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    臍灸聯(lián)合穴位貼敷治療陰性體質高血壓病人血清microRNA-92a水平的變化

    2021-04-14 13:33:36徐永娟蘇稼航遲榮香呂曙光
    關鍵詞:體質陰性穴位

    徐永娟,蘇稼航,遲榮香,呂曙光

    高血壓是常見的心血管疾病之一,以動脈血壓增高為基本特征,易損傷諸多靶器官,如心、腎、腦等,是影響現(xiàn)代人生活質量的主要因素[1-3]。該疾病發(fā)生、發(fā)展與高鹽膳食、肥胖及飲食等諸多因素相關,目前,學術界比較認可的致病機制包括內(nèi)分泌學說、腎素-血管緊張素-醛固酮學說、遺傳學說等[4-5]。中醫(yī)學認為,高血壓疾病病理因素涉及虛、火、風、痰等,造成三臟(脾、肝、腎)功能失常,陰陽失衡。中醫(yī)體質辨識,將高血壓病人分為陰性體質及陽性體質。目前,臨床治療陰性體質高血壓病人常以藥物為主,雖可取得一定降壓效果,但缺乏一種預測治療效果的生物學標志物[6-7]。臨床研究發(fā)現(xiàn),炎性因子、內(nèi)皮因子等均參與高血壓疾病的發(fā)生過程,但白細胞計數(shù)(WBC)、同型半胱氨酸(Hcy)等標志物的靈敏度及特異度較低,而microRNA-92a是一種在內(nèi)皮細胞特異性高表達的微小RNA,且與動脈粥樣硬化、炎癥反應及內(nèi)皮功能障礙緊密聯(lián)系,影響心血管疾病的預后[8]。目前,臨床上已有關于血清microRNA-92a與高血壓病人大動脈僵硬度關系的研究,但將血清microRNA-92a用于評估高血壓治療效果的研究并不多見。鑒于此,本研究監(jiān)測納入的100例陰性體質高血壓病人血清microRNA-92a、WBC及Hcy的表達,并分析三者與臍灸聯(lián)合穴位貼敷治療陰性體質高血壓病人血壓控制效果的相關性,以判斷血清microRNA-92a、WBC及Hcy水平是否可以作為血壓控制水平的預測指標。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 回顧性分析2017年9月—2018年12月就診于我院的100例陰性體質高血壓病人的臨床資料,其中男55例,女45例;年齡51~65(56.75±5.13)歲;病程1~7(4.32±1.25)年;中醫(yī)辨證分型:痰濕內(nèi)阻證21例,腎精不足證28例,氣血兩虛證37例,沖任失調證14例。根據(jù)治療后血壓控制水平將病人分為4組:A組[血壓<120/80 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),20例]、B組[血壓(120~139)/(80~89)mmHg,27例]、C組[血壓(140~159)/(90~99)mmHg,45例]、D組(血壓≥160/100 mmHg,8例)。本研究符合我院醫(yī)學倫理委員會制定的標準。

    1.2 診斷標準 西醫(yī)診斷標準:符合《中國高血壓基層管理指南》[9]中高血壓診治標準。中醫(yī)診斷標準:符合《高血壓中醫(yī)診療指南》[10]中陰性體質辨證標準。①氣血兩虛,主證:口干心煩、眩暈時作、短氣乏力,次證:納呆、面白、心悸失眠、腹脹便溏;②痰濕內(nèi)阻,主證:頭重如裹,次證:少食多寐、嘔吐痰涎、胸脘痞悶,舌脈:脈細、舌淡;③腎精不足,主證:耳鳴腰酸、心煩不寐,次證:失眠夢遺、心悸健忘等,舌脈:脈細數(shù)、舌紅;④沖任失調,主證:婦女更年期前后或月經(jīng)來潮時出現(xiàn)頭痛、頭暈,次證:心煩、失眠,舌脈:舌淡,脈弦細。

    1.3 納入與排除標準 納入標準:①符合中西醫(yī)診斷標準且為陰性體質者;②年齡18~80歲;③對本研究用藥無過敏者;④治療依從性較高;⑤臨床資料完整。排除標準:①哺乳期、妊娠期女性;②存在繼發(fā)性高血壓者;③伴有嚴重肝腎功能衰竭、心肺疾病及重度糖尿病者;④嚴重認知功能障礙。

