灸法延緩衰老的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

楊健濠，趙彩嬌，王 瑜

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西 南寧 530011）

衰老又稱為老化，是指隨著年齡的增長，機(jī)體組織器官功能減退、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)下降、應(yīng)激能力及機(jī)體結(jié)構(gòu)發(fā)生退行性變化的過程。這是由遺傳因素和后天因素之間相互作用所驅(qū)動的。近年來針灸療法以其特有的優(yōu)勢被廣泛地運(yùn)用到養(yǎng)生保健領(lǐng)域中，艾灸延緩衰老逐漸成為中醫(yī)界共同關(guān)注和研究的熱點(diǎn)。艾灸療法作為祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的一部分，具有無毒副作用、方便經(jīng)濟(jì)、適用范圍廣等特點(diǎn)。唐代醫(yī)家王燾所著《外臺秘要》載：“三里養(yǎng)先后天之氣，灸三里可使元?dú)獠凰?，故稱長壽之灸?！爆F(xiàn)將近年來灸法延緩衰老的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展綜述如下。

1 清除自由基

自由基是機(jī)體代謝過程中產(chǎn)生的一類具有強(qiáng)氧化性的物質(zhì)。正常情況下，自由基在機(jī)體內(nèi)處于不斷產(chǎn)生與被清除的動態(tài)平衡中。隨著年齡的增長，機(jī)體內(nèi)SOD（超氧化物歧化酶）、GSH-Px（谷胱甘肽過氧化物酶）和CAT（過氧化氫酶）等內(nèi)源性抗氧化酶活性下降，清除自由基能力減弱，導(dǎo)致自由基在機(jī)體內(nèi)大量堆積，其強(qiáng)氧化作用會造成蛋白質(zhì)、核酸變性，生物膜通透性增加和過氧化脂質(zhì)增多，其代謝產(chǎn)物MDA（丙二醛）含量升高，進(jìn)而增強(qiáng)氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞和組織，推進(jìn)了衰老進(jìn)程。韋良玉等［1］研究表明艾炷灸可增強(qiáng)衰老模型小鼠腦組織中T-SOD（總超氧化物歧化酶）和Cu、Zn SOD 活力，增強(qiáng)腦細(xì)胞內(nèi)抗氧化能力，減少NO 含量，改善小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，延緩腦組織的老化和腦功能的退化。王淑娟等［2］研究保健灸治療更年期大鼠的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)更年期保健灸組大鼠血清MDA 含量降低，SOD 活性升高，且腦組織p53 蛋白表達(dá)水平下降，提示保健灸能起到抗氧化的作用，并通過調(diào)控p53蛋白的表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到延緩衰老的目的。梁欣等［3］選用脾俞、腎俞艾灸衰老模型大鼠，發(fā)現(xiàn)艾灸可以提高松果體SODmRNA的表達(dá)，減緩LF（脂褐素）積聚，減輕氧化損傷，進(jìn)而延緩衰老進(jìn)程。譚杏［4］研究發(fā)現(xiàn)，艾灸“足三里”“神闕”能夠提高衰老大鼠SOD活性，降低MDA及LF含量，并升高各臟器指數(shù)，改善海馬CA1 區(qū)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，有效增強(qiáng)衰老大鼠機(jī)體的抗氧化能力，在一定程度上可延緩衰老。秦夢鞠等［5］艾炷灸衰老模型豚鼠的神闕穴，發(fā)現(xiàn)SOD 相關(guān)基因表達(dá)均得到提高，提示艾灸可調(diào)控SOD相關(guān)基因的表達(dá)，清除自由基，進(jìn)而提高機(jī)體抗氧化的能力。馬治國等［6］研究發(fā)現(xiàn)回醫(yī)“烙灸療法”能增強(qiáng)衰老模型大鼠SOD 活性，改善衰老大鼠的一般生活狀況。方玉麗［7］研究表明，艾炷灸足三里、懸鐘及百會、關(guān)元穴均能提高D-半乳糖衰老小鼠腦組織中SOD2、GADD45（生長阻滯和 DNA 損傷誘導(dǎo)蛋白 45）的mRNA及蛋白的表達(dá)，有利于提高神經(jīng)細(xì)胞的抗氧化能力和修復(fù)能力。

