動(dòng)物檢疫樣品采集與檢疫技術(shù)

馬 莉

（甘肅省靖遠(yuǎn)縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，甘肅靖遠(yuǎn) 730600）

在動(dòng)物養(yǎng)殖發(fā)展過(guò)程中，動(dòng)物檢驗(yàn)是重要的工作內(nèi)容。養(yǎng)殖戶要想創(chuàng)建出良好的安全養(yǎng)殖環(huán)境，就必須要提高對(duì)動(dòng)物檢驗(yàn)工作的重視程度。動(dòng)物樣品的采集以及動(dòng)物檢疫是主要構(gòu)成內(nèi)容，工作人員應(yīng)重點(diǎn)做好安全防范工作，嚴(yán)格按照相關(guān)流程規(guī)范要求，開(kāi)展動(dòng)物檢疫樣品的采集工作，將采樣過(guò)程中發(fā)生感染的幾率控制在最小范圍；同時(shí)一旦發(fā)現(xiàn)疫情，可以及時(shí)做好隔離處理，嚴(yán)格落實(shí)消毒殺菌，將疫情維持在可控范圍內(nèi)[1]。

1 動(dòng)物樣品采集與檢疫的意義

動(dòng)物檢疫樣品的采集及檢疫是開(kāi)展動(dòng)物檢疫工作以及畜產(chǎn)品安全監(jiān)管工作的基礎(chǔ)方法，為當(dāng)?shù)匦竽琉B(yǎng)殖業(yè)提供公平、公正、客觀、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，也是對(duì)飼料、獸藥和畜產(chǎn)品安全質(zhì)量進(jìn)行有效監(jiān)管的重要措施，將會(huì)對(duì)地區(qū)畜產(chǎn)品的市場(chǎng)安全以及有關(guān)政策的制定起到直接影響作用。只有確保樣品采集以及檢疫結(jié)果具有真實(shí)準(zhǔn)確性，才能對(duì)相應(yīng)行政案件的處理起到應(yīng)有作用。在開(kāi)展動(dòng)物檢驗(yàn)樣品的采集和檢疫工作過(guò)程中，嚴(yán)格規(guī)范樣品采集以及檢疫技術(shù)和行為，不僅可以促進(jìn)動(dòng)物檢疫結(jié)果準(zhǔn)確性進(jìn)一步提高，同時(shí)還有利于提高執(zhí)法部門的科學(xué)性，對(duì)于責(zé)任追溯工作的有效開(kāi)展起到積極推動(dòng)作用[2]。

2 動(dòng)物檢疫樣品采集的基本原則

2.1 典型性原則

在開(kāi)展動(dòng)物檢疫樣品采集工作過(guò)程中，典型性原則發(fā)揮著十分重要的作用，即要求盡量采集有代表性的病理組織。對(duì)成活動(dòng)物的選擇上，確保所選動(dòng)物活體具備典型臨床特征以外，還應(yīng)確保養(yǎng)殖戶并未對(duì)活體進(jìn)行過(guò)任何藥物的使用，只有這樣才可以保證采集的動(dòng)物樣本具有代表性。在對(duì)動(dòng)物樣本進(jìn)行檢疫過(guò)程中，要保證可以快速準(zhǔn)確地將病原檢測(cè)出來(lái)，確保樣品采集的典型性，保證所選擇出來(lái)的動(dòng)物材料具有較高病原含量。

2.2 合理性原則

在進(jìn)行動(dòng)物檢疫樣品采集過(guò)程中，對(duì)于發(fā)病的動(dòng)物群體需要做好抽樣檢測(cè)工作，需要采集動(dòng)物活體5 只（頭）及以上，在實(shí)際樣品采集過(guò)程中應(yīng)確保達(dá)足夠數(shù)量，同時(shí)還應(yīng)采集出相應(yīng)備份樣品，這樣不僅能夠保證病菌檢測(cè)的充分有效性，同時(shí)保證有充足的備樣來(lái)保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確有效性。

2.3 適時(shí)性原則

在開(kāi)展動(dòng)物檢疫樣品采集工作的過(guò)程中，一定要保證適時(shí)性原則。特別是在炎熱夏季對(duì)病死動(dòng)物進(jìn)行樣品采集時(shí)，由于氣溫較高，病死動(dòng)物極容易在短時(shí)間內(nèi)就出現(xiàn)腐爛發(fā)臭等現(xiàn)象，為確保對(duì)動(dòng)物樣品檢測(cè)質(zhì)量造成影響，必須要保證在4 小時(shí)內(nèi)對(duì)病料進(jìn)行樣品采集。

