去泛素化酶OTULIN研究進(jìn)展①

胥虹貝 羅 勇 （重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，重慶400016）

線性泛素化修飾主要由泛素蛋白N末端的甲硫氨酸Met1 的氨基與另一泛素分子C 末端甘氨酸的羧基共價(jià)結(jié)合而成——甲硫氨酸1-泛素鏈（Met1-Ub）［1］。研究表明，由Sharpin、HOIL-1L和HOIP構(gòu)成的線性泛素鏈組裝復(fù)合體（linear ubiquitin chain as?sembly complex，LUBAC）可對(duì)NF-κB 通路中的重要組分NEMO 及NOD2 受體信號(hào)通路中的受體相互作用蛋白激酶 2（receptor interacting protein kinase 2，RIPK2）進(jìn)行線性泛素鏈組裝［2-3］。OTULIN（OTU domain DUB with Linear linkage specificity）作為一種重要的去泛素化酶，可通過S1'泛素結(jié)合位點(diǎn)特異性結(jié)合Met1-Ub，去除底物蛋白Met1-Ub，在OTULIN相關(guān)自身炎癥反應(yīng)綜合征（OTULIN-related autoin?flammatory syndrome，ORAS）、細(xì)胞死亡、血管再生、神經(jīng)炎癥等病理生理過程中發(fā)揮重要作用。本文就OTULIN 結(jié)構(gòu)、調(diào)節(jié)機(jī)制及生物學(xué)特性的研究現(xiàn)狀進(jìn)行概述。

1 OTULIN結(jié)構(gòu)及調(diào)節(jié)機(jī)制

1.1 OTULIN 與Met1-Ub 人類OTULIN 基因位于染色體5p15.2 區(qū)，通過轉(zhuǎn)錄翻譯合成含有352 個(gè)氨基酸的OTULIN 蛋白［4-5］。晶體結(jié)構(gòu)分析表明，Asn341、His339 和 Cys129 構(gòu)成 OTULIN 蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)的催化中心，其中His339和Cys129通過不同排列方式形成2 種不同構(gòu)象，具有催化活性的“活化”構(gòu)象（約30%）主要通過Asn341、His339和Cys129相互作用發(fā)揮作用，而無催化活性的“非活化”構(gòu)象（約70%）中因Asp336 將His339 從原有催化位置拉出，Cys129發(fā)生轉(zhuǎn)向從而形成無效的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體［5］。

線性泛素化修飾是近年發(fā)現(xiàn)的一種新型泛素鏈連接方式［1］。研究表明，OTULIN 催化結(jié)構(gòu)域（cat?alytic domain of OTULIN，OTULINcat）的C129位點(diǎn)可與Met1-Ub特異性結(jié)合，且OTULIN催化結(jié)構(gòu)域在物種間高度保守［4］。Ub 遠(yuǎn)端和近端分別與多個(gè)泛素結(jié)合位點(diǎn)S1 和S1'連接。S1 位點(diǎn)與遠(yuǎn)端Ub 的結(jié)合覆蓋面積為1 045?2，且該位點(diǎn)含有與螺旋臂（aa 254～264）相互作用的 Ile44。S1'位點(diǎn)與近端 Ub 的結(jié)合覆蓋面積為 880 ?2，主要由 Ub 的 Helix 和 Phe4位點(diǎn)與OTULINcat 的α1 螺旋和α2 螺旋構(gòu)成。大量S1'泛素結(jié)合位點(diǎn)對(duì)OTULIN 發(fā)揮去泛素化酶作用至關(guān)重要。S1'位點(diǎn)錨定近端Ub，將Met1 指向催化中心。除在空間上與Met-1 很接近的Lys63 外，其他近端Ub 的Lys 殘基均遠(yuǎn)離催化中心。OTULIN 通過aa 125～127 和 aa 282～284 形成的 2 個(gè)環(huán)將連接點(diǎn)分開。非Met1-Ub 鏈，包括Lys63-Ub 在內(nèi)的泛素鏈均可在一定程度旋轉(zhuǎn)近端Ub，使OTULIN S1'位點(diǎn)與非Met1-Ub 鏈無法結(jié)合。研究發(fā)現(xiàn)，Lys63-Ub 與OTU?LIN 的結(jié)合能力低于Met1-Ub 與OTULIN 結(jié)合能力的 1%，Lys48-Ub 與 OTULIN 未檢測(cè)到結(jié)合，表明OTULIN 的泛素結(jié)合點(diǎn)可在一定程度上特異性識(shí)別結(jié)構(gòu)非常相似的Met1-Ub 和Lys63-Ub。當(dāng)Ub 間含有完整的Gly76-Met1鏈序列時(shí)，OTULIN 可特異性分解 Ub，OTULIN 對(duì)含 Gly76-Met1突變的 tetraUb 無水解性。C129A、H339A 和 N341A 位點(diǎn)突變的 OTULIN也無法分解 Met1-Ub。S1（L259E 和 E314R）或 S1'（W96A 和TQK100-102AAA）位點(diǎn)的點(diǎn)突變可降低OTULIN 對(duì) Met1-Ub 的親和力，從而降低 OTULIN 的去泛素化酶活性［5］。