    1.4 治療方法 100例陰性體質高血壓病人均接受臍灸聯(lián)合穴位貼敷治療。①臍灸。將茯苓、吳茱萸、肉豆蔻、五味子、補骨脂及白術等藥方根據(jù)比例混合后并粉碎,密封備用。病人取仰臥位,將臍部充分暴露、消毒,用溫開水將上述粉狀物調制成上窄下寬圈狀,內(nèi)徑等于臍部直徑,于臍部處填滿藥末并抹勻,將大艾柱置于藥末上,施灸10壯,時間維持在90 min。灸后保留臍部藥末,借助無紡布敷貼固封神闕穴處,4 h后揭下。每日1次,連續(xù)治療2周。②穴位貼敷。按照比例混合補骨脂、熟附塊、吳茱萸、桑寄生、丁香、淫羊藿、麻黃、肉桂等藥方,并超微粉碎,密封備用。在貼敷期間,取適量藥末姜汁調制成稠糊狀,制作成錐狀藥餅(直徑為20 mm)。將涌泉、內(nèi)關、三陰交3個穴位充分暴露、消毒,于無紡布(規(guī)格:60 mm×70 mm)中央處,將錐狀藥置入,并固定于穴位上,保留4~6 h,每日1次,連續(xù)治療2周。

    1.5 觀察指標 ①血清microRNA-92a。于治療2周后,根據(jù)Trizol試劑盒說明書,提取血漿總RNA,并檢測RNA提取液的OD260吸光光度值,計算其純度及濃度,通過瓊脂糖凝膠電泳法對RNA完整性進行測定,通過實時熒光定量聚合酶鏈式反應(RT-PCR)法測定microRNA-92a的表達,并用CT值計算相對microRNA-92a表達水平,U6 snRNA為內(nèi)參。microRNA-92a引物序列:5′-TATTGCACTTGTCCCGGCCTG-3′。②WBC及Hcy水平。于治療2周后,采集病人3 mL空腹肘靜脈血,3 000 r/min離心(半徑為6 cm,離心10 min),采用日本東芝生產(chǎn)的TBA-120FR全自動生化分析儀測定WBC及Hcy水平。

    1.6 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,多組間比較采用單因素方差分析檢驗,組間兩兩比較采用SNK-q檢驗,經(jīng)雙變量Pearson直線相關性檢驗血清指標與血壓之間的相關性,根據(jù)曲線下面積(AUC)檢驗各血清指標與血壓的評估價值,AUC≤0.5無診斷價值,>0.5且<0.7診斷價值較低,0.7~0.9診斷價值中等,>0.9診斷價值高。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結 果

    2.1 4組臨床資料比較 4組性別、年齡、病程及中醫(yī)辨證分型比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。詳見表1。

    表1 4組臨床資料比較

    2.2 4組血清microRNA-92a、WBC、Hcy水平比較 microRNA-92a、WBC、Hcy水平比較,D組>C組>B組>A組,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表2。

    表2 4組血清microRNA-92a、WBC、Hcy水平比較 (x±s)

    2.3 血清microRNA-92a、WBC、Hcy水平與血壓的相關性分析 雙變量直線相關性檢驗結果顯示,血清microRNA-92a、WBC、Hcy與血壓呈正相關(P<0.05)。詳見表3。

    表3 血清microRNA-92a、WBC、Hcy與血壓的相關性分析

    2.4 ROC曲線檢驗各血清指標與血壓水平的評估價值 將陰性體質高血壓作為狀態(tài)變量,將各血清指標與血壓水平作為檢驗變量,得到ROC曲線,結果顯示,血清WBC、Hcy預測陰性體質高血壓病人血壓控制水平的AUC分別為0.572,0.668,預測價值較低;而microRNA-92a預測陰性體質高血壓病人血壓控制水平的AUC為0.781,預測價值理想。詳見表4、圖1。

    表4 ROC曲線結果

    圖1 血清WBC、Hcy、microRNA-92a預測陰性體質高血壓病人血壓控制水平的ROC曲線圖

    3 討 論

    高血壓是諸多心血管疾病的高危因素,可導致平滑肌細胞及血管內(nèi)皮細胞受到機械性損傷,增加血管壁通透性,進而激活凝血機制,導致管腔狹窄及血管壁增厚,提高動脈粥樣硬化敏感度[11]。高血壓屬于中醫(yī)學“眩暈”“頭痛”范疇,頭竅為其病位,其主要發(fā)病機制為陰虛陽亢,致使氣血失衡以及火、虛、風等病理因素的發(fā)生[12]?!饵S帝內(nèi)經(jīng)》中記載“諸風掉眩,皆屬于肝”“腎虛則頭重高搖,髓海不足則腦轉耳鳴”,認為高血壓與肝、腎等臟器病變有緊密關聯(lián),需將陰陽調節(jié)平衡,使經(jīng)氣運行正常,可有效控制高血壓癥狀,使病情緩解。

