馬 娟
山東省平度市東閣動物衛(wèi)生與產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督站,山東平度 266700
牛結(jié)核病的病原為牛型結(jié)核分枝桿菌,該病在我國被列為二類動物疫病,是一種人畜共患的慢性消耗性疾病。從發(fā)現(xiàn)結(jié)核病的病原至今已有130 多年的歷史,經(jīng)過多年的努力該病得到一定的控制,近年來家畜及人類結(jié)核病陽性率有上升趨勢,仍然是威脅動物與人類健康和生命安全的重要傳染病之一。牛結(jié)核分枝桿菌感染動物機體后潛伏期大約為半個月,較長的可達幾個月。眾所周知,人類結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的,人們往往忽視了牛型結(jié)核分枝桿菌對人類的威脅,人型結(jié)核分枝桿菌、牛型結(jié)核分枝桿菌及禽型結(jié)核分枝桿菌均可感染人及其他動物,是人類目前面臨較為嚴峻的公共衛(wèi)生問題。
人畜共患病的防控是目前疫病防控的一大挑戰(zhàn),特別是人畜共患病中的結(jié)核病和布魯氏桿菌病在全國乃至全世界感染率有上升趨勢,特別是在獸醫(yī)、檢疫員、養(yǎng)殖人員、實驗室人員等,均是該病感染的高危人群,這應(yīng)引起所有人的重視。我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部對該病的防控高度重視,各省、市已加強對牛布病、結(jié)核病等人畜共患病的防控力度,特別是對乳用牛和種用牛的監(jiān)測,很多地區(qū)均要求對全群乳用和種用牛進行結(jié)核病的監(jiān)測,進一步加強人畜共患病的凈化工作。本文對牛結(jié)核病流行情況進行回顧,并對牛結(jié)核病的臨床癥狀、診斷及防控措施進行總結(jié)。
科學家(羅伯特·科赫博士)最早在1882年宣布發(fā)現(xiàn)結(jié)核病的致病菌為結(jié)核分枝桿菌,這一發(fā)現(xiàn)尤為重要,為該病的診斷、防控開辟了新的道路。通過多年的努力,結(jié)核病的流行得到一定的控制,但結(jié)核病仍然是威脅動物及人類健康甚至是致命的傳染病。世界衛(wèi)生組織公布,每天有超過4 000 人死于結(jié)核病,并有將近3 萬人感染結(jié)核分枝桿菌。20世紀80年代全國進行奶牛抽樣檢測,結(jié)核病患病率為5.0%左右。到21世紀初,部分地區(qū)結(jié)核病患病率高達10.18%,有的養(yǎng)殖場陽性率甚至超過了20.0%[1],有上升的趨勢。
牛型結(jié)核分枝桿菌自然感染動物時潛伏期長短不一,短的有數(shù)天,長的可達數(shù)年。家畜中以奶牛最易感,由于不同動物及病原侵入器官不同而臨床癥狀也存在差異,根據(jù)侵入器官不同,病變器官出現(xiàn)大小不等的結(jié)節(jié),在肺臟、乳房、淋巴以及腸道最為多見。奶牛典型癥狀為產(chǎn)乳量下降、被毛粗糙,消瘦、咳嗽等。患病牛在感染初期通常沒有明顯臨床癥狀,有的表現(xiàn)為低熱,病毒侵入肺部通常會導(dǎo)致干咳和呼吸困難,侵入腸道通常導(dǎo)致腹痛、血便,腹瀉和便秘交替出現(xiàn)。中后期出現(xiàn)消瘦、貧血、奶牛產(chǎn)奶下降、呼吸困難、淋巴腫大等,在某一器官或多個器官出現(xiàn)硬結(jié)是最為典型的癥狀。
牛結(jié)核的診斷可以通過病原分離鑒定、ELISA及皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)等方法,各檢測方法均存在優(yōu)缺點。在基層常用免疫學方法進行奶牛結(jié)核病的診斷,即皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng),皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)診斷法特異性較高、操作簡單、不依賴儀器,是基層診斷奶牛結(jié)核病很實用的臨床技術(shù)。用牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗檢測牛結(jié)核病是臨床使用最多的檢測方法,出生三周后的犢牛即可用本試驗進行牛型結(jié)核分枝桿菌的篩查、檢疫。注射部位通常選擇在牛頸側(cè)中部上1/3,提前備毛,如果犢牛太小也可在肩胛部進行,在選擇注射部位時注意術(shù)部應(yīng)無明顯病變。按說明稀釋好的提純牛型結(jié)核菌素稀釋后應(yīng)當天使用完,每只牛皮內(nèi)注射0.1 mL(不區(qū)分牛的大小以及日齡),注射器械及術(shù)部應(yīng)做好消毒,避免產(chǎn)生假陽性。皮下注射應(yīng)出現(xiàn)小皰(如沒有小皰則暗示未注入皮內(nèi))。皮內(nèi)注射后于72 h觀察注射部位是否有炎性反應(yīng)(紅、腫、熱、痛),并測量皮皺厚度差以判定試驗結(jié)果。個別??赡艹霈F(xiàn)較晚的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng),因此可以于96 h、120 h再分別觀察注射部位。根據(jù)《GB/T18645—2002動物結(jié)核病診斷技術(shù)》標準,牛注射部位有明顯的炎性反應(yīng),皮厚差大于或等于4 mm則為陽性,表明牛感染了結(jié)核分枝桿菌(排除假陽性);如果注射部位無炎性反應(yīng),皮厚差小于2 mm為陰性;處于兩者之間為疑似,應(yīng)于2 個月后進行復(fù)檢,如果仍為疑似經(jīng)2個月再次復(fù)檢,此時仍為疑似則應(yīng)判斷為陽性。游標卡尺的操作及讀數(shù)準確性是判斷檢測結(jié)果的關(guān)鍵,應(yīng)熟練掌握其操作及讀數(shù)方法。皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的使用較早,是一項較成熟的檢測技術(shù),但存在假陽性造成誤殺的情況。
為提高檢測的準確性、便利,一些新的檢測方法被開發(fā)用于牛結(jié)核病的檢測,例如IFN-γ體外釋放法,膠體金免疫層析法,葉俊、布日額等人將結(jié)核分支桿菌MPB70和MPB83兩種分泌蛋白基因通過分子生物學技術(shù)進行融合表達并純化,建立結(jié)核分枝桿菌膠體金免疫層析技術(shù)[2],這為臨床快速檢測技術(shù)的研發(fā)提供了有效的參考。
牛結(jié)核的防控應(yīng)重點監(jiān)測乳用牛和種用牛,對監(jiān)測確診為陽性家畜應(yīng)按照相關(guān)技術(shù)規(guī)范進行撲殺和無害化處理。應(yīng)對牛群實施清群和凈化措施;全場進行徹底的清洗消毒,病死或淘汰的尸體按要求進行無害化處理。對產(chǎn)奶牛、種用牛進行全覆蓋檢測,對肉牛、耕牛及其家畜進行抽檢[3]。
做好人員防控工作,必須嚴格按照生物安全防護技術(shù)規(guī)程開展采樣和實驗檢測工作,防止人員在工作中感染、病原擴散等情況[4]。高危工作人員在開展工作時可以使用藥物進行預(yù)防,鏈霉素、卡那霉素的抗菌譜較青霉素廣,主要對結(jié)核桿菌、多種革蘭氏陰性桿菌(如大腸桿菌、沙門氏菌、布魯氏桿菌、巴氏桿菌等)有較強的抗菌作用[5]。1862年法國生物學家巴斯德發(fā)明了巴氏滅菌法,該方法對于切斷該病的傳播起了重要作用,但巴氏滅菌法并不能保證百分之百對結(jié)核分枝桿菌進行滅活,也存在風險[6]。
對于環(huán)境消毒可以使用甲醛、過氧乙酸。甲醛又稱蟻醛,為無色氣體,40%甲醛溶液即福爾馬林,能與水或乙醇任意混合,不僅能殺死細菌的繁殖型,也能殺死芽孢(如炭疽芽孢),以及抵抗力強的結(jié)核桿菌[7]。很多養(yǎng)殖場喜歡使用生石灰作為消毒藥,生石灰主要成分是氧化鈣(化學式為CaO),是一種價廉易得的消毒藥,具強堿性,不溶于水,吸濕性很強,對繁殖型細菌有良好的消毒作用,但易從空氣中吸收二氧化碳形成碳酸鈣而失效,對芽孢和結(jié)核桿菌無效[8]。