細(xì)胞自噬在輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)中的作用研究進(jìn)展

楊廷芳，王 麗，史月濱，陸 婷，張 勇

1昆明醫(yī)科大學(xué)，云南昆明 650500；2 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，云南昆明 650032；3 云南省第一人民醫(yī)院，云南昆明 650032

放射治療在惡性腫瘤治療中占據(jù)重要地位。盡管放療技術(shù)的不斷革新使治療效果及患者生活質(zhì)量明顯改善，但輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)(the radiationinduced bystander effect，RIBE)也引起了科研及臨床工作者們的重視。截至目前，尚無(wú)確切方法防治輻射旁效應(yīng)。輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)已成為放射生物學(xué)及輻射防護(hù)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，研究其調(diào)控機(jī)制對(duì)優(yōu)化放射治療、放射防護(hù)及輻射安全等具有重要意義。

1 輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)概述

輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)指受輻射細(xì)胞或組織釋放的信號(hào)導(dǎo)致未受輻射的機(jī)體其他部位發(fā)生的生物學(xué)現(xiàn)象，包括基因組不穩(wěn)定、應(yīng)激反應(yīng)、凋亡及細(xì)胞增殖改變等生物學(xué)反應(yīng)[1-2]。

關(guān)于RIBE 的報(bào)道可追溯到1954 年，Parsons等[3]發(fā)現(xiàn)慢性粒細(xì)胞性白血病患者的脾經(jīng)X 線照射后，胸骨骨髓中檢測(cè)到導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)損傷的因子——致裂因子。1992 年Nagasawa 和Little[4]發(fā)現(xiàn)當(dāng)0.1%～1% 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(Chinese hamster ovary cells，CHO)受α 粒子照射時(shí)，30%～50%的細(xì)胞出現(xiàn)姐妹染色單體交換，表明射線誘發(fā)了輻射旁效應(yīng)。此研究開啟了以細(xì)胞模型研究輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)的先例，也引起了研究者們對(duì)輻射旁效應(yīng)的高度重視。此后，研究者們?cè)诖蠖鄶?shù)細(xì)胞中觀察到了輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)[5]。臨床研究也發(fā)現(xiàn)腫瘤放射治療后可引起正常組織的損傷，常見的有肺癌放療所致放射性肺炎和放射性肺纖維化[6]。

輻射旁效應(yīng)是保護(hù)因素還是有害因素曾一度引發(fā)爭(zhēng)議。實(shí)驗(yàn)證據(jù)已將RIBE 與癌癥的許多特征聯(lián)系起來，包括基因組不穩(wěn)定、細(xì)胞能量失調(diào)、抵抗細(xì)胞死亡、腫瘤免疫逃避、腫瘤促進(jìn)炎癥以及增強(qiáng)的放射抵抗，突出了RIBE 事件在患者治療中的不良反應(yīng)作用[7]。但近期有研究又重新確立了RIBE 在放射治療中對(duì)轉(zhuǎn)移瘤的殺傷作用。Tubin等[8]回顧分析了23 例接受非傳統(tǒng)立體定向放射治療(stereotactic body radiation therapy，SBRT) 的不可切除的大體積腫瘤病例，對(duì)腫瘤的低氧節(jié)段(SBRT-PATHY)利用非靶向效應(yīng)進(jìn)行放射治療，發(fā)現(xiàn)RIBE 響應(yīng)率為96%。放射治療4 周后，腫瘤體積縮小的中位值為70%，17%的研究對(duì)象完全緩解，且未出現(xiàn)任何急性或遲發(fā)毒性反應(yīng)。表明SBRT-PATHY 在利用輻射缺氧誘導(dǎo)的非靶向效應(yīng)在治療腫瘤方面起到了顯著作用。但受限于樣本量，缺乏前瞻性研究的證實(shí)。近年Farias 等[9]開發(fā)了新模型，使用人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell，MSC)和射線照射同時(shí)干預(yù)異體腫瘤移植小鼠模型，發(fā)現(xiàn)協(xié)同機(jī)制的存在。這種機(jī)制能夠增強(qiáng)輻射殺滅原發(fā)腫瘤及轉(zhuǎn)移灶的局部和全身性反應(yīng)，表明了輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)在殺滅腫瘤轉(zhuǎn)移灶中有其作用。有研究者建立外泌體聯(lián)合放射治療的模型，研究輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)。De Araujo Farias等[10]發(fā)現(xiàn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體聯(lián)合放射治療，可抑制轉(zhuǎn)移性黑色素瘤細(xì)胞的擴(kuò)散，表明外泌體聯(lián)合放射治療參與了輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)，該研究將放射治療的局部治療作用拓展到全身療效上，開拓了轉(zhuǎn)移性腫瘤的治療思路。

