• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    脊髓損傷相關(guān)信號(hào)通路在脊髓損傷修復(fù)過(guò)程中的研究進(jìn)展

    2021-03-27 01:35:01王志剛丁向前鄒楊鴻余化霖
    關(guān)鍵詞:膠質(zhì)脊髓分化

    敬 聰 王志剛 王 君 丁向前 鄒楊鴻 余化霖 耿 鑫

    1.昆明醫(yī)科大學(xué)研究生院,云南昆明 650500;2.昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外二科,云南昆明 650500

    脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是一種嚴(yán)重的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì),大約90%的SCI 是由交通事故、暴力、體育運(yùn)動(dòng)或跌倒等事件引起,以頸椎損傷最為常見(jiàn),其中60%的SCI 患者年齡僅在15~35 歲。SCI 臨床結(jié)局取決于損傷的嚴(yán)重程度和位置,由于SCI 后軸突不會(huì)自發(fā)再生,往往會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重并發(fā)癥,最嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致截癱[1]。SCI 是一個(gè)多種途徑、因素參與的復(fù)雜病理生理過(guò)程,不僅是原發(fā)性一次損傷及剪切、穿透或壓縮對(duì)脆弱神經(jīng)組織產(chǎn)生的破壞,隨之而來(lái)的水腫、脂質(zhì)氧化、炎癥、細(xì)胞毒性和微膠質(zhì)活化等還可誘發(fā)二次損傷,導(dǎo)致少突膠質(zhì)細(xì)胞死亡和產(chǎn)生軸突脫髓鞘[2]。SCI 發(fā)生初期,大量炎癥反應(yīng)產(chǎn)生,最具特征性的改變是白細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng),這些反應(yīng)會(huì)誘發(fā)神經(jīng)膠質(zhì)瘢痕形成及髓鞘源性抑制因子(myelin-associated inhibitory factors,MAIFs)產(chǎn)生。神經(jīng)膠質(zhì)瘢痕雖然有利于控制炎癥和減少進(jìn)一步損傷,但會(huì)導(dǎo)致軸突生長(zhǎng)錐塌陷,從而阻礙神經(jīng)元重建與修復(fù)。MAIFs 在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷部位周?chē)z質(zhì)瘢痕中高度表達(dá),抑制受損部位少突膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元分化,使軸突再生減少,從而影響受損神經(jīng)的修復(fù)。目前SCI 主要治療方法都圍繞在受壓脊髓減壓、激素沖擊治療、康復(fù)鍛煉及營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)藥物對(duì)癥支持治療[3],具有一定的效果,但卻沒(méi)有在根本上解決SCI 修復(fù)的病理生理過(guò)程。隨著對(duì)本病深入研究,發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell,NSC)在各種信號(hào)通路的作用下可以定向增殖與分化,尤其是軸突生長(zhǎng)、神經(jīng)束再生、少突膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)的髓鞘形成,這些發(fā)現(xiàn)為SCI 的修復(fù)提供了重要依據(jù)[4]。本文對(duì)SCI 相關(guān)信號(hào)通路在SCI 修復(fù)過(guò)程中的研究成果和進(jìn)展作一綜述,希望可以為SCI 的治療開(kāi)辟新的視野。

    1 Wnt 信號(hào)通路

    1.1 Wnt 信號(hào)通路的來(lái)源

    Wingless 基因最早在黑尾果蠅中被發(fā)現(xiàn),其在果蠅胚胎發(fā)育中有重要作用,缺失會(huì)導(dǎo)致果蠅無(wú)翅畸形。研究者[5]發(fā)現(xiàn)一個(gè)整合位點(diǎn)(integration,Int),將小鼠乳腺腫瘤病毒插入其中,可導(dǎo)致乳腺癌形成,將其命名為Int-1。Nusse 等[6]從多個(gè)物種的基因組DNA 與Int-1 低位雜交顯示這些基因從黑尾果蠅到人類(lèi)都表現(xiàn)為高度保守,能夠控制中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育與成熟。Wingless 和Int-1 具有同源性,為了方便表示屬于這一系列的基因,于是將“wingless”和“integration”兩詞合并為Wnt。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)Wnt 家族的信號(hào)分子具有19 種Wnt[7](分別是Wnt-1、Wnt-2、Wnt-3、Wnt-3a、Wnt-4 等)和14 種已知受體[8][10 種Frizzleds(Fzds),Ryk,Ror1/2 和PTK7]。