1.2 LUBAC 與 Met1-Ub LUBAC 最初由 日 本學(xué)者KIRISAKO 等［6］提 出 ，認(rèn) 為 LUBAC 由 HOIL-1L（heme-oxidized IRP2 ligase，RIPK2）或 RBCK1（Ran BP-type and C3HC4-type zinc finger containing 1，RBCK1）、HOIP（HOIL-1L interacting protein）構(gòu)成，HOIL-1L 和 HOIP 均為含 RING 類結(jié)構(gòu)域的 E3 連接酶，HOIL-1L 與 HOIP 結(jié)合可特異性募集 Met1-Ub。TOKUNAGA 等［7］發(fā)現(xiàn)了 LUBAC 另一重要組分——Sharpin（SHANK-associated RH domain interacting protein），Sharpin 的 UBL 結(jié)構(gòu)域可與 HOIP 的 NZF（NPL4 Zinc figer1）結(jié)構(gòu)域相互作用，含 Sharpin 的LUBAC 可對(duì) NF-κB 通路中的重要組分 NEMO 進(jìn)行線性泛素鏈組裝，從而激活NF-κB信號(hào)通路［8-10］。此外，Sharpin 基因無意義突變可導(dǎo)致小鼠慢性增生性皮炎，癥狀類似于X 連鎖高IgM 綜合征和低水腫外胚層發(fā)育不良的表現(xiàn)［11-12］。HOIP 對(duì)維持 LUBAC 活性至關(guān)重要，研究表明，僅有Met1-Ub富集不足以進(jìn)一步激活 NF-κB 信號(hào)通路［5］。LUBAC 中僅 HOIP 可募集Met1-Ub，也是激活NF-κB 信號(hào)通路的先決條件。因此，LUBAC 被重新定義為包含Sharpin、HOIL-1L和HOIP的復(fù)合體［9］。

1.3 OTULIN 活性調(diào)節(jié)對(duì) LUBAC 募集 Met1-Ub 的影響 OTULIN 通過保守的PIM 結(jié)構(gòu)域與HOIP 的PUB 結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合，該結(jié)合依賴于OTULIN 的Tyr56和 HOIP的 Asn102［13］。共表達(dá) OTULIN 可抑制HOIP 泛素 化，表明 OTULIN 也 可 抑制 LUBAC 中HOIP 自身泛素化過程，對(duì) OTULIN 拮抗 LUBAC 誘導(dǎo)的 NF-κB 激活至關(guān)重要［5，14］。OTULIN PIM 結(jié)構(gòu)域中Tyr56 磷酸化可抑制OTULIN 與HOIP 結(jié)合，在一定程度上調(diào)節(jié)OTULIN 的去泛素化酶作用［14］。此外，生理?xiàng)l件下，非磷酸化OTULIN參與調(diào)節(jié)LUBAC募集Met1-Ub 過程，而磷酸化OTULIN 可通過抑制HOIP與OTULIN結(jié)合影響線性泛素鏈組裝［5，14-16］。