2 輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)機(jī)制研究

早期研究認(rèn)為輻射旁效應(yīng)的機(jī)制主要是通過細(xì)胞間縫隙連接(gap junction intercellular communication，GJIC)和活化生化信號(hào)分子兩條途徑傳遞信號(hào)[11-12]。近年來，越來越多的證據(jù)表明外泌體是介導(dǎo)輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)機(jī)制的一條重要途徑[13-15]。

2.1GJIC 研究表明GJIC 是由連接蛋白Connexin形成的簇狀細(xì)胞管道結(jié)構(gòu)，在相鄰細(xì)胞之間的信號(hào)傳遞和物質(zhì)交換中起重要作用，而連接蛋白存在于人類所有類型的解剖組織中[16]。RIBE 可以通過GJIC 將輻照細(xì)胞釋放的損傷信號(hào)傳遞給未受射線照射的旁細(xì)胞，從而引起旁細(xì)胞的損傷改變。Autsavapromporn 等[11]發(fā)現(xiàn)細(xì)胞在質(zhì)子和重離子照射時(shí)產(chǎn)生的信號(hào)通過細(xì)胞間縫隙連接可損傷旁細(xì)胞，這種損傷效應(yīng)可以傳給其子代細(xì)胞，子代旁細(xì)胞的應(yīng)激效應(yīng)水平取決于線性能量傳遞(linear energy transfer，LET)的特性。GJIC 抑制劑可減輕高LET 射線(質(zhì)子或碳離子)對(duì)旁細(xì)胞后代的氧化損傷和基因損傷，但不能減輕低LET 射線(X 射線)對(duì)旁細(xì)胞后代的損傷作用。此外，Arora 等[17]使用肺癌細(xì)胞系和卵巢癌細(xì)胞系研究順鉑通過GJIC 誘導(dǎo)旁細(xì)胞發(fā)生毒性損傷時(shí)，發(fā)現(xiàn)順鉑對(duì)旁細(xì)胞的損傷作用是由癌細(xì)胞密度決定的。只有在高密度縫隙連接結(jié)構(gòu)形成，靶向抑制連接蛋白43(connexin43，Cx43)時(shí)，旁細(xì)胞不發(fā)生毒性損傷反應(yīng)，從而表現(xiàn)為癌細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥。表明GJIC 有增強(qiáng)順鉑對(duì)旁細(xì)胞毒性損傷的作用，且與連接蛋白的密度呈正相關(guān)關(guān)系。上述研究證實(shí)GJIC 是RIBE 的機(jī)制之一，GJIC 通過連接蛋白介導(dǎo)RIBE。

