痰液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)對(duì)下呼吸道感染用藥的指導(dǎo)作用

韓志梅

下呼吸道感染是常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)疾病，由于近年來(lái)抗菌藥物的廣泛使用，導(dǎo)致病原菌耐藥性逐漸上升，而隨著病原菌的不斷變遷，既往經(jīng)驗(yàn)用藥局限性逐漸凸顯，在影響治療效果的同時(shí)會(huì)進(jìn)一步增加耐藥性，不利于臨床治療。相關(guān)研究指出，通過(guò)痰液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)可分析主要病原菌分布及對(duì)抗生素敏感度，有助于臨床合理選擇抗生素[1]。為分析本地區(qū)下呼吸道感染老年患者主要病原菌構(gòu)成及耐藥性，本研究收集患者痰液標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，詳情如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2018年10月至2020年4月下呼吸道感染老年患者372例，其中男性201例，女性171例；年齡60～72歲，平均(66.03±2.75)歲。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn) ①納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)檢查確診為下呼吸道感染；痰液培養(yǎng)標(biāo)本未受污染；對(duì)本研究知情、簽署同意書(shū)。②排除標(biāo)準(zhǔn)：近期經(jīng)抗感染治療；標(biāo)本采集、培養(yǎng)過(guò)程出現(xiàn)交叉感染；合并其他呼吸系統(tǒng)疾病或其他慢性感染性疾病。

1.3 方法 標(biāo)本采集：清晨取樣，鹽水漱口后用力咳出，注意避免受上呼吸道菌群污染，將樣本置于無(wú)菌盒，30min內(nèi)送檢。標(biāo)本合格標(biāo)準(zhǔn)：白細(xì)胞/上皮細(xì)胞>2.5。分離鑒定：將標(biāo)本接種于嗜血巧克力平板、麥康凱平板、血瓊脂平板，置入孵育箱進(jìn)行培養(yǎng)，溫度設(shè)置36℃，孵育18～24h后，再對(duì)分離出的致病菌進(jìn)行涂片革蘭染色和分純培養(yǎng)，孵育完成后進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)采用MIC法，配置好0.5麥?zhǔn)媳葷釢舛染?，采用VITEK2 COMPACT 60全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)進(jìn)行病原菌鑒定及藥敏試驗(yàn)。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922，腸球菌ATCC29212，金黃色葡萄球菌ATCC29213，銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.4 觀察指標(biāo) ①統(tǒng)計(jì)痰液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果，分析主要病原菌構(gòu)成。②分析藥敏試驗(yàn)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)主要革蘭陰性菌及主要革蘭陽(yáng)性菌耐藥性。

2.結(jié)果

2.1 主要致病菌構(gòu)成 372例患者共分離致病菌435株，其中革蘭陰性菌256株，占比58.85%，以肺炎克雷伯菌(24.14%)、大腸埃希菌(15.86%)、銅綠假單胞菌(11.72%)為主；革蘭陽(yáng)性菌109株，占比25.06%，以金黃色葡萄球菌(13.10%)、凝固酶陰性葡萄球菌(8.05%)為主；真菌70株，占比16.09%，主要為白色假絲酵母菌(14.71%)，見(jiàn)表1。

表1 主要致病菌構(gòu)成

2.2 主要革蘭陰性菌耐藥性 肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等主要革蘭陰性菌對(duì)亞胺培南耐藥性較低，見(jiàn)表2。

表2 主要革蘭陰性菌耐藥性

2.3 主要革蘭陽(yáng)性菌耐藥性 金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌等主要革蘭陽(yáng)性菌對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥性較低，見(jiàn)表3。

表3 主要革蘭陽(yáng)性菌耐藥性

3.討論

呼吸道是人體與外界相通的重要組織，其中咽喉、鼻腔等上呼吸道組織中存在正常菌群，一般情況下呼吸道為無(wú)菌狀態(tài)，但當(dāng)人體免疫功能下降后易受病原菌入侵發(fā)生感染，通過(guò)準(zhǔn)確診斷并合理分析對(duì)臨床用藥有指導(dǎo)作用。

