海膽和海參中microRNAs的研究進展

尹文露，劉 麗，趙譚軍，韓森榮，宋 堅，李瑩瑩，常亞青，湛垚垚

（大連海洋大學農(nóng)業(yè)農(nóng)村部北方海水增養(yǎng)殖重點實驗室，遼寧大連116023）

0 引言

MicroRNAs(MiRNAs)是一類由真核生物內(nèi)源基因編碼產(chǎn)生的長度約為20 nt的調(diào)控型非編碼RNAs(non-coding RNAs，ncRNAs)，主要通過mRNA剪切和抑制蛋白質(zhì)翻譯等方式調(diào)控靶基因的表達。自1993年在秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)中首次發(fā)現(xiàn)miRNA——lin-4以來[1]，關于真核生物體內(nèi)miRNAs的鑒定及其生物學功能的研究便廣泛開展了起來?，F(xiàn)已證實，miRNAs可通過調(diào)控生物體內(nèi)約50%以上的蛋白質(zhì)編碼基因，參與生長發(fā)育[2]、免疫防御[3]和生理代謝[4]等多種生命過程。此外，研究發(fā)現(xiàn)miRNAs對其靶基因的調(diào)控還具有多向性和復雜性的特點，即miRNAs既可以對靶基因的轉(zhuǎn)錄進行負向調(diào)控又可以進行正向調(diào)控[5-6]，同一個miRNA可調(diào)控多個甚至上千個靶基因的表達，而同一個靶基因的表達也可以受到多個miRNAs的調(diào)控[6-7]。

海膽(sea urchins)和海參(sea cucumbers)屬棘皮類動物(echinoderms)，是高等海洋無脊椎動物的重要代表物種，其中某些種類還是重要的世界性漁業(yè)資源，具有較高的商業(yè)價值。比如，海膽綱中的中間球海膽(Strongylocentrotus intermedius)，被認為是海膽中性腺品質(zhì)最好的種類，是中國重要的海膽?zhàn)B殖品種和出口海產(chǎn)品種類，市場需求量逐年增加。海參綱中的刺參(Apostichopus japonicas)在亞洲被譽為“海產(chǎn)八珍”之首，其產(chǎn)業(yè)規(guī)模從1980年開始迅速擴張，目前西太平洋地區(qū)刺參的平均年養(yǎng)殖產(chǎn)量已經(jīng)從2008年的9.3×104t[8]增加到2018年的1.74×105t[9]。近年來，探明各類miRNAs在海膽和海參生長發(fā)育以及生理代謝過程中的調(diào)控功能及調(diào)控機制已逐漸成為海膽和海參研究領域的熱點，因此，本研究中綜述了近年來海膽和海參中miRNAs的研究相關成果及進展，以期進一步豐富和完善海膽和海參中miRNAs的基礎資料，為系統(tǒng)了解和掌握海膽和海參中miRNAs的序列特點、生物學功能及其參與調(diào)控重要生理過程的分子機制提供參考資料。

1 動物體內(nèi)miRNAs的成熟及其調(diào)控機制

在動物體內(nèi)，miRNA的成熟可分為4個階段（圖1）：（1）細胞核中初級 miRNA(primary miRNA，primiRNA)的生成——miRNA基因絕大部分由RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ)介導轉(zhuǎn)錄[10]，極小部分由RNA聚合酶Ⅲ(RNA polymeraseⅢ)介導轉(zhuǎn)錄[11]，形成長度為300～1000 nt的pri-miRNA；（2）pri-miRNA加工轉(zhuǎn)化為miRNA前體(precursormiRNA，premiRNA)——pri-miRNA會在細胞核中被核糖核酸酶ⅢDrosha(ribonucleaseⅢ Drosha)和RNA結(jié)合蛋白(digeorge syndrome chromosomal region 8，DGCR8)復合體切割成長約70 nt的發(fā)卡環(huán)結(jié)構(gòu)pre-miRNA[12]；（3）pre-miRNA從細胞核向細胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運——premiRNA會被輸出蛋白5(exportin-5)以及GTP結(jié)合蛋白(GTP binding protein)由細胞核轉(zhuǎn)運到細胞質(zhì)中[13]；（4）miRNA的成熟——pre-miRNA在細胞質(zhì)中被核糖核酸酶ⅢDicer(ribonucleaseⅢDicer)切割形成約為20 nt左右的成熟miRNA雙鏈復合體，并與RNA干擾效應分子Argonaute蛋白(Ago)一起被整合到效應分子中，形成RNA誘導的沉默復合物(RNA-induced silencing complex，RISC)復合體，通過解旋酶生成2條成熟的miRNA[14]。成熟后的miRNA主要是通過與其靶基因3'非編碼區(qū)域(3'-untranslated region，3'-UTR)中特異性的“種子序列”(seed sequences)的結(jié)合進而對靶基因進行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控[15]。此外，miRNA還可以通過與靶基因的編碼區(qū)域(coding sequence)、5'非編碼區(qū)域(5'-untranslated region，5'-UTR)及啟動子區(qū)(promoter)進行結(jié)合后進一步行使其生物學功能[16-17]。