ZHOU 等［17］在 1 個(gè)巴基斯坦和 2 個(gè)土耳其家譜中發(fā)現(xiàn)，含 OTULIN 錯(cuò)義突變（p. Leu272Pro 和 p.Tyr244Cys）和移碼突變（Gly174Aspfs*2）的4 個(gè)患兒出現(xiàn)不同程度發(fā)熱、中性粒細(xì)胞性皮炎/脂膜炎、生長(zhǎng)發(fā)育受限、關(guān)節(jié)痛、進(jìn)行性脂肪代謝障礙等癥狀，對(duì)TNF 抑制劑（英夫利昔單抗）和類固醇具有不同反應(yīng)。值得注意的是，OTULIN 的3種基因突變并不影響 OTULIN 與 LUBAC 結(jié)合，OTULIN N 末端結(jié)構(gòu)域?qū)?OTULIN 與 LUBAC 的結(jié)合是必需的［17］。僅轉(zhuǎn)染p.Leu272Pro和p.Gly174Aspfs*2過表達(dá)的質(zhì)粒無法有效抑制HEK293 細(xì)胞內(nèi)NF-κB 信號(hào)通路活性，表明p. Leu272Pro 和p. Gly174Aspfs*2 突變可影響OTULIN 的去泛素化活性，而p. Tyr244Cys 突變對(duì)OTULIN 酶活性無影響。患者成纖維細(xì)胞和外周血單核細(xì)胞內(nèi)NF-κB 和MAPK 信號(hào)通路被明顯激活，OTULIN 靶蛋白 NEMO、TNFR1、RIPK1 和 ASC 蛋白Met1-Ub 含量明顯增多。DAMGAARD 等［18］發(fā)現(xiàn)，B細(xì)胞或者T 細(xì)胞OTULIN 基因敲除小鼠HOIP 和Sharpin 含量明顯降低，HOIL-1 表達(dá)無明顯變化，而骨髓細(xì)胞OTULIN 基因敲除小鼠HOIL-1 和HOIP 無明顯改變，Sharpin 輕微降低，表明 OTULIN 對(duì) LU?BAC 各組分表達(dá)影響不同，可能與調(diào)控的細(xì)胞類型有關(guān)，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

1.4 OTULIN 與 NF-κB 信號(hào)通路 研究發(fā)現(xiàn)，OTU?LIN 可阻斷 LUBAC 形成 Met1-Ub 從而抑制 NF-κB 信號(hào)通路激活［5，15，19-20］。OTULIN 缺失可導(dǎo)致包括 LU?BAC 在內(nèi)的多種Met1-Ub 泛素化蛋白累積，但對(duì)TNF 誘導(dǎo)的HOIP 至TNFR1 這一過程無影響。但OTULIN 異位表達(dá)導(dǎo)致 TNF 誘導(dǎo)的 NF-κB 和相關(guān)促炎信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活延遲［5，15］。TNFR1 信號(hào)傳導(dǎo)通路中，OTULIN 分解 Met1-Ub 可抑制 NEMO 與 RIPK1結(jié)合［5］。OTULIN C129A 突變可導(dǎo)致 OUTLIN 催化活性喪失，但仍可導(dǎo)致體內(nèi)NF-κB 活化程度降低，推測(cè)可能與突變的OTULIN 仍可結(jié)合泛素從而發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)效應(yīng)有關(guān)［5］。ZHAO 等［13］蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，OTULIN 除與LUBAC 相互作用外，還參與TRIM32蛋白（tripartite motif-containing protein 32）介導(dǎo)的 NF-κB 信號(hào)通路，TRIM32 可通過 OTULIN 非去泛素化作用抑制OTULIN 與LUBAC 結(jié)合，TRIM32將K63-泛素鏈結(jié)合至OTULIN，阻斷OTULIN 與HOIP 的相互作用，從而激活NF-κB 通路。因此，OTULIN 可多途徑調(diào)控 NF-κB 信號(hào)通路，具體調(diào)控機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

