IgM-κ型M蛋白對全血CRP的檢測干擾及分析

史曉潔，侯艷峰,陳 亮，馬岳珠，魏天晗，苑玉嬌，王泉淼，劉志忠△

1.中國康復研究中心北京博愛醫(yī)院檢驗科，北京 100068；2.北京大學第一醫(yī)院檢驗科，北京 100034; 3.深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司北京分公司，北京 100000

M蛋白是由B淋巴細胞或漿細胞單克隆惡性增殖所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常免疫球蛋白，具有獨特的物理、化學及免疫學特性，其增多引起的黏滯血癥及與體內(nèi)某些物質(zhì)的特異結合(如形成巨酶)可干擾檢驗結果，在特定條件下產(chǎn)生沉淀可以干擾比色和濁度分析而引起假性結果[1]。C-反應蛋白(CRP)是一種典型的非特異性急性時相蛋白，對于細菌感染、各種炎癥過程的監(jiān)測、急性心肌梗死、新生兒血流感染診斷等方面具有重要意義[2]，使用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝的全血樣本開展血常規(guī)與全血CRP的快速聯(lián)合檢測，有助于鑒別感染、炎癥病變類型和程度，得到臨床的普遍認可與支持。近日，筆者發(fā)現(xiàn)1例典型的IgM-κ型M蛋白干擾全血標本CRP項目檢測的案例，并對目前幾種CRP檢測體系抗M蛋白干擾能力進行了評估，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1標本來源 患者，男，84歲，因肺部感染、泌尿道炎癥入院治療。收集患者同部位、同時抽取的EDTA-K2抗凝血標本與生化促凝血標本。

1.2儀器與試劑 普門PA990特定蛋白分析儀及配套CRP試劑(深圳普門公司)、普門PA900特定蛋白分析儀及配套CRP試劑(深圳普門)、 Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀及配套試劑(芬蘭)、邁瑞B(yǎng)C-5390CRP儀器及配套CRP試劑(深圳邁瑞)、邁瑞B(yǎng)S-800M全自動生化分析儀(深圳邁瑞)及中生超敏CRP試劑(中生北控)、邁瑞B(yǎng)S-2000M全自動生化分析儀(深圳邁瑞)及積水超敏CRP試劑(日本)、貝克曼AU680自動生化分析儀(美國)及積水CRP試劑(日本)。

1.3方法 普門PA990特定蛋白分析儀、普門PA900特定蛋白分析儀采用散射免疫比濁法，Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀、邁瑞B(yǎng)C-5390CRP儀器、邁瑞B(yǎng)S-800M全自動生化分析儀、邁瑞B(yǎng)S-2000M全自動生化分析儀、貝克曼AU680自動生化分析儀均采用透射免疫比濁法，其抗體來源依次為兔克隆抗CRP抗體、羊克隆抗CRP抗體、鼠克隆抗CRP抗體、兔克隆抗CRP抗體、鼠克隆抗CRP抗體、鼠克隆抗CRP抗體。

2 結 果

2.1干擾的發(fā)現(xiàn) 該例患者的血常規(guī)聯(lián)合全血CRP檢測中，普門PA990特定蛋白分析儀測得CRP水平為158 mg/L，而白細胞計數(shù)(WBC)及中性粒細胞百分比(NEU%)均正常(WBC：5.83×109/L、NEU%：57.7%)，血常規(guī)檢測與CRP結果極度不符，其同時抽取的生化促凝標本中的超敏CRP項目(邁瑞B(yǎng)S-800M全自動生化分析儀及中生超敏CRP試劑檢測)，結果為1.60 mg/L，反應曲線正常。

更換檢測儀器與系統(tǒng)后的結果如下：血常規(guī)全血標本使用Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀進行檢測，檢測CRP結果為92.00 mg/L；普門PA900特定蛋白分析儀檢測CRP結果為142.00 mg/L；邁瑞B(yǎng)C-5390CRP儀器檢測CRP結果為1.40 mg/L。生化血清標本使用邁瑞B(yǎng)S-2000M全自動生化分析儀及積水超敏CRP試劑進行檢測，CRP檢測結果為1.30 mg/L；使用貝克曼AU680自動生化分析儀及積水CRP試劑進行檢測，CRP檢測結果為1.94 mg/L；生化反應曲線均正常。血清標本CRP項目，使用生理鹽水稀釋2、4、10倍后，結果分別為2.12、2.14、2.10 mg/L；稀釋前后結果一致，反應曲線均正常。CRP>100 mg/L表示嚴重的疾病過程并常表示細菌感染的存在。異常增高的CRP結果為干擾導致的假性增高。