圖1 動物體內(nèi)miRNA的成熟過程示意圖

2 海膽和海參中miRNAs的生物功能

2.1 參與調(diào)控生長與發(fā)育

生長發(fā)育是從受精卵至成熟個體的重要生命現(xiàn)象，也是一個極其復雜的動態(tài)變化過程。由于海膽作為胚胎發(fā)育生物學的模式生物已經(jīng)有100多年的歷史，因此，目前關于海膽和海參中參與調(diào)控生長發(fā)育的miRNAs的研究多集中于miRNAs對海膽胚胎發(fā)育的調(diào)控作用。

21世紀初，人們就已經(jīng)發(fā)現(xiàn)miRNAs對海膽胚胎發(fā)育的調(diào)節(jié)有著至關重要的作用。Song等[18]的研究顯示，miRNAs是紫球海膽(Strongylocentrotus purpuratus)胚胎發(fā)育基因調(diào)控網(wǎng)絡的重要組成部分，通過抑制dicer和drosha基因的功能來抑制miRNAs的正常成熟會導致紫球海膽的胚胎無法正常發(fā)育，形成原腸胚而導致胚胎死亡。

Wnt信號通路(Wnt signaling pathway)是影響動物胚胎發(fā)育的重要蛋白信號網(wǎng)絡，可介導動物胚胎發(fā)育過程中的細胞增殖分化、體軸發(fā)生和形態(tài)形成等多種細胞反應[19]。海膽中的miR-2007和miRDeep2-35240是2個最早被發(fā)現(xiàn)參與Wnt信號通路調(diào)控的miRNAs。在紫球海膽中，miR-2007的長度為25 nt，其種子序列為“-TAAAGTC-”，與Wnt信號通路中的βcatenin基因的3'非編碼區(qū)有2個結(jié)合位點（圖2A），miRDeep2-35240的長度為25 nt，其種子序列為“-TAACGTG-”，與紫海膽Wnt信號通路中的β-catenin基因的3'非編碼區(qū)有1個結(jié)合位點（圖2A）。有研究顯示，阻斷miR-2007和miRDeep2-35240與β-catenin基因的結(jié)合，會導致紫球海膽個體的腸和食道肌肉組織的發(fā)育缺陷[20]。值得注意的是，紫球海膽miRDeep2-35240和人類的miR-25有著相同的“種子序列”，且兩者都可以影響Wnt信號通路中β-catenin基因的表達[20-21]，提示海膽中的miRDeep2-35240與人類的miR-25可能具有相似的調(diào)節(jié)功能，但兩者的系統(tǒng)進化軌跡仍需進一步的研究和探索。miR153-3p、miR-2002、miR-200和miRDeep2-30364是最新被證實參與調(diào)控海膽早期發(fā)育過程中Wnt信號通路的miRNAs，它們可分別調(diào)控海膽Wnt信號通路中的編碼不同Dvl蛋白亞型的基因的表達。Dvl蛋白是Wnt信號通路中的關鍵蛋白，起著將細胞信息傳遞到各種發(fā)育途徑中的重要作用，在海膽中，Dvl蛋白有4個亞型，分別由dvl5a、dvl1、dvl4a和dvl4b基因編碼[22]。在紫球海膽中，miR-153-3p的長度為25 nt，其種子序列為“-TAAAAA-”，與紫球海膽Wnt信號通路中的dvl5a基因的3'非編碼區(qū)有2個結(jié)合位點（圖2B）；miR-2002的長度為25 nt，其種子序列為“-CTTATGT-”，與紫球海膽Wnt信號通路中的dvl4a和dvl1基因的3'非編碼區(qū)均有1個結(jié)合位點（圖2C）。紫球海膽的miR-200的長度也為25 nt，其種子序列為“-GTATGAT-”，與紫球海膽Wnt信號通路中的dvl4b基因的3'非編碼區(qū)有1個結(jié)合位點（圖2D）。miRDeep2-30364的種子序列為“-TAACGTG-”，其在紫球海膽Wnt通路中dvl5a和dvl1基因的3'非編碼區(qū)均有1個結(jié)合位點（圖2B、E）。進一步的研究指出，阻斷miR153-3p、miR-2002、miR-200和miRDeep2-30364與其靶基因dvl5a、dvl4a、dvl1和dvl4b的結(jié)合，可能會干擾紫球海膽Wnt信號的正常轉(zhuǎn)導，對紫球海膽浮游幼體的骨針長度、初級間充質(zhì)細胞(primary mesenchyme cell，PMC)的形態(tài)、腸道形態(tài)和纖毛均產(chǎn)生不同程度的影響[22]。此外，miR-2007也可以抑制紫球海膽Wnt信號通路中Dvl蛋白亞型編碼基因dvl5a、dvl4a和dvl4b的表達，進而導致紫球海膽Wnt信號通路紊亂[22]（圖2C、E）。

