蜂蜜中農藥殘留檢測前處理和分析方法研究進展

吳升德 谷群遠 沈校校 王仁德 劉鋒 張學軍

（鹽城市產品質量監(jiān)督檢驗所，鹽城 224056）

蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，與自身分泌物混合后，經充分釀造而成的天然甜物質。蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露應安全無毒，不得來源于雷公藤、博落回、狼毒等有毒蜜源植物[1]。蜜蜂在傳播花粉、采集花蜜和花粉的過程中，不可避免的會接觸到空氣、水、作物上殘存的農藥，而且蜂農為了防治蜜蜂的病蟲害，生產中經常使用殺螨劑，如氟胺氰菊酯、氟氯苯氰菊酯等，造成農藥在蜂產品中的殘留。人們長期食用含有農藥殘留的蜂蜜，會不利于身體健康。我國農業(yè)農村部發(fā)布的《蜂蜜中農藥殘留限量（一）》（NY/T 1243-2006）標準規(guī)定，蜂蜜中的氟胺氰菊酯、氟氯苯氰菊酯最大殘留限量分別為50 μg/kg、10 μg/kg[2]。目前，我國現(xiàn)有國家標準和行業(yè)標準涉及蜂蜜中農藥殘留限量指標僅有 10項，已不符合市場需求，不利于蜂蜜產品的質量控制[3]。因此，應建立完善蜂蜜中農藥殘留限量和分析方法標準，確保蜂產品的質量安全，保障人們身體健康。

蜂蜜基質復雜，主要成分是葡萄糖、果糖、蔗糖和水分，占90% 左右，除此之外，還含有蛋白質、礦物質、維生素和多酚類物質等，這使得蜂蜜中農藥殘留提取凈化的前處理方法以及檢測分析方法的選擇尤為重要。本文概述了近年來蜂蜜中農藥殘留檢測的前處理技術和分析方法的應用情況，為我國蜂蜜產品中農藥殘留的常規(guī)監(jiān)管和風險評估提供依據。

1 蜂蜜中農藥殘留檢測前處理方法

近年來，蜂蜜中農藥殘留檢測的前處理方法中，應用比較多的主要有液液萃取法、固相萃取法和QuEChERS 法等。

1.1 液液萃取法

液液萃取法是利用組分在不同溶劑中的溶解度差異而達到分離或提取目的。方英立等[4]采用鹽析輔助液液萃取法，將蜂蜜用4%的硫酸鈉溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取，測定蜂蜜中六六六和滴滴涕的殘留。為提取測定蜂蜜中的雙甲脒、氟胺氰菊酯等農藥，張晶等[5]使用調節(jié)pH 值液液萃取法，操作步驟為取4g 蜂蜜，加入pH<10 的氫氧化鈉溶液，旋渦混勻，加入正己烷振蕩，離心后取上清液檢測。液液萃取法優(yōu)點是容易操作，分離效率和經濟性高；缺點是萃取過程中容易產生乳化，使得分析結果穩(wěn)定性差，需要大量有機溶劑，容易造成環(huán)境污染。

1.2 固相萃取法

固相萃取法原理是利用固體吸附劑將目標化合物吸附，后用洗脫液洗脫，達到分離和富集目標化合物的目的。林國斌等[6]使用Florisil 和Oasis 萃取柱，凈化測定蜂蜜中擬除蟲菊酯類農藥殘留，加標回收率為77.3%～103.0%。朱之烔等[7]采用全自動固相萃取法，蜂蜜樣品經親水親脂平衡HLB 固相萃取柱凈化，建立了同時測定蜂蜜中9 種苯并咪唑類和新煙堿類農藥的檢測方法，平均回收率為78.2%～101.2%。Nazia Rafique 等[8]采用改良的固相萃取法，在26.9%的巴基斯坦蜂蜜被測樣品中檢測出敵敵畏、甲硫磷等9 種農藥殘留，含量在3～48.8μg/kg 之間。陳興連等[9]采用固相萃取法提取測定蜂蜜中六六六、滴滴涕殘留量，方法選用Florisil 柱中加入乙二胺-N-丙基硅烷為凈化材料，平均回收率在70.2%～97.4%之間。固相萃取法有操作簡便、使用溶劑少、凈化效果好和環(huán)境友好等優(yōu)點，但需專門的固相萃取裝置并選好相應的凈化填料。

