進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查在診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的價(jià)值

陳德喬

（重慶市萬(wàn)州區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 404000）

非霍奇金淋巴瘤是一種發(fā)病率較高的血液系統(tǒng)惡性腫瘤。該病患者的淋巴細(xì)胞在分化的過程中會(huì)發(fā)生克隆性增生。非霍奇金淋巴瘤患者的中位年齡為50 歲左右。該病患者的淋巴瘤細(xì)胞侵犯其骨髓的幾率高達(dá)30% ～50%。不同類型的非霍奇金淋巴瘤患者骨髓侵犯的發(fā)生率存在較大的差異。該病患者的淋巴瘤細(xì)胞是否侵犯其骨髓是對(duì)其病情進(jìn)行分期的重要指標(biāo)。準(zhǔn)確地診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者的病情有助于臨床醫(yī)生為其制定有針對(duì)性的治療方案。對(duì)該病患者進(jìn)行骨髓活檢是目前臨床上確診其病情最準(zhǔn)確的方法。但對(duì)非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進(jìn)行骨髓活檢的操作復(fù)雜。對(duì)該病患者進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查及流式細(xì)胞術(shù)檢查也能觀察到其骨髓內(nèi)細(xì)胞的情況[1]。本文主要是探討進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查在診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對(duì)象為重慶市萬(wàn)州區(qū)第一人民醫(yī)院收治的30 例非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者。該醫(yī)院收治這些患者的時(shí)間為2019 年1 月至2020 年1 月。在這些患者中，有男性17 例，占比為56.67%；有女性13 例，占比為43.33%；其中年齡最小的患者34 歲，年齡最大的患者79 歲，其平均年齡為（56.48±18.16）歲。這些患者均對(duì)本次研究知情，同意參與本次研究。

1.2 方法

對(duì)這些患者均進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢查，方法是：對(duì)患者進(jìn)行骨髓穿刺，采集其3 ～5 ml 的骨髓液，并使用乙二胺四乙酸二鉀進(jìn)行抗凝。對(duì)骨髓液進(jìn)行離心、洗滌等處理后，放入6 色流式細(xì)胞儀。使用直接免疫標(biāo)記法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫分型。使用CD45/ 側(cè)向角光散射設(shè)門法圈定淋巴細(xì)胞。若患者骨髓液中的細(xì)胞存在以下任意一種狀態(tài)，即可判定其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯：1）B 淋巴細(xì)胞呈輕鏈限制性表達(dá)狀態(tài)。2）Kappa 或Lanbda 表型缺失。3）B 淋巴細(xì)胞群表型異常。4）CD56 和CD16 雙陽(yáng)性細(xì)胞的比例升高，或CD56、CD16 的某一標(biāo)記缺失。5）T 淋巴細(xì)胞表型異常[2]。對(duì)這些患者均進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，方法是：對(duì)患者進(jìn)行骨髓穿刺，采集其0.2 ml 的骨髓液。制作骨髓涂片。在涂片自然干燥后，用瑞氏染色液對(duì)涂片進(jìn)行染色。用顯微鏡觀察涂片中有核細(xì)胞的數(shù)量。在患者的骨髓有核細(xì)胞中，若淋巴細(xì)胞占比≥30%，可確診其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。在患者的骨髓有核細(xì)胞中，若淋巴細(xì)胞占比＜30%，但其骨髓液中存在異常淋巴細(xì)胞或母細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞，也可確診其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯[3]。對(duì)這些患者均進(jìn)行骨髓活檢，方法是：采集患者一塊1 cm長(zhǎng)的圓柱形骨髓組織標(biāo)本。對(duì)標(biāo)本進(jìn)行脫鈣處理。將標(biāo)本切成薄片。用蘇木精- 伊紅染色法對(duì)切片進(jìn)行染色。在油鏡下選取200 個(gè)有核細(xì)胞進(jìn)行觀察。若患者的骨髓組織標(biāo)本中存在淋巴瘤細(xì)胞，可確診其病情為非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。所有檢查均由同一檢驗(yàn)師完成。

1.3 觀察指標(biāo)

將這些患者進(jìn)行骨髓活檢的結(jié)果作為確診其病情的標(biāo)準(zhǔn)。觀察根據(jù)這些患者進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢查結(jié)果及骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的結(jié)果診斷其病情的準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

將本次研究中的數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（± s）表示，采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗(yàn)。以P ＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)這些患者進(jìn)行骨髓活檢的結(jié)果顯示，所有患者均發(fā)生非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。根據(jù)這些患者進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢查或骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的結(jié)果診斷其病情的準(zhǔn)確率均較高。根據(jù)這些患者進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢查的結(jié)果診斷其病情的準(zhǔn)確率與根據(jù)其進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的結(jié)果診斷其病情的準(zhǔn)確率相比，P ＞0.05。詳見表1。

表1 這些患者進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢查及骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的結(jié)果

