陜北地區(qū)巨菌草在七彩山雞飼料中的應(yīng)用研究

鄧新為，羅 娜，孫志宏,2*，劉 夏

(1.延安大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，陜西 延安 716000；2.陜西省區(qū)域生物資源保育與利用工程技術(shù)研究中心，陜西 延安 716000)

七彩山雞(Phasianuscolchicus)，別稱野雞，因其羽毛色彩斑斕，故名為七彩山雞[1]。七彩山雞除了具有觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值外，還具有補(bǔ)氣生血、滋肝腎、提神補(bǔ)腦及治多種慢性病等功效，含有多種人體必需的氨基酸、微量元素及維生素等成分，營養(yǎng)價(jià)值極高，對(duì)人體健康具有極好的功效[2-3]。

巨菌草(Pennisetumgiganteum)原產(chǎn)于非洲。目前，延安市已在巨菌草選育栽培、收割、飼料化利用等方面取得了一定的成就[4]。巨菌草作為一種高價(jià)值、低成本、產(chǎn)量高、粗蛋白和糖分含量高的植物，發(fā)展巨菌草業(yè)已經(jīng)成為目前的潮流與趨勢(shì)[5-6]。

我國目前飼料種類繁多，大都以豆粕、玉米、麩皮等為主，延安市養(yǎng)殖業(yè)對(duì)牧草的添加和引用更是缺乏，篩選優(yōu)質(zhì)牧草和飼料作物是目前研究方向的一種新趨勢(shì)。通過在飼料中引用優(yōu)質(zhì)牧草，實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)飼料的生產(chǎn)供應(yīng)，對(duì)提高食草性畜禽的健康發(fā)展十分重要[7]。楊旭暉等[8]為了評(píng)定青貯巨菌草飼喂價(jià)值，利用青貯巨菌草與青貯全株玉米、青貯飼用甜高粱進(jìn)行了飼喂育肥牛、羊?qū)Ρ仍囼?yàn)，研究表明青貯飼料適口性較好，對(duì)羊的增重效果好且差異顯著。李海燕等[9]利用巨菌草作為飼糧飼喂白絨山羊，對(duì)其生產(chǎn)性能和生長(zhǎng)發(fā)育起著一定的促進(jìn)作用，且經(jīng)濟(jì)成本較低。由前人已取得的成果可見，利用巨菌草作為飼糧，在降低成本、增加動(dòng)物產(chǎn)量、拓寬飼糧資源方面有著巨大的開發(fā)前景[10-12]。巨菌草在飼料領(lǐng)域的使用是否對(duì)動(dòng)物腸道微生物產(chǎn)生影響，目前未見報(bào)道。因此，本研究選用七彩山雞為研究對(duì)象，采用巨菌草替代七彩山雞日糧中麩皮的含量，探討不同添加水平的巨菌草對(duì)七彩山雞免疫器官指數(shù)、血液生理生化指標(biāo)及腸道消化酶活性的影響，以進(jìn)一步探討添加巨菌草飼料飼養(yǎng)畜禽的應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

巨菌草采自延安大學(xué)萃園校區(qū)科研基地，待植株生長(zhǎng)到3 m左右，進(jìn)行收割，風(fēng)干打碎，測(cè)定巨菌草營養(yǎng)成分見表1。七彩山雞飼養(yǎng)于延安大學(xué)萃園校區(qū)科研基地。

表1 巨菌草營養(yǎng)成分

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本研究采用單因素設(shè)計(jì)，選取同批次、健康、日齡30 d、初始體重為(0.184±0.012)kg的七彩山雞150只，隨機(jī)分為5組，即1個(gè)對(duì)照組、4個(gè)試驗(yàn)組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組按照質(zhì)量比例在基礎(chǔ)飼糧中添加4%、8%、12%、16%的巨菌草以替代麩皮，即T1、T2、T3和T4組。飼糧配比參照《雞營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)，根據(jù)試驗(yàn)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。試驗(yàn)飼糧制成顆粒形狀飼喂，飼糧組成見表2，試驗(yàn)期為112 d。

