SARS-CoV-2病毒載量及其臨床意義

陳愛平，李天萍，凌 華，張擁軍

1 前 言

SARS-CoV-2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2)引起的2019年冠狀病毒病(COVID-19)全球疫情已經(jīng)持續(xù)1年多，給全世界的社會生活和經(jīng)濟(jì)帶來前所未有的深遠(yuǎn)影響。COVID-19的實驗室診斷主要采用病原學(xué)證據(jù)，包括從患者樣品中分離病毒，并檢測病毒相關(guān)抗原、病毒核酸或序列及病毒相關(guān)抗體等，其中以病毒核酸檢測最直接、最常見[1-3]。通過對疑似感染者、密切接觸者、重點人群進(jìn)行病毒核酸篩查，能夠及時發(fā)現(xiàn)感染者并采取隔離措施，是目前確定傳染源、評估隔離效果、遏制病毒進(jìn)一步傳播擴(kuò)散的重要公共衛(wèi)生策略。SARS-CoV-2的核酸檢測體系，按照原理可分為常規(guī)逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR, RT-PCR)、實時熒光RT-PCR(real time reverse transcription PCR)、等溫擴(kuò)增、數(shù)字PCR(digital PCR, dPCR)、基因組測序、基因芯片等多種手段[1-3]。其中應(yīng)用最廣泛的核酸檢測方法就是實時熒光RT-PCR，不僅能夠顯示檢測對象的感染狀態(tài)，還能夠?qū)﹃栃詷悠分胁《綬NA進(jìn)行定量。

病毒載量(viral load)是用于描述人體內(nèi)病毒總量的一個術(shù)語，通常采用核酸擴(kuò)增方法，以標(biāo)準(zhǔn)體積的體液(如血液、血漿、腦脊液等)里檢出的病毒核酸拷貝數(shù)(copies/mL)來表示[4]。檢測病毒載量在人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)等領(lǐng)域應(yīng)用較多，已經(jīng)有多種高度敏感、特異、準(zhǔn)確的商品試劑盒獲得美國食品藥品管理署(Food and Drug Administration，F(xiàn)DA)和歐盟CE(Conformité Européenne)許可，并在國內(nèi)外臨床實驗室使用，用于明確診斷、評估感染嚴(yán)重程度及監(jiān)測抗病毒治療效果。由于COVID-19屬于新發(fā)傳染病，疾病相關(guān)背景知識仍處于不斷完善的階段，目前對SARS-CoV-2病毒載量及其臨床價值還缺乏統(tǒng)一的認(rèn)識。本文擬簡要介紹SARS-CoV-2病毒載量的測定方法，總結(jié)感染者體內(nèi)病毒載量分布及動態(tài)變化，進(jìn)而分析相關(guān)數(shù)據(jù)與患者臨床表現(xiàn)、疾病進(jìn)程及預(yù)后的聯(lián)系，以促進(jìn)根據(jù)病毒載量結(jié)果開展患者精準(zhǔn)管理、部署COVID-19防控策略。

2 SARS-CoV-2核酸檢測體系及病毒載量檢測概述

COVID-19疫情暴發(fā)之后，中國科學(xué)家迅速確定了病原體為SARS-CoV-2，并及時與全世界科學(xué)家分享了病毒基因組序列[5]。根據(jù)基因組序列信息，國內(nèi)外眾多研究機(jī)構(gòu)和體外診斷試劑生產(chǎn)廠商隨后立即研制出不同的核酸檢測體系，陸續(xù)獲得相關(guān)監(jiān)管部門的認(rèn)證和生產(chǎn)許可并投放到市場，在全球疫情應(yīng)對過程中發(fā)揮了重要作用。其中，能夠?qū)颊邩悠愤M(jìn)行SARS-CoV-2核酸定量檢測的方法主要包括實時熒光RT-PCR和數(shù)字PCR兩種。

