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    甲狀腺癌組織中抗凋亡基因-1蛋白的表達(dá)水平及其臨床病理意義

    2021-12-03 23:22:32唐錦玲
    當(dāng)代醫(yī)藥論叢 2021年6期
    關(guān)鍵詞:陽性細(xì)胞甲狀腺癌標(biāo)本

    梁 靚,唐錦玲

    (江蘇省人民醫(yī)院病理科,江蘇 南京 210000)

    甲狀腺癌是指起源于甲狀腺濾泡上皮的惡性腫瘤。早期甲狀腺癌患者多無明顯癥狀,中晚期甲狀腺癌患者隨著腫瘤體積的增大會逐漸出現(xiàn)呼吸困難、吞咽困難、聲音嘶啞、心動過速等癥狀[1-2]。近年來的大量研究顯示,惡性腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移不僅與腫瘤細(xì)胞的增殖、分化有關(guān),還與腫瘤細(xì)胞凋亡規(guī)律失常有關(guān)[3-5]。抗凋亡基因-1(BAG-1)是一個(gè)新近發(fā)現(xiàn)的抗凋亡基因。有報(bào)道稱,BAG-1 蛋白可通過多種途徑參與腫瘤細(xì)胞的凋亡抑制,其表達(dá)水平與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展具有一定的相關(guān)性。國內(nèi)的研究顯示,BAG-1 蛋白在消化道腫瘤、淋巴造血系腫瘤等惡性腫瘤患者體內(nèi)的表達(dá)水平會明顯升高[6-7]。本文主要是研究甲狀腺癌組織中BAG-1 蛋白的表達(dá)水平及其臨床病理意義。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    將2018 年1 月至2020 年1 月期間我院病理科收集的69 份甲狀腺癌組織病理標(biāo)本、34 份癌旁甲狀腺組織標(biāo)本、35 份甲狀腺腺瘤組織標(biāo)本和30 份正常甲狀腺組織標(biāo)本作為研究對象。將其中69 份甲狀腺癌組織病理標(biāo)本作為研究組,將其中34 份癌旁甲狀腺組織標(biāo)本作為對照A 組,將其中35 份甲狀腺腺瘤組織標(biāo)本作為對照B 組,將其中30 份正常甲狀腺組織標(biāo)本作為對照C 組。研究組69 份甲狀腺組織標(biāo)本取自69 例患者〔年齡為45 ~63 歲,平均年齡為(52.78±3.78)歲〕;其中,取自男性患者和女性患者的甲狀腺組織標(biāo)本分別有31 份和38 份;病理分期為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期的甲狀腺組織標(biāo)本分別有27 份、21 份、16份和5 份;組織學(xué)分型為分化型癌和未分化型癌的甲狀腺組織標(biāo)本分別有53 份和16 份;發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺組織標(biāo)本分別有18 份和51 份。對照A 組34 份甲狀腺組織標(biāo)本取自34 例患者〔年齡為45 ~63歲,平均年齡為(52.54±4.09)歲〕;其中,取自男性患者和女性患者的甲狀腺組織標(biāo)本各有17 份。對照B 組35 份甲狀腺組織標(biāo)本取自35 例患者〔年齡為46 ~64 歲,平均年齡為(53.78±4.11)歲〕;其中,取自男性患者和女性患者的甲狀腺組織標(biāo)本分別有18 份和17 份。對照C 組30 份甲狀腺組織標(biāo)本取自30 例患者,其年齡為44 ~62 歲,平均年齡為(52.65±3.98)歲;其中,取自男性患者和女性患者的甲狀腺組織標(biāo)本分別有16 份和14 份。四組甲狀腺組織標(biāo)本取自患者的年齡及性別相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。

    1.2 方法

    采用免疫組化法檢測四組甲狀腺組織標(biāo)本中BAG-1 蛋白的表達(dá)水平,比較四組甲狀腺組織標(biāo)本中BAG-1 蛋白的陽性表達(dá)率,并采用Pearson 相關(guān)性分析法分析BAG-1基因的表達(dá)水平與甲狀腺癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性。對甲狀腺組織標(biāo)本中BAG-1 蛋白的表達(dá)水平進(jìn)行檢測的方法是:所用試劑為DAB 顯色試劑盒和羊抗兔SP 免疫組化染色試劑盒,用BAG-1 兔抗人多克隆抗體作為一抗,用已知BAG-1 呈陽性的扁桃體作為陽性對照。用10% 的福爾馬林溶液對甲狀腺組織標(biāo)本進(jìn)行固定,用石蠟對標(biāo)本進(jìn)行包埋,然后將其連續(xù)切成5 μm 的薄片。在60℃的溫度下對切面進(jìn)行2 h 的炙烤,儲存?zhèn)溆谩⑶衅撓炛了?7℃下用3% 的過氧化氫(H202)處理15 min,用微波修復(fù)抗原,加入山羊血清封閉。在切片中加入一抗,置于4℃的環(huán)境中過夜。在切片中加入用生物素標(biāo)記的二抗,用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)進(jìn)行顯色,用蘇木精復(fù)染后封片。以磷酸鹽緩沖液(PHS)代替一抗作為陰性空白對照。結(jié)果判斷:用400 倍的顯微鏡隨機(jī)觀察每張病理切片的10 個(gè)視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)200 個(gè)細(xì)胞,胞核內(nèi)或胞漿出現(xiàn)黃色顆粒且顏色明顯比背景染色深為陽性細(xì)胞,取10 個(gè)視野中陽性細(xì)胞的平均值作為該切片的陽性細(xì)胞數(shù),計(jì)算陽性細(xì)胞的比份,陽性細(xì)胞的比份超過5%表示BAG-1 蛋白呈陽性表達(dá)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    用SPSS 13.0 軟件處理本研究中的數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料用%表示,用χ2 檢驗(yàn),計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(± s)表示,用t 檢驗(yàn),P <0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 比較四組甲狀腺組織標(biāo)本中BAG-1 蛋白的陽性表達(dá)率

