化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附法診斷乙肝病毒感染的臨床價(jià)值對(duì)比

杜明娟 陳 萍

山東省淄博市張店區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,山東 淄博 255000

乙肝病毒在臨床上擁有較高的感染率，若不及時(shí)采取有效的措施控制，病情發(fā)展會(huì)不斷進(jìn)展成肝硬化、肝炎、肝癌等嚴(yán)重性肝病，威脅患者身體健康與生命安全。近年來(lái)，我國(guó)乙肝的發(fā)病率呈現(xiàn)出有所上升的趨勢(shì)，如何預(yù)防和治療乙肝已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)界亟待解決的重大問(wèn)題。臨床上檢驗(yàn)乙肝病毒感染的血清標(biāo)志物檢測(cè)技術(shù)以化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)(CLIA)與酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)最為常見(jiàn)，本文就二者用于乙肝病毒感染診斷中的價(jià)值展開(kāi)對(duì)比。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧分析我院于2018年1月至2019年12月這段時(shí)間收治的行乙肝病毒血清標(biāo)志物檢驗(yàn)的64例患者臨床資料，男、女分別為38例、26例，年齡23歲～75歲，中位年齡(53.64±5.34)歲。

1.2方法

1.2.1CLIA 儀器與試劑均為深圳新產(chǎn)業(yè)提供的化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑；采集患者晨起空腹肘部靜脈血5.0ml，分別將校準(zhǔn)品、樣本加80微升,熒光素標(biāo)記物加100微升,磁性微球溶液加20微升，混勻，37℃環(huán)境下溫育10分鐘，上磁分離器分離4分鐘，倒去上清；不取掉磁分離器，輕輕地沿試管壁加工作洗液400微升,靜置60秒，倒去上清，將上述步驟重復(fù)2次后再加入發(fā)光標(biāo)記物100微升，混勻，37℃環(huán)境下溫育10分鐘，上磁分離器分離4分鐘，倒去上清。不取掉磁分離器，輕輕地沿試管壁加工作洗液400微升，靜置60秒，倒去上清，將上述步驟重復(fù)2次后放在化學(xué)發(fā)光儀上測(cè)定發(fā)光的強(qiáng)度，整個(gè)過(guò)程嚴(yán)格按照儀器及試劑說(shuō)明書(shū)規(guī)范開(kāi)展。

1.2.2ELISA 采集患者晨起空腹肘部靜脈血5.0ml，離心后取上清液用TEC ANSPECTRA的酶標(biāo)儀檢測(cè)，將試劑和微孔反應(yīng)條在室溫的環(huán)境下放置30min，再將待檢血清樣本加入至微孔反應(yīng)條內(nèi)，用封片將其封鎖處理，再放置為溫度為37℃的水浴箱中，1h后將其取出，去除微孔反應(yīng)條內(nèi)的液體，反復(fù)洗滌五次后，將試劑加入至反應(yīng)條中將其放置在溫度為37℃的水浴箱中，30min后再取出，加入終止液，嚴(yán)格按照儀器和試劑的說(shuō)明書(shū)開(kāi)展[1]。

1.3觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)兩種方法乙肝病毒感染的準(zhǔn)確率以及HBsAg(乙型肝炎表面抗原)、HBsAb(乙型肝炎表面抗體)、HBeAg(乙型肝炎e抗原)、HBeAb(乙型肝炎e抗體)、HBcAb(乙型肝炎核心抗體)檢出率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SPSS21.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，n表示患者例數(shù)，以平均數(shù)和百分?jǐn)?shù)表示計(jì)量資料和計(jì)數(shù)資料，用t和x2值進(jìn)行檢驗(yàn)，當(dāng)P低于0.05時(shí)，表示統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)之間存在顯著差異。

