網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢測進(jìn)展及其參數(shù)在臨床疾病中的應(yīng)用

王學(xué)菊

天津市北辰醫(yī)院 （天津 300400）

網(wǎng)織紅細(xì)胞（reticulocyte，RET）檢測能充分反映骨髓紅系造血水平。一般紅細(xì)胞形成過程中，晚幼紅細(xì)胞的增殖形成需分裂3～4次，個(gè)數(shù)轉(zhuǎn)為6～8個(gè)，且紅細(xì)胞不再分裂，排除細(xì)胞核后形成RET[1]。正常情況下，骨髓僅是由RET、成熟紅細(xì)胞釋放并進(jìn)入血液內(nèi)，對(duì)疾病的評(píng)估、預(yù)后起到參考作用，人工顯微鏡法是RET 的主要檢測方法，但檢測指標(biāo)單一、穩(wěn)定性差、耗時(shí)長，影響疾病判斷準(zhǔn)確度。近年來，醫(yī)學(xué)領(lǐng)域檢測技術(shù)明顯提高，使RET 檢測水平極大提高。另外，各種檢測儀器的推陳出新，使多種檢測項(xiàng)目的各類型參數(shù)數(shù)量得以增加。目前，RET 項(xiàng)目參數(shù)主要有RET 絕對(duì)值（RET#）、RET 百分比（reticulocyte percentage，RET%）、未成熟RET 比率（immature reticulocyte fraction，IRF）、 低 熒 光 強(qiáng) 度RET 比 率（low fluorescent reticulocyte，LFR）、中熒光強(qiáng)度RET 比率（middle fluorescent reticulocyte，MFR） 以 及 高 熒 光 強(qiáng) 度RET 比 率（high fluorescent reticulocyte，HFR）[2]。不同參數(shù)是否起到不同作用需進(jìn)行闡明。現(xiàn)本研究對(duì)RET 的檢測方法以及其參數(shù)應(yīng)用情況進(jìn)行綜述，旨在為疾病診斷、療效評(píng)定提供參考。

1 RET 檢測技術(shù)

1.1 手工計(jì)數(shù)

手工計(jì)數(shù)分為玻片法及試管法，但玻片法的準(zhǔn)確度受血液水分揮發(fā)、染色時(shí)間等主觀因素影響，故被試管法替代；試管法易掌握、重復(fù)性高，但仍有諸多因素影響。Miller 窺盤法是早期應(yīng)用的手工計(jì)數(shù)法，檢測RET 的主要標(biāo)準(zhǔn)性方法，由國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦[3]；該方法是將具備1:9比例正方形計(jì)數(shù)方格Miller 窺盤放置在顯微鏡目鏡內(nèi)，計(jì)數(shù)小格紅細(xì)胞數(shù)，即可明確總體數(shù)目。但早期手工計(jì)數(shù)檢測準(zhǔn)確度受檢驗(yàn)人員經(jīng)驗(yàn)的影響，且操作耗時(shí)長，準(zhǔn)確度、重復(fù)性有一定局限性，故逐漸被取代。

1.2 自動(dòng)分析儀

血細(xì)胞分析儀具備耗時(shí)短、測定結(jié)果準(zhǔn)確度高、自動(dòng)化強(qiáng)等優(yōu)勢，逐漸用于各級(jí)醫(yī)院血液常規(guī)檢查中。流式細(xì)胞儀較傳統(tǒng)檢測方法更加簡便，靈敏度、特異度均較高，能夠直觀反映紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，檢測病變細(xì)胞表面抗原表達(dá)。汪梅花和趙康[4]證實(shí)了流式細(xì)胞術(shù)可準(zhǔn)確分析急性白血病患者的免疫表型。徐芬等[5]發(fā)現(xiàn)流式細(xì)胞術(shù)檢測RET 參數(shù)，有助于判斷紅細(xì)胞的活動(dòng)度，了解其參數(shù)在新生兒溶血病自然病程中的變化規(guī)律。國內(nèi)血細(xì)胞分析儀邁瑞6800血細(xì)胞分析儀，采用流式細(xì)胞法及激光射頻法進(jìn)行RET 的檢測。隨后美國拜爾公司推出多功能紅細(xì)胞分析儀，利用容量、電導(dǎo)、光散射以及電阻抗、熒光分析儀技術(shù)等，測定結(jié)果準(zhǔn)確、自動(dòng)化強(qiáng)，逐漸取代手工計(jì)數(shù)。

