樹莓組織培養(yǎng)育苗技術(shù)

王 禹

(黑龍江省農(nóng)科院園藝分院，哈爾濱150060)

樹莓(RubusidaeusL.)為懸鉤子屬多年生落葉小灌木，俗稱托盤、覆盆子，分單季品種和雙季品種，適應(yīng)性強(qiáng)，栽培范圍廣。其果實(shí)營養(yǎng)價(jià)值高、口感好，除富含豐富的維生素、氨基酸和類黃酮外，還含有糅化酸、花色苷、SOD 酶等有益成份，是當(dāng)今風(fēng)靡世界的第三代水果中的佼佼者。

隨著樹莓種植面積的擴(kuò)大，優(yōu)質(zhì)種苗的需求也隨之增長。但樹莓傳統(tǒng)的根蘗分株、埋土壓條和扦插繁殖育苗方式，受氣候條件、環(huán)境因素影響及母株數(shù)量和品種特性限制，致使生育周期長，繁殖系數(shù)低，苗木質(zhì)量參差不齊，難以滿足市場對(duì)優(yōu)質(zhì)苗木的需求。因此，應(yīng)探索有效的樹莓優(yōu)良種苗繁育途徑。從材料選擇、組培苗育苗、組培苗馴化及管理等方面闡述樹莓組織培養(yǎng)技術(shù)繁育種苗，以期提高種苗繁殖數(shù)量和質(zhì)量。

1 材料選擇

選擇無病蟲害、生長健壯、芽體飽滿莖粗不超過0.5 cm的嫩枝或半木質(zhì)化的枝條。田間采集時(shí)間為6月中旬～ 9月初。

2 組培準(zhǔn)備工作

2.1 培養(yǎng)基的制備及工具準(zhǔn)備

所有培養(yǎng)基均采用MS + 植物激素 + 7 g/L瓊脂 + 30 g/L白糖，pH 5.4～6.0，0.103 MPa，121 ℃，濕熱滅菌20 min。無菌水、濾紙及工具，0.103 MPa，121 ℃，濕熱滅菌30 min。

2.2 材料處理

將采集的枝條剪成帶一個(gè)芽1 cm長的莖段，用洗潔精清洗干凈，流水狀態(tài)下沖洗1 h，置于超凈工作臺(tái)中無菌水沖洗3次。

嫩枝莖段消毒：酒精40 s，無菌水沖洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒5 min，無菌水沖洗3次，每次1 min以上。

半木質(zhì)化莖段消毒：酒精1 min，無菌水沖洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒7 min，無菌水沖洗3次，每次1 min以上。

2.3 組培苗培養(yǎng)

2.3.1 生長培養(yǎng)。將消毒好的莖段底部黑色部分切去，接種到MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA生長培養(yǎng)基上。7 d后腋芽陸續(xù)萌發(fā)，轉(zhuǎn)接增殖培養(yǎng)基時(shí)，芽高最好不超過1 cm。

2.3.2 增殖培養(yǎng)。將萌發(fā)的腋芽從莖段上切下，接種到MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA增殖培養(yǎng)基上，每30 d轉(zhuǎn)接一次，增殖系數(shù)因品種而異，可達(dá)2.8～4.1。

增殖培養(yǎng)可連續(xù)進(jìn)行4次，然后進(jìn)行復(fù)壯培養(yǎng)，復(fù)壯培養(yǎng)基可采用MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA，培養(yǎng)溫度20 ℃，光照時(shí)間10 h/d，培養(yǎng)30 d。

2.3.3 生根培養(yǎng)。當(dāng)組培苗長至1 cm高時(shí)，切成單株?duì)?，接種到MS+0.2 mg/L IBA生根培養(yǎng)基上。

2.3.4 培養(yǎng)條件。白天溫度23 ℃±2 ℃，夜間不低于18 ℃；光照時(shí)間14 h/d，光照強(qiáng)度為2500～3000 lx，相對(duì)空氣濕度40%～60%。

2.4 組培苗馴化

2.4.1 煉苗。當(dāng)組培苗根系1 cm長時(shí)，將組培苗從培養(yǎng)室移至馴化室。繼續(xù)生長至根系長2 cm、株高3 cm以下，此時(shí)進(jìn)行馴化。馴化前3 d，把瓶蓋打開，讓組培苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境。

2.4.2 移栽。栽基質(zhì)采用草炭土，拌入30%的百菌清(百菌清∶土1∶100)，噴灑2.5%殺滅菊酯乳油1000倍液，塑料布覆蓋7 d。采用72穴，5 cm深的穴盤，使用前穴盤澆透水，放置2 d。

將組培苗根部培養(yǎng)基洗凈，用鑷子在穴盤上上打孔，根系不要卷曲，栽好后輕輕把空隙填滿，不要用手壓，以免基部折斷，澆透水即可。

2.4.3 馴化管理。緩苗前保持土壤濕潤，遮光率20%；相對(duì)空氣濕度不高于40%；環(huán)境溫度白天不高于30 ℃，夜晚不低于18 ℃，30 d后成活率可達(dá)90%。

移栽后注意預(yù)防紅蜘蛛，可選用73%炔螨特乳油、阿維菌素等；真菌、細(xì)菌性害可采用甲基托布津、使百克等。緩苗后每15 d 噴 1 次0.2%～0.3%磷酸二氫鉀溶液。