2.2活化生化信號(hào)分子及相關(guān)通路 研究發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β，TGFβ)、白細(xì)胞介素-8(interleukin-8，IL-8)、活性氧(reactive oxygen species，ROS)、一氧化氮(NO)及絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK) 通路參與RIBE[18-20]。Widel 等[21]用X 線照射野生型和TP53 基因敲除的人結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT116，然后與未受照射共培養(yǎng)，IL-6 和IL-8 參與RIBE。Sergeeva 等[19]發(fā)現(xiàn)ROS 和超氧化物自由基(superoxide radical production，NOX)參與RIBE。Fu 等[20]發(fā)現(xiàn)經(jīng)α 粒子照射后，MAPK通路和NF-κ 通路協(xié)同作用調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞釋放TNF-α 和IL-8，在RIBE 中促進(jìn)旁細(xì)胞損傷。Fu等[22]發(fā)現(xiàn)在受輻照細(xì)胞中，RIBE 分子機(jī)制依賴于p53 活化及相關(guān)凋亡通路，局部照射后輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)及巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)是局部照射后常見的淋巴細(xì)胞減少的原因之一。已知半胱氨酸蛋白酶CPR4(一種同源的人組織蛋白酶B)為線蟲的首個(gè)輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)因子。Peng 等[1]發(fā)現(xiàn)受紫外線或γ 射線照射的秀麗隱桿線蟲分泌的CPR-4，降低了紫外線劑量依賴性動(dòng)物的生殖細(xì)胞死亡率，也增加了未受輻射的動(dòng)物胚胎死亡率，導(dǎo)致了輻射組織遠(yuǎn)隔的未受照射組織損傷，他們推測(cè)CPR-4 是通過胰島素樣生長(zhǎng)因子受體DAF-2 發(fā)揮輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)作用，此研究為輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)作用機(jī)制提供了新思路。上述研究通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)，證實(shí)了活化生化信號(hào)分子及相關(guān)通路是RIBE 產(chǎn)生的重要信號(hào)傳遞途徑，深入研究活化生化信號(hào)分子及相關(guān)通路在RIBE 中的作用，可為揭示RIBE 的產(chǎn)生機(jī)制及其防治提供理論依據(jù)。

2.3外泌體 近年來，研究表明外泌體也參與輻射旁效應(yīng)[23]。眾多研究已通過外泌體內(nèi)含物，包括DNA、miRNA 及蛋白層面，研究外泌體在RIBE 中的作用。陳纖等[24]用X 線照射H460 非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，采用差速離心法提取外泌體處理旁細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)旁細(xì)胞的微核形成率增加，這種現(xiàn)象在用RNA 酶處理外泌體后消失，受照射H460 細(xì)胞分泌的外泌體可能是介導(dǎo)電離輻射旁效應(yīng)的機(jī)制之一，外泌體RNA 可能是介導(dǎo)電離輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)的一種重要信號(hào)分子，并推測(cè)外泌體可能通過膜融合的方式進(jìn)入旁細(xì)胞。Ariyoshi 等[13]用4 Gy X 線分別照射細(xì)胞條件培養(yǎng)基(irradiated cell conditioned medium，ICCM) 及小鼠血清，然后提取對(duì)應(yīng)的外泌體樣囊泡(exosome-like，ELV)處理正常人成纖維細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)處理后的細(xì)胞均出現(xiàn)DNA 損傷，進(jìn)一步用DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶處理從條件培養(yǎng)基中提取的外泌體囊泡(ICCM ELV)，證實(shí)輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)是由外泌體樣囊泡中的線粒體DNA 介導(dǎo)的。外泌體來源的miRNA 亦被證實(shí)在RIBE 中起重要作用，包括在放射治療后激活輻射旁效應(yīng)并引起基因組不穩(wěn)定[15]。宋曼[25]用射線照射人支氣管上皮BEP2D 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)輻射誘導(dǎo)的外泌體miR-1246 通過條件培養(yǎng)基促進(jìn)未照射細(xì)胞微核的產(chǎn)生和DNA 損傷相關(guān)蛋白53BP1 聚焦點(diǎn)(foci)的形成，產(chǎn)生旁基因組損傷效應(yīng)，證實(shí)了外泌體miRNA 參與RIBE。Tan 等[26]采用兩種細(xì)胞系共培養(yǎng)的方法，首次發(fā)現(xiàn)分別與α 粒子、X 線照射的皮膚角質(zhì)HaCaT 細(xì)胞共培養(yǎng)后，未受輻射的WS1 細(xì)胞遷移受到抑制，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)內(nèi)含miR-27a 的外泌體是主要的RIBE 信號(hào)因子；再用含miR-27a 的外泌體處理未受輻射的WS1 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)升高的miR-27a 根據(jù)細(xì)胞內(nèi)的氧化還原狀態(tài)通過MMP2 抑制旁效應(yīng)細(xì)胞遷移，證實(shí)外泌體miRNA 是介導(dǎo)RIBE 的重要調(diào)節(jié)因子。此外，外泌體來源的蛋白質(zhì)也參與RIBE。Freudenmann 等[14]發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞通過外泌體分泌的L-Plastin 蛋白促進(jìn)癌細(xì)胞克隆形成和有絲分裂活性增加，腫瘤細(xì)胞經(jīng)輻射后產(chǎn)生的生長(zhǎng)抑制因子減少；進(jìn)一步通過免疫沉淀及siRNA 敲低L-Plastin 蛋白表達(dá)后，推斷RIBE 是由輻射觸發(fā)的有絲分裂活性或克隆形成降低所致。Mo 等[27]分別于正常氧含量和缺氧條件下，照射非小細(xì)胞肺癌A549 細(xì)胞，然后提取外泌體與未受輻射的A549 細(xì)胞或人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)外泌體明顯促進(jìn)了A549 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，促進(jìn)HUVEC 增殖和血管新生。缺氧細(xì)胞和輻照細(xì)胞釋放的外泌體較正常細(xì)胞釋放的外泌體促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的作用更強(qiáng)。發(fā)現(xiàn)外泌體內(nèi)的血管生成素樣蛋白4(angiopoietin-like protein 4，ANGPTL4) 可促進(jìn)A549 細(xì)胞遷移和HUVEC血管新生。近期Dong 等[28]發(fā)現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體等細(xì)胞器也參與RIBE，該研究是對(duì)外泌體等囊泡參與RIBE 機(jī)制研究的拓展。