表2 試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在延安大學(xué)萃園校區(qū)科研基地進(jìn)行，采用立體重疊3層籠養(yǎng)方式，自由采食和進(jìn)水。22 d時(shí)第1次注射雞瘟疫苗，65～95 d時(shí)注射雞瘟疫苗和禽霍亂疫苗。試驗(yàn)期內(nèi)對(duì)雞舍定期打掃衛(wèi)生，保持通風(fēng)，并定期作消毒處理，保證飼養(yǎng)環(huán)境的清潔。

1.4 樣品采集與制備

于試驗(yàn)第106～112 d進(jìn)行消化能代謝試驗(yàn)，每日下午定時(shí)收集當(dāng)日全部新鮮糞樣(去除糞樣中羽毛、皮屑、飼料等雜物)，混合后取20%放入自封袋內(nèi)，置于4℃冰箱保存，最后將5 d收集的糞樣于65℃烘箱中烘干，用小型粉碎機(jī)粉碎過40目篩，密封保存并做好標(biāo)記，供指標(biāo)測(cè)定用。

于試驗(yàn)第111 d下午18時(shí)起試驗(yàn)雞禁食，12 h后個(gè)體稱重，并從每個(gè)重復(fù)選取9只接近平均體重的肉雞，翅靜脈采血5 mL，采用翅靜脈采血法[13]采血，注入真空采血管中。采血后的雞即進(jìn)行屠宰，解剖并摘取胸腺、脾臟、法氏囊，并取雞十二指腸腸道內(nèi)容物，-20℃冰箱保存。

1.5 指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 消化能

在第106～112 d階段5 d的采糞期，采用全收糞法代謝試驗(yàn)測(cè)定消化能。

1.5.2 血液生理生化指標(biāo)

采用DIRUI600全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血液中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞百分比、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量、血小板計(jì)數(shù)、平均血小板體積、總蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、肌酸激酶、乳酸脫氫酶、血清甘油三酯。

1.5.3 免疫器官指標(biāo)

試驗(yàn)雞屠宰后，解剖并摘取胸腺、脾臟、法氏囊，除去血液后稱重。免疫器官指數(shù)采用公式計(jì)算：免疫器官指數(shù)(mg/g)=免疫器官重(mg)/雞活重(g)。

1.5.4 消化酶活性

將-20℃下保存的十二指腸內(nèi)容物，未解凍前用分析天平稱重，按照質(zhì)量體積比為1:1加入4℃的生理鹽水，低溫下勻漿30 s后用低溫離心機(jī)在4℃條件下2500 r/min、離心10 min，取上清液若干等份，消化酶活性采用試劑盒(南京建成生物有限公司)測(cè)定。測(cè)定酶為十二指腸淀粉酶、脂肪酶。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 25.0和 Microsoft Excel 2019 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理分析。各處理組采用單因素ANOVA分析，差異顯著時(shí)采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 巨菌草對(duì)七彩山雞血液生理生化指標(biāo)的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，添加不同水平巨菌草的飼料對(duì)七彩山雞的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量、血小板計(jì)數(shù)、平均血小板體積、總蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、肌酸激酶、乳酸脫氫酶、血清甘油三酯均無顯著性影響。與對(duì)照組相比，僅T3組雞血液中的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比顯著性提高，但其淋巴細(xì)胞百分比顯著降低。綜合來看，在飼料中添加較多巨菌草對(duì)七彩山雞血液中的免疫指標(biāo)有較顯著的影響。

表3 巨菌草對(duì)七彩山雞血液生理生化指標(biāo)的影響

2.2 巨菌草對(duì)七彩山雞免疫器官指數(shù)的影響

由表4可見，與對(duì)照組相比，T3組雞的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)顯著增大，T1、T2、T4組雞未達(dá)到顯著性差異；T1、T2、T3組雞的法氏囊指數(shù)與對(duì)照組相比有顯著性差異，T3組雞的法氏囊指數(shù)最大；綜合結(jié)果來看，T3組中添加巨菌草對(duì)七彩山雞的免疫器官指數(shù)影響較好。