1.5 OTULIN 與NOD2受體信號(hào)通路 細(xì)胞內(nèi)PRR核苷酸寡聚化結(jié)構(gòu)域蛋白2（nucleotide oligomeriza?tion domain containing protein 2，NOD2）可識(shí)別細(xì)菌肽聚糖的胞壁酰二肽（muramyl dipeptide，MDP）成分，各種病理刺激下，NOD2 與RIPK2 結(jié)合，募集細(xì)胞凋亡抑制劑（IAP）家族的Ub 連接酶［21］。研究發(fā)現(xiàn)，OTULIN 參與調(diào)節(jié)NOD2 受體信號(hào)通路。NOD2刺激可促進(jìn)LUBAC 募集Met1-Ub 對(duì)RIPK2 進(jìn)行線性泛素鏈組裝［22］。OTULIN 沉默可致 RIPK2 蛋白的Met1-Ub 含量 增 高 ，與 NEMO 和 RIPK2 結(jié)合增多、NF-κB 信號(hào)通路激活增強(qiáng)有關(guān)，反之，OTULIN 過表達(dá)可抑制RIPK2蛋白Met1泛素化［15］。OTULIN 可限制RIPK2 蛋白Met1-Ub 組裝速度并持續(xù)分解LU?BAC募集的Met1-Ub，少量配體刺激NOD2時(shí)該現(xiàn)象尤為顯著，此外，NOD2和TNFR1刺激可導(dǎo)致受體組分Met1-Ub 混雜，該作用可被內(nèi)源性O(shè)TULIN 抵消，LUBAC和OTULIN持平的活性作用可以解釋為什么Met1-Ub在細(xì)胞中處于極低水平以及過表達(dá)LUBAC并不會(huì)明顯促進(jìn)Met1-Ub 在細(xì)胞內(nèi)的富集，盡管有研究發(fā)現(xiàn)離體條件下LUBAC 可明顯促進(jìn)Ub 鏈組裝［6，23］。DRABER 等［24］研究認(rèn)為，OTULIN 未被招募至TNFR1 信號(hào)復(fù)合物，其主要通過調(diào)節(jié)細(xì)胞胞質(zhì)LUBAC 復(fù)合體組分的Met1 泛素化水平，而不是調(diào)節(jié)RIPK1 和NEMO 等信號(hào)復(fù)合物自身的Met1 泛素化。但 WAGNER 等［25］發(fā)現(xiàn)，當(dāng) TNF 刺激后，TNFR1復(fù)合物存在低水平內(nèi)源性O(shè)TULIN 表達(dá)，OTULIN 參與調(diào)節(jié) NOD2 受體復(fù)合物中 RIPK2 的泛素化［3，15］。因此，OTULIN對(duì)受體信號(hào)復(fù)合物如TNFR1和NOD2的作用尚不明確。

2 OTULIN生物學(xué)特性

2.1 OTULIN 與細(xì)胞死亡 研究表明，OTULIN 過表達(dá)可抑制poly（I：C）誘導(dǎo)的NF-κB 信號(hào)通路激活。過表達(dá)OTULIN，經(jīng)10 ng/ml TNF-α誘導(dǎo)的NF-κB靶基因轉(zhuǎn)錄水平降低。無OTULIN 過表達(dá)的細(xì)胞在TNF-α 刺激后15 min，細(xì)胞內(nèi)IκBα 迅速發(fā)生磷酸化及降解，但過表達(dá)OTULIN 的細(xì)胞內(nèi) NF-κB 信號(hào)通路激活明顯延遲［5］。OTULIN 過表達(dá)導(dǎo)致 TNF-α 誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡敏感性降低，與Sharpin 缺失的cpdm小 鼠 及 HOIL-1 突 變 的 人 類 中 結(jié) 果 一 致［7-9，26-27］。KEUSEKOTTEN 等［5］發(fā)現(xiàn)，OTULIN 過表達(dá)可誘導(dǎo)細(xì)胞晚期JNK信號(hào)通路激活和c-Jun磷酸化，從而導(dǎo)致誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的2 大分子PARP 和caspase-3 被剪切，HEK 293ET 和 U2OS 細(xì)胞中，敲除 OTULIN 基因可進(jìn)一步增強(qiáng)poly（I：C）和TNF-α 誘導(dǎo)的細(xì)胞因子產(chǎn)生和 NF-κB 信號(hào)通路激活。TNF-α 刺激后早期IκBα 被輕度磷酸化和降解，晚期 JNK 和 c-Jun 持續(xù)磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞死亡。此外，RUNE BUSK DAMGAARD 等［20］發(fā)現(xiàn)，OTULIN 缺乏導(dǎo)致成纖維細(xì)胞和單核細(xì)胞對(duì)TNF 誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡更加敏感。KEUSEKOTTEN 等［5］認(rèn)為 OTULIN 過表達(dá)和敲除均可導(dǎo)致細(xì)胞死亡，具體機(jī)制有待進(jìn)一步探索。