圖2 miRNAs與Dvl蛋白亞型基因的結(jié)合位點

miRNAs除了通過調(diào)控Wnt信號通路影響海膽胚胎的發(fā)育外，還可通過其他途徑對海膽的胚胎發(fā)育產(chǎn)生影響。比如，miR-31是一種高度保守的miRNA，其成熟序列的長度在21～24 nt之間并有長度為16 nt的保守堿基，在脊椎動物的成骨細胞分化中發(fā)揮著重要的作用[23]。在海膽中，miR-31不僅在海膽的早期胚胎發(fā)育中具有較高的相對表達水平，在海膽生活周期的其他階段也保持著較為廣泛的表達。在紫球海膽中，miR-31可以通過種子序列“-TCTTGCC-”與pmar1、alx1、snail和vegfr7基因的3'非編碼區(qū)域完全結(jié)合來直接抑制這4個基因的表達，實現(xiàn)對紫球海膽初級間充質(zhì)細胞的形態(tài)形成和骨骼形成的調(diào)控，進而影響紫球海膽的胚胎發(fā)育過程[24]。有趣的是，在海膽骨骼形成中發(fā)揮重要作用的除vegfr7基因外，還有與其同屬于同一家族的vegf3基因[25]。雖然vegf3基因的非編碼區(qū)并不存在與miR-31的結(jié)合位點，但是，當敲除miR-31基因后，紫球海膽胚胎中的vegf3基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物又會顯著增加[24]，因此推測miR-31可能是通過間接方式調(diào)控外胚層中vegf3基因的表達，但其具體的調(diào)控機制仍需進一步的研究。

目前，關于miRNAs調(diào)控海參生長發(fā)育方面的研究較少。現(xiàn)有報道顯示，刺參中的miR-10a-5p、miR-10a和miR-200-3p可能會通過調(diào)控其潛在的靶基因acadl和hhadh的相對表達，影響刺參體內(nèi)線粒體中的脂肪酸β-氧化的速度，進而對刺參的生長發(fā)育產(chǎn)生相應的影響[26-27]。

2.2 參與調(diào)控病原體免疫反應

海膽與海參都是推演先天免疫系統(tǒng)起源和進化的重要模式生物，但是，由于海參種類在養(yǎng)殖規(guī)模和經(jīng)濟價值上要高于海膽類，目前關于海膽和海參中參與病原體免疫防御反應的miRNAs多集中于海參類，尤其是重要的養(yǎng)殖種類——刺參。越來越多的證據(jù)表明，miRNAs對海參先天免疫防御的調(diào)控主要是通過調(diào)控海參體內(nèi)補體系統(tǒng)(complement system)和Toll樣受體(Toll like receptor，TLR)信號通路中的相關因子而實現(xiàn)的。其中，補體系統(tǒng)是海參先天免疫的重要組成部分，在消除病原菌和維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮著重要作用，而刺參的C3補體(complement component 3，C3)則是刺參補體系統(tǒng)的中心樞紐[28]；而刺參體內(nèi)的TLR信號通路則是通過特異性銜接子募集來激活核因子-κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)、干擾素調(diào)節(jié)因子(interferon-regulatory factors，IRFs)和腫瘤壞死因子(tumor necrosis factors，TNFs)等先天性免疫相關因子，參與和調(diào)控刺參的免疫應答反應[29]。

