外泌體在寄生蟲及媒介病毒中的研究進(jìn)展

王海洋，李夢茹，程 鵬，公茂慶

上世紀(jì)80年代，有研究者在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞的上清液中發(fā)現(xiàn)了一種直徑在40～100 nm之間的小囊泡。隨后，這種小囊泡被命名為外泌體(exosomes)。研究之初，外泌體被普遍認(rèn)為是細(xì)胞代謝的一種“廢棄物”，因而并沒有受到廣泛關(guān)注。現(xiàn)如今，隨著生物醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們對外泌體的認(rèn)識也愈加深入。外泌體的典型直徑為30～100 nm，電鏡下呈杯狀形態(tài)，在蔗糖密度梯度下懸浮密度為1.10～1.21 g/mL[1-2]，其膜結(jié)構(gòu)中含有外泌體的標(biāo)志物四聚體蛋白家族CD9和CD81[3]，以及豐富的鞘磷脂和膽固醇，這些都是在黃病毒感染中必不可少的物質(zhì)[4]。普遍認(rèn)為，外泌體主要存在于大多數(shù)體液中，如血漿、羊水、尿液、母乳和唾液等，具有廣泛的病理生理功能[5-6]。

外泌體的相關(guān)研究主要集中在以下3個(gè)方面：①作為細(xì)胞間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的樞紐，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答，促進(jìn)細(xì)胞增殖；②作為疾病早期診斷的標(biāo)志物分子，外泌體內(nèi)部含眾多細(xì)胞特異性結(jié)構(gòu)，能夠準(zhǔn)確反映分泌細(xì)胞的類型及功能，因此可以通過檢測特異性標(biāo)志物來檢測某些疾病的發(fā)生發(fā)展?fàn)顩r；③作為一種靶向給藥途徑，因外泌體表面有許多特異性膜蛋白，可以識別受體并與之發(fā)生特異性結(jié)合，因此，將外泌體作為一個(gè)定向給藥系統(tǒng)能夠大大增加藥物作用的精確性，并且能夠減少藥物的用量，降低藥物的毒副作用[7]。

需要特別指出的是，細(xì)胞外囊泡(extracellular vesicles，EVs)與外泌體有眾多相似的特征且兩者之間至今沒有一個(gè)明確的界限加以區(qū)分，有學(xué)者將外泌體和EVs的概念混用，也有學(xué)者認(rèn)為外泌體屬于EVs范疇，將EVs根據(jù)直徑大小和生成、分泌方式的不同分為外泌體和微囊泡(microvesicles，MVs)[8]。

1 醫(yī)學(xué)原蟲外泌體

醫(yī)學(xué)原蟲以及原蟲感染性疾病至今仍是全球亟需解決的醫(yī)療衛(wèi)生問題，外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為防治原蟲疾病帶來了新的轉(zhuǎn)機(jī)。已有研究表明，瘧原蟲(Plasmodium)、利什曼原蟲(Leishmania)和錐蟲(Trypanosome)等多種醫(yī)學(xué)原蟲都能夠釋放外泌體，并且已有學(xué)者從原蟲的分泌物中成功分離并純化外泌體，這對于外泌體在醫(yī)學(xué)原蟲領(lǐng)域的研究打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

1.1蟲源性外泌體 從最近幾年的報(bào)道中不難看出，蟲源性外泌體的研究主要集中在醫(yī)學(xué)原蟲中。根據(jù)產(chǎn)生的機(jī)制和大小的不同，蟲源性外泌體主要被分為4種類型：①外泌體；②微型囊泡；③凋亡小體；④瘤小體。具體組分和物質(zhì)性質(zhì)見表1。接下來分別對研究較為集中的幾種醫(yī)學(xué)原蟲外泌體及其在原蟲感染性疾病中的作用進(jìn)行分論。