2.1 實時熒光RT-PCR 實時熒光RT-PCR是在傳統(tǒng)RT-PCR體系中加入熒光基團(tuán)，根據(jù)熒光信號強(qiáng)度連續(xù)監(jiān)控擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對初始樣品中模板RNA進(jìn)行定量分析。SARS-CoV-2核酸檢測試劑中，最常見的是TaqMan探針法，具有靈敏度高、特異性好、能夠定量檢測病毒RNA的優(yōu)點，普遍被認(rèn)為是COVID-19實驗室診斷的金標(biāo)準(zhǔn)[1-3]。檢測靶標(biāo)包括冠狀病毒特異的結(jié)構(gòu)蛋白基因如S、E、N基因，以及SARS-CoV-2種特異性的非結(jié)構(gòu)蛋白基因如RNA依賴的RNA多聚酶(RdRp)、ORF1a、ORF1b[1-3]。模板定量的基礎(chǔ)是擴(kuò)增過程中產(chǎn)物熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時所需要的循環(huán)次數(shù)即循環(huán)閾值(Cycle threshold,Ct)。Ct值與反應(yīng)體系中靶基因的核酸總量的對數(shù)成反比，起始模板濃度每降低10倍，Ct值約增加3.3，因此可以作為臨床樣品中病原體濃度的相對指標(biāo)。在相同檢測體系和反應(yīng)條件下，根據(jù)已知不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，就可以計算出樣品中模板RNA實際濃度[2]。

在實際工作中，面對不同目的(如群體篩查、個案追蹤、隔離、出院、旅行、復(fù)工、復(fù)學(xué)等)帶來巨大的SARS-CoV-2核酸檢測需求，通常以實時熒光RT-PCR檢測所得的Ct值間接反映樣品中病毒載量，僅在一些科研工作中繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得并報告病毒載量數(shù)值。值得注意的是，樣品的Ct值易受到多種因素影響，包括采樣質(zhì)量、核酸提取、PCR擴(kuò)增試劑及檢測的靶基因等[2]。不同廠商的試劑盒敏感性存在差異，例如，截至2020年11月20日，我國共批準(zhǔn)24種SARS-CoV-2核酸檢測試劑，其中17種基于實時熒光RT-PCR，其檢測限(limit of detection, LOD)在100-1 000 copies/mL之間波動[6]。并且同樣的樣品在不同實驗室之間Ct值可能存在差異，同一實驗室不同試劑和不同檢測儀器也可能導(dǎo)致Ct值差異，因此，應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎解讀核酸檢測報告的Ct值。

2.2 dPCR 數(shù)字PCR的核心是通過模板有限稀釋、終點擴(kuò)增和泊松分布的原理來實現(xiàn)絕對定量[7-8]。通過將模板核酸分子分散到數(shù)萬個以上的反應(yīng)單元，使每個反應(yīng)單元分配到1個模板分子或無模板，在每一個反應(yīng)單元里獨立進(jìn)行PCR擴(kuò)增，完成之后分析每個反應(yīng)單元熒光信號，最后根據(jù)泊松分布計算目標(biāo)核酸的拷貝數(shù)。按照液體分配方式，dPCR分為微流PCR(microfluidic digital PCR，mdPCR)、液滴PCR(droplet digital PCR，ddPCR)和芯片PCR(chip digital PCR，cdPCR)3種類型[3]。dPCR的主要優(yōu)勢是定量與擴(kuò)增效率變化無關(guān)，無需內(nèi)對照基因和標(biāo)準(zhǔn)曲線，對樣品中抑制擴(kuò)增的因素耐受，能夠?qū)Φ蜐舛群怂針悠窚?zhǔn)確定量。因此dPCR報告的病毒載量結(jié)果具有廣泛的通用性，可信度較高。

為比較實時熒光RT-PCR和數(shù)字PCR的檢測效率，Suo等[8]采用相同的引物-探針組合和模板，發(fā)現(xiàn)針對ORF1ab和N基因的ddPCR可報告范圍為10～5×104copies/reaction，而實時熒光RT-PCR的可報告范圍為103-107copies/reaction，可見ddPCR的最小檢測范圍顯著低于實時熒光RT-PCR。進(jìn)一步分析證明ddPCR檢測ORF1ab和N基因的檢測限分別為2.1 copies/reaction和1.8 copies/reaction，對應(yīng)的實時熒光RT-PCR檢測限則分別為1 039 copies/reaction和873.2 copies/reaction，因此對于低濃度樣品，ddPCR比實時熒光RT-PCR敏感500倍。