表4 巨菌草對(duì)七彩山雞免疫器官指數(shù)的影響

2.3 巨菌草對(duì)七彩山雞消化酶活性的影響

根據(jù)表5可知，與對(duì)照組相比，隨著巨菌草添加比例的升高，T1、T2、T3、T4組雞的十二指腸淀粉酶活性顯著提高，分別增加了2.12%、4.52%、5.58%、7.71%；十二指腸脂肪酶活性達(dá)到了顯著性差異，T2、T3、T4組雞的脂肪酶活性均隨著巨菌草添加比例的提高而顯著性降低，T1組雞的十二指腸脂肪酶較對(duì)照組活性有所降低。

表5 巨菌草對(duì)七彩山雞十二指腸消化酶活性的影響

3 討 論

3.1 巨菌草對(duì)七彩山雞血液生理生化指標(biāo)的影響

血液是機(jī)體的重要組成部分，各組織與細(xì)胞間的交換必須依賴于血液流動(dòng)來完成，血液也有維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的作用[14]。血液的生理生化指標(biāo)會(huì)隨著內(nèi)外環(huán)境的變化而變化，如營養(yǎng)水平和外界環(huán)境等因素，其變化可反映機(jī)體的生長(zhǎng)狀況，也可反映動(dòng)物健康狀況[15-17]。血液生化指標(biāo)可反映機(jī)體營養(yǎng)代謝情況和各組織器官功能，也可間接反映了機(jī)體的生長(zhǎng)性能[18-19]。白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞百分比在血液的細(xì)胞免疫系統(tǒng)中起著十分重要的作用[20]。本研究中，添加12%巨菌草水平與對(duì)照組相比，白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比顯著提高，淋巴細(xì)胞百分比顯著降低，表明巨菌草在一定程度上提高了七彩山雞的免疫功能。添加巨菌草的試驗(yàn)組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性與對(duì)照相比雖無明顯差異，但活性卻明顯增加，研究表明丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性高低可反映蛋白質(zhì)合成和分解的能力[21]。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組雞血液中的總蛋白、白蛋白含量有所提高，其中，T3組雞的血液中總蛋白、白蛋白高于對(duì)照組和其他試驗(yàn)組。夏信山等[22]研究報(bào)道總蛋白、白蛋白含量的增加可反映豬的消化吸收增強(qiáng)，蛋白質(zhì)代謝加強(qiáng)，免疫能力提高。史卉玲等[23]研究表明，添加苜蓿后飼糧中蛋白質(zhì)水平增高，為奶牛瘤胃中微生物合成蛋白質(zhì)提供了充足的氮源，從而促進(jìn)了血清總蛋白、白蛋白的增加。飼糧中添加巨菌草后蛋白水平增高，促進(jìn)七彩山雞的消化吸收與機(jī)體的蛋白質(zhì)水平，改善七彩山雞的免疫能力，促進(jìn)其健康生長(zhǎng)，這與雷曉軍等[24]研究中草藥飼糧添加劑對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)中總蛋白、白蛋白含量增加增強(qiáng)機(jī)體免疫力的結(jié)果一致。飼糧中添加巨菌草后，增加了七彩山雞對(duì)飼糧的吸收與利用，進(jìn)而促進(jìn)新陳代謝，增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力。