2 RET 參數(shù)分類

隨著全自動(dòng)分析儀的廣泛應(yīng)用，RET 相關(guān)參數(shù)不斷增加，且能精確得到各種參數(shù)，如RET#、RET%、IRF、LFR、MFR、HFR 等，檢測熒光越高，RET 含核酸量越高，細(xì)胞幼稚程度越高；IRF是反映幼稚細(xì)胞占RET總數(shù)的比例，是MFR 與HFR 之和[6]。通常健康者外周血內(nèi)主要為LFR，若骨髓刺激，未成熟細(xì)胞進(jìn)入外周血，使相關(guān)參數(shù)發(fā)生改變。因此，RET 參數(shù)對(duì)腎衰竭、貧血、肝臟疾病等有一定參考意義。

3 疾病應(yīng)用

3.1 缺鐵性貧血

缺鐵性貧血主要表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性貧血，骨髓鐵染色、血清鐵參數(shù)等應(yīng)用各具優(yōu)劣勢，前者有一定創(chuàng)傷性，后者評(píng)價(jià)紅細(xì)胞生成有一定局限性、靈敏度差。李綿綿等[7]表明IRF、RET 生成指數(shù)（reticulocyte production index，RPI）可更好地評(píng)價(jià)骨髓造血功能。朱瓊等[8]表明缺鐵性貧血患兒REF%高于健康兒童，且動(dòng)態(tài)評(píng)估紅細(xì)胞參數(shù)可早期診斷兒童缺鐵性貧血，判斷補(bǔ)鐵效果及兒童生長發(fā)育。因此，就國內(nèi)RET 參數(shù)判定而言，IRF 可作為早期檢測缺鐵性貧血的重要指標(biāo)。

3.2 溶血性貧血

溶血性貧血主要是由紅細(xì)胞存活時(shí)間縮短，且骨髓代償功能下降所致。紅細(xì)胞膜缺陷、血紅細(xì)胞異常及酶缺陷等內(nèi)在因素以及免疫性、非免疫性等外在因素均可造成紅細(xì)胞壽命縮短[9]。韓啟福等[10]表明溶血性貧血患者RET%、RET#、IRF、MFR 和HFR 明顯高于健康對(duì)照人群，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白水平、LFR 均低于健康對(duì)照人群。Li WW 等[11]報(bào)道不同貧血之間RET%存在差異，不同溶血特征的綜合評(píng)估簡單、實(shí)用、有效。通常，溶血性貧血患者促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）應(yīng)激性增加，促使骨髓造血系統(tǒng)不斷釋放REF，故而會(huì)導(dǎo)致HFR、MFR 及IRF 表達(dá)增加。黎海江等[12]對(duì)自身免疫性溶血性貧血患者采用血液置換及洗滌紅細(xì)胞輸注，治療后RET 相關(guān)參數(shù)下降。因此，根據(jù)RET 相關(guān)參數(shù)檢測結(jié)果可用于診斷溶血性貧血，為臨床診斷、治療提供可靠的參考依據(jù)。

3.3 終末期腎病貧血

腎臟是釋放EPO 的重要臟器。終末期腎病或腎移植的患者EPO 釋放量下降，故會(huì)引起貧血，其中部分患者因循環(huán)鐵缺乏，且無法滿足紅系造血，造成功能性缺鐵。徐茂茂和汪秀英[13]的研究表明慢性腎功能不全合并貧血患者LFR 顯著高于非腎病貧血患者，RET#、IFR、MFR 以及HFR 低于非腎病貧血患者。戴學(xué)慶和蔡守兵[14]證實(shí)對(duì)RET各種參數(shù)的測定，能作為診斷、治療腎性貧血的重要指標(biāo)，反映機(jī)體骨髓造血功能，觀察紅系生長狀況。因此，RET參數(shù)可相應(yīng)作為判斷腎性貧血疾病的重要標(biāo)準(zhǔn)。