2.4 無(wú)菌性原則

開(kāi)展樣品采集時(shí)，一定要保證采集工作在無(wú)菌環(huán)境中，從而保證采集過(guò)程不會(huì)由于人為因素而增加其他致病源，避免因致病源對(duì)病原體檢測(cè)結(jié)果造成的干擾，同時(shí)還能夠確保生物學(xué)檢驗(yàn)工作的準(zhǔn)確性。除此以外，在采集過(guò)程中應(yīng)做好對(duì)采集工作人員安全的保護(hù)，防止一些人畜共患疫病對(duì)工作人員身體健康造成一定威脅。

2.5 安全性原則

在動(dòng)物檢疫樣品采集環(huán)節(jié)中，工作人員必須要做好相應(yīng)的安全防護(hù)措施，防止疫情傳染、擴(kuò)散等，避免疫情對(duì)周圍環(huán)境造成污染，減少人員受到動(dòng)物疫病的傳染，及時(shí)采用各類處理和殺菌消毒的方法，確保樣品采集工作的安全性。

3 樣品采集的流程分析

3.1 做好檢疫前的準(zhǔn)備工作

在正式開(kāi)始對(duì)檢疫樣品進(jìn)行采集前，應(yīng)嚴(yán)格遵循動(dòng)物檢疫工作的相關(guān)規(guī)范要求，做好各種檢測(cè)儀器設(shè)備以及檢測(cè)藥劑準(zhǔn)備工作，在前往養(yǎng)殖場(chǎng)開(kāi)展樣本采集工作前，務(wù)必要對(duì)所有檢測(cè)設(shè)備做好檢查，確保設(shè)備、藥劑數(shù)量和種類齊全，避免應(yīng)遺漏對(duì)采集工作造成不良影響[3]。

3.2 保證取樣操作的規(guī)范性

防疫人員到達(dá)養(yǎng)殖場(chǎng)準(zhǔn)備對(duì)動(dòng)物病料進(jìn)行樣品采集時(shí)，一定要做好相應(yīng)的防護(hù)準(zhǔn)備，佩戴相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備。在病料采集前，首先應(yīng)將采集道具做好消毒處理，每采集完一個(gè)樣品后，都要將使用過(guò)的采集設(shè)備進(jìn)行清洗消毒，更換手套后，才可以進(jìn)行接下來(lái)的樣品采集工作。待結(jié)束取樣后，需認(rèn)真填寫檢疫單，并將收集好的病料放入檢疫袋后做好密封處理，同時(shí)在檢疫袋上貼好標(biāo)識(shí)，將采集信息認(rèn)真填寫好，同時(shí)要保證字跡工整。檢疫單一式三份，經(jīng)雙方確認(rèn)無(wú)誤后加蓋公章，分別由檢疫單位、養(yǎng)殖場(chǎng)以及承檢單位分別保存，另外檢疫人員應(yīng)親自將檢疫樣品在三天之內(nèi)運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。

3.3 規(guī)范填寫檢疫報(bào)告單

當(dāng)檢疫人員在養(yǎng)殖場(chǎng)結(jié)束取樣操作后，應(yīng)在檢疫報(bào)告中認(rèn)真填寫好每一項(xiàng)具體內(nèi)容，確保字跡清晰。檢疫報(bào)告編號(hào)由動(dòng)物品種的代碼、檢疫日期和檢疫樣品的品類代碼共同組成，填寫時(shí)一定要確保上述所有信息全部準(zhǔn)確無(wú)誤，檢疫報(bào)告內(nèi)容具有可追溯性。檢疫核對(duì)人員應(yīng)對(duì)檢疫人員填寫的檢疫日期以及被檢單位工作人員填寫的檢疫日期一致性進(jìn)行認(rèn)真核對(duì)，檢疫報(bào)告應(yīng)詳細(xì)填寫檢疫樣品的封存、存儲(chǔ)以及運(yùn)輸?shù)惹闆r，確保填寫的樣品數(shù)量與實(shí)際封存數(shù)量相一致，對(duì)檢疫樣品性狀等有清晰地描述。

4 動(dòng)物檢疫樣品的檢疫技術(shù)方法

近年來(lái)我國(guó)對(duì)動(dòng)物檢疫樣品的檢疫技術(shù)水平也在不斷提升，檢疫技術(shù)和方法也由以往的單一化逐漸向多樣化發(fā)展，具體體現(xiàn)在產(chǎn)地檢疫、抽樣檢疫、境外運(yùn)輸檢驗(yàn)以及駐場(chǎng)檢疫等各環(huán)節(jié)中。最常見(jiàn)的是臨場(chǎng)檢疫，通過(guò)問(wèn)診、聽(tīng)診和觸診對(duì)方式對(duì)疾病進(jìn)行檢驗(yàn)和判斷。另外隔離檢驗(yàn)也是較為常見(jiàn)的檢疫方式，采用隔離觀察法對(duì)疾病進(jìn)行檢驗(yàn)和判斷。通常野生動(dòng)物需要25 天隔離，大型家畜需要隔離40 天左右，禽類需要隔離15 天，小型動(dòng)物需要隔離7 天左右。在所有動(dòng)物檢疫方法中，檢測(cè)結(jié)果最為準(zhǔn)確可靠的就是實(shí)驗(yàn)室檢疫，對(duì)動(dòng)物檢疫樣品的各種檢疫方法進(jìn)行綜合考量，主要會(huì)涉及到下面集中檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用[4]。