3.2 巨菌草對(duì)七彩山雞免疫器官及免疫功能的影響

器官指數(shù)可在一定程度上反映機(jī)體的功能強(qiáng)弱與受損狀況。脾臟、胸腺、法氏囊作為七彩山雞的主要免疫器官，其發(fā)育狀況影響機(jī)體的免疫應(yīng)答水平與免疫防御功能，免疫器官指數(shù)的增加和降低可表明機(jī)體的體液免疫與細(xì)胞免疫的能力[25]。有研究表明免疫器官指數(shù)的增加可間接表明機(jī)體的健康狀況[26-27]。本試驗(yàn)中T3組雞的器官指數(shù)均顯著高于對(duì)照組，且優(yōu)于其他試驗(yàn)組。崔玉銘等[28]人研究表明蛋白質(zhì)和氨基酸是動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)的基本組成物質(zhì)，飼糧中的蛋白質(zhì)可以保障機(jī)體維持正常免疫功能。胡永娜[29]研究表明飼糧中菜籽粕可刺激肉仔雞的免疫應(yīng)答反應(yīng)，促進(jìn)肉仔雞免疫器官的發(fā)育，增強(qiáng)肉仔雞的免疫功能。王娟娟等[30]研究表明，飼料中添加蛋白質(zhì)對(duì)雞的免疫器官指數(shù)有顯著性影響。本試驗(yàn)中，巨菌草作為一種高蛋白的營養(yǎng)物質(zhì)加入飼糧后，提高了飼糧的蛋白質(zhì)含量，增強(qiáng)了七彩山雞的正常免疫應(yīng)答水平，促進(jìn)機(jī)體免疫應(yīng)答反應(yīng)的能力，提高免疫器官的重量，進(jìn)而增強(qiáng)七彩山雞的免疫功能水平。由此可見，巨菌草對(duì)七彩山雞的代謝及免疫功能具有一定的促進(jìn)作用，在機(jī)體免疫反應(yīng)中起著至關(guān)重要的作用。

3.3 巨菌草對(duì)七彩山雞消化酶活性的影響

動(dòng)物消化食物的方式主要分為機(jī)械性消化和化學(xué)性消化。七彩山雞主要以消化酶進(jìn)行化學(xué)性消化，因此相關(guān)的腸道消化酶可作為動(dòng)物消化利用營養(yǎng)物質(zhì)的首要工具，在一定程度上反映機(jī)體的消化能力，消化酶的變化可間接反應(yīng)機(jī)體的消化能力[31-32]。與對(duì)照組相比，T1、T2、T3、T4組雞的十二指腸淀粉酶活性均達(dá)到了顯著性差異，T2、T3、T4組雞的十二指腸脂肪酶活性顯著增加。加入較高比例巨菌草替代部分麩皮可改變機(jī)體的淀粉酶活性，一定程度上促進(jìn)七彩山雞對(duì)淀粉的吸收與轉(zhuǎn)化，改善新陳代謝與能量轉(zhuǎn)化。殷海成等[33]研究中提到消化酶活性受眾多環(huán)境因素的影響，提高飼糧中的纖維含量，可促進(jìn)唾液、胃酸、胃液的分泌，提高胰液的分泌量，加入巨菌草后，飼糧中纖維含量明顯增加，可能對(duì)酶活性的改變起了一定的促進(jìn)作用。巨菌草在8%比例以上，均能提高消化酶和脂肪酶活性，可能是因?yàn)轱暭Z中較高的纖維含量增加了腸道絨毛高度與寬度，促進(jìn)飼糧在腸道中的消化與吸收，增強(qiáng)七彩山雞對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化，提高動(dòng)物機(jī)體的消化吸收能力。但隨著巨菌草比例的不斷增加，脂肪酶與淀粉酶活性增加的幅度逐漸變低，說明七彩山雞對(duì)巨菌草飼糧的吸收具有一定限制。

4 結(jié) 論

在七彩山雞日糧中，添加不同比例的巨菌草對(duì)其血液生理生化指標(biāo)有一定的改善作用，同時(shí)也可以顯著提高七彩山雞的免疫功能，增強(qiáng)七彩山雞十二指腸脂肪酶和淀粉酶的活性，從而促進(jìn)七彩山雞對(duì)飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收與代謝。添加巨菌草比例為12%可替代麩皮，其對(duì)七彩山雞的各項(xiàng)指標(biāo)改善效果最好，建議在陜北地區(qū)推廣使用。