2.2 OTULIN 與ORAS ORAS也被稱為otulipenia，主要由DUB 的OTU 結(jié)構(gòu)域的純合錯(cuò)義（p.L272P 和p. Y244C）和 移碼 突變（p. G174Dfs*2）產(chǎn)生［18］。DAMGAARD 等［18］最初發(fā)現(xiàn) 3 個(gè)具有血緣關(guān)系的早產(chǎn)兒均表現(xiàn)出特發(fā)性炎癥表型，嬰兒在出生后即出現(xiàn)反復(fù)腹瀉、血清高C反應(yīng)蛋白、高白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等全身炎癥反應(yīng)，最后均進(jìn)展為復(fù)發(fā)性結(jié)節(jié)性脂膜炎，并伴有不同程度中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、復(fù)發(fā)性發(fā)熱、生長(zhǎng)發(fā)育不良、關(guān)節(jié)疼痛腫脹及血清免疫球蛋白和自身抗體水平升高等。p. Y244C 和p.G174Dfs*2 突變患者體內(nèi) NF-κB、JAK/STAT 和 TNF信號(hào)通路被激活，激活程度與采樣時(shí)患者癥狀嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，此外，不同患者細(xì)胞內(nèi)OTULIN 蛋白差異表達(dá)，OTULIN 含量與體內(nèi) NF-κB 信號(hào)激活程度呈負(fù)相關(guān)，此外，OTULIN 基因突變患者細(xì)胞內(nèi)Met1-Ub 水平明顯上升。英夫利昔單抗（Infliximab）可明顯改善患者癥狀，降低外周血C 反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞含量至正常水平［18］。

2019年，DAMGAARD等［20］發(fā)現(xiàn)1例出生即出現(xiàn)嚴(yán)重全身炎癥反應(yīng)的阿拉伯女嬰，全外顯子組測(cè)序提示該患兒OTULIN 發(fā)生純合子單堿基替換，即c. 841g>a，p. Gly 281 Arg。與 Leu272 和 Tyr244 相似，Gly281位于OUT 結(jié)構(gòu)域，是位于螺旋α11和α12環(huán)上的保守位點(diǎn)。Gly28 與His282、Thr283 共同構(gòu)成泛素結(jié)合位點(diǎn)，穿過活化位點(diǎn)直接與M1-Ub 遠(yuǎn)端結(jié)合。晶體結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，含Gly281Arg ORAS 突變的 OTULIN 催化結(jié)構(gòu)域（OTULINcatG281R）采用類似OTULINcatWT的OTU 折疊方式，但引入的Arg 側(cè)鏈無法裝配于螺旋α3 和α9 間的狹窄口袋中，從而將GLy281 環(huán)從正常結(jié)合槽中翻轉(zhuǎn)出來。對(duì)突變的OTULIN蛋白進(jìn)行跨環(huán)高晶體學(xué)B因子分布分析，結(jié)果提示，與OUT 結(jié)構(gòu)域內(nèi)的其他區(qū)域相比，突變后的環(huán)柔韌性增強(qiáng)，從而影響M1-Ub 結(jié)合位點(diǎn)阻止底物結(jié)合，降低OTULIN 水解M1-Ub 活性。同OTU?LINC129A位 點(diǎn) 85 nmol/L 的 解 離 常 數(shù) 相 比 ，OTU?LINC129A/G281R與 M1-Ub 解 離 常 數(shù) 為 9.3 μmol/L。OTULING281R對(duì)M1-Ub 的水解活性低于OTULINcatWT的1/20～1/200。OTULING281R患者成纖維細(xì)胞中蓄積大量M1-Ub，且TNF-RSC 信號(hào)通路明顯受損，此外，OTULIN 缺乏的人單核細(xì)胞內(nèi) NF-κB 信號(hào)通路被激活，TNF 分泌增多。DAMGAARD 等［20］發(fā)現(xiàn)，造血干細(xì)胞移植術(shù)可完全緩解患兒ORAS 相關(guān)癥狀，為該突變類型的ORAS 患者提供有效治療方案。此外，NABAVI等［28］2019年也報(bào)道了一種新的OTULIN致病性變異體，即由OTULIN純合子c.864+2 T>C突變（NM_138348）所致的全身炎癥反應(yīng)并導(dǎo)致患者死亡，晶體結(jié)構(gòu)分析提示，突變的OTULIN 蛋白結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，且去泛素化酶活性明顯降低。