miR-133和miR-137是最早被證實參與調(diào)控刺參補體系統(tǒng)中心分子——C3補體的重要miRNAs。在刺參中，miR-133的長度為23 nt，其種子序列為“-UUG GUCC-”，與刺參補體系統(tǒng)中c3基因的3'非編碼區(qū)有1個結(jié)合位點（圖3）。利用脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)對刺參進行免疫刺激后發(fā)現(xiàn)，在LPS刺激的第6～12 h中，刺參體內(nèi)的miR-133的相對表達呈上調(diào)趨勢且在第9 h時達到峰值，但在LPS刺激的第9～12 h中，刺參體內(nèi)的c3的相對表達卻呈現(xiàn)下調(diào)趨勢[30]，即，在LPS刺激后的第9～12 h中，刺參體內(nèi)的miR-133和c3的相對表達呈負相關，據(jù)此推斷，miR-133可能通過靶向抑制刺參體內(nèi)c3的轉(zhuǎn)錄來調(diào)節(jié)補體系統(tǒng)的免疫應答。miR-137是一種通過控制細胞周期和細胞分化過程來影響動物疾病發(fā)展的miRNA[31]。在刺參中，miR-137的長度為22 nt，其種子序列為“-AUUGCUU-”，與刺參的c3基因的3'非編碼區(qū)有1個結(jié)合位點（圖3）。研究顯示，在LPS刺激9 h后，刺參體內(nèi)的miR-137的相對表達呈現(xiàn)下調(diào)趨勢，進一步的分析發(fā)現(xiàn)，miR-137可以抑制刺參體腔細胞中c3基因的mRNA的翻譯，推測miR-137可通過靶向調(diào)節(jié)C3蛋白的表達來參與刺參的免疫應答反應[32]。此外，最新的研究還證實，刺參中的miR-2004和miR-2006也可以通過靶向調(diào)節(jié)c3基因來參與免疫反應[32]。上述研究結(jié)果，不僅在一定程度上揭示了miRNAs對基因調(diào)節(jié)的多向性和刺參（乃至棘皮動物）先天免疫的復雜性，同時也為不同miRNAs可以執(zhí)行相同功能來使基因組功能最大化提供了有力證據(jù)。

圖3 miR-133、miR-137與c3基因的結(jié)合位點

在TLR信號通路調(diào)控方面，miR-200和miR-2008被證實可分別靶向調(diào)控2種TLR信號通路相關分子——tollip[33]和tlr3[34]參與刺參的先天免疫過程（圖4）。在刺參中，miR-200是一種長為23 nt的小分子RNA，其種子序列為“-AAUACUG-”位于5'端的2～8位，與TLR信號通路中tollip基因3'非編碼區(qū)有1個結(jié)合位點（圖5）。研究表明，miR-200可以靶向TLR通路的成員來參與TLR信號的級聯(lián)調(diào)控[35]。例如，在被燦爛弧菌(Vibrio splendidus)感染的刺參個體和被LPS刺激的刺參初級體腔細胞(primary coelomocytes)中，miR-200和Toll相互作用蛋白(toll-interacting protein，Tollip)在所有檢測的時間點均呈正表達相關，這一結(jié)果說明，刺參中的miR-200具有增強體腔細胞的抗菌活性和抑制LPS啟動的雙重功能[33]。刺參中的miR-2008的長度為21 nt，其種子序列為“-UCAGCCU-”，與刺參抗細菌感染關鍵基因——tlr3的3'非編碼區(qū)有1個結(jié)合位點（圖5），是海參皮膚潰瘍綜合征(sea cucumber skin ulceration syndrome，SUS)爆發(fā)的重要調(diào)節(jié)因子[34]。研究發(fā)現(xiàn)，在燦爛弧菌感染后的第12 h，刺參中的miR-2008的相對表達呈顯著增加趨勢而tlr3的相對表達則呈現(xiàn)顯著降低趨勢[34]，提示在受細菌感染的刺參中，miR-2008可能通過靶向調(diào)控與TLR途徑相關的基因來參與免疫應答，但其具體的機制尚待深入研究。除了上述miRNAs外，miR-133、miR-31和miR-210也被證實可以通過靶向調(diào)控irapk-1、p105和toll的表達來介導刺參中TLR信號的級聯(lián)激活（圖4）[34,36]。