表1 蟲源性外泌體研究進(jìn)展Tab.1 Research progress of parasites-derived exosomes

1.1.1利什曼原蟲外泌體 利什曼病是一種由利什曼原蟲通過白蛉(sandfly)傳播的寄生蟲病，根據(jù)臨床特征可分為皮膚利什曼病、粘膜利什曼病和內(nèi)臟利什曼病3種類型。研究發(fā)現(xiàn)利什曼原蟲外泌體通過刺激人類宿主產(chǎn)生白細(xì)胞介素-10(IL-10)和抑制腫瘤壞死因子α(TNF-α)的釋放來調(diào)節(jié)人類單核細(xì)胞所釋放的細(xì)胞因子(主要為IL-4)對干擾素-γ(IFN-γ)的作用[9]，從而起到殺傷胞內(nèi)病原體的作用。此外，杜氏利什曼原蟲(Leishmaniadonovani)外泌體會抑制脊椎動物淋巴結(jié)和脾臟產(chǎn)生CD4+T細(xì)胞，并加重宿主的感染[9]。另外已有研究證實(shí)，在已發(fā)現(xiàn)的329種利什曼原蟲蛋白質(zhì)中，有超過52%是由外泌體介導(dǎo)的方式釋放的，且大都可以看作是利什曼原蟲感染的主要毒性因子[10-11]。與其他原蟲類似，利什曼原蟲外泌體可以通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的信號傳導(dǎo)功能發(fā)揮促炎作用，并在感染部位招募中性粒細(xì)胞，加劇感染[12]。此外，利什曼原蟲表面分布著一種鋅依賴的金屬蛋白酶GP63，約占其總蛋白組的1%，通過糖磷脂酰肌醇(GPI)錨定在利什曼原蟲表面得以表達(dá)，或通過外泌體介導(dǎo)的方式分泌到細(xì)胞外環(huán)境[13-14]。有報(bào)道稱，GP63基因因編碼一些常見的毒力因子而高度保守。早期關(guān)于GP63毒力作用的研究表明，GP63能夠?qū)⒀a(bǔ)體蛋白C3b裂解為失活的iC3b片段，從而幫助寄生蟲逃避補(bǔ)體介導(dǎo)的裂解作用。研究發(fā)現(xiàn)外泌體在利什曼原蟲GP63進(jìn)入巨噬細(xì)胞發(fā)揮毒力作用時(shí)具有重要的作用，即利什曼原蟲外泌體先與巨噬細(xì)胞質(zhì)膜融合，再介導(dǎo)GP63的入膜反應(yīng)[15]。因此，如能對外泌體介導(dǎo)的原蟲入膜反應(yīng)加以阻抗干預(yù)措施，或許能夠間接的抑制GP63發(fā)揮毒性，繼而降低利什曼病的嚴(yán)重程度[15]。在Hassani等[16]關(guān)于利什曼原蟲外泌體釋放實(shí)驗(yàn)中，最初的結(jié)果表明當(dāng)原蟲進(jìn)入脊椎動物宿主時(shí)，環(huán)境溫度發(fā)生改變會促使原蟲表面囊泡和外泌體的分泌急劇增加。Atayde等[17]通過小鼠實(shí)驗(yàn)表明，外泌體和其它多種囊泡甚至決定著利什曼病的嚴(yán)重程度和轉(zhuǎn)歸。