2 結(jié) 果

2.1兩種方法診斷乙肝病毒感染的準(zhǔn)確率 CLIA法檢出乙肝病毒感染共62例，準(zhǔn)確率為96.88%；ELISA法檢出乙肝病毒感染共53例，準(zhǔn)確率為82.81%，兩種方法的準(zhǔn)確率比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2兩種方法陽(yáng)性檢出率對(duì)比 CLIA法檢出HBsAg38例(59.38%)、HBsAb12例(18.75%)、HBeAg22例(34.38%)、HBeAb14例(21.88%)、HBcAb50例(78.13%)；ELISA法檢出HBsAg20例(31.25%)、HBsAb12例(18.75%)、HBeAg14例(21.88%)、HBeAb4例(6.25%)、HBcAb52例(81.25%)CLIA法在HBsAg、HBeAg、HBeAb陽(yáng)性檢出率明顯高于ELISA，且P<0.05，二者在HBsAb、HBcAb陽(yáng)性檢出率方面無(wú)顯著差異(P>0.05)。

3 討 論

乙肝嚴(yán)重威脅人們的身體健康和生命安全，并且伴隨著我國(guó)近年來(lái)乙肝發(fā)病率呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)，乙肝發(fā)生的主要原因是感染乙肝病毒，其屬于嗜肝DNA病毒科，具有耐紫外線、耐低溫、耐熱等特征，治療難度大。臨床上如何預(yù)防和治療乙肝病毒感染已經(jīng)成為社會(huì)各界研究的重大課題。但是無(wú)論采取何種治療手段，其前提均是建立在準(zhǔn)確的診斷結(jié)果基礎(chǔ)上的。

乙肝病毒血清標(biāo)志物作為掌握機(jī)體免疫情況的重要指標(biāo)，其中HBsAg為乙肝患者血清中首先出現(xiàn)的病毒標(biāo)志物，可作為乙肝的早期診斷。通常在感染乙肝病毒后1～2周內(nèi)出現(xiàn)，并且在2～6個(gè)月水平顯著升高。HBsAb則是受到HBsAg的刺激而形成的對(duì)應(yīng)抗體，其能夠和HBsAg進(jìn)行結(jié)合。HBe Ag作為乙肝病毒核心顆粒中一類(lèi)可溶性蛋白質(zhì)，也是乙肝病毒感染的一大重要指標(biāo)，HBeAg的水平反應(yīng)了乙肝病毒復(fù)制的活躍度。當(dāng)HBe Ag 結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)標(biāo)志著患者有較強(qiáng)的傳染性和感染性。HBe Ab是人體感染乙肝病毒后，繼乙肝核心抗體產(chǎn)生而出現(xiàn)的另一抗體，是乙肝病毒感染的又一標(biāo)志物，HBe Ab陽(yáng)性預(yù)示患者的傳染性已顯著或相對(duì)降低，病毒復(fù)制程度已明顯或緩解降低。HBc Ab是一種敏感的血清標(biāo)志物，也是乙型肝炎急性感染的早期標(biāo)志。由此可見(jiàn)，通過(guò)血清標(biāo)志物水平用于判斷乙肝病毒感染情況，臨床上對(duì)上述血清標(biāo)志物檢測(cè)的方法以CLIA和ELISA檢測(cè)最為常見(jiàn)[2]。在本文中，對(duì)二者在乙肝病毒感染中的臨床價(jià)值進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示：CLIA檢出陽(yáng)性率96.88%高于ELISA法82.81%，CLIA法在：HBsAg、HBeAg、HBeAb陽(yáng)性檢出率明顯高于ELISA法，且差異顯著(P<0.05)，提示CLIA診斷價(jià)值更高。與ELISA相比，CLIA法的優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在：(1)CLIA法將化學(xué)發(fā)光技術(shù)和免疫測(cè)定技術(shù)有機(jī)結(jié)合起來(lái)，進(jìn)一步拓寬了檢測(cè)的范圍，提高了檢測(cè)結(jié)果的靈敏度。(2)CLIA法檢測(cè)信號(hào)速率變化比ELISA法更快，充分有效的彌補(bǔ)了ELISA法閾值附近時(shí)的漏診或錯(cuò)檢。(3)CLIA法可以借助微小直徑的磁顆粒來(lái)增加反應(yīng)面積，從而提高檢驗(yàn)的靈敏度。(4)CLIA法用于HBsAg靈敏度的測(cè)定中可以降至0.1ng/mL以下。