劑通常濃度也較高。

圖5 保護劑處理對輻射后梔子葉片數(shù)的影響Fig.5 Effects of protective agents on leaf number of gardenia after radiation treatment

2.2.7 保護劑對輻射后梔子葉長、葉寬的影響 由圖6 可知，在0～20 Gy 輻射劑量下，除0.30 g·L-1和0.12 g·L-1Cys 分別在5 Gy 和20 Gy 對梔子葉長有顯著抑制作用，其他保護劑處理組與對照組均無顯著差異。40 Gy 輻射劑量下，NaCl 除3.00 g·L-1處理組全部死亡，其他濃度處理組梔子葉片長度均顯著增大，說明NaCl 對高劑量輻射下的梔子葉片長度具有保護作用。0.12 g·L-1和0.30 g·L-1Cys 處理組梔子葉長相比對照顯著增加了107.41%和57.61%。Vc 除0.07 g·L-1處理組梔子葉長最低且顯著低于對照，其他濃度從低到高處理組葉長比對照分別顯著增加了19.34%、23.87%和83.13%。

圖6 保護劑處理對輻射后梔子葉片長度的影響Fig.6 Effects of protective agents on leaf length of gardenia after radiation treatment

圖7 保護劑處理對輻射后梔子葉片寬度的影響Fig.7 Effects of protective agents on leaf width of gardenia after radiation treatment

由圖7 可知，Cys 和Vc 對0～20 Gy 輻射劑量下梔子葉寬影響不明顯。NaCl 對0 ～10 Gy 輻射劑量下梔子葉寬影響不明顯。20 Gy 輻射劑量下，3.00 g·L-1NaCl 處理組葉寬顯著比對照高50.35%。40 Gy 輻射劑量下，NaCl 各濃度影響同葉長，分別比對照顯著提高了56.70%、34.02%和51.55%。0.12 g·L-1和0.30 g·L-1Cys 浸泡40 Gy 輻射后插條，梔子葉寬顯著比對照提高76.29%、37.11%。而0.18 g·L-1濃度處理組相比對照顯著減小。Vc 在0.08 g·L-1濃度浸泡40 Gy輻射后插條，梔子葉寬比對照顯著增大60.82%。而濃度0.07 g·L-1處理組梔子葉寬顯著低于對照。

2.3 輻射及保護劑處理對梔子葉片形態(tài)變化的影響

由表5 可知，輻射后梔子葉片形態(tài)均發(fā)生了變異，主要表現(xiàn)為葉緣波浪、殘缺、葉片卷曲、葉尖端二裂、三裂、葉柄細長呈心形小葉等(圖8)。隨著輻射劑量的增加，葉片形態(tài)變異率逐漸增大。40 Gy 輻射劑量組，成活植株極少，且?guī)缀趺恐耆~片都發(fā)生了形態(tài)變異。說明高劑量輻射下梔子葉片形態(tài)變化大。

表5 輻射及保護劑處理對梔子葉片形態(tài)變異率的影響Table 5 Effects of radiation and protective agent treatment on leaf morphological variability of gardenia /%

圖8 輻射及保護劑處理對梔子葉片形態(tài)的影響Fig.8 Effects of radiation and protective agent treatment on leaf morphology of gardenia

由表5 可知，與對照相比，未輻照處理組經保護劑處理后葉片發(fā)生了變異。NaCl、Cys 與Vc 均有不同濃度處理組葉片形態(tài)發(fā)生了改變。其中0.18 g·L-1Cys處理組葉片變異率最高為18.16%。說明保護劑處理對梔子葉片形態(tài)變化有一定的影響，Cys 對未輻照組梔子葉片形態(tài)變化影響更大。5 Gy 輻射劑量下，0.08 g·L-1Vc 處理組葉片形態(tài)變異率最高，相比CK1提高11.74 個百分點，比CK2提高10.54 個百分點。10 Gy輻射劑量下2.0 g·L-1NaCl 處理組梔子葉片形態(tài)變異率最高，比CK1提高20.97 個百分點，比CK2提高18.46 個百分點。20 Gy 輻射劑量組經0.30 g·L-1Cys處理后梔子葉片形態(tài)變異率最高，比CK1提高34.39個百分點，比CK2提高27.99 個百分點；經3.00 g·L-1NaCl 處理梔子葉片形態(tài)變異率較CK1提高16.82 個百分點，比CK2提高10.42 個百分點。說明0.30 g·L-1Cys 和3.00 g·L-1NaCl 處理在20 Gy 輻射劑量下對葉片形態(tài)變異率有一定提高作用。40 Gy 輻射劑量下經保護劑處理后的成活梔子葉片形態(tài)變異率均較高，且明顯高于20 Gy 輻射下各處理組。0.12 g·L-1Cys 處理梔子葉片形態(tài)變異率為85.71%，0.08 g·L-1Vc 處理組葉片形態(tài)變異率為83.33%。表明0.12 g·L-1Cys 和0.08 g·L-1Vc 處理在40 Gy 輻射劑量下，不僅能提高植株成活率，也能保證梔子葉片形態(tài)變異效果。