1.1.2瘧原蟲外泌體 瘧疾是一種由瘧原蟲引起的寄生蟲病，臨床表現(xiàn)為間歇性發(fā)熱、嘔吐、乏力和紅細(xì)胞損傷引起的頭痛[18]。研究表明，外泌體的釋放量與瘧疾的嚴(yán)重程度有關(guān)[19]。從受伯氏瘧原蟲(Plasmodiumberghei)感染的宿主血清中提取的外泌體含有寄生蟲抗原，以劑量特異性的方式刺激巨噬細(xì)胞表面CD40表達(dá)和TNF釋放，并通過巨噬細(xì)胞誘發(fā)免疫反應(yīng)[20]。另外，研究人員還從BALB/c小鼠的外周血中分離出約氏瘧原蟲(Plasmodiumyoelii)所釋放的外泌體，通過蛋白質(zhì)組學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)這些外泌體含有寄生蟲蛋白(具有免疫原性和免疫反應(yīng)性)，能夠刺激小鼠產(chǎn)生IgG抗體，誘導(dǎo)網(wǎng)狀紅細(xì)胞增多癥和激活宿主免疫反應(yīng)[21]。還有報(bào)道稱，約氏瘧原蟲外泌體能在受感染小鼠體內(nèi)抑制肺癌細(xì)胞的生長，且外泌體中miRNA的高攜帶量會導(dǎo)致血管內(nèi)皮生長因子受體(VEGFR2)表達(dá)降低，從而抑制血管生成和腫瘤的生長[22]。

1.1.3陰道毛滴蟲外泌體 有關(guān)陰道毛滴蟲(Tri-chomonasvaginalis)外泌體的研究發(fā)現(xiàn)，外泌體能夠通過抑制宿主分泌IL-8從而有效抑制嗜中性粒細(xì)胞的增殖和遷移，繼而影響嗜中性粒細(xì)胞通過凝集素途徑或旁路途經(jīng)激活補(bǔ)體而發(fā)揮殺蟲作用。因此可以認(rèn)為，蟲源外泌體抑制IL-8的分泌，有利于其在宿主體內(nèi)存活和生長[23]。

綜上所述，對于受感染的宿主來說，蟲源性外泌體是一把“雙刃劍”，給原蟲在寄生時(shí)提供了有利的寄生環(huán)境，為之后的感染提供了較有力的保障；同時(shí)又能激活宿主免疫反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)對宿主的保護(hù)性免疫。

1.2宿主源性外泌體 過去關(guān)于原蟲-外泌體的研究中，已有大量報(bào)道指出，醫(yī)學(xué)原蟲在寄生和感染宿主細(xì)胞的同時(shí)，不僅蟲體本身可以釋放大量外泌體，還可以刺激宿主細(xì)胞分泌外泌體，前者主要參與調(diào)控蟲體的寄生環(huán)境和宿主免疫應(yīng)答，后者主要參與調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫系統(tǒng)。更具體地說，蟲源性外泌體及宿主細(xì)胞釋放的外泌體都參與了寄生蟲病的發(fā)病機(jī)制[24]。一方面，蟲源性外泌體包含保守的寄生蟲特異性信息，包括蛋白質(zhì)、RNA、非編碼RNA(ncRNA)和核酸，這些信息被轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞，然后可以調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)，參與寄生蟲的免疫逃逸，最終促進(jìn)感染[25]。另一方面，宿主細(xì)胞在受到寄生蟲感染時(shí)進(jìn)入應(yīng)激狀態(tài)，同時(shí)釋放外泌體，激活NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞等免疫細(xì)胞，發(fā)揮抗感染作用[26]。

Bhatnagar[27]等研究發(fā)現(xiàn)，受到剛地弓形蟲(Toxoplasmagondii)感染的巨噬細(xì)胞會大量釋放外泌體，同時(shí)，這些外泌體會促進(jìn)未成熟巨噬細(xì)胞釋放Toll樣受體(TLR)和TNF-α等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子會積極地參與機(jī)體的抗蟲免疫反應(yīng)。另外，妊娠期母鼠在受到弓形蟲感染時(shí)，從受感染的樹突狀細(xì)胞中提取的外泌體可以保護(hù)小鼠的胎兒不受垂直傳播導(dǎo)致的感染[28]。可見，宿主細(xì)胞在受到原蟲入侵時(shí)，能夠以分泌外泌體的方式對感染源做出回應(yīng)以保護(hù)機(jī)體免受侵?jǐn)_。