OTULIN 在T 細(xì)胞、B 細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞中均有表達(dá)，在樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中含量尤為豐富。OTULIN 敲除小鼠表現(xiàn)出早發(fā)的嚴(yán)重全身炎癥反應(yīng)，體重明顯下降，血清促炎細(xì)胞因子尤其是TNF、G-CSF 和IL-6 含量顯著增多，中性粒細(xì)胞增多，組織內(nèi)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。OTULIN 發(fā)揮抗炎效應(yīng)具有細(xì)胞特異性，T 細(xì)胞或B 細(xì)胞OTULIN 敲除小鼠無明顯炎癥表型，而骨髓細(xì)胞OTULIN 導(dǎo)致小鼠（LysMCre-OTULINLacZ/flox）出現(xiàn)嚴(yán)重的急性全身炎癥反應(yīng)，體內(nèi)淋巴器官和肝臟明顯腫大，外周血白細(xì)胞明顯增多，以中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞增多為主［18］。雖然 DAMGAARD 等［18］發(fā)現(xiàn) B 細(xì)胞和T 細(xì)胞OTULIN 沉默對(duì)小鼠體內(nèi)Met1-Ub 募集無明顯影響，但另有研究報(bào)道T 細(xì)胞和B 細(xì)胞參與Met1-Ub 募集過程［29-32］。因此，OTULIN 調(diào)節(jié) B 細(xì)胞和T細(xì)胞內(nèi)Met1-Ub的可能作用尚未明確。

2.3 OTULIN 與血管再生 OTULIN 基因突變與胚胎中時(shí)期血管形成缺陷密切相關(guān)。DAMGAARD等［19］發(fā)現(xiàn)，OTULIN 基因 336 位 Asp 突變?yōu)?Glu，可導(dǎo)致突變小鼠在胚胎期第12.5～14 d 死亡，突變小鼠頭及軀干血管分支網(wǎng)絡(luò)形成障礙、血管排列紊亂，在胚胎頭部的中間區(qū)域，多個(gè)大直徑腦血管分支形成分層血管網(wǎng)絡(luò)，大的顱內(nèi)血管擴(kuò)張，血管分支減少，內(nèi)皮細(xì)胞在分叉處聚集，OTULIN 可與Dishev?eled-2 蛋白（DVL2）結(jié)合，參與調(diào)節(jié)經(jīng)典的Wnt 信號(hào)通路，對(duì)胚胎時(shí)期血管形成發(fā)揮重要作用。此外，研究發(fā)現(xiàn)，染色體5p15.2 位點(diǎn)基因丟失導(dǎo)致的人OTULIN 合成障礙可導(dǎo)致精神發(fā)育遲滯、神經(jīng)及顱面發(fā)育畸形［33-35］。

2.4 OTULIN 與缺血性腦血管疾病 目前OTULIN在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中的研究較少，僅在腦血管疾病中有報(bào)道。XU 等［36］研究發(fā)現(xiàn)，局灶腦缺血/再灌注損傷可誘導(dǎo)大腦內(nèi)源性O(shè)TULIN 表達(dá)增多，且上調(diào)的OTULIN 富集于活化的小膠質(zhì)細(xì)胞。過表達(dá)OTULIN 具有神經(jīng)保護(hù)、減輕小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)的作用，該效應(yīng)與腦內(nèi)NF-κB 信號(hào)通路被抑制有關(guān)。鑒于OTULIN 參與外周免疫細(xì)胞及CNS 免疫細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，對(duì)NF-κB 信號(hào)通路發(fā)揮重要的負(fù)性調(diào)節(jié)作用，推測(cè)OTULIN 可能對(duì)CNS 其他相關(guān)疾病發(fā)揮作用，是極具研究意義的靶點(diǎn)。

3 展望

OTULIN 作為一種新型的可特異性水解Met-Ub的去泛素化酶，參與包括細(xì)胞死亡、炎癥反應(yīng)和血管生成等多個(gè)重要的生理過程。但目前關(guān)于其去泛素化的具體機(jī)制研究較少，仍然存在許多需進(jìn)一步探索的問題，比如OTULIN 對(duì)LUBAC 各組分表達(dá)影響的機(jī)制，磷酸化OTULIN是如何影響OTULIN的去泛素化效應(yīng)？大量細(xì)胞研究證實(shí)OTULIN 可通過抑制NF-κB 信號(hào)激活從而有效減輕炎癥反應(yīng)，那是否OTULIN 參與調(diào)控減輕諸多由NF-κB 信號(hào)激活介導(dǎo)的疾病炎癥損傷呢？因其強(qiáng)大的負(fù)性調(diào)控NF-κB信號(hào)通路，減輕炎癥性損傷的效應(yīng)，OTULIN 是一種有價(jià)值的、值得深入研究的去泛素化酶，有待成為一種新的治療靶點(diǎn)。