3 SARS-CoV-2病毒載量數(shù)據(jù)的臨床應(yīng)用

最初報道SARS-CoV-2感染主要引起肺炎，隨著COVID-19病例增多，逐漸建立起對該疾病臨床表現(xiàn)和癥狀的全面認(rèn)識。除呼吸道外，陸續(xù)從其它樣品如糞便、尿液、血液、唾液等檢測出病毒RNA[1-2,9]。因此全面了解感染后SARS-CoV-2在宿主不同部位的分布及隨著疾病進(jìn)展發(fā)生的動態(tài)變化，對于闡明疾病發(fā)生機(jī)制、評估治療效果和預(yù)測疾病轉(zhuǎn)歸等方面，具有重要參考價值。

3.1 不同類型樣品病毒分布、載量差異 在SARS-CoV-2被確認(rèn)為引起COVID-19的病原之后，對于這種全新的冠狀病毒病，參照過去對嚴(yán)重急性呼吸綜合征(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS)和中東呼吸綜合征(Middle East Respiratory Syndrome, MERS)的認(rèn)識，呼吸道樣品成為實驗室確診的首選。但在呼吸道樣品之外，其它哪些部位還可能檢測到病毒成分，是否可能存在其它傳播途徑，需實驗室證據(jù)。

中國疾病預(yù)防控制中心團(tuán)隊在2020年3月首先報告了對部分中國患者的觀察結(jié)果[9]。根據(jù)對來自湖北、山東、北京3家醫(yī)院205名患者1 070份樣品(咽拭子、鼻拭子、血液、痰、糞便、尿液等)的檢測，發(fā)現(xiàn)肺泡灌洗液陽性率最高(93%)，其次為痰(72%)、鼻拭子(63%)、纖維支氣管鏡活檢(46%)、咽拭子(32%)、糞便(29%)、血液(1%)，72份尿液未檢測到病毒RNA。除了鼻拭子平均Ct值為24.3(1.4×106copies/mL)，其余樣品的平均Ct值大于30(<2.6×104copies/mL)。上述結(jié)果，不僅證明了多種樣品可以檢測到SARS-CoV-2病毒成分，下呼吸道樣品陽性率最高，而且從糞便樣品中分離到活病毒，表明病毒可能通過糞便途徑傳播，為疫情初期病例確診和遏制病毒傳播提供了重要信息。確定宿主不同樣品病毒載量及持續(xù)時間，還有助于研判病毒感染對不同組織產(chǎn)生的病理損害。類似地，美國哈佛大學(xué)團(tuán)隊[10]調(diào)查了88名住院患者，發(fā)現(xiàn)住院患者中首次采樣時大多數(shù)能夠檢出病毒RNA，檢出率分別為鼻咽拭子50%、口咽拭子67%、痰85%、血液27%、尿液10%。血漿中病毒載量范圍為1.8～3.8 log10RNA copies/mL，低于痰中病毒載量(1.8～9.0 log10RNA copies/mL)。

3.2 病毒載量的動態(tài)變化 對于確診感染者來說，連續(xù)檢測不同階段、不同類型樣品病毒載量可以反映病毒在宿主體內(nèi)的活躍復(fù)制程度，進(jìn)而動態(tài)監(jiān)測臨床進(jìn)程、評估治療方案、調(diào)整感染者隔離時間。

Zheng等[11]系統(tǒng)調(diào)查了浙江省96名COVID-19患者共計3 497份樣品(包括呼吸道、糞便、血清、尿液)中的病毒載量，研究發(fā)現(xiàn)所有患者呼吸道樣品均檢出病毒，59%患者的糞便樣品和41%患者的血清樣品檢出病毒，而尿液樣品僅1份陽性。呼吸道樣品病毒載量最高，其次為糞便和血清樣品。輕癥患者呼吸道樣品在發(fā)病第二周病毒載量達(dá)到高峰；重癥患者呼吸道樣品病毒載量在發(fā)病后第3～4周仍然較高，其糞便樣品同樣在發(fā)病后第3～4周病毒載量最高。病毒在糞便中持續(xù)時間中位數(shù)為22 d, 顯著高于呼吸道樣品(18 d)和血清樣品(16 d)，提示疫情防控中需要加強(qiáng)患者糞便管理。