痰液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)是呼吸道感染治療的重要方案，可為主治醫(yī)師提供治療依據(jù)。本研究痰液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示，372例患者共分離致病菌435株，其中革蘭陰性菌256株，占比58.85%，以肺炎克雷伯菌(24.14%)、大腸埃希菌(15.86%)、銅綠假單胞菌(11.72%)為主；革蘭陽(yáng)性菌109株，占比25.06%，以金黃色葡萄球菌(13.10%)、凝固酶陰性葡萄球菌(8.05%)為主；真菌70株，占比16.09%。與相關(guān)研究[2，3]存在一定出入，其原因在于不同地區(qū)、不同時(shí)期患者病原菌存在差異，進(jìn)一步說(shuō)明實(shí)施痰液標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)的必要性。

藥敏試驗(yàn)是分析病原菌對(duì)不同抗生素耐藥性及敏感性的主要方式，可避免由于經(jīng)驗(yàn)藥用藥造成抗生素濫用，而造成耐藥性上升。岑敏等[4]研究指出，不同年齡小兒感染率、細(xì)菌耐藥性均存在明顯差異。李英等[5]進(jìn)一步指出，2013年至2015年小兒下呼吸道感染主要致病菌與既往存在明顯差異，主要致病菌對(duì)抗生素敏感度有變遷趨勢(shì)。因此，為進(jìn)一步明確本地區(qū)下呼吸道感染患者主要病原菌耐藥性，本研究對(duì)患者進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果顯示主要革蘭陰性菌對(duì)亞胺培南耐藥性較低，主要革蘭陽(yáng)性菌對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥性較低，提示對(duì)以革蘭陰性菌感染為主的患者可選擇亞胺培南為經(jīng)驗(yàn)用藥，對(duì)以革蘭陽(yáng)性菌感染為主的患者可選擇萬(wàn)古霉素作為經(jīng)驗(yàn)用藥。肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等主要革蘭陰性菌對(duì)頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢吡肟、頭孢噻肟等頭孢類抗生素均有較高耐藥性，原因可能為臨床第二代、第三代頭孢菌素使用廣泛，甚至存在濫用現(xiàn)象，染色體或細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶，導(dǎo)致主要病原菌對(duì)新一代內(nèi)酰胺類抗生素存在廣泛耐藥性。而存在超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的菌株對(duì)內(nèi)酰胺類抗生素敏感性均較低，包括氨曲南、青霉素等[6]。肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南耐藥性較低，提示革蘭陰性菌對(duì)亞胺培南均有較高敏感度。李怡等[7]在分析2012年至2016年革蘭陰性菌耐藥性分析時(shí)指出，大腸埃希菌、腸桿菌、肺炎克雷伯菌均對(duì)亞胺培南具有較低耐藥率，這與本研究結(jié)果一致。本研究中全部革蘭陽(yáng)性菌均對(duì)萬(wàn)古霉素?zé)o耐藥性，因?yàn)槿f(wàn)古霉素可有效抑制病原菌細(xì)胞壁及蛋白質(zhì)合成，降低細(xì)胞膜通透性，但同時(shí)需注意，萬(wàn)古霉素不良反應(yīng)較多，臨床使用時(shí)不應(yīng)作為首選，在其他抗生素效果不佳時(shí)應(yīng)用既可降低對(duì)人體損害，又能避免萬(wàn)古霉素耐藥性上升。有研究指出，萬(wàn)古霉素應(yīng)用于革蘭陽(yáng)性菌為主的感染性疾病有確切效果，但治療安全性與替考拉寧相比較差[8]。因此，臨床應(yīng)用抗生素時(shí)應(yīng)充分考慮患者實(shí)際情況、耐受程度、不良反應(yīng)等多種因素，及時(shí)檢測(cè)血藥濃度，提高用藥安全性。

綜上，下呼吸道感染患者主要致病菌構(gòu)成為以肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等為主的革蘭陰性菌及以金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌為主的革蘭陽(yáng)性菌，通過(guò)藥敏試驗(yàn)可分析主要病原菌耐藥性，對(duì)革蘭陰性菌感染患者可選擇亞胺培南，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌感染患者可在考慮用藥安全性的基礎(chǔ)上選擇萬(wàn)古霉素。