在瘧原蟲感染的小鼠模型中，Combes[29]等發(fā)現(xiàn)敲除ABCA1基因可直接導(dǎo)致宿主源性外泌體分泌量下降，從而保護(hù)受感染小鼠免受腦型瘧疾。Lorena[21]等研究了小鼠體內(nèi)受約氏瘧原蟲(Plasmodiumyoelii)感染的網(wǎng)狀細(xì)胞所釋放的外泌體免疫效應(yīng)，他們觀察到，外泌體介導(dǎo)的免疫效應(yīng)可以很好地保護(hù)小鼠免受約氏瘧原蟲等多種原蟲的感染。另有一項(xiàng)研究[30]揭示了外泌體在惡性瘧原蟲(Plasmodiumfalciparum)生物學(xué)中的作用，表明受感染的紅細(xì)胞可以通過分泌外泌體直接與寄生的瘧原蟲進(jìn)行信息交換，這一效應(yīng)似乎對瘧原蟲向媒介蚊蟲的傳播發(fā)揮了重要的作用，但其具體機(jī)制不詳。

以上宿主源性外泌體的研究證明了其在醫(yī)學(xué)原蟲感染中的重要性。一些宿主源性外泌體的研究進(jìn)展見表2。

2 醫(yī)學(xué)蠕蟲外泌體

在蠕蟲感染過程中，分泌細(xì)胞的起源是決定外泌體功能和組分的關(guān)鍵因素，在功能方面，外泌體是機(jī)體-蟲體免疫調(diào)節(jié)的關(guān)鍵一環(huán)：包括抗原呈遞、調(diào)節(jié)宿主免疫應(yīng)答、表達(dá)某些活化分子、免疫監(jiān)視以及介導(dǎo)細(xì)胞間通訊[35-36]。在組分方面，蠕蟲外泌體主要含有miRNA、蛋白質(zhì)及脂類等。

表2 宿主源性外泌體研究進(jìn)展Tab.2 Research progress of parasitifer-derived exosomes

2.1馬來布魯線蟲外泌體 馬來布魯線蟲(Brugiamalayi)以蚊蟲為中間宿主，是一種常見的醫(yī)學(xué)蠕蟲，主要寄生于人類淋巴系統(tǒng)，侵入人體后會引發(fā)淋巴絲蟲病[37]。Zamanian[38]等用RNA干擾(RNA interference，RNAi)技術(shù)沉默了馬來布魯線蟲外泌體釋放基因BM-CPL-1，發(fā)現(xiàn)該蟲在失去外泌體釋放功能后，不僅對蚊蟲的感染率下降了近40%，而且建立和維持寄生蟲血癥的功能也受到了限制。另有報(bào)道，馬來布魯線蟲在宿主體內(nèi)釋放的外泌體還有激活宿主巨噬細(xì)胞的功能，以調(diào)節(jié)機(jī)體固有免疫應(yīng)答[24]。由此可見，通過調(diào)節(jié)宿主體內(nèi)的蟲源性外泌體的分泌，對某些蠕蟲感染性疾病的治療來說可作為一個(gè)潛在的有利靶點(diǎn)。

2.2血吸蟲外泌體 血吸蟲病是由裂體屬吸蟲如日本血吸蟲(Schistosomajaponicum)、曼氏血吸蟲(Schistosomamansoni)等感染引起的熱帶寄生蟲病，其在世界范圍內(nèi)對公共衛(wèi)生所造成的影響僅次于瘧疾。最近，有學(xué)者首次從日本血吸蟲中分離、提純了外泌體樣囊泡，并對其做了分析。結(jié)果表明，這些囊泡能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞極化，并產(chǎn)生TNF-α、CD16/32等促炎因子[39]。此外，Zhu[40]等通過蛋白質(zhì)組學(xué)分析了血吸蟲外泌體中的403個(gè)蛋白質(zhì)成分，發(fā)現(xiàn)這些蛋白組分除了具有催化活性、翻譯調(diào)節(jié)活性以及抗體結(jié)合活性外，還可以將miRNA傳遞到宿主細(xì)胞中，從而介導(dǎo)寄生作用。在自身免疫性疾病中，樹突狀細(xì)胞釋放的外泌體可以調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的過度活化；且最新的研究表明，向小鼠模型腹腔注射樹突狀細(xì)胞源性外泌體可以抑制小鼠炎癥性腸胃病的進(jìn)展，主要作用機(jī)制是抑制促炎細(xì)胞因子，如IL-17a和IFN-γ，并促進(jìn)TGF-β抗炎細(xì)胞因子的生成。鑒于其抗炎作用的存在，多位學(xué)者認(rèn)為外泌體可能具有免疫抑制藥物的應(yīng)用價(jià)值[41-42]。