2 提高免疫功能

免疫功能的強(qiáng)弱是機(jī)體抗病能力的體現(xiàn)。隨著年齡的增長，機(jī)體胸腺、脾臟等組織器官萎縮退化，T、B 淋巴細(xì)胞的數(shù)量和功能逐漸下降，識別病原體能力減弱，對外來抗原反應(yīng)性降低，導(dǎo)致自身免疫性疾病及感染性疾病發(fā)病率升高，加速了機(jī)體老化。因此，提高機(jī)體免疫功能可有效延緩衰老。黃立師等［8］予以溫和灸亞急性衰老大鼠的腎俞穴，模型組予每日在腎俞穴做抓取動作5 min，結(jié)果發(fā)現(xiàn)艾灸組大鼠血清IgG、IgA、IgM 含量較模型組升高，且胸腺、脾臟指數(shù)也較模型組升高，提示艾灸可以調(diào)控機(jī)體的免疫機(jī)制，提高免疫球蛋白含量，延緩胸腺的萎縮與退化，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，從而延緩衰老的進(jìn)程。崔云華等［9］研究提示艾灸可降低血清皮質(zhì)酮含量，促進(jìn)胸腺糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)，上調(diào)胸腺CD4+T細(xì)胞IL-2（白介素-2）、IL-2Rα（白介素-2 受體抗體）、NF-κB（核因子-κB）和I-κB蛋白表達(dá)量。李霞等［10］研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)艾灸后衰老大鼠的胸腺、脾臟指數(shù)均明顯升高，T、B淋巴細(xì)胞增殖活性上調(diào)，TGF-β（轉(zhuǎn)化生長因子-β）含量下降，而IFN-γ（γ-干擾素）含量升高，提示艾灸可以增強(qiáng)免疫器官的功能，提高免疫細(xì)胞的活性，從而達(dá)到抗衰老的目的。

3 調(diào)節(jié)內(nèi)分泌

人體的生長、發(fā)育、成熟、衰老與機(jī)體內(nèi)胰腺、甲狀腺、性腺、腎上腺等內(nèi)分泌腺體密切相關(guān)。當(dāng)機(jī)體內(nèi)分泌功能失調(diào)，垂體-甲狀腺、垂體-性腺、垂體-腎上腺皮質(zhì)三個軸的功能逐步衰退，導(dǎo)致衰老的發(fā)生。趙胤［11］研究結(jié)果表明，保健灸法可以使更年期雌性大鼠E2（雌二醇）含量升高，F(xiàn)SH（卵泡刺激素）和LH（黃體生成素）含量降低，調(diào)整更年期大鼠的生殖內(nèi)分泌紊亂，調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-卵巢軸功能，對延緩衰老有一定作用。蘇妝等［12］為探討保健灸延緩衰老的作用機(jī)制，予以艾灸更年期雌性大鼠的關(guān)元穴、足三里穴，結(jié)果顯示艾灸可降低血清中TC（總膽固醇）、TG（甘油三酯）、LDL-C（低密度脂蛋白膽固醇）含量，升高HDL-C（高密度脂蛋白膽固醇）含量，升高E2含量，降低FSH、LH 含量，抑制腦組織Caspase-3 蛋白表達(dá)。LEI 等［13］予以艾灸亞急性衰老大鼠，結(jié)果大鼠學(xué)習(xí)記憶能力得到改善，血清皮質(zhì)酮含量降低，胸腺GR 含量升高。零佩東等［14］研究發(fā)現(xiàn)，艾炷灸足三里穴+懸鐘穴、關(guān)元穴+百會穴均能改善衰老小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，起到延緩腦衰老的作用，其機(jī)制可能與降低血清INS（胰島素）、提高腦組織INS水平表達(dá)有關(guān)。