3 細(xì)胞自噬與輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)

3.1細(xì)胞自噬 細(xì)胞自噬，又稱Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡，指細(xì)胞受刺激時(shí)利用溶酶體消化回收廢棄的細(xì)胞成分和細(xì)胞器以實(shí)現(xiàn)對(duì)自身代謝和能量的更新[29]。細(xì)胞自噬是真核細(xì)胞的一種自我保護(hù)機(jī)制，在維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、能量代謝及應(yīng)對(duì)應(yīng)激等方面起著重要的作用[30]。哺乳動(dòng)物的細(xì)胞自噬分為三類：大自噬/小自噬和分子伴侶介導(dǎo)的自噬[31]。目前認(rèn)為細(xì)胞自噬起到抑制腫瘤發(fā)生的作用，但在腫瘤發(fā)展的進(jìn)程中起促進(jìn)作用[32-33]。

3.2GJIC 參與RIBE 細(xì)胞自噬 范華東[34]采用體外質(zhì)粒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)研究細(xì)胞自噬在α 粒子輻射旁效應(yīng)中的作用，發(fā)現(xiàn)不同劑量α 粒子輻射細(xì)胞產(chǎn)生的不同水平ROS，在細(xì)胞間縫隙連接途徑誘導(dǎo)旁區(qū)細(xì)胞自噬中起關(guān)鍵作用。作為細(xì)胞間縫隙連接的關(guān)鍵組成分子及細(xì)胞自噬系統(tǒng)底物的Cx43，介導(dǎo)照射區(qū)細(xì)胞產(chǎn)生的ROS 向旁細(xì)胞傳遞[35]。低劑量(10 cGy)、高劑量(300 cGy)α 粒子輻照細(xì)胞產(chǎn)生ROS，一方面通過GJIC 分別引起旁細(xì)胞自噬的激活和抑制；另一方面ROS 分別激活和抑制酪氨酸激酶Src，引起旁細(xì)胞自噬的激活和抑制。此研究可為腫瘤放射治療保護(hù)非靶器官提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

