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    ELISA法和RIA法在檢測(cè)系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗雙鏈DNA抗體中的效果對(duì)比

    2021-04-15 14:03:58河南省范縣人民醫(yī)院457500孫文順
    首都食品與醫(yī)藥 2021年6期
    關(guān)鍵詞:一致性例數(shù)陽(yáng)性率

    河南省范縣人民醫(yī)院(457500)孫文順

    系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是常見(jiàn)的一類自身免疫疾病,會(huì)導(dǎo)致機(jī)體多器官受累,目前尚無(wú)根治方案。SLE患者會(huì)產(chǎn)生針對(duì)組織蛋白及核酸的特殊抗體,目前抗雙鏈DNA(抗dsDNA)抗體已經(jīng)成為了診斷SLE及判別SLE病情活動(dòng)的重要指標(biāo)[1]。目前抗dsDNA抗體的檢測(cè)方案包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、放射免疫分析(RIA)、間接免疫熒光法(CLIFT)等,有研究證實(shí)RIA法在檢測(cè)抗dsDNA抗體水平上有著較高的陽(yáng)性率,但該方案具有一定的污染性,臨床應(yīng)用受限[2],也有研究認(rèn)為RIA法與疾病活動(dòng)情況有關(guān)。ELISA法多作為SLE的一個(gè)篩選方案,在抗dsDNA抗體檢測(cè)上開(kāi)展有限[3]。本文就ELISA法和RIA法在檢測(cè)SLE患者抗dsDNA抗體上的診斷效能進(jìn)行了研究對(duì)比,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 研究對(duì)象選取為2016年3月~2019年12月之間我院186例SLE患者、183例其他自身免疫疾病患者(非SLE)、78例非自身免疫疾病者和50例健康體檢者,分別設(shè)為SLE組、其他自身免疫疾病組、非自身免疫疾病組、對(duì)照組。研究通過(guò)倫理委員會(huì)審批。SLE組患者包括男性5例,女性181例,年齡19~57歲,平均(35.7±9.6)歲;其他自身免疫疾病組患者包括干燥綜合征98例,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎51例,混合性結(jié)締組織病11例,皮肌炎7例,多發(fā)性肌炎3例,其他13例,該組有男性13例,女性170例,年齡18~59歲,平均(39.4±7.6)歲;非自身免疫疾病組包括支氣管哮喘34例,肺炎12例,冠心病23例,肝硬化5例,消化道炎癥4例,該組有男性7例,女性71例,年齡18~69歲,平均(44.1±7.8)歲;對(duì)照組包括男性5例,女性45例,年齡20~53歲,平均(38.1±7.8)歲。各組受檢者基本資料(性別、年齡)可比(P>0.05)。

    附表1 兩種檢驗(yàn)方案對(duì)各組患者抗dsDNA抗體陽(yáng)性率的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比[n(%)]

    附表2 兩種檢驗(yàn)方案在抗dsDNA抗體檢測(cè)上的診斷效能對(duì)比(%)

    1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡≥18歲;②符合1997年SLE分類標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)疾病診斷;③受檢者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):①診斷未明者;②資料不全者;③中途退出研究者。