    1.2 Wnt 信號(hào)通路的機(jī)制

    Wnt 信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)體內(nèi)多種功能,尤其在蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵過(guò)程。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,Wnt 信號(hào)通路參與神經(jīng)元分化、生成、存活、死亡、再生及突觸形成、延伸、重塑等過(guò)程。Wnt 信號(hào)通路分為兩類(lèi)[9],第一類(lèi)是Wnt/β-catenin 信號(hào)通路;第二類(lèi)是Wnt/Ca2+和Wnt/PCP 信號(hào)通路。Wnt/β-catenin 信號(hào)通路的激活從Wnt 配體與Fzd 受體的結(jié)合開(kāi)始,隨后Wnt-Fz募集支架蛋白質(zhì)DVL,產(chǎn)生一系列蛋白結(jié)構(gòu)變化[10]。同時(shí),axin、腺瘤病大腸桿菌蛋白和GSK-3β 磷酸化后與β-catenin 結(jié)合增加,使β-catenin 進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi),與T 細(xì)胞因子/淋巴增強(qiáng)因子相互作用,導(dǎo)致Wnt 目標(biāo)基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄過(guò)程,促進(jìn)神經(jīng)再生。在Wnt/Ca2+途徑中[11],主要是DVL 信號(hào)產(chǎn)生后,通過(guò)一系列的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、調(diào)節(jié),使細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高,從而促進(jìn)對(duì)應(yīng)蛋白激酶激活。在Wnt/PCP 途徑中[12],DVL 的Wnt-Fz 結(jié)合體依賴(lài)性募集會(huì)激活小GTPase 蛋白,例如Rho 和Rac,隨后會(huì)激活Jun-N 端激酶,后者又可以轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核或修飾細(xì)胞骨架的穩(wěn)定性。

    1.3 Wnt 信號(hào)通路與SCI 修復(fù)

    Wnt 信號(hào)通路具有刺激神經(jīng)生長(zhǎng)、發(fā)育的作用,尤其是胚胎時(shí)期的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育[13]。Strand 等[14]發(fā)現(xiàn)Wnt/β-catenin 信號(hào)是幼年斑馬魚(yú)脊髓再生所必須的,隨后證實(shí)其在成年斑馬魚(yú)的脊髓再生過(guò)程中也高度表達(dá)。Wnt 具有維持人類(lèi)胚胎干細(xì)胞多能性及誘導(dǎo)多能干細(xì)胞產(chǎn)生的作用,同時(shí)會(huì)促進(jìn)SCI 受損處NSC向神經(jīng)元分化,改善損傷處的傳導(dǎo)功能。李秋玲[15]發(fā)現(xiàn),Wnt-3a 可以通過(guò)β-catenin 通路對(duì)脊髓神經(jīng)細(xì)胞的分化起到調(diào)節(jié)作用,同時(shí)Wnt-3a 的表達(dá)會(huì)影響脊髓聯(lián)合纖維的生成。研究證實(shí),利用Wnt 促進(jìn)胚胎干細(xì)胞分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞,并將其移植到已形成神經(jīng)膠質(zhì)瘢痕的SCI 大鼠模型中,發(fā)現(xiàn)損傷處的髓鞘再生,大鼠運(yùn)動(dòng)功能得到改善[16]。LINGO-1 可以與NgR/P75 結(jié)合形成復(fù)合體,該結(jié)合體的表達(dá)會(huì)促進(jìn)MAIFs 的表達(dá),抑制軸突再生,產(chǎn)生髓鞘化。許剛等[17]研究表明,降低LINGO-1 的表達(dá),使Wnt-7b 的表達(dá)升高,可以促進(jìn)脊髓源性NSC 的增殖增加。Li 等[18]研究利用Wnt-4修飾的NSC 移植可恢復(fù)SCI 大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能。

    2 Notch 信號(hào)通路

    2.1 Notch 信號(hào)通路的來(lái)源

    Notch 基因在突變的果蠅中發(fā)現(xiàn),是一種膜受體,廣泛存在于不同生物體中,主要用于調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、發(fā)育及凋亡等,尤其是在組織及器官的早期發(fā)育中起到重要作用。Notch 信號(hào)通路主要由Notch 受體、Notch配體蛋白、細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)器分子三部分組成。Notch 受體是在各種生物組織中廣泛表達(dá),尤其是細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中。而Notch 配體則在不同物種中表達(dá)不一,如在果蠅中表達(dá)Delta、Serrate,而在線(xiàn)蟲(chóng)中表達(dá)LAG-2 和APX-1。