4 調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)

神經(jīng)遞質(zhì)是在突觸傳遞中擔(dān)當(dāng)信使的特定化學(xué)物質(zhì)。在正常情況下，中樞內(nèi)各種神經(jīng)遞質(zhì)間處于相對平衡的狀態(tài)，保持著正常穩(wěn)定的功能。在衰老的過程中，單胺類神經(jīng)系統(tǒng)等功能逐漸衰退，腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量也下降，表現(xiàn)為學(xué)習(xí)記憶能力減退。盧巖等［15］研究隔藥灸臍對衰老大鼠的影響，發(fā)現(xiàn)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力得到明顯改善，大腦皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量也得到提高。顧江等［16］研究表明艾灸能夠明顯提高衰老大鼠腦組織NE（去甲腎上腺素）、E（腎上腺素）、DA（多巴胺）的含量，降低突觸抑制性神經(jīng)遞質(zhì)5-HT（5-羥色胺）的含量，以改變腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量來起到抗衰老的作用。

5 調(diào)控衰老相關(guān)通路

5.1 細(xì)胞凋亡相關(guān)通路 趙果毅等［17］研究表明，艾灸可使衰老大鼠的Bcl-2（B 淋巴細(xì)胞瘤-2）的表達(dá)增強(qiáng)，Bax 的表達(dá)降低，進(jìn)而抑制了細(xì)胞凋亡，減少神經(jīng)元的丟失來達(dá)到改善衰老的目的。譚琳鎣等［18］研究發(fā)現(xiàn)，溫和灸能抑制衰老大鼠肝組織中Rb（視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤腫瘤抑制蛋白）、p53mRNA及其蛋白的表達(dá)，促進(jìn) Bcl-2、PKCmRNA 及其蛋白的表達(dá)。蘇妝等［19］研究發(fā)現(xiàn)予以保健灸更年期雌性大鼠可使其腦組織中的Caspase-3 的表達(dá)水平下降，抑制了由起始因子Caspase-3 引起的細(xì)胞凋亡，從而起到延緩衰老的作用。

5.2 學(xué)習(xí)記憶相關(guān)通路 杜艷等［20］研究發(fā)現(xiàn)艾灸可升高腦組織大腦皮質(zhì)和海馬CA3 區(qū)的c-fos 表達(dá)的神經(jīng)元密度，促進(jìn)大腦皮質(zhì)、海馬CA3 區(qū)與學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的c-fos 蛋白表達(dá)，從而改善大腦的學(xué)習(xí)記憶功能，延緩腦衰老進(jìn)程。韋良玉等［21］艾炷灸D-半乳糖衰老小鼠的“足三里、懸鐘”“百會、關(guān)元”，結(jié)果發(fā)現(xiàn)衰老小鼠腦組織大腦皮層、海馬CA3 區(qū)c-fosmRNA 的表達(dá)均得到提高，從而改善學(xué)習(xí)記憶能力，延緩腦衰老。趙利華等［22］探討艾灸療法對改善衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶的作用機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)艾灸組神經(jīng)元密度明顯升高，其機(jī)制可能是通過提高cNOS（一氧化氮合酶）的活力，生成生理濃度NO，增加第二信使cGMP 的含量，即通過NO-cGMP 信號系統(tǒng)，促進(jìn)c-fosmRNA 的表達(dá)，并維持LPT（長時程增強(qiáng)），改善學(xué)習(xí)記憶能力。黃新格等［23］予以益髓灸干預(yù)衰老模型小鼠，發(fā)現(xiàn)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力得到改善，延緩了腦衰老，其作用機(jī)制可能是通過降低D-半乳糖誘導(dǎo)的8-OHdG（8-羥基脫氧鳥苷）表達(dá)，抑制細(xì)胞的DNA 損傷，提高機(jī)體T-AOC（總抗氧化能力）水平，發(fā)揮抗OS（氧化應(yīng)激）損傷的作用來實(shí)現(xiàn)的。