2.3絲蟲外泌體 淋巴絲蟲病是一種由寄生的班氏絲蟲(Filariaphilippinensis)、馬來絲蟲(Brugiamalayi)引起的由蚊蟲傳播的熱帶病，在全球73個(gè)國家傳播和流行。研究指出，班氏絲蟲感染宿主后，會向宿主分泌大量外泌體，其內(nèi)主要包含生物活性蛋白、mRNA、miRNA和其它非編碼小RNA[43]?，F(xiàn)已證明，外泌體攜帶的部分小RNA能夠調(diào)控宿主的基因表達(dá)，并抑制宿主的免疫反應(yīng)，以促進(jìn)蟲體的寄生和生長[44-45]。而那些具有生物活性的蛋白質(zhì)，其中約80%都能在哺乳動物的外泌體中發(fā)現(xiàn)。那些已經(jīng)被鑒定的蛋白質(zhì)，有20%參與了生物活性分子的結(jié)合，16%參與了各種離子的運(yùn)輸，21%參與了各種水解酶和轉(zhuǎn)移酶的代謝過程。以上生物活性物質(zhì)發(fā)揮作用的前提是攜帶它們的外泌體能對其進(jìn)行精準(zhǔn)的運(yùn)輸和調(diào)控[46]，比如當(dāng)機(jī)體發(fā)生絲蟲感染時(shí)，會以外泌體介導(dǎo)的方式釋放BM-CPL-1(一種類似于半胱氨酸蛋白酶的蛋白質(zhì)分子)，雖然這種蛋白質(zhì)分子的具體功能尚不清楚，但是已有學(xué)者證實(shí)它的存在能夠良好地維持寄生蟲血癥[47]。

3 醫(yī)學(xué)節(jié)肢動物外泌體

醫(yī)學(xué)節(jié)肢動物的治理是目前防治媒介疾病最有效的方法之一。隨著人們對外泌體有了更深入的了解，醫(yī)學(xué)節(jié)肢動物外泌體及其在媒介病毒和媒介疾病中的研究成果也相繼問世。其中，以蜱蟲和蚊蟲等節(jié)肢動物外泌體的研究成果最具代表性，學(xué)者們希望節(jié)肢動物外泌體能給媒介疾病的防治提供新的思路和參考價(jià)值。

3.1蜱蟲外泌體 蜱蟲是多種脊椎動物體表的暫時(shí)性寄生蟲，同樣也是一些人獸共患病的重要傳播媒介和貯存宿主[48]。研究發(fā)現(xiàn)，來自蜱神經(jīng)元細(xì)胞的外泌體可能介導(dǎo)蜱蟲傳播的黃病毒RNA和蛋白質(zhì)，并在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中從一個(gè)神經(jīng)元細(xì)胞向另一個(gè)神經(jīng)元細(xì)胞傳遞。另外，蜱傳蘭加特病毒(tick-borne langat virus，LGTV)是一種與蜱傳腦炎病毒(tick-borne encephalitis virus，TBEV)密切相關(guān)的模式病原體，其能夠充分利用節(jié)肢動物外泌體將病毒RNA和蛋白傳遞到宿主皮膚角化細(xì)胞和血細(xì)胞[49]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在蜱N2a細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞中可觀察到LGTV E蛋白去糖基化現(xiàn)象[50]，而這種病毒E蛋白的去糖基化過程需要病毒粒子和外泌體的參與。值得指出的是，在蜱蟲細(xì)胞中維持糖基化的LGTV E-蛋白的主要作用可能是為了促進(jìn)宿主細(xì)胞分泌外泌體和感染病毒，從而使節(jié)肢動物在寄生到脊椎動物宿主時(shí)能立即傳播病毒以觸發(fā)感染[50]。也有學(xué)者證實(shí)，在蚊蟲細(xì)胞中，西尼羅河病毒(West Nile virus，WNV)E蛋白大量糖基化是將病原體傳遞給脊椎動物宿主所必需的過程[51]。部分寄生蟲與醫(yī)學(xué)節(jié)肢動物外泌體研究進(jìn)展見表3。