韓國團(tuán)隊[12]采集了54名住院患者的上呼吸道樣品(鼻咽拭子、口咽拭子)、下呼吸道樣品(痰液)，連續(xù)觀察了從發(fā)病前6 d到發(fā)病后48 d病毒載量。癥狀出現(xiàn)前0～5 d可發(fā)現(xiàn)病毒快速增殖，出現(xiàn)癥狀當(dāng)天病毒載量最高，相應(yīng)的Ct值為最低13.47(11.85～16.13)。發(fā)病前5d到發(fā)病后10 d平均Ct值都<30，發(fā)病3周后實時熒光RT-PCR陰性(Ct>35)。相關(guān)結(jié)果對于大流行期間指導(dǎo)流行病學(xué)調(diào)查、病房周轉(zhuǎn)、患者隨訪具有參考價值?？偟恼f來，綜合當(dāng)前已發(fā)表的文獻(xiàn)，病毒載量變化的總體趨勢是，出現(xiàn)癥狀之前2～3 d可檢測到病毒RNA，出現(xiàn)癥狀第1周達(dá)到高峰，隨后數(shù)天或數(shù)周內(nèi)病毒載量逐漸下降[13]。

3.3 病毒載量與疾病嚴(yán)重程度 SARS-CoV-2感染后，由于宿主免疫狀態(tài)差異、基礎(chǔ)疾病、感染劑量不同等，感染者臨床表現(xiàn)范圍包括無癥狀、輕癥、中度、重癥甚至死亡。病毒載量與患者臨床表現(xiàn)之間是否存在相關(guān)性，也受到廣泛關(guān)注。

美國哈佛大學(xué)團(tuán)隊[10]分析了235名不同嚴(yán)重程度患者(88例住院患者、94例有癥狀感染者、53例癥狀恢復(fù)期患者)SARS-CoV-2病毒載量結(jié)果，發(fā)現(xiàn)住院患者中病毒載量與疾病嚴(yán)重程度存在相關(guān)性，需要呼吸機(jī)治療的患者中44%檢測到病毒血癥，需要鼻插管補(bǔ)充氧氣的患者病毒血癥檢出率為19%，而不需要補(bǔ)充氧氣的患者病毒血癥檢出率為0%。住院患者中，血漿病毒載量越高，與多種炎癥和疾病嚴(yán)重程度指標(biāo)的相關(guān)性越顯著。

Sun等[14]系統(tǒng)觀察了廣東省35例COVID-19患者，包括28名輕癥患者和7名重癥患者?？偣彩占?18份臨床樣品(包括鼻咽拭子、喉拭子、痰液、糞便、血清)，檢測發(fā)現(xiàn)重癥患者鼻咽拭子和喉拭子中病毒載量高于輕癥患者，而兩組患者痰液中病毒載量相似。兩組患者痰液和輕癥患者組糞便中病毒載量高于上呼吸道樣品。所有患者上呼吸道中病毒載量在發(fā)病后第一周達(dá)到高峰，隨后2～4周內(nèi)迅速下降。發(fā)病6～8周后仍然能夠檢出病毒RNA，但病毒載量極低，接近實時熒光RT-PCR的檢測限。僅在1名重癥患者檢測到病毒血癥，持續(xù)5～6 d。

Chen等[15]采用ddPCR調(diào)查了52例COVID-19患者(普通患者40%、重癥患者33%和危重患者27%)血液中病毒載量，48例(92.3%)患者可檢測到病毒血癥。普通患者、重癥患者和危重患者血漿中平均病毒載量分別為81.68、73.62和176 copies/mL。30例出院患者中仍有15例血液病毒核酸陽性，輕癥患者和重癥患者病毒血癥中位清除時間均為21 d以上，而危重患者在發(fā)病45 d之后仍然可在血漿中檢測到病毒核酸。綜上，從不同類型樣品的檢測結(jié)果來看，呼吸道樣品的病毒載量在不同程度患者中差異不大，而血液、唾液、糞便樣品的病毒載量及病毒持續(xù)排放時間與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)[10,15-16]。

3.4 病毒載量與感染性 以實時熒光RT-PCR和數(shù)字PCR為基礎(chǔ)的病毒核酸檢測，不能區(qū)分感染性和非感染性病毒，唯有病毒分離培養(yǎng)才能夠證實感染性的活病毒的存在。

加拿大團(tuán)隊[17]為了評估SARS-CoV-2的E基因Ct值、發(fā)病時間與病毒培養(yǎng)的關(guān)聯(lián)性，將90份陽性樣品接種Vero細(xì)胞，僅26份(28.9%)樣品證實有病毒生長。培養(yǎng)陽性樣品的Ct值平均為17，顯著低于培養(yǎng)陰性樣品Ct值27。出現(xiàn)癥狀到檢測的時間，分離陽性的樣品平均為3 d，陰性樣品為7 d，而所有Ct>24或癥狀發(fā)作> 8d的樣品均無病毒生長，表明不具有感染性。