    研究組甲狀腺組織標(biāo)本中BAG-1 蛋白的陽性表達(dá)率高于對照A 組、對照B 組與對照C 組甲狀腺組織標(biāo)本,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)。詳見表1。

    2.2 甲狀腺癌組織中BAG-1 基因的表達(dá)水平與甲狀腺癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性

    在這69 份甲狀腺癌組織標(biāo)本中,未分化型甲狀腺癌組織標(biāo)本中BAG-1 的陽性表達(dá)率高于分化型甲狀腺癌組織標(biāo)本,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織標(biāo)本中BAG-1 的陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織標(biāo)本,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05);病理分期為Ⅲ期、Ⅳ期的甲狀腺癌組織標(biāo)本中BAG-1 的陽性表達(dá)率高于病理分期為Ⅰ期、Ⅱ期的甲狀腺癌組織標(biāo)本,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)。詳見表2。通過進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析可知,甲狀腺癌組織中BAG-1 蛋白的表達(dá)水平與甲狀腺癌的組織學(xué)分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與病理分期呈顯著正相關(guān)(P <0.05)。

    3 討論

    甲狀腺癌在臨床上較為常見。此病患者約占惡性腫瘤患者總數(shù)的1%。近年來我國甲狀腺癌的發(fā)病率以每年遞增20% 左右的速度持續(xù)增長[8]。有研究發(fā)現(xiàn),甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展不僅取決于腫瘤細(xì)胞的增殖,還與腫瘤細(xì)胞的凋亡有關(guān)[9]。BAG-1 是臨床上在對B 淋巴細(xì)胞瘤-2 基因(Bcl-2)結(jié)合的各類蛋白進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)的另一種凋亡抑制基因。Emmanouil 等[9]研究指出,人表皮生長因子受體2(HER2)呈陽性的乳腺癌患者體內(nèi)BAG-1 蛋白的表達(dá)水平顯著升高。這說明,BAG-1 蛋白的異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。BAG-1 蛋白是一個(gè)與細(xì)胞凋亡相關(guān)的多功能蛋白,有多種亞型,可通過與大量的細(xì)胞靶點(diǎn)相互作用來實(shí)現(xiàn)抗細(xì)胞凋亡的作用[10]。BAG-1 蛋白在與Bcl-2 結(jié)合后,可共同起到抑制細(xì)胞凋亡的作用。BAG-1 蛋白在與多種生長因子受體結(jié)合后,可促進(jìn)生長因子的表達(dá),提高細(xì)胞的增殖能力。Kizilboga 等[11]研究指出,若BAG-1 蛋白過度表達(dá),會抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。本研究的結(jié)果顯示,研究組甲狀腺組織標(biāo)本中BAG-1蛋白的陽性表達(dá)率高于其他三組甲狀腺組織標(biāo)本。這表明,BAG-1 蛋白在甲狀腺癌組織中存在高表達(dá)的現(xiàn)象,BAG-1蛋白與甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。BAG-1 蛋白表達(dá)水平的升高可增強(qiáng)與細(xì)胞靶點(diǎn)的相互作用,抑制癌細(xì)胞凋亡,導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖/ 凋亡的平衡遭到破壞,使癌細(xì)胞異常存活,進(jìn)而累積形成優(yōu)勢克隆,促進(jìn)甲狀腺癌的發(fā)展。本研究的結(jié)果顯示,惡性程度高的未分化型甲狀腺癌組織標(biāo)本中BAG-1 的陽性表達(dá)率高于惡性程度低的分化型甲狀腺癌組織標(biāo)本,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織標(biāo)本中BAG-1的陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌組織標(biāo)本,病理分期為Ⅲ期、Ⅳ期的甲狀腺癌組織標(biāo)本中BAG-1 的陽性表達(dá)率高于病理分期為Ⅰ期、Ⅱ期的甲狀腺癌組織標(biāo)本。這說明,甲狀腺癌組織中BAG-1 蛋白的表達(dá)水平與甲狀腺癌的臨床病理參數(shù)呈正相關(guān)

    綜上所述,甲狀腺癌組織中BAG-1 蛋白的表達(dá)水平較高,且其表達(dá)水平與甲狀腺癌的臨床病理參數(shù)呈顯著正相關(guān)。甲狀腺癌組織中BAG-1 蛋白的表達(dá)水平可作為反映甲狀腺癌惡性程度和預(yù)后的重要參數(shù)。

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