表3 部分寄生蟲與醫(yī)學(xué)節(jié)肢動物外泌體研究進(jìn)展Tab.3 Research progress of exosomes on a part of parasites and vector insects

3.2蚊蟲外泌體 伊蚊(Aedes)是登革病毒(Dengue virus，DENV)的主要傳播媒介，DENV屬于黃病毒科黃病毒屬，含4種血清型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型)[52]。外泌體不僅參與伊蚊的各項(xiàng)生理機(jī)能，同樣參與著登革熱疾病的感染過程[53]，登革熱是一種廣泛流行于熱帶和亞熱帶的人獸共患疾病。Vora等[54]曾報(bào)道感染DENVⅡ型或Ⅲ型的伊蚊細(xì)胞能夠分泌攜帶病毒RNA和蛋白質(zhì)的外泌體，且這些外泌體能夠繼而感染伊蚊C6/36細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞。Vora使用低劑量GW4869(外泌體釋放抑制劑)處理受DENVⅡ型感染的蚊蟲細(xì)胞并作為陰性對照，發(fā)現(xiàn)DENVⅡ感染是由外泌體的釋放所介導(dǎo)的。與此同時(shí)，GW4869處理也影響了病毒包膜蛋白與伊蚊細(xì)胞四聚體蛋白域內(nèi)的糖蛋白(Tsp29Fb)的相互作用，表明該節(jié)肢動物Tsp29Fb在外泌體釋放途徑中發(fā)揮一定的作用。經(jīng)過反復(fù)驗(yàn)證，Vora做出了這樣的結(jié)論：通過抑制節(jié)肢動物Tsp29Fb或通過GW4869抑制外泌體的釋放可能是一種阻斷DENVⅡ傳播的有效方法，也可能成為一種防治蚊媒病毒的潛在措施。Braicu[55]等另有報(bào)道，外泌體這條通路不僅參與了DENV的傳播和感染，還能幫助DENV Ⅱ型繼續(xù)尋找下一個(gè)靶細(xì)胞。值得注意的是，Zhou[49]等用網(wǎng)格蛋白(clathrin)抑制劑(Pitstop-2)處理后發(fā)現(xiàn)，外泌體介導(dǎo)的蟲媒病毒傳播依賴于網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用。

在此基礎(chǔ)上，Reyes-Ruiz[56]等人利用負(fù)染色電子顯微鏡和動態(tài)光散射技術(shù)(dynamic light scattering，DLS)對Vora等的發(fā)現(xiàn)加以補(bǔ)充，受DENV感染的伊蚊細(xì)胞所分泌的外泌體，其平均直徑遠(yuǎn)比未受感染的伊蚊細(xì)胞的外泌體大的多，且含有病毒樣微粒?？梢钥闯?，外泌體在DENV的傳播中發(fā)揮著對宿主不利的消極作用。但是，最近的一項(xiàng)調(diào)查卻得出了與上述相悖的結(jié)論，Martins從感染DENV的哺乳動物體內(nèi)分離出來的外泌體參與著宿主的免疫防御，調(diào)節(jié)著生物活性分子的分泌以達(dá)到抵抗感染的目的[57]。因此，定性外泌體在受DENV感染的細(xì)胞中的功能和作用機(jī)制，以及其在登革熱感染病程中發(fā)揮的作用都需要在未來的研究中進(jìn)一步闡明。