    1.3 方法 所有對(duì)象均分別采用ELISA法和RIA法進(jìn)行血清抗dsDNA抗體的檢測(cè)。抽取受檢者清晨空腹靜脈血5ml,3000r/min條件下離心15min,取血清保存于-80℃環(huán)境下待檢。ELISA法試劑盒由愛(ài)爾蘭Trinity Biotech公司提供,RIA法試劑盒由上海萬(wàn)方金科生物科技有限公司提供。所有受試者血清樣本收集完成后,同時(shí)進(jìn)行樣本抗dsDNA抗體水平的測(cè)定,實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將標(biāo)本與試劑盒提前取出,待恢復(fù)室溫后開(kāi)始試驗(yàn),過(guò)程嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境、設(shè)備均符合檢驗(yàn)要求。對(duì)比兩種檢驗(yàn)方案在不同組別中的陽(yáng)性率,對(duì)比兩種檢驗(yàn)方案的診斷效能,并對(duì)兩種檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行一致性分析。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均錄入SPSS23.0軟件進(jìn)行處理,計(jì)數(shù)資料用%表示,組間、組內(nèi)技術(shù)資料對(duì)比均用χ2,兩種檢驗(yàn)方法的一致性分析采用Kappa檢驗(yàn),檢驗(yàn)水平α=0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 陽(yáng)性率對(duì)比抗dsDNA抗體陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果顯示,RIA法檢測(cè)SLE組、其他自身免疫疾病組、非自身免疫疾病組、對(duì)照組的陽(yáng)性率分別為47.3%、23.5%、1.3%、0,ELISA法檢測(cè)結(jié)果分別為62.9%、31.1%、0、0,兩種檢驗(yàn)方案SLE組的陽(yáng)性率均顯著高于其他組(P<0.05),且ELISA檢出陽(yáng)性率顯著高于RIA(P<0.05)。見(jiàn)附表1。

    2.2 診斷效能對(duì)比 診斷效能對(duì)比結(jié)果顯示,兩種檢驗(yàn)方案在特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值對(duì)比上無(wú)顯著差異(P>0.05),但ELISA法的敏感性為62.9%,顯著高于RIA法的47.3%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)附表2。

    2.3 一致性檢驗(yàn) RIA法檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)132例,陰性例數(shù)365例,ELISA法檢測(cè)陽(yáng)性例數(shù)174例,陰性例數(shù)323例,一致性檢驗(yàn)結(jié)果顯示,兩種檢驗(yàn)方案中度一致(Kappa系數(shù)=0.629)。

    3 討論

    上世紀(jì)60年代Ceppelini等人的研究首次發(fā)現(xiàn)SLE患者血清中的抗dsDNA抗體,在之后不斷的研究中,對(duì)抗dsDNA抗體的認(rèn)識(shí)不斷加深,目前已經(jīng)成為了SLE診斷的主要依據(jù)[4]。抗dsDNA抗體會(huì)隨著SLE患者疾病活動(dòng)度進(jìn)行浮動(dòng),因此不但能作為診斷依據(jù),同時(shí)還可作為疾病評(píng)估、療效評(píng)估的重要依據(jù)。因此,選擇合適的方案進(jìn)行抗dsDNA抗體的準(zhǔn)確檢測(cè),是十分必要的。RIA法和ELISA法都是臨床常用的抗dsDNA抗體檢測(cè)方案,從本次研究數(shù)據(jù)來(lái)看,兩種檢測(cè)方案對(duì)SLE患者的抗dsDNA抗體檢出率均顯著高于其他組別,這說(shuō)明兩種方案對(duì)于自身免疫疾病的診斷均有一定的應(yīng)用價(jià)值,尤其在SLE診斷上預(yù)警價(jià)值較高。在進(jìn)一步的診斷效能對(duì)比上來(lái)看,兩種檢驗(yàn)方案均有較高的特異性,但ELISA法的敏感性要明顯高于RIA法,這說(shuō)明前者對(duì)SLE患者的抗dsDNA抗體檢測(cè)親和力較高,在篩查上有著更高的診斷價(jià)值。從一致性分析結(jié)果來(lái)看,兩種檢驗(yàn)方案中度一致。本次的檢驗(yàn)結(jié)果與Mahler等人的研究一致[5],但也有學(xué)者研究結(jié)果顯示,RIA法在SLE患者抗dsDNA抗體檢測(cè)上敏感性要略高于ELISA法[6],考慮原因可能受到樣本量及不同廠商試劑等因素的影響,還需要進(jìn)一步深入研究。

    綜上所述,兩種檢驗(yàn)方案在SLE患者的抗dsDNA抗體檢測(cè)上均有較好效果,可幫助進(jìn)行SLE病情活動(dòng)情況的監(jiān)測(cè),ELISA法檢驗(yàn)敏感性更好,更具有應(yīng)用價(jià)值。

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