    2.2 Notch 信號(hào)通路的機(jī)制

    Notch 在各物種之間高度保守,是神經(jīng)發(fā)育的核心,決定NSC 增殖和神經(jīng)元分化的時(shí)間及其持續(xù)時(shí)間[19],而且不同的刺激強(qiáng)度會(huì)誘導(dǎo)Notch 信號(hào)通路激活不同的路徑和動(dòng)態(tài)機(jī)制。在Notch 信號(hào)表達(dá)中,來(lái)自相同細(xì)胞型的受體和配體會(huì)產(chǎn)生旁抑制效應(yīng),而不同細(xì)胞群受體和配體產(chǎn)生誘導(dǎo)效應(yīng)。旁抑制效應(yīng)是一種正反饋的機(jī)制,這種機(jī)制在細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中會(huì)促使細(xì)胞向不同方向分化,尤其是NSC 分化[20]。細(xì)胞膜表面的Notch 分子與Delta 配體存在的相互抑制作用屬于旁抑制效應(yīng)。誘導(dǎo)效應(yīng)分為ADAM(S2 裂解)和g-分泌酶(S3 裂解)介導(dǎo)的兩個(gè)連續(xù)裂解步驟,導(dǎo)致Notch 胞內(nèi)段亞基釋放,在細(xì)胞核內(nèi)與轉(zhuǎn)錄因子CSL 結(jié)合成復(fù)合體[21],激活MAIFs 的目的基因,抑制神經(jīng)元再生。

    2.3 Notch 信號(hào)通路與SCI 修復(fù)

    Notch 信號(hào)是控制NSC 增殖、分化的關(guān)鍵機(jī)制之一。Notch1 缺陷使NSC 提前退出細(xì)胞周期,以犧牲膠質(zhì)細(xì)胞生成為代價(jià)開(kāi)始神經(jīng)發(fā)生,提示Noch1 在調(diào)節(jié)胚胎NSC 神經(jīng)元分化的發(fā)生中起著重要作用。Zhou等[22]在體外模擬SCI 微環(huán)境中證實(shí)脊髓提取物可以通過(guò)Notch1 和Hes1 促進(jìn)內(nèi)源性NSC 大量增殖。Notch 信號(hào)通路在脊髓源性NSC 分化成神經(jīng)元或膠質(zhì)細(xì)胞中起到?jīng)Q定性作用[23]。同時(shí),SCI 發(fā)生后,Notch信號(hào)表達(dá)的增強(qiáng)使得促神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分化的信號(hào)變得十分活躍,從而加速促進(jìn)NSC 向膠質(zhì)細(xì)胞的分化,且該過(guò)程呈不可逆趨勢(shì)。轉(zhuǎn)錄激活因子5(activating transcription factor 5,ATF5)在NSC 的增殖、分化中扮演重要作用,秦杰等[24]首次證實(shí)利用DAPT 抑制NSC中Notch 信號(hào)的表達(dá)會(huì)引起NSC 中ATF5 上調(diào),使NSC 分化成神經(jīng)元。Li 等[18]研究證明,Notch 信號(hào)配體Jagged 的負(fù)效應(yīng)可以被Wnt-4 抑制,從而促進(jìn)NSC 向神經(jīng)元分化。

    3 TGF-β/Smads 信號(hào)通路

    3.1 TGF-β/Smads 信號(hào)通路的來(lái)源

    TGF-β 具有多種生物學(xué)活性,與創(chuàng)傷的修復(fù)密切相關(guān)。TGF-β 家族由TGF-β 異構(gòu)體、抑制素、活化素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、生長(zhǎng)分化因子等30 多個(gè)因子組成,參與調(diào)節(jié)胞增殖、分化、遷移和凋亡等多種反應(yīng),并在胚胎發(fā)育、組織分化中起到重要作用。TGF-β 有3 個(gè)亞型,即TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3,其在體內(nèi)的各種生物學(xué)活性卻不同。

    1995 年,Sekelsky 等[25]先后證實(shí)果蠅的dpp 基因編碼的Smad4 類(lèi)同源蛋白(mothers against decapen taplegic,Mad)是一類(lèi)新的高度保守的蛋白家族,而Mad 參與TGF-β 家族的信號(hào)調(diào)節(jié),并在多種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中扮演中心角色。1996 年,Savage 等[26]在研究TGF-β 信號(hào)通路中發(fā)現(xiàn),秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)胞漿內(nèi)Sma2、Sma3、Sma4 蛋白為T(mén)GF-β 樣受體下游轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白,參與信號(hào)調(diào)節(jié)的傳導(dǎo),并證實(shí)其和Mad 蛋白在TGF-β 信號(hào)通路中作用與功能相似。