6 其 他

杜艷等［24］研究發(fā)現(xiàn)，艾炷灸可促進(jìn)衰老小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞c-fos、pRb蛋白表達(dá)，下調(diào)P16蛋白表達(dá)，進(jìn)而抑制衰老小鼠大腦組織神經(jīng)元細(xì)胞的衰老，延緩腦老化。馬曉芃等［25］研究發(fā)現(xiàn)，溫和灸延緩衰老的機(jī)制與減輕衰老大鼠肝組織蛋白質(zhì)羰基毒化作用，及降低肝組織的p19ARF、p53mRNA 的表達(dá)有關(guān)。梁欣等［26］研究提示艾灸可能是通過促進(jìn)機(jī)體腦區(qū)松果體中HSP70（熱體克蛋白70）的表達(dá)，提高松果體細(xì)胞的抗氧化能力，減緩松果體細(xì)胞減少的速度，并維持松果體的正常形態(tài)和功能，減緩松果體衰退，從而達(dá)到抗衰老的目的。趙利華等［27］予以益髓灸D-半乳糖衰老小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗衰老基因klotho 的mRNA 及蛋白的表達(dá)升高，胰島素信號通路的激活受到抑制，降低了Akt1、FOXO3amRNA 及p-Akt、p-FOXO3a蛋白的含量，起到延緩腦衰老的效果。蔣云芳等［28］研究顯示，艾炷灸命門穴可以降低衰老模型大鼠腦組織中AG?Es、RAGE 及 RAGE mRNA 的表達(dá)水平，減少了對蛋白的直接修飾及抑制AGEs 與特異性配體RAGE 結(jié)合，引發(fā)一系列的生物學(xué)效應(yīng)而達(dá)到延緩衰老的目的。

7 小 結(jié)

灸法自古以來就是延年保健的重要方法?！侗怡o心書》中記載：“保命之法，灼艾第一，丹藥第二，附子第三。”《類經(jīng)圖翼》中也提到：“神闕行隔鹽灸，艾灸至三五百壯，不惟疾愈，亦且延年。”近年來灸法延緩衰老的作用機(jī)制研究取得了較大的進(jìn)展，主要集中在清除自由基、提高免疫功能、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)、調(diào)控衰老相關(guān)信號通路等方面，可見灸法延緩衰老是多靶點(diǎn)、多方位的，是從整體上調(diào)節(jié)人體的臟腑陰陽，以達(dá)到延緩衰老的目的。但有一些問題需要更加深入地探討與研究：①目前D-半乳糖所致的衰老大鼠模型只是比較接近自然衰老大鼠，與正常衰老仍有一定差距。大鼠的生理結(jié)構(gòu)與人體存在差異，經(jīng)絡(luò)的循行、穴位的定位與人體也會有所不同，故實(shí)驗(yàn)結(jié)果能否提供臨床指導(dǎo)還有待驗(yàn)證。②由于體質(zhì)的差異、脈證的不同，在衰老選穴搭配、灸法、灸時、灸量上均未制定具體的標(biāo)準(zhǔn)。③炎性衰老是指衰老進(jìn)程中促炎性反應(yīng)狀態(tài)的慢性、進(jìn)行性升高的現(xiàn)象，被視為機(jī)體衰老進(jìn)程速率和長壽的決定因素［29］，與許多老齡疾病密切相關(guān)，如心血管疾病、老年性癡呆、帕金森病、2型糖尿病等［30］，但目前在灸法延緩衰老的研究中，有關(guān)炎性衰老方面的研究仍較少。因此，開展灸法與炎性衰老的相關(guān)性研究，對延緩衰老具有重要意義。