圖4 miRNAs參與TLR信號通路相關基因調(diào)控模式圖

圖5 miR-200與tollip基因及miR-2008與tlr3基因的結(jié)合位點

現(xiàn)有研究顯示，miRNAs對海參的免疫調(diào)節(jié)機制非常復雜，除上述2種途徑外，miR-92a對14-3-3ζ的調(diào)節(jié)作用也說明miRNAs可以通過參與活性氧(reactive oxygen species,ROS)的調(diào)節(jié)和細胞凋亡途徑來影響海參的免疫反應[37]。最近還有研究發(fā)現(xiàn)，一些miRNA可能對患海參皮膚潰瘍綜合征的刺參的病原菌附著和識別，信號轉(zhuǎn)導和病變修復起重要作用[38]。這對海參的先天免疫應答及機制的研究具有重要的學術意義，同時也對海參產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展性有著重要的意義。

2.3 參與響應環(huán)境應激

環(huán)境應激是由于外界環(huán)境條件改變而引起的生物個體生理代謝發(fā)生變化的一種反應，也是生物對生存環(huán)境變化產(chǎn)生的適應的前提和基礎。海洋是海膽和海參類動物賴以生存的媒介，半開放式的循環(huán)系統(tǒng)決定了海膽和海參類動物時刻與海水發(fā)生著液體交換，因此，海洋環(huán)境因子的而變化對海膽和海參類動物的生存、生理代謝和種群規(guī)模等都具有重要影響。

海水鹽度(sea-water salinity，SS)指的是海水質(zhì)量與水中可溶固體質(zhì)量的比，是影響海膽和海參類生存的重要環(huán)境因子之一。有研究顯示，海膽和海參類動物主要通過滲透壓調(diào)節(jié)來適應海水鹽度的變化。研究證實，刺參中的miR-10具有1個長度為7 bp的種子序列“-UGUCCCA-”可以通過與tbc1d5基因的3'UTR相結(jié)合，以實現(xiàn)對tbc1d5基因的轉(zhuǎn)錄進行負調(diào)控[39]。TBC1D5不僅是細胞外環(huán)境中內(nèi)體運輸與應激性自噬之間的關鍵分子開關，還參與了反向轉(zhuǎn)運(antiport)和葡萄糖攝取等生理反應[40]，這一結(jié)果提示，miR-10在刺參滲透壓調(diào)控方面可能發(fā)揮重要作用。Xian等[41]的研究表明，鹽度脅迫會影響刺參體內(nèi)K+和Cl-的濃度，此外，向鹽度脅迫處理后的刺參體內(nèi)注射miR-10的模擬物和抑制劑都會對刺參體內(nèi)的K+和Cl-濃度產(chǎn)生影響[39]，提示，miR-10在刺參響應鹽脅迫和維持細胞穩(wěn)態(tài)方面具有重要意義。此外，有研究表明，與自然海水鹽度(SS=32)相比，低鹽度脅迫(SS=18)會誘導刺參體內(nèi)的miRNAs出現(xiàn)差異表達，其中，miR-124、miR-2010和miR-2013的相對表達量在低鹽脅迫組呈下調(diào)趨勢，而miR-2010、miR-278-3p和miR-2005的相對表達量則在低鹽脅迫組呈上調(diào)趨勢，對這些差異表達的miRNAs及其靶基因進行研究推測，刺參可能利用碳水化合物和脂肪酸所代謝的能量通過改變氨基酸代謝、離子通道和轉(zhuǎn)運蛋白等方式來應對低鹽度脅迫[42]。