    3.2 TGF-β/Smads 信號(hào)通路的機(jī)制

    TGF-β/Smads 信號(hào)通路的主要成員有TGF-β、TGF-β 受體、各種Smads 蛋白及其核內(nèi)連接蛋白[27]。TGF-β 受體本身具有絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶催化的結(jié)構(gòu)域。其主要信號(hào)傳導(dǎo)途徑如下:當(dāng)TGF-β 受體Ⅰ型、Ⅱ型被激活時(shí),促使Smad2 和Smad3 蛋白激活,使其發(fā)生磷酸化,然后形成復(fù)合體進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi),與對(duì)應(yīng)蛋白質(zhì)相互結(jié)合后產(chǎn)生生物活性調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄,對(duì)神經(jīng)細(xì)胞分化產(chǎn)生影響。當(dāng)Ⅰ型受體被激活時(shí),Smad6和Smad7 蛋白與其結(jié)合后會(huì)抑制R-Smads 的磷酸化過(guò)程,導(dǎo)致TGF-β 信號(hào)通路的減弱甚至被阻斷。

    3.3 TGF-β/Smads 信號(hào)通路與SCI 修復(fù)

    TGF-β1 由體內(nèi)大部分細(xì)胞合成分泌,在組織損傷時(shí)上調(diào),通過(guò)刺激新的基質(zhì)蛋白生成,誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)沉積,減少炎癥反應(yīng),參與損傷組織的修復(fù),SCI后2 d 就可檢測(cè)到TGF-β1 急劇升高[28],而TGF-β2與TGF-β3 出現(xiàn)的時(shí)間則較晚,其主要作用是使膠質(zhì)瘢痕形成減少和小膠質(zhì)細(xì)胞及巨噬細(xì)胞活化增強(qiáng)[29]。O’brien 等[30]研究表明,在大鼠SCI 模型中,星形膠質(zhì)細(xì)胞與TGF-β 的表達(dá)增加呈正相關(guān),后續(xù)發(fā)現(xiàn)TGF-β/Smads 信號(hào)通路與SCI 的炎癥反應(yīng)和瘢痕形成密切相關(guān)。Kugler 等[31]的研究證實(shí)大鼠SCI 模型給予TGF-β治療后5 d,其后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)較對(duì)照組效果明顯,但后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘢痕增生較對(duì)照組更多。

    4 mTOR 信號(hào)通路

    4.1 mTOR 信號(hào)通路的來(lái)源

    mTOR 信號(hào)通路在哺乳動(dòng)物中的靶點(diǎn)是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,屬于磷酸肌醇3 激酶相關(guān)蛋白激酶家族,在細(xì)胞代謝、增殖、分化和凋亡方面起到關(guān)鍵作用,并參與轉(zhuǎn)錄、mRNA 翻譯、自噬等生理過(guò)程。mTOR 信號(hào)通路也涉及神經(jīng)發(fā)育、通路形成、突觸可塑性、學(xué)習(xí)和記憶過(guò)程[32]。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi),mTOR分為mTORC1 和mTORC2,mTORC1 對(duì)雷帕霉素的作用敏感,而mTORC2 對(duì)雷帕霉素具有抗藥性。mTORC1在抑制自噬的同時(shí),對(duì)蛋白質(zhì)合成、核糖體生物生成和脂肪生成中起到積極的調(diào)節(jié)作用,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝,而mTORC2 則控制細(xì)胞生存、增殖[32]。

    4.2 mTOR 信號(hào)通路的機(jī)制

    mTOR 可對(duì)細(xì)胞外多種刺激產(chǎn)生應(yīng)答,如生長(zhǎng)因子、胰島素、營(yíng)養(yǎng)素、氨基酸、葡萄糖等,主要通過(guò)經(jīng)典的PI3K/Akt/mTOR 途徑來(lái)實(shí)現(xiàn),而PI3K/Akt/mTOR 信號(hào)通路的激活涉及膠質(zhì)瘢痕形成。結(jié)節(jié)性腦硬化復(fù)合物(tuberous sclerosis complex,TSC)是由TSC-1、TSC-2和TBC1D7 形成三聚體復(fù)合物,該復(fù)合物是Rheb 的抑制劑,而Rheb 是mTOR 活化所必需的,因此TSC 是mTOR 關(guān)鍵負(fù)調(diào)控因子[33]。在NSC 中,mTORC1 的過(guò)度激活與TSC 低表達(dá)有關(guān),而Akt 的活化可抑制TSC的形成,從而激活mTOR 信號(hào)通路,同時(shí)mTORC1 以通過(guò)抑制PI3K 信號(hào)和mTORC1 的激活來(lái)自我調(diào)節(jié)并形成負(fù)反饋回路。