    中藥穴位貼敷是一種經(jīng)濟便捷、操作簡單的中醫(yī)外治方法,以經(jīng)絡學說為主要指導方法,將藥物貼敷在主要穴位上,藥物吸收發(fā)揮作用,調節(jié)陰陽使其平衡,進而達到治療疾病的目的。本研究采用吳茱萸、補骨脂、肉桂、淫羊藿、桑寄生、丁香等藥物進行穴位貼敷及臍灸,其中吳茱萸可發(fā)揮止痛散寒、疏肝理氣的功效;補骨脂具有補腎補脾、壯陽健胃的功效;肉桂則有補火助陽、引火歸元之功效,可治腎虛作喘、眩暈目赤等癥;淫羊藿、丁香具有補肝助陽、強健筋骨之功效;桑寄生有補肝腎的功效。且現(xiàn)代醫(yī)學證實,在涌泉穴貼敷吳茱萸等藥可降低細小動脈的外周阻力,在一定程度上可降低血壓[13-15]。本研究結果發(fā)現(xiàn),臍灸聯(lián)合穴位貼敷治療陰性體質高血壓病人的療效明顯,可有效控制其血壓水平。但目前臨床上仍缺乏一種高效預測治療效果的生物學標志物。因此,客觀、準確地評估高血壓病人病情,對指導早期合理治療、評估預后均有重要意義,也是改善病人預后的關鍵所在。

    高血壓以原發(fā)性多見,具體發(fā)病機制尚未完全闡明,近年來研究報道m(xù)icroRNA與高血壓發(fā)生、發(fā)展密切相關,可能通過影響腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)激活及胰島素抵抗、神經(jīng)、血管等而進行血壓的調控[16]。microRNA屬于一種高度保守及內(nèi)源性的非編碼RNA,一般由19~25個核苷酸構成,經(jīng)阻礙靶基因轉錄后翻譯參與細胞生理及病理過程,如增殖、分化、凋亡及免疫反應、機體代謝等。臨床研究證實,在心肌梗死、糖尿病及腫瘤等諸多病人中,血清microRNA表達呈特異性,可見該指標可成為診治、病情監(jiān)測及判斷預后的一項新型生物標記物[17]。microRNA-92a是一種可以對內(nèi)皮細胞生長、遷徙、凋亡進行控制的microRNA,在體內(nèi)諸多組織器官生長及發(fā)展調控中均具有重要意義,當病人血管內(nèi)皮功能受到損傷時,血漿中microRNA-92a含量明顯上升,缺乏microRNA-92a基因將減弱組織及細胞的增生修復能力[18]。本研究中,血清microRNA-92a、WBC、Hcy水平比較,D組>C組>B組>A組,且均與血壓水平呈正相關,進一步繪制ROC曲線進行預測價值分析,結果發(fā)現(xiàn),microRNA-92a的AUC>0.7,而WBC、Hcy的AUC分別為0.572,0.668,可見,相比WBC、Hcy,microRNA-92a預測血壓控制水平的價值理想,對指導高血壓病人病情評估、臨床治療等均有較高的應用價值。microRNA-92a與高血壓的作用機制體現(xiàn)在以下幾點:①microRNA-92a與激素。高血壓發(fā)病的經(jīng)典途徑為RAAS的激活,而microRNA-92a可經(jīng)諸多途徑對血壓水平產(chǎn)生間接或直接影響,且與RAAS的過度激活相關[19]。②microRNA-92a與血管。在高血壓的發(fā)生、發(fā)展過程中,血管平滑肌的遷移擴散及不同表型均發(fā)揮重要作用,而microRNA-92a有助于降低血管平滑肌的遷移及增殖。體內(nèi)及體外研究發(fā)現(xiàn),在血管系統(tǒng)及內(nèi)皮細胞中,microRNA-92a呈高度表達,可損傷血管生成[20]。胎肝激酶-1、血管性血友病因子及內(nèi)皮型一氧化氮合酶等均為microRNA-92a的靶基因,其可通過對上述靶基因進行靶向調節(jié),進而影響內(nèi)皮細胞功能。此外,高濃度葡萄糖、血管緊張素Ⅱ等均可增加microRNA-92a的表達,其通過作用于靶基因,進而激活內(nèi)皮細胞炎癥小體,加重內(nèi)皮細胞炎癥反應,促進動脈粥樣硬化病變的發(fā)展[21]。

    綜上所述,血清microRNA-92a、WBC、Hcy水平與臍灸聯(lián)合穴位貼敷治療后陰性體質高血壓病人的血壓控制水平密切相關,其中microRNA-92a用于臨床評估治療效果的準確度較高,可考慮將其作為療效評估的血清標志物。

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