英國團(tuán)隊[18]對2020年1-5月253名確認(rèn)感染者324份上呼吸道樣品(Ct值均數(shù)31.15)進(jìn)行病毒培養(yǎng)，共133份(41%)樣品分離陽性，來自111例感染者。統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)分離陽性與Ct值存在相關(guān)性，Ct值每增加1個單位，分離到有感染性病毒的估計比值比(odds ratio，OR)下降0.67。

法國團(tuán)隊[19]從155例患者183份實時熒光RT-PCR陽性樣品(9份痰液、174份鼻咽拭子)分離到129個毒株，再次證明了樣品Ct值與陽性分離率存在顯著相關(guān)性。所有Ct值13-17樣品都可分離到病毒，Ct值增加，分離率逐漸下降，Ct值33時僅為12%，Ct值>34樣品均未見到病毒生長。即使病毒載量高達(dá)105RNA copies/mL，發(fā)病超過8 d的樣品亦不能分離到病毒?？梢姡ㄟ^病毒分離，明確病毒核酸陽性感染者是否具有感染性及其時間區(qū)段，對于部署隔離措施、密切接觸者追蹤、復(fù)工復(fù)產(chǎn)等公共衛(wèi)生政策具有參考價值。

3.5 病毒載量與COVID-19預(yù)后 無論是無癥狀感染者或輕癥患者，還是住院的重癥患者，經(jīng)過一段時間隔離或治療之后，大部分患者體內(nèi)病毒逐漸消失直至完全康復(fù)，少部分患者則死于COVID-19。除去如抗病毒藥物、基礎(chǔ)疾病、年齡等因素之外，感染者的病毒載量是否與疾病的預(yù)后相關(guān)，同樣受到研究者的關(guān)注。

首先，有研究探討了患者入院時病毒載量與COVID-19預(yù)后的關(guān)聯(lián)性。Choudhuri等[20]回顧總結(jié)分析了2020年美國一家醫(yī)院近半年時間(3-8月)入院48 h內(nèi)SARS-CoV-2陽性病例共1 044例(存活出院病例774例，死亡病例270例)，按照Ct值將上述病例分為4組(<22.9，23～27.3，27.4～32.8，>32.9)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ct值<22.9組死亡率41.4%，而Ct值>32.9組死亡率13.2%，且存活病例入院時平均Ct值(28.6±5.8)高于死亡病例(24.8±6.0)，因此認(rèn)為患者入院時Ct值與死亡率相關(guān)。Bryan等[21]對華盛頓大學(xué)醫(yī)院245名患者(住院患者194例、急診39例、門診12例)資料的分析，在調(diào)整了血清學(xué)狀態(tài)、年齡、性別之后，發(fā)現(xiàn)入院時病毒載量與死亡相關(guān)，與入院時病毒載量較低患者(Ct值>22)相比，入院時病毒載量較高(Ct值<22)患者的OR為4.20(95%CI, 1.62～10.86)。類似地，巴西團(tuán)隊[22]回顧總結(jié)了875例患者(包括不用住院的輕癥患者50.1%、入院治療的中度患者30.4%、危重病房收治患者19.5%)，發(fā)現(xiàn)高病毒載量(Ct值<25)患者死亡率46%(87/191)，低病毒載量患者死亡率22%(41/185)，同樣顯示入院時病毒載量與死亡相關(guān)，OR值為2.93(95%CI:1.87-4.60)。