另外有研究發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)由醫(yī)學(xué)節(jié)肢動物傳播的黃病毒可在脊椎動物大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞中復(fù)制，這些內(nèi)皮細(xì)胞起到保護(hù)血腦屏障的作用，受感染的內(nèi)皮細(xì)胞更易在外泌體的介導(dǎo)下受到黃病毒的侵犯并引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷[58-59]。有學(xué)者推測最初來源于內(nèi)皮細(xì)胞的少量外泌體在進(jìn)入血腦屏障后，可能會繼而介導(dǎo)黃病毒向中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳播。受到感染的神經(jīng)細(xì)胞會迅速分泌大量攜帶感染源性物質(zhì)的外泌體以加速血腦屏障的破壞，從而允許更高的外周病毒載量以及免疫細(xì)胞的活化和轉(zhuǎn)運(yùn)。不僅如此，外泌體在介導(dǎo)蟲媒病毒傳播的同時(shí)，也在維持病毒RNA活性以及持久的感染而發(fā)揮著一定作用[50]。

4 總結(jié)與展望

人類與寄生蟲感染的斗爭史同樣也是一部見證著人類醫(yī)學(xué)發(fā)展的醫(yī)學(xué)史。如今，寄生蟲病仍多發(fā)于衛(wèi)生條件較為落后的國家和地區(qū)，因缺乏有效的疫苗以及高效特異的治療方法而使寄生蟲感染的“重災(zāi)區(qū)”蒙受著巨大的財(cái)政損失。然而，外泌體的研究或能為寄生蟲病的突破打開新大門。研究發(fā)現(xiàn)，外泌體樣囊泡的膜結(jié)構(gòu)可以作為疫苗等藥物在宿主體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)。另有報(bào)道描述，寄生蟲外泌體的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)較哺乳動物的更加穩(wěn)定，因此通過探索其結(jié)構(gòu)、生成方式和分泌方式，有望開發(fā)出更可靠的疫苗傳遞系統(tǒng)。此外，外泌體中含有的某些重要的蛋白成分，因其具有較強(qiáng)的免疫原性而被認(rèn)為可以作為候選抗原以用于相關(guān)疫苗的開發(fā)[66]。值得強(qiáng)調(diào)的是，外泌體在宿主對寄生蟲病的免疫調(diào)控中也參與了重要的一環(huán)，如參與抗原物質(zhì)提呈、刺激或抑制細(xì)胞因子分泌等。一方面，在多種效應(yīng)機(jī)制的刺激下，寄生蟲向宿主體內(nèi)釋放包裹有大量蟲源信息的外泌體，從而參與宿主免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，抑制炎癥反應(yīng)，改善其寄生環(huán)境[67]；另一方面，宿主也會釋放外泌體對蟲源感染做出積極回應(yīng)。因此，可否在明確感染和發(fā)病機(jī)制的前提下，開發(fā)出外泌體介導(dǎo)的免疫療法？這一問題值得進(jìn)一步深思和探討。經(jīng)過數(shù)十載的探索，外泌體在腫瘤等疾病的早期診斷和靶向治療中已有了深入的研究，在寄生蟲以及媒介病毒領(lǐng)域中也有了長足的發(fā)展。未來，需要規(guī)范外泌體分離和提純方式、建立各研究領(lǐng)域外泌體數(shù)據(jù)庫，以便在今后的研究中更加高效便捷地辨識和提取。相信隨著研究的不斷深入，利用外泌體早期預(yù)防、診斷和治療寄生蟲疾病和媒介疾病將成為現(xiàn)實(shí)。

利益沖突：無