    4.3 mTOR 信號(hào)通路與SCI 修復(fù)

    mTOR 信號(hào)對(duì)于控制干細(xì)胞增殖和分化至關(guān)重要。Ryskalin 等[34]研究表明,mTORC1 信號(hào)改變可導(dǎo)致NSC 的增殖增強(qiáng),但不會(huì)促進(jìn)NSC 分化。mTOR 信號(hào)通路在SCI 不同時(shí)間段中發(fā)揮的作用也不相同。小鼠急性SCI 模型中抑制mTOR 能夠促進(jìn)自噬,顯著減少損傷處神經(jīng)元和神經(jīng)細(xì)胞死亡,抑制mTOR 會(huì)降低小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的促炎癥因子的表達(dá)水平。在亞急性/慢性SCI 模型中,利用Rapa 抑制mTOR 通路,可以抑制SCI 后新蛋白的合成和減低星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖,進(jìn)而達(dá)到促進(jìn)軸突再生和髓鞘的形成,最終促進(jìn)SCI 修復(fù)。

    5 結(jié)語(yǔ)

    目前針對(duì)SCI 的治療研究主要是兩個(gè)方向:一是通過(guò)NSC 移植,使其分化成神經(jīng)元來(lái)治療;二是通過(guò)各種刺激,促使現(xiàn)有神經(jīng)元再生和增殖,進(jìn)而達(dá)到治療目的。無(wú)論哪一種方法都與信號(hào)通路密切相關(guān),但對(duì)于移植NSC 來(lái)治療SCI 這種方法還存在著很多不可忽視的問(wèn)題,最核心原因還是內(nèi)源性NSC 不足,而利用胚胎干細(xì)胞又會(huì)引起倫理道德問(wèn)題。而且,體外長(zhǎng)時(shí)間人工培養(yǎng)擴(kuò)增NSC 的生物安全性也遭到質(zhì)疑。

    調(diào)節(jié)信號(hào)通路來(lái)修復(fù)SCI 現(xiàn)在已成為前沿的研究課題,但其具體作用及機(jī)制尚未研究透徹,尤其是信號(hào)通路如何調(diào)控SCI 的修復(fù),所以有廣闊的研究空間及前景,需要更加深入了解信號(hào)通路與SCI 的相關(guān)分子機(jī)制,為SCI 的臨床治療提供更加有意義的參考價(jià)值。