隨后有研究發(fā)現(xiàn)，患者血漿中病毒RNA水平與COVID-19預(yù)后也存在關(guān)聯(lián)性。由于未能在血液中檢測到病毒顆?；蚍蛛x培養(yǎng)出活的有感染性病毒，將血液中檢測到病毒RNA定義為RNA血癥(RNAemia)，以示與病毒血癥(viremia)區(qū)別。Prebensen等[23]對挪威部分患者的分析，123名患者中47%至少在1份血液樣品中檢出RNA血癥，入住危重病房或死亡的患者檢出率(80%)顯著高于普通住院患者(34%)。41%的患者進(jìn)入危重病房之前RNA血癥Ct值>38，低于2.70 log10copies/mL的定量檢測限。一例持續(xù)陽性的危重癥患者最低Ct值為25.9(相當(dāng)于RNA載量6.3 log10copies/mL)?；貧w分析顯示，患者基線RNA血癥和RNA載量與進(jìn)入危重病房和/或死亡顯著相關(guān)。相反，入院時上呼吸道拭子Ct值不能提供預(yù)后信息。Veyer等[24]采集了法國巴黎一家醫(yī)院58名患者和12名健康對照者樣品，通過dPCR平臺檢測發(fā)病8～12 d后患者血液中病毒載量，發(fā)現(xiàn)58名患者中43例(74.1%)出現(xiàn)RNA血癥，輕中度患者53%出現(xiàn)病毒血癥，重癥患者為88%。總的說來，RNA血癥水平與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，輕中度、重癥、危重患者組RNA血癥中位數(shù)分別為89、279和301 copies/mL。尤其是1名RNA血癥載量達(dá)到65 476 copies/mL的患者，在采集了血漿樣品后第2 d即死亡。因此認(rèn)為通過數(shù)字PCR檢測RNA血癥是COVID-19患者的可靠預(yù)后生物標(biāo)志。

4 小結(jié)與展望

COVID-19全球大流行尚未終結(jié)，在過去的一年里全世界科學(xué)家不斷創(chuàng)新和通力合作，及時總結(jié)和分享了疾病有關(guān)的實驗室指標(biāo)、臨床表現(xiàn)和治療信息，不斷完善COVID-19的疾病“拼圖”，為深入認(rèn)識COVID-19疾病特征、完善預(yù)防策略、優(yōu)化治療方案進(jìn)行了不懈的努力?？梢灶A(yù)見，在疫情全面消退之前的相當(dāng)長一段時期，SARS-CoV-2核酸檢測依然是患者確診和治療管理、密切接觸者追蹤的重要組成部分。為充分利用核酸檢測中獲得的病毒載量數(shù)據(jù)，更加科學(xué)地應(yīng)對大流行疫情，需要考慮以下幾個方面：1)核酸檢測報告應(yīng)提供Ct值或病毒載量。雖然定性報告SARS-CoV-2核酸檢測陽性或陰性結(jié)果足以輔助臨床醫(yī)生做出診斷，但提供相應(yīng)Ct值或病毒載量將有助于實施更加妥善的臨床治療方案和進(jìn)行科學(xué)的患者管理。2)利用人類內(nèi)對照基因?qū)t值進(jìn)行標(biāo)化。由于絕大多數(shù)檢測是以Ct值反映病毒載量，如前所述，患者樣品的Ct值可能受到多種因素影響，因此對原始數(shù)據(jù)應(yīng)謹(jǐn)慎解讀。在測定病毒載量的同時，設(shè)立人類基因內(nèi)對照將Ct值進(jìn)行標(biāo)化，能夠消除部分干擾因素，使不同實驗條件下的Ct值更加具有可比性。按照標(biāo)化后的Ct值對患者進(jìn)行分層分析，能夠更加清晰地揭示病毒載量與臨床表現(xiàn)、預(yù)后的相關(guān)性。3)病毒載量與感染性。所有SARS-CoV-2核酸檢測結(jié)果反映的都是病毒基因組RNA或片段，核酸檢測陽性并不意味著宿主體內(nèi)一定存在復(fù)制活躍的有感染性的病毒，只有病毒分離培養(yǎng)才能顯示樣品中是否存在活的可培養(yǎng)病毒，體現(xiàn)樣品的感染性。4)推廣開展數(shù)字PCR檢測。相對于實時熒光RT-PCR，數(shù)字PCR更加敏感和準(zhǔn)確，因此利用數(shù)字PCR可提高血液、眼淚、尿液等低病毒載量樣品的檢出率，從而可以更加精細(xì)地揭示SARS-CoV-2在體內(nèi)的動態(tài)變化規(guī)律和致病機(jī)制，并且數(shù)字PCR亦有助于不同實驗室間病毒載量數(shù)據(jù)交流比較。隨著數(shù)字PCR儀器設(shè)備的普及推廣，數(shù)字PCR技術(shù)必將越來越多地應(yīng)用于病毒載量檢測。

利益沖突：無