1.3 QuEChERS法

QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）法是利用吸附劑填料與基質中的雜質相互作用，吸附雜質從而達到快速提取和凈化目標組分的方法。Ana Paula Ferreirade Souza 等[10]采用QuEChERS 法結合Plackett Burma 實驗設計優(yōu)化樣品前處理，通過檢測發(fā)現(xiàn)51 個巴西蜂蜜樣品中37.3%都有農藥殘留，其中吡蟲啉、噻蟲胺和樂果是最常見的。苗瓊晨等[11]使用QuEChERS 法檢測蜂蜜中的15 種三唑類農藥及15 種抗生素，回收率在71.1%～116%之間。王思威等[12]采用改進的QuEChERS 法檢測荔枝花粉和花蜜中吡唑醚菌酯及其主要代謝物BF 500-3，在花粉和花蜜基質中的平均回收率為87.0%～97.8%。李燕妹[13]使用QuEChERS 法檢測蜂蜜中敵敵畏、甲霜靈等15 種農藥殘留，其平均回收率為94.8%～111%。QuEChERS 法具有簡單便捷，分析速度快，適用范圍廣，回收率、精確度、準確度高等優(yōu)點，是近年來常用的一種用于農產品檢測的快速樣品前處理技術。

2 蜂蜜中農藥殘留檢測分析方法

2.1 光譜法

為實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測，近年來嘗試將光譜法應用于蜂蜜中農藥殘留的分析。葛學峰等[14]通過研究腐霉利-蜂蜜混合體系的穩(wěn)態(tài)熒光光譜，發(fā)現(xiàn)蜂蜜溶液中腐霉利的含量與對應的熒光強度有良好的線性關系，從而建立了快速檢測蜂蜜中腐霉利殘留的分析方法。孫旭東等[15]采用表面增強拉曼光譜分析蜂蜜中的樂果殘留，通過確定蜂蜜中樂果對應的四個特征拉曼位移峰，建立線性回歸模型，實現(xiàn)了蜂蜜中樂果殘留的快速檢測，方法的檢測限為2 mg/kg。由于光譜法不需要復雜的前處理工序，具有快速高效的特點，為快速分析蜂蜜中的農藥殘留提供了新的思路。

2.2 色譜法

色譜法的本質是利用混合物在固定相和流動相之間分配比例的差異，對混合物進行分離和分析的方法，目前已廣泛應用到很多領域中。《食品安全國家標準 蜂蜜中5 種有機磷農藥殘留量的測定 氣相色譜法》（GB 23200.97-2016）規(guī)定采用氣相色譜法檢測蜂蜜中敵百蟲、皮蠅磷、毒死蜱、馬拉硫磷、蠅毒磷5 種有機磷農藥殘留量[16]。李歡歡等[17]采用氣相色譜法測定蜂蜜中8 種有機氯農藥殘留，方法采用RTX-1 毛細管柱為分離柱，ECD 檢測器，檢出限為0.14～0.45ng/ml。周碧青等[18]采用氣相色譜法測定蜂蜜中8 種有機磷農藥殘留量，方法采用Rtx-1701毛細管柱為分離柱，F(xiàn)PD 檢測器，8 種有機磷農藥在3 個不同加標水平的方法回收率為85%～110%。于玲[19]采用超聲輔助分散液液微萃取結合高效液相色譜法測定蜂蜜中的溴氰菊酯，檢出限為8 μg/kg。

2.3 色譜-質譜聯(lián)用法

隨著科技進步，聯(lián)用技術通過結合各種儀器分析方法的優(yōu)點，提高了對農藥殘留的定性定量效率。例如：GC-MS、GC-MS/MS、HPLC-MS/MS 等。樊艷等[20]采用GC-MS/MS 聯(lián)用快速檢測蜂蜜中敵敵畏、氧樂果等20 種農藥殘留，檢出限為0.003～0.082μg/kg。汪建妹等[21]采用超高效液相色譜-串聯(lián)質譜技術測定蜂蜜中39 種抗生素及25 種農藥殘留，通過多反應監(jiān)測模式，農獸藥的檢出限為0.02～3.8μg/kg。何麗君等[22]采用超高效液相色譜-高分辨質譜法分析21種三嗪類殺蟲劑農藥殘留量，檢測限為 1～10μg/kg。《食品安全國家標準 蜂蜜、果汁和果酒中497 種農藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法》（GB 23200.7-2016）規(guī)定了采用氣相色譜-質譜法測定蜂蜜中497 種農藥及相關化學品殘留量[23]?！斗涿壑?86 種農藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法》（GB/T 20771-2008）標準適用于洋槐蜜、油菜蜜、椴樹蜜、蕎麥蜜、棗花蜜中486 種農藥及相關化學品殘留的定性鑒別和461 種農藥及相關化學品殘留量的定量測定[24]。

3 總結與展望

民以食為天，食以安為先。農藥殘留是蜂蜜產業(yè)發(fā)展面臨的一項重要安全問題。進一步研究蜂蜜中農藥殘留的前處理和檢測分析方法，開發(fā)新的更為簡便快捷、準確度高、環(huán)境友好的分析方法，對于有關部門加強蜂產品行業(yè)的監(jiān)管，促進蜂產品相關企業(yè)的發(fā)展，保證消費者的身體健康具有重大意義。