    猜你喜歡
    膠質(zhì)脊髓分化
    人工3D脊髓能幫助癱瘓者重新行走?
    軍事文摘(2022年8期)2022-11-03 14:22:01
    兩次中美貨幣政策分化的比較及啟示
    分化型甲狀腺癌切除術(shù)后多發(fā)骨轉(zhuǎn)移一例
    人類(lèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞和NG2膠質(zhì)細(xì)胞的特性
    視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞的研究進(jìn)展
    姜黃素對(duì)脊髓損傷修復(fù)的研究進(jìn)展
    側(cè)腦室內(nèi)罕見(jiàn)膠質(zhì)肉瘤一例
    磁共振成像(2015年1期)2015-12-23 08:52:21
    Cofilin與分化的研究進(jìn)展
    中西醫(yī)結(jié)合治療脊柱骨折合并脊髓損傷25例
    間歇導(dǎo)尿配合溫和灸治療脊髓損傷后尿潴留30例
    夜夜夜夜夜久久久久| 国产色视频综合| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 捣出白浆h1v1| 国精品久久久久久国模美| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 在线永久观看黄色视频| 午夜免费鲁丝| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | √禁漫天堂资源中文www| 国产精品九九99| 人妻 亚洲 视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 在线观看舔阴道视频| 午夜精品国产一区二区电影| 夜夜夜夜夜久久久久| av在线播放免费不卡| 国产亚洲精品一区二区www | 免费在线观看影片大全网站| 国产1区2区3区精品| 很黄的视频免费| 日本黄色日本黄色录像| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产99久久九九免费精品| 电影成人av| 在线观看免费视频网站a站| 夜夜夜夜夜久久久久| 黄色视频不卡| а√天堂www在线а√下载 | 亚洲精品一二三| 少妇粗大呻吟视频| 午夜福利视频在线观看免费| 午夜福利在线免费观看网站| 高清在线国产一区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久久亚洲真实| 亚洲av熟女| 90打野战视频偷拍视频| 大香蕉久久网| 免费在线观看完整版高清| 日本五十路高清| 国产高清视频在线播放一区| 日日爽夜夜爽网站| 日韩有码中文字幕| 怎么达到女性高潮| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 丰满迷人的少妇在线观看| 午夜91福利影院| 狂野欧美激情性xxxx| 国产av又大| 久久久久国内视频| 国产黄色免费在线视频| 免费高清在线观看日韩| 精品人妻在线不人妻| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产高清激情床上av| 久久ye,这里只有精品| 超色免费av| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品免费一区二区三区在线 | 国产一区二区三区视频了| 欧美乱色亚洲激情| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 99久久精品国产亚洲精品| 一边摸一边抽搐一进一小说 | x7x7x7水蜜桃| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲伊人色综图| 亚洲视频免费观看视频| 久久久久久久久免费视频了| 精品第一国产精品| 免费在线观看亚洲国产| 久久国产精品大桥未久av| 精品国产一区二区三区四区第35| 精品国产一区二区三区四区第35| av视频免费观看在线观看| 一级黄色大片毛片| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 在线天堂中文资源库| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲第一青青草原| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲一码二码三码区别大吗| 精品亚洲成国产av| 美女视频免费永久观看网站| 亚洲精品在线美女| 久久久久久人人人人人| 国产精品久久久久久精品古装| 日韩有码中文字幕| 亚洲人成电影观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产淫语在线视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 在线观看66精品国产| 大香蕉久久成人网| 啦啦啦免费观看视频1| 成人国产一区最新在线观看| 免费不卡黄色视频| 免费黄频网站在线观看国产| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 丝袜在线中文字幕| 午夜两性在线视频| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 午夜免费鲁丝| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 最近最新免费中文字幕在线| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产一区二区三区视频了| 女性被躁到高潮视频| 久久久久久久国产电影| 国产成人精品无人区| 一个人免费在线观看的高清视频| www.999成人在线观看| 欧美黑人精品巨大| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美 日韩 精品 国产| 又紧又爽又黄一区二区| 韩国av一区二区三区四区| 一进一出抽搐gif免费好疼 | a级毛片在线看网站| 国产有黄有色有爽视频| 露出奶头的视频| 女人久久www免费人成看片| 久久久久精品人妻al黑| 黄片小视频在线播放| 久久ye,这里只有精品| 男人的好看免费观看在线视频 | 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 午夜久久久在线观看| 精品福利永久在线观看| 精品免费久久久久久久清纯 | 午夜日韩欧美国产| 亚洲免费av在线视频| 亚洲精品自拍成人| 中文字幕人妻熟女乱码| 性少妇av在线| 久久精品亚洲av国产电影网| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产成人欧美| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| av天堂久久9| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 在线观看免费午夜福利视频| 久久九九热精品免费| 麻豆国产av国片精品| 黄色片一级片一级黄色片| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 很黄的视频免费| 精品欧美一区二区三区在线| 精品无人区乱码1区二区| 精品国产一区二区久久| 亚洲一区二区三区欧美精品| a级毛片在线看网站| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 12—13女人毛片做爰片一| 国产亚洲精品一区二区www | 精品亚洲成a人片在线观看| 欧美日韩精品网址| 欧美日韩av久久| 亚洲专区国产一区二区| 欧美精品亚洲一区二区| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美国产精品va在线观看不卡| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 亚洲av片天天在线观看| 热re99久久国产66热| 亚洲欧美激情综合另类| 精品国产一区二区久久| 日本vs欧美在线观看视频| 一区二区三区精品91| 欧美精品一区二区免费开放| 国产精品偷伦视频观看了| 久久99一区二区三区| 老司机影院毛片| 老司机影院毛片| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 一二三四社区在线视频社区8| 久久中文看片网| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲久久久国产精品| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 