海膽和海參類動物屬于海洋耗氧生物，因此海水的溶氧量(dissolved oxygen，DO)也是影響海膽和海參類動物生存和生理代謝過程的重要海洋環(huán)境因子。Huo等[43]利用比較miRNA組方法研究了不同溶解氧水平下刺參呼吸樹中miRNAs的差異表達，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組(DO=8 mL/L)相比，在嚴重缺氧條件下(DO=2 mL/L)，miR-31-5p和miR-184的相對表達量分別上調(diào)了3.2倍和3.7倍。進一步分析發(fā)現(xiàn)，miR-31-5p可以在人類(Homo sapiens)大腸癌中表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)下游的信號轉(zhuǎn)導途徑發(fā)揮作用[44]，而egfr基因又與缺氧相關，提示，刺參體內(nèi)的miR-31-5p可能通過靶向調(diào)控EGFR途徑的關鍵信號分子的表達應對嚴重缺氧條件。在哺乳動物中，miR-184的過度表達不僅會在人類成神經(jīng)細胞瘤細胞(neuroblastoma cells)中會引起細胞凋亡[45]，還會在老年大鼠的腎小球系膜細胞(glomerular mesangial cell)中加劇氧化損傷并抑制細胞內(nèi)的自噬(autophagy)反應[46]，結(jié)合低氧條件下刺參呼吸樹中miRNAs的差異表達結(jié)果，推測刺參可通過miR-184的差異表達來靶向調(diào)控細胞增殖、氧化損傷和自噬相關等生理過程應對和適應低氧脅迫。

海水溫度(sea-water temperature，ST)是表示海水熱力狀況的一個物理量，是海洋生物生長繁殖的關鍵環(huán)境限制因子之一，主要受太陽輻射以及海洋與大氣熱交換的作用而發(fā)生改變[47]，大量研究已經(jīng)證實，環(huán)境溫度的改變不但能影響海膽和海參類動物的生長發(fā)育、攝食行為、生理免疫，還會影響其新陳代謝和基因的表達[48-49]。Li等[49]發(fā)現(xiàn)，與對照組(16℃)相比，高溫(26℃)處理6 h后，刺參的腸組織中的miR-493-3p和miR-2981的表達量均呈顯著上調(diào)趨勢，其中，miR-493-3p可通過靶向調(diào)控ythdf2基因的表達而激活細胞的增殖和遷移[50]；而miR-2981則可通過靶向調(diào)控scl13a5基因增加細胞中β-氧化的速率[49,51]。因此，上述結(jié)果提示，刺參可能通過改變其體內(nèi)的細胞活動提高自身能量代謝來應對不同程度的高溫脅迫。

3 總結(jié)

綜上可以看出，目前關于海膽和海參乃至棘皮動物中miRNAs的研究仍相對滯后。其中，對于海膽類miRNAs的研究多局限于探究其對胚胎發(fā)育過程的調(diào)控，而對海參類miRNAs的研究則多強調(diào)其在先天免疫防御和應對環(huán)境脅迫方面的作用。此外，除紫球海膽和刺參外，其他種類海膽和海參中miRNAs的相關信息仍相對匱乏。因此，在今后的研究中，首先可以利用高通量測序技術和生物信息分析方法，拓寬海膽和海參miRNAs檢測的物種范圍，大規(guī)模獲取其他海膽、海參種類中miRNAs的序列和結(jié)構(gòu)信息，進一步豐富和擴充海膽和海參miRNAs數(shù)據(jù)庫的基礎資料，同時，分析海膽和海參中miRNAs之間的系統(tǒng)進化關系，進一步系統(tǒng)和深入地了解海膽和海參，乃至棘皮動物中miRNAs的演化關系。此外，通過多組學聯(lián)動分析技術，進一步篩選和鑒定與海膽和海參中miRNAs具有潛在靶向關系的候選基因，建立miRNAs及其靶基因的互做調(diào)控網(wǎng)絡，深入系統(tǒng)開展不同發(fā)育階段、不同地理區(qū)域以及不同病理生理狀態(tài)下海膽和海參中miRNAs及其靶基因的表達規(guī)律及靶向互做模式，為進一步深入闡明海膽和海參中miRNAs的生物調(diào)控功能，全面挖掘海膽和海參中具有學術意義和產(chǎn)業(yè)價值的miRNAs奠定一定的基礎。