3.4 惡性腫瘤放化療

目前，惡性腫瘤患者在放化療時(shí)，主要是判定白細(xì)胞計(jì)數(shù)及血小板計(jì)數(shù)，若兩者表達(dá)量下降，則表明骨髓抑制明顯，并可能出現(xiàn)感染、出血風(fēng)險(xiǎn)。張碩[15]的研究表明急性白血病患者化療后RET#、RET%、IRF 以及白細(xì)胞計(jì)數(shù)均等降低，化療第4天開始，IRF 逐漸降低且顯著，化療第7天開始，RET#、RET%水平明顯降低。葉火林等[16]證實(shí)，化療第14天開始，腫瘤患者IRF、RET 表達(dá)下降，且與化療后7 天無明顯差異，化療后21 天開始，IRF 及RET 表達(dá)明顯升高，而且患者化療后白細(xì)胞減少程度與IRF、RET 表達(dá)具有正相關(guān)性。因此，IRF 和RET 表達(dá)可作為評(píng)估腫瘤化療后骨髓造血功能早期恢復(fù)的主要指標(biāo)，并與白細(xì)胞計(jì)數(shù)呈正相關(guān)，有積極的臨床意義。故此根據(jù)RET 參數(shù)變化，較白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)更具應(yīng)用價(jià)值，能準(zhǔn)確評(píng)估骨髓抑制恢復(fù)狀況。

3.5 骨髓移植

骨髓移植前，患者需要先接受放化療破壞機(jī)體病態(tài)的造血功能，隨后輸注大量的造血干細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)造血以及免疫系統(tǒng)重建的目的。黎雯等[17]指出異基因造血干細(xì)胞移植聯(lián)合輸注內(nèi)皮祖細(xì)胞后RET 數(shù)量明顯升高。當(dāng)前，通過RET 及絕對(duì)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)監(jiān)測，可評(píng)估骨髓移植患者造血功能恢復(fù)效果，但多種因素會(huì)影響RET 的釋放，因此在應(yīng)用時(shí)需綜合其他指標(biāo)進(jìn)行判斷。

3.6 肝臟疾病

肝臟是人體造血的重要器官，肝臟病變會(huì)影響機(jī)體正常造血系統(tǒng)的功能，進(jìn)而使紅細(xì)胞異常。另外，肝細(xì)胞破壞會(huì)引起人體營養(yǎng)吸收異常，鐵元素、葉酸等成分吸收不足，使細(xì)胞DNA 合成與成熟功能受阻，合成速度減慢，造成細(xì)胞核無法在短時(shí)間內(nèi)分裂，最后形成巨細(xì)胞貧血或缺鐵性貧血，導(dǎo)致RET 改變[18]。陸國偉等[19]表明肝硬化患者RET 參數(shù)高于健康體檢者，而聯(lián)合凝血功能、肝功能以及RET 參數(shù)，可提高疾病診斷準(zhǔn)確度。魏三舟等[20]提示慢性丙型肝炎病毒感染患者RET 比例、血清EPO 水平高于非貧血患者，證實(shí)丙型肝炎病毒相關(guān)性貧血的發(fā)生與自身免疫相關(guān)。因此，肝臟疾病患者存在RET 參數(shù)改變，但并非屬于特異性指標(biāo)，仍需進(jìn)一步探討，或聯(lián)合其他指標(biāo)檢測。

4 結(jié)論

隨著RET 檢測技術(shù)的完善、全自動(dòng)及多功能血液分析儀的應(yīng)用，使臨床檢測更加準(zhǔn)確、方便，且經(jīng)濟(jì)成本低，受到臨床醫(yī)師的青睞。目前，RET 參數(shù)應(yīng)用日漸廣泛，在貧血性疾病、肝臟疾病、腎臟疾病、腫瘤等疾病的輔助診斷、治療判定及預(yù)后評(píng)估中有積極的應(yīng)用價(jià)值，且較侵入性操作更具優(yōu)勢。可見，隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展使其參數(shù)不斷更新，這將逐漸成為疾病診斷、治療等的新方向。