女性生殖器流出的白浆| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 又紧又爽又黄一区二区| 日日爽夜夜爽网站| aaaaa片日本免费| 午夜精品久久久久久毛片777| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产精品免费大片| 黄色怎么调成土黄色| 成人18禁在线播放| 亚洲人成电影观看| 麻豆国产av国片精品| 1024视频免费在线观看| 国产av又大| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 老熟女久久久| 黄色女人牲交| 91成年电影在线观看| 黄片小视频在线播放| 久久久久国内视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 99国产精品免费福利视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产色视频综合| 老司机午夜十八禁免费视频| 黄色丝袜av网址大全| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 看黄色毛片网站| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 免费在线观看日本一区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产精品久久久久成人av| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 免费不卡黄色视频| 搡老乐熟女国产| netflix在线观看网站| 亚洲五月色婷婷综合| 乱人伦中国视频| 99re在线观看精品视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 丝瓜视频免费看黄片| a级片在线免费高清观看视频| 丁香欧美五月| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 成人三级做爰电影| 成人影院久久| 久久 成人 亚洲| 9191精品国产免费久久| xxx96com| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲情色 制服丝袜| 日韩有码中文字幕| 国产极品粉嫩免费观看在线| 99香蕉大伊视频| √禁漫天堂资源中文www| 美国免费a级毛片| av免费在线观看网站| 热re99久久精品国产66热6| 欧美精品高潮呻吟av久久| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 丝袜人妻中文字幕| 极品人妻少妇av视频| 午夜精品在线福利| 黄片大片在线免费观看| 三级毛片av免费| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲五月色婷婷综合| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲国产看品久久| 一进一出抽搐gif免费好疼 | 脱女人内裤的视频| 九色亚洲精品在线播放| 欧美精品高潮呻吟av久久| a级片在线免费高清观看视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 视频区欧美日本亚洲| 免费看十八禁软件| 国产国语露脸激情在线看| 精品久久久久久久久久免费视频 | 99久久综合精品五月天人人| 91大片在线观看| 久久影院123| 高清在线国产一区| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产深夜福利视频在线观看| 午夜福利,免费看| 亚洲,欧美精品.| 久久久国产精品麻豆| 嫁个100分男人电影在线观看| 久久久国产成人精品二区 | 色综合欧美亚洲国产小说| 国产在线精品亚洲第一网站| 麻豆国产av国片精品| 国产精品一区二区免费欧美| 欧美性长视频在线观看| 9热在线视频观看99| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产精品久久久av美女十八| 日本精品一区二区三区蜜桃| 99国产精品免费福利视频| 久久精品人人爽人人爽视色| a在线观看视频网站| 成年女人毛片免费观看观看9 | 老熟妇乱子伦视频在线观看| www.自偷自拍.com| 亚洲精品一二三| 久久精品国产亚洲av高清一级| 午夜精品久久久久久毛片777| 夫妻午夜视频| 欧美人与性动交α欧美软件| 美女视频免费永久观看网站| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产一区二区激情短视频| a级片在线免费高清观看视频| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 制服诱惑二区| 国产熟女午夜一区二区三区| 热99re8久久精品国产| 精品国产乱子伦一区二区三区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲人成电影观看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产精品偷伦视频观看了| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲九九香蕉| 久久亚洲真实| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 我的亚洲天堂| 国产精品久久久久久精品古装| 国产精品久久久人人做人人爽| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 国产亚洲精品久久久久5区| 在线观看一区二区三区激情| 国产精品久久久人人做人人爽| 日本黄色日本黄色录像| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产亚洲欧美98| 777米奇影视久久| av国产精品久久久久影院| 亚洲精品在线美女| 97人妻天天添夜夜摸| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 中文字幕人妻丝袜制服| 久9热在线精品视频| 午夜成年电影在线免费观看| a级毛片黄视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲av日韩在线播放| 在线播放国产精品三级| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 1024香蕉在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 美女扒开内裤让男人捅视频| 老司机在亚洲福利影院| 人妻 亚洲 视频| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产色视频综合| 免费观看精品视频网站| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日韩精品免费视频一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av | 久久精品国产a三级三级三级| 久久精品人人爽人人爽视色| 最近最新中文字幕大全免费视频| 色婷婷av一区二区三区视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产野战对白在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 久久精品91无色码中文字幕| 国产精品 欧美亚洲| 欧美精品亚洲一区二区| 国产高清激情床上av| 最近最新中文字幕大全免费视频| 精品久久蜜臀av无| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产又爽黄色视频| cao死你这个sao货| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产免费男女视频| 国产在线观看jvid| 亚洲一码二码三码区别大吗| 99久久综合精品五月天人人| www日本在线高清视频| 日本欧美视频一区| 一夜夜www| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 国产精品永久免费网站| 一级黄色大片毛片| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产精品成人在线| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 婷婷成人精品国产| 