3 討論

非霍奇金淋巴瘤是一種惡性淋巴細(xì)胞增殖性腫瘤。該病患者發(fā)病的部位主要是其淋巴結(jié)、脾及胸腺等淋巴器官。導(dǎo)致非霍奇金淋巴瘤發(fā)生的因素主要是患者存在免疫功能異常、發(fā)生病毒或細(xì)菌感染、接觸有害的化學(xué)物質(zhì)、遺傳因素等。非霍奇金淋巴瘤患者的臨床表現(xiàn)包括發(fā)熱、盜汗、消瘦、皮膚瘙癢、腹部有飽脹感、腹痛、消化不良、消化道出血、淋巴結(jié)腫大、鼻塞及局部黏膜潰瘍等。非霍奇金淋巴瘤患者的病理類型不同、受侵犯的部位不同或受侵犯的范圍不同，其臨床癥狀會(huì)存在一定的差異。目前臨床上比較常見的是B 淋巴細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤。但國(guó)外的研究結(jié)果證實(shí)，亞洲居民T 淋巴細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤的發(fā)生率高于西方國(guó)家居民。盡早確診非霍奇金淋巴瘤患者的病情有利于臨床醫(yī)生盡早對(duì)其進(jìn)行有針對(duì)性的治療。該病患者的淋巴瘤細(xì)胞易侵犯其骨髓。非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤細(xì)胞是否侵犯其骨髓是對(duì)其病情進(jìn)行分期的重要指標(biāo)。若非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤細(xì)胞侵犯其骨髓，則可將其病情判定為Ⅳ期非霍奇金淋巴瘤。Ⅳ期非霍奇金淋巴瘤患者的預(yù)后較差。對(duì)非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進(jìn)行骨髓活檢可全面了解其骨髓組織的結(jié)構(gòu)、骨髓細(xì)胞的形態(tài)等，從而比較準(zhǔn)確地診斷其病情。但進(jìn)行骨髓活檢需要采集患者一塊骨髓組織標(biāo)本，對(duì)其造成的創(chuàng)傷比較大，對(duì)檢驗(yàn)師和檢驗(yàn)設(shè)備的要求較高，耗時(shí)較長(zhǎng)。因此，該方法在臨床上的推廣受到一定的限制。

近年來，隨著臨床檢驗(yàn)技術(shù)的不斷進(jìn)步，流式細(xì)胞術(shù)檢查逐漸被用于臨床診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯。流式細(xì)胞術(shù)檢查是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量檢查。流式細(xì)胞術(shù)檢查是目前臨床上最先進(jìn)的細(xì)胞定量檢查技術(shù)之一。進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢查僅需要采集患者少量的骨髓液，對(duì)其造成的創(chuàng)傷較小，檢查的速度快，可進(jìn)行多參數(shù)檢測(cè)，從而識(shí)別其骨髓液中的異常細(xì)胞，并確定異常細(xì)胞的細(xì)胞周期時(shí)相[4]。但流式細(xì)胞術(shù)無法完全替代骨髓活檢。

骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查又被稱為骨髓象檢查，是指使用顯微鏡或自動(dòng)化儀器對(duì)骨髓中細(xì)胞的形態(tài)及數(shù)量進(jìn)行的檢查。骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查可用于診斷多種疾病。非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞在骨髓中的形態(tài)呈高度特異性，且不同病理類型非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞的特征差異非常大。臨床醫(yī)生在對(duì)非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查時(shí)，應(yīng)充分把握各種非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞的特點(diǎn)，從而準(zhǔn)確地診斷其病情。與進(jìn)行骨髓活檢相比，進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查操作簡(jiǎn)單，取材方便，可清晰地觀察到高特異性非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞的形態(tài)特征[5]。非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞的體積比骨髓中的原始紅細(xì)胞或原漿細(xì)胞大，呈深藍(lán)色，含有嗜天青顆粒，核染色質(zhì)呈細(xì)網(wǎng)狀或粗網(wǎng)狀，核仁大[6-7]。但骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查仍然無法完全替代骨髓活檢。對(duì)非霍奇金淋巴瘤患者進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查時(shí)，其檢查結(jié)果可能呈假陽(yáng)性。這主要是因?yàn)?，濾泡細(xì)胞淋巴瘤及套細(xì)胞淋巴瘤等非霍奇金淋巴瘤患者的淋巴瘤細(xì)胞特異性較低。因此臨床醫(yī)生在對(duì)非霍奇金淋巴瘤患者進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查后，還應(yīng)結(jié)合其臨床癥狀、進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢查的結(jié)果等診斷其病情[8]。

綜上可見，進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查可作為輔助診斷非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯的方法之一。對(duì)非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯患者進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查可觀察到其淋巴瘤細(xì)胞的形態(tài)，有助于臨床醫(yī)生為其制定有針對(duì)性的治療方案。