2.2干擾的產(chǎn)生 回顧該患者生化結果，總蛋白偏高(86.7 g/L)、清蛋白偏低(33.8 g/L) 、清蛋白/球蛋白比例倒置(0.6)。但肝功酶類均正常，提示清蛋白/球蛋白比例倒置并非由肝臟功能障礙引起。檢測免疫球蛋白IgM水平，結果嚴重超限，約為45 g/L。最后血清蛋白電泳結果確定患者存在M蛋白，并進一步分型提示為IgM-κ型M蛋白。

2.3干擾的糾正 對于全血標本，有條件實驗室可以嘗試更換檢測系統(tǒng)，針對本例標本，使用邁瑞B(yǎng)C-5390CRP儀器及配套CRP試劑，能夠得到正確的結果。 另外，使用普門PA990特定蛋白分析儀，血常規(guī)標本3 000 r/min離心5 min后，使用血漿進行檢測，結果為5 mg/L，基本可以排除干擾，而Orion Diagnostica QuikRead go C-反應蛋白定量分析儀使用同樣處理后的血漿進行檢測，結果>120 mg/L，干擾仍然存在，具體原因有待進一步研究。

3 討 論

不同類型M蛋白的理化性質(zhì)不一樣、檢測試劑成分有差異，受干擾的方法和項目也不一樣[3]。近年來，已有很多研究報道 M 蛋白在臨床檢測中存在干擾，包括血常規(guī)檢測中的血細胞計數(shù)、血紅蛋白等，免疫檢測中的促甲狀腺激素等，以及生化檢測中的血清鈉、鈣、C 反應蛋白、高密度脂蛋白膽固醇、葡萄糖、γ-谷氨酰基轉移酶等[4-10]。

關于M蛋白導致CRP結果假性增高或假性降低的案例，均為血清標本相關報道，尚無M蛋白干擾全血CRP結果的報道。本案例發(fā)現(xiàn)IgM-κ型M蛋白可導致EDTA抗凝血(全血)CRP結果假性增高，對比各種儀器CRP檢測結果，提示M 蛋白干擾的出現(xiàn)與儀器性能、試劑組分相關。不同品牌儀器受到的M蛋白干擾程度不同，不同標本類型(全血、血清、血漿)抗干擾能力也不同，具體原因有待進一步研究。

日常工作中，檢驗者除需要重視溶血、脂血、黃疸等干擾因素外，一定要充分認識M蛋白干擾的潛在可能性。而CRP作為炎癥標志物，隨著即時檢驗技術的進展，不同檢測系統(tǒng)的CRP儀器快速準確、結果可比性強。全血CRP聯(lián)合血常規(guī)白細胞結果可以快速有效地區(qū)分不同病原體類型，為臨床診斷和治療提供支持,具有良好的臨床應用推廣價值。錯誤的CRP結果，可能會誤導臨床診斷與治療，而急診患者，更應該警惕這種干擾。對于急查樣本，一方面應該結合白細胞、紅細胞沉降率等結果綜合分析CRP結果，另一方面也可以根據(jù)生化結果中清蛋白/球蛋白比例進行這種干擾的排查[11]。

綜上所述，在審核檢驗結果時，若發(fā)現(xiàn)CRP與血常規(guī)結果極度不匹配或與臨床表現(xiàn)不符時，應根據(jù)實驗室條件，更換檢測方法，確保檢驗結果準確無誤。生化血清標本可以先查看反應曲線有無異常，嘗試對受干擾的項目通過稀釋法檢測。必要時應向臨床醫(yī)生解釋由方法學、試劑和標本類型等影響導致的結果差異，對于需要頻繁檢測CRP水平的患者，建議患者采用同一種方法進行病情監(jiān)測。