研究表明ROS 是細(xì)胞氧化還原的下游調(diào)控靶點(diǎn)。Yang 等[36]在經(jīng)α 粒子照射的肝癌細(xì)胞HepG2中發(fā)現(xiàn)活化的酪氨酸激酶Src 使Cx43 265 位點(diǎn)酪氨酸磷酸化，抑制輻照細(xì)胞的Cx43 磷酸化水平后，發(fā)現(xiàn)旁細(xì)胞中DNA 損傷蛋白γ-H2A 焦點(diǎn)形成率顯著增加；他們進(jìn)一步證實(shí)了自噬調(diào)控Src 活性和Cx43 磷酸化，并且旁細(xì)胞自噬水平與輻射誘導(dǎo)的ROS 相關(guān)。此研究為ROS 和自噬通過調(diào)控Src-Cx43 通路介導(dǎo)GJIC 參與RIBE 自噬提供了依據(jù)。吳李君[37]用50 cGy α 粒子照射HepG2 細(xì)胞后，也證實(shí)了自噬途徑通過調(diào)節(jié)Src 激酶活性參與Cx43 的磷酸化，而Cx43 第265 位的磷酸化是影響RIBE 的重要途徑。上述兩項(xiàng)研究的結(jié)果與范華東的研究相符，證實(shí)α 粒子誘發(fā)的ROS 通過GJIC調(diào)控旁細(xì)胞自噬。

3.3活性生化信號(hào)分子參與RIBE 細(xì)胞自噬 電離輻射可通過釋放促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的衰老相關(guān)分泌因子(senescence-associated secretory phenotypes，SASps)誘導(dǎo)未受照射的旁細(xì)胞產(chǎn)生有害的輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)。Huang 等[38]發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬是輻射誘導(dǎo)垂體瘤轉(zhuǎn)化基因1(pituitary tumor transforming gene1，PTTG1)缺陷的乳腺癌細(xì)胞發(fā)生衰老的必要條件，抑制自噬可使細(xì)胞由X 線輻射誘導(dǎo)的衰老狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榈蛲?；衰老的癌?xì)胞通過釋放CSF2 激活JAK2-STAT3 和AKT 通路，促進(jìn)未受輻射細(xì)胞發(fā)生侵襲和遷移而發(fā)揮輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)。此研究首次揭示了自噬在輻射誘導(dǎo)衰老和旁效應(yīng)中的雙重作用。

Wang 等[39]采用3 Gy γ 射線照射人肝癌細(xì)胞HepG2，收集條件培養(yǎng)基(conditioned medium，CM)處理非輻射細(xì)胞，并檢測(cè)到伴隨細(xì)胞內(nèi)ROS 增加的線粒體功能障礙(線粒體膜蛋白MMP)，微核和自噬蛋白標(biāo)志物表達(dá)量升高；1% 二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO) 加入到CM 后，旁細(xì)胞的微核數(shù)量及自噬蛋白標(biāo)志物含量顯著降低，輻射旁細(xì)胞轉(zhuǎn)染自噬相關(guān)蛋白LC3 siRNA 或Beclin-1 siRNA 后，旁細(xì)胞的微核數(shù)量顯著增加。此研究證實(shí)了ROS 參與RIBE 細(xì)胞自噬。Kong 等[40]發(fā)現(xiàn)用X 線照射海拉細(xì)胞，未受照射的旁細(xì)胞(unirradiated cell，UIC)，特別是具有預(yù)誘導(dǎo)自噬的UIC，可以分泌IL-6，并且證實(shí)自噬可以激活自噬過程中產(chǎn)生IL-6 所需的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(the signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)。得出RIBE 的代謝協(xié)同作用很可能是由受輻照的細(xì)胞釋放的旁觀者因子啟動(dòng)，誘導(dǎo)UIC發(fā)生自噬并激活STAT3 產(chǎn)生IL-6，最終表現(xiàn)為UIC 分泌的IL-6 激活UIC 中NF-κB 通路的結(jié)論。