4.1 個(gè)體檢測(cè)技術(shù)

對(duì)出現(xiàn)病態(tài)的動(dòng)物進(jìn)行單獨(dú)個(gè)體檢查時(shí)，首先對(duì)其是否存在疾病進(jìn)行判定，具體檢測(cè)內(nèi)容包括觀察受檢動(dòng)物的精神狀態(tài)、通過(guò)觸摸動(dòng)物身體檢測(cè)其是否存在異常情況、查看動(dòng)物視黏膜確認(rèn)是否存有異常、觀察并確定動(dòng)物排泄物正常與否、檢查并確定動(dòng)物的脈搏跳動(dòng)頻次是否存在異常、觀察并檢測(cè)動(dòng)物的呼吸情況是否存在異常等。一旦確定存在疫情，應(yīng)將隔離動(dòng)物立即隔離，并迅速采取針對(duì)性措施開(kāi)展進(jìn)一步的檢測(cè)和處理。

4.2 病理學(xué)檢查技術(shù)

普通的動(dòng)物疾病檢測(cè)很難對(duì)疫病進(jìn)行準(zhǔn)確診斷，也無(wú)法確定動(dòng)物死亡的具體原因，因此需要配合病理學(xué)檢測(cè)技術(shù)。具體檢測(cè)操作時(shí)，需要認(rèn)真觀察動(dòng)物的外表癥狀后，再開(kāi)始相應(yīng)的剖檢工作，從而準(zhǔn)確排除惡性傳染性疾病。剖檢工作需要在無(wú)菌環(huán)境下實(shí)施操作，將取出的檢測(cè)樣品進(jìn)行組織學(xué)檢查，從中找出產(chǎn)生病變的具體原因，避免單憑肉眼觀察造成的誤診或漏診情況。

4.3 病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)

病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)通常用于對(duì)動(dòng)物疫病確診的最后環(huán)節(jié)，檢測(cè)過(guò)程非常仔細(xì)，可以把致病菌和病毒精準(zhǔn)分離開(kāi)，將病毒類型精準(zhǔn)檢測(cè)，從而對(duì)疫病進(jìn)行診斷。動(dòng)物檢疫樣品目前主要包含四種類型，寄生蟲(chóng)病可以采取病原檢查，通過(guò)顯微鏡對(duì)蟲(chóng)卵實(shí)施細(xì)致的鏡檢，采用集卵措施將原蟲(chóng)、蠕蟲(chóng)等寄生蟲(chóng)準(zhǔn)確的檢測(cè)；病毒性傳染疾病可以采用病原學(xué)檢查方法對(duì)分離處理的病毒進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)病毒核算進(jìn)行檢查，并觀察病毒形狀；細(xì)菌性傳染疾病可以采用病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)利用顯微鏡對(duì)病原體進(jìn)行細(xì)致觀察，對(duì)病原體進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)，對(duì)培養(yǎng)出的病原體進(jìn)行檢查；采用PCR 技術(shù)可以檢測(cè)無(wú)活性樣品，且具有安全、可靠的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，有效解決無(wú)法進(jìn)行人工培養(yǎng)、極微小、存在缺陷的病體和病毒材料檢查問(wèn)題，從而有效消除病原菌對(duì)周圍環(huán)境造成的影響。

4.4 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)

對(duì)于特殊的傳染性疾病，有時(shí)采用病毒分離檢測(cè)技術(shù)無(wú)法準(zhǔn)確檢查出疫病的具體類型，必須要借助免疫性檢測(cè)技術(shù)來(lái)進(jìn)行檢查和確診。目前部分傳染病診斷液、抗原以及陽(yáng)性血清等都出現(xiàn)商品化，因此在檢測(cè)過(guò)程中需要借助免疫性檢測(cè)技術(shù)，通過(guò)被檢病料、被檢血清或抗原的方式進(jìn)行檢查。

4.5 血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)

在對(duì)動(dòng)物檢疫樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可以采用不同血清學(xué)檢測(cè)方式，主要包括血凝或血凝抑制實(shí)驗(yàn)、直接凝集反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、間接凝集反應(yīng)護(hù)沉淀反應(yīng)等，只要知道其中一種抗體或抗原，就能夠?qū)α硪环竭M(jìn)行檢測(cè)。