3 討論

輻射誘變育種可大幅度提高突變頻率。研究表明經射線處理人工誘導的突變頻率比自然突變頻率高幾百倍甚至幾千倍[11]，在無性繁殖的觀賞花卉中已成為主要育種技術[18]。輻射誘變育種成功的關鍵在于確定輻射源、輻射劑量、劑量率[19-22]。本研究采用60Co-γ 射線輻射梔子插條，得到半致死劑量為81.65 Gy，半生根劑量為21.22 Gy，半成株劑量為20.30 Gy。根系是吸收養(yǎng)分和水分的重要器官，可進行一系列有機化合物的合成，對地上部分的形態(tài)建成和生長代謝過程有重要作用[23]。本研究中生根插條后期生長仍受到抑制，因此建議梔子插條輻照誘變適宜劑量選擇半成株劑量附近，即20 Gy 左右，與徐宏等[24]輻射誘變選育梔子新品系得到的結果相同，說明觀賞型梔子變種與野生梔子60Co-γ 射線輻射插條的誘變效應可能相同。輻射誘變處理不僅誘發(fā)突變，而且會造成不良損傷[25-26]。本試驗中梔子插條生根率及成株率在40 Gy 輻射劑量下僅為1.59%，而5 Gy 輻射劑量對梔子插條具有一定的刺激作用。這與黎熠睿等[27]研究電子束轉靶X 射線對唐菖蒲生長發(fā)育具有低促高抑作用結果一致，與Gudkov 等[28]發(fā)現(xiàn)的低劑量輻射5 ～20 Gy(種子輻射)或1 ～5 Gy(營養(yǎng)植物輻射)能促進植物的生長發(fā)育的結論也一致。

最佳濃度的保護劑是獲得最佳保護效果的關鍵[15]。本試驗采用不同濃度的NaCl、Cys、Vc 浸泡不同劑量60Co-γ 射線輻射后的梔子插條，發(fā)現(xiàn)3.00 g·L-1NaCl 處理在20 Gy 輻射劑量下生根率與成株率相比對照均顯著提高，且對梔子插條生根數(shù)、根長，植株節(jié)間長度、葉片數(shù)、分枝數(shù)、葉寬等生長形態(tài)指標均有較好的保護效果。0.12 g·L-1Cys 和0.08 g·L-1Vc處理在40 Gy 輻射劑量下使插條生根率和成株率分別比對照顯著提高了1.6 倍和4.6 倍以上，對梔子插條生根數(shù)、根長，植株節(jié)間長度、葉片數(shù)、葉長、葉寬等生長形態(tài)指標均有較好的保護效果。王會全等[29]研究NaCl 脅迫對不同品系火龍果種子萌發(fā)及枝條扦插的影響發(fā)現(xiàn)NaCl 濃度為3 g·L-1時平均每株的生根數(shù)達最大，且生根率和成活率也較高，與本研究結果一致。而40 Gy 輻射劑量下，Gys 及Vc 對梔子的保護作用與曾昭琪等[14]發(fā)現(xiàn)L-半胱氨酸對柵列藻的輻射受損有明顯的防護效果，張再君等[30]、柳學余等[31]發(fā)現(xiàn)抗壞血酸對輻射后小麥具有防護作用的結論相同。本研究中，3 種保護劑對梔子插條輻射均有一定保護作用，且對高劑量輻射處理保護效果顯著，對低劑量輻射處理保護效果不顯著。與傅春玲等[16]發(fā)現(xiàn)Vc 對中、高劑量γ 射線損傷具有一定防護作用的結論一致。此外，本研究發(fā)現(xiàn)高劑量輻射處理下適宜的保護劑濃度也較高，與管振謙等[32]發(fā)現(xiàn)高濃度(120×10-6以下)的腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate，ATP)，細胞色素C 水溶液浸泡高劑量γ 射線及加速電子輻射的向日葵種子時作用更明顯的結果相同。

此外，5～20 Gy 輻射劑量處理下CK2葉片形態(tài)變異率較CK1有所增加，推測可能由于泡水后，進入植物內部的H2O 在原有自由基的作用下，產生了更多的自由基，但具體機理有待深入研究。

4 結論

本研究采用不同劑量60Co-γ 射線輻射梔子插條，發(fā)現(xiàn)低劑量輻射對梔子插條具有一定促進作用，隨著輻射劑量增加，對梔子插條的損傷作用增大，適宜的輻射誘變劑量為20 Gy 左右。經NaCl、Cys 及Vc 3 種保護劑不同濃度浸泡輻射后梔子插條，不同輻射劑量下，適宜保護劑的種類和濃度各不相同。輻射劑量為20 Gy 時，最適保護劑為3.00 g·L-1NaCl；40 Gy 輻射劑量下，Cys 和Vc 保護效果更好。3 種保護劑對梔子插條均有一定的保護作用，但其在梔子插條內的作用機理還有待深入研究。