3.4外泌體參與RIBE 細(xì)胞自噬 外泌體作為一條額外的通路在RIBE 細(xì)胞間通訊中起著重要作用[15]。Song 等[41]用2 Gy γ 射線照射人支氣管上皮BEP2D 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)外泌體中的microRNA-7-5p 可通過EGFR/Akt/mTOR 信號(hào)通路介導(dǎo)輻射旁細(xì)胞發(fā)生自噬，這種外泌體介導(dǎo)的自噬可以被microRNA-7-5p 抑制劑抑制，證實(shí)外泌體參與RIBE細(xì)胞自噬。Cai 等[42]經(jīng)10 Gy X 線照射小鼠大腦后，從星形膠質(zhì)細(xì)胞中提取外泌體并染色，然后分別加入未照射星形膠質(zhì)細(xì)胞及經(jīng)尾靜脈注射到自噬雙標(biāo)LC3B-GFP 小鼠體內(nèi)，檢測(cè)到未受照射的細(xì)胞及小鼠肺組織中microRNA-7 水平升高而凋亡蛋白Bcl-2 水平降低，接著用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)證實(shí)microRNA-7 直接靶向Bcl-2，證實(shí)了外泌體microRNA-7 靶向Bcl-2 介導(dǎo)局灶性腦照射后肺內(nèi)旁觀者自噬。該研究從體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)了外泌體介導(dǎo)輻射旁自噬。

4 問題與展望

目前RIBE 的機(jī)制研究主要集中于細(xì)胞間縫隙連接、活性生化信號(hào)分子及外泌體三條途徑。近年來研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬存在于RIBE 中，是旁效應(yīng)細(xì)胞的一種反應(yīng)，但對(duì)于其在RIBE 中作用的研究很少。目前常用的自噬檢測(cè)方法，如電鏡觀察自噬體和溶酶體的超微結(jié)構(gòu)、生化檢測(cè)自噬體膜標(biāo)志蛋白及自噬底物、免疫熒光檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3 或GFP-LC3 斑點(diǎn)形成等，特異性及準(zhǔn)確性欠佳，增加了對(duì)自噬的功能評(píng)估難度，也限制了其研究進(jìn)展。Tian 等[43]開發(fā)了一種有效檢測(cè)哺乳動(dòng)物自噬的單克隆抗體，今后會(huì)有更多高效準(zhǔn)確的自噬檢測(cè)方法出現(xiàn)。近年來，外泌體在RIBE 中的研究越來越多，涉及外泌體miRNA、線粒體DNA 及蛋白質(zhì)等層面。已有研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導(dǎo)旁區(qū)細(xì)胞自噬。進(jìn)一步研究細(xì)胞的自噬系統(tǒng)及外泌體如何協(xié)同作用參與旁細(xì)胞自噬，將有助于揭示RIBE 的機(jī)制。此外，當(dāng)輻射劑量超過一定閾值時(shí)，輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)不再增加，這是否與分布在細(xì)胞膜上的細(xì)胞間縫隙連接的組成分子的數(shù)量和密度有關(guān)?不同劑量率對(duì)自噬在輻射旁效應(yīng)的影響及時(shí)間-效應(yīng)機(jī)制也尚不清楚。同時(shí)，目前的研究主要為細(xì)胞水平和動(dòng)物模型研究，人體研究還有很遠(yuǎn)的路要走。

雖然輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)是一種弱生物效應(yīng)，但其增加了放射治療及輻射防護(hù)的復(fù)雜性。在我國(guó)，65%～75%的腫瘤患者在治療過程中接受過放射治療，所以深入研究細(xì)胞自噬有助于進(jìn)一步探索RIBE 的產(chǎn)生機(jī)制，既可增強(qiáng)放療對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷效應(yīng)，又能減輕RIBE 對(duì)正常組織器官的損傷，有望發(fā)掘臨床精準(zhǔn)放療和防治輻射旁效應(yīng)的新靶點(diǎn)。相信隨著機(jī)制研究的深入及放療技術(shù)的發(fā)展，可早期干預(yù)RIBE，同時(shí)又能提高放射治療療效的臨床實(shí)踐會(huì)越來越多。

利益沖突：無(wú)。

作者貢獻(xiàn)聲明：楊廷芳負(fù)責(zé)構(gòu)思和撰寫論文；史月濱、陸婷負(fù)責(zé)校對(duì)；張勇、王麗負(fù)責(zé)修改論文和基金支持。