国产一区二区激情短视频| 69精品国产乱码久久久| 欧美久久黑人一区二区| 午夜两性在线视频| 黄色视频不卡| 在线观看日韩欧美| 一级毛片高清免费大全| 美女午夜性视频免费| 久久国产精品大桥未久av| 日本wwww免费看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 久久国产精品影院| 亚洲视频免费观看视频| 在线观看日韩欧美| 午夜日韩欧美国产| 久久久国产欧美日韩av| 99国产精品免费福利视频| 在线看a的网站| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 成人av一区二区三区在线看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 午夜日韩欧美国产| 亚洲美女黄片视频| 男女下面插进去视频免费观看| 欧美中文综合在线视频| 亚洲情色 制服丝袜| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 精品第一国产精品| 久久久久久人人人人人| 黄频高清免费视频| 老司机福利观看| 麻豆成人av在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线 | 午夜精品久久久久久毛片777| 一级毛片高清免费大全| 久久亚洲精品不卡| 免费在线观看亚洲国产| 少妇 在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 热re99久久国产66热| 色综合婷婷激情| 国产又爽黄色视频| 精品福利永久在线观看| 咕卡用的链子| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 最近最新免费中文字幕在线| 中文字幕色久视频| 午夜两性在线视频| 香蕉丝袜av| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产高清视频在线播放一区| 精品国产乱码久久久久久男人| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久精品国产亚洲av高清一级| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日本欧美视频一区| 欧美精品一区二区免费开放| 国产亚洲精品一区二区www | 亚洲精品乱久久久久久| 999精品在线视频| 大型av网站在线播放| 一级毛片女人18水好多| 亚洲第一av免费看| 香蕉国产在线看| 亚洲国产精品合色在线| www.999成人在线观看| 女人精品久久久久毛片| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 两个人看的免费小视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 麻豆国产av国片精品| 热99国产精品久久久久久7| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 中文亚洲av片在线观看爽 | 一级毛片女人18水好多| 欧美黑人精品巨大| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲三区欧美一区| а√天堂www在线а√下载 | 一区福利在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 下体分泌物呈黄色| 午夜福利在线免费观看网站| 国产高清videossex| 午夜精品国产一区二区电影| 免费人成视频x8x8入口观看| 美女福利国产在线| 另类亚洲欧美激情| 两人在一起打扑克的视频| 妹子高潮喷水视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日本五十路高清| 桃红色精品国产亚洲av| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲国产看品久久| 一级,二级,三级黄色视频| 看黄色毛片网站| 国产蜜桃级精品一区二区三区 | 中文字幕高清在线视频| 美女午夜性视频免费| 69av精品久久久久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 精品国产美女av久久久久小说| 黄色片一级片一级黄色片| 国产精品亚洲一级av第二区| 中文字幕人妻丝袜制服| 日日夜夜操网爽| 精品国产美女av久久久久小说| 99热国产这里只有精品6| 国产精品98久久久久久宅男小说| 天天添夜夜摸| 久久青草综合色| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 精品熟女少妇八av免费久了| av免费在线观看网站| 久久精品人人爽人人爽视色| 成人影院久久| 色在线成人网| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲国产精品sss在线观看 | 一进一出抽搐gif免费好疼 | 国产精品九九99| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产成人av激情在线播放| 国产成人系列免费观看| 一区在线观看完整版| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 99国产综合亚洲精品| 精品国产乱子伦一区二区三区| 在线观看免费视频网站a站| 热99re8久久精品国产| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲国产欧美一区二区综合| av不卡在线播放| 女性生殖器流出的白浆| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲第一青青草原| 久久久久精品国产欧美久久久| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲人成电影免费在线| 婷婷成人精品国产| 国产熟女午夜一区二区三区| 一进一出抽搐gif免费好疼 | 国产av精品麻豆| 91老司机精品| 黄色女人牲交| 99久久综合精品五月天人人| 午夜影院日韩av| 亚洲人成伊人成综合网2020| 欧美日韩亚洲高清精品| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久香蕉精品热| 一级片免费观看大全| 韩国av一区二区三区四区| 美女高潮到喷水免费观看| 国产精品一区二区免费欧美| 国产一卡二卡三卡精品| 黑人猛操日本美女一级片| av在线播放免费不卡| 中文字幕色久视频| 久久久国产欧美日韩av| 老司机午夜十八禁免费视频| 成人国产一区最新在线观看| 女警被强在线播放| 欧美 日韩 精品 国产| 99riav亚洲国产免费| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| av有码第一页| 成人精品一区二区免费| 五月开心婷婷网| 看片在线看免费视频| 女性生殖器流出的白浆| 国产1区2区3区精品| av有码第一页| 丁香六月欧美| 欧美激情极品国产一区二区三区| 脱女人内裤的视频| 久久久水蜜桃国产精品网| 欧美国产精品一级二级三级| 日韩成人在线观看一区二区三区| 老司机午夜十八禁免费视频| 悠悠久久av| 欧美日韩福利视频一区二区| 午夜两性在线视频| 国产精品成人在线| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 两性夫妻黄色片| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲色图av天堂| 成年人免费黄色播放视频| 国产99久久九九免费精品| 久久久久精品人妻al黑| 午夜免费鲁丝| 亚洲av成人av| 窝窝影院91人妻| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 一区二区三区国产精品乱码| 精品久久久久久久毛片微露脸| 91在线观看av| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 成人永久免费在线观看视频| 中文字幕人妻丝袜制服| 757午夜福利合集在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 91九色精品人成在线观看| 国产有黄有色有爽视频| 欧美性长视频在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 午夜激情av网站| 久久精品成人免费网站| 久久久精品区二区三区| av福利片在线| 欧美+亚洲+日韩+国产| aaaaa片日本免费| 免费少妇av软件| 男女高潮啪啪啪动态图| 欧美黄色片欧美黄